睡眠剥夺对慢性应激抑郁模型大鼠海马Bcl-xl表达的影响

目的 探讨睡眠剥夺通过影响海马区Bcl-xl含量及活性而产生的快速抗抑郁机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、抑郁模型组、睡眠剥夺组和水环境对照组.用改良多平台睡眠剥夺法(MMPM)对用慢性不可预见性应激抑郁模型方法建立的抑郁大鼠模型进行睡眠剥夺.用旷场实验测试其行为变化,以及用免疫组化法测试海马CAI、CA3、DG区Bcl-xl的平均光密度值.结果 (1)睡眠剥夺组大鼠与抑郁模型组相比旷场实验的水平得分[(35.30±18.77)分,(81.30±18.41)分,P＜0.01]与垂直得分[(20.50±4.84)分,(27.70±8.19)分,P＜0.05]均明显升高,潜伏期明显缩短[(4.60±1.35)s,(2.20±1.55)s,P＜0.01].(2)海马CAI、CA3、DG区Bcl-xl平均光密度值比较中,抑郁模型组均显著低于正常对照组(0.1356±0.0224,0.1389±0.0250,0.1457±0.0162;0.1725±0.0327,0.1734±0.0261,0.1768±0.0271;P＜0.01),睡眠剥夺组均显著高于抑郁模型组(0.1621±0.0128,0.1603±0.0137,0.1625±0.0192;0.1356±0.0224,0.1389±0.0250,0.1457±0.0162;P＜0.05).结论 睡眠剥夺可明显改善抑郁大鼠的抑郁样行为;海马部位Bcl-xl含量及活性的增高可能参与了睡眠剥夺的快速抗抑郁作用.     

慢性应激大鼠抑郁症模型的建立

目的采用慢性不可预见性轻度应激建立大鼠抑郁症模型。方法选用SPF雄性大鼠,通过慢性不可预见性轻度应激制作抑郁症模型。观察大鼠体重和摄食量的变化,记录液体消耗实验和强迫游泳实验结果。结果与对照组比较,受到慢性不可预见性轻度应激的大鼠体重增长值、摄食量明显低于对照组(P<0.05),液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏好指数明显下降(P<0.01),强迫游泳5min内静止不动时间明显延长(P<0.001)。结论慢性不可预见性轻度应激可以成功建立大鼠抑郁症模型。     

慢性应激对大鼠海马线粒体解偶联蛋白4及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨慢性应激对抑郁模型大鼠海马线粒体解偶联蛋白4（UCP4）及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 应用慢性轻度不可预见性的应激制作抑郁症大鼠模型,随机分成2组：对照组、模型组.用流式细胞术分别检测海马组织细胞凋亡率、线粒体膜电位;用酶标仪检测乳酸脱氢酶（LDH）含量;用免疫组化检测神经细胞数目;用Western blot法检测UCP4及Bcl-2蛋白表达水平.结果 慢性应激干预后,模型组中海马神经细胞凋亡率[（4.35±0.19）％]和LDH含量[（445.5±91.70）U/mg）]明显升高,与正常对照组[（0.34±0.06）％,（167.2±63.40） U/mg）]相比,差异有统计学意义（P＜0.01）.与对照组相比[（72.50±4.25）个],模型组中海马组织神经细胞数目[（45.30±2.54）个]和线粒体膜电位有所下降.模型组中UCP4及Bcl-2蛋白水平表达下调.结论 抑郁症大鼠海马组织存在明显的神经元凋亡坏死,这可能与线粒体膜电位下降,UCP4及Bcl-2蛋白表达下调有关.     

慢性不可预见性应激模型大鼠海马形态及其 糖皮质激素受体表达的动态观察

［摘要］目的: 观察慢性不可预见性刺激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）所致抑郁症模型大鼠海马形态和神经元糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达变化。方法: 用CUMS法刺激大鼠建立抑郁模型。取CUMS后2周,4周,6周大鼠海马组织,以未经刺激的大鼠海马组织为对照组,利用免疫荧光技术以及RT PCR方法分别检测各组大鼠海马神经元GR表达的分布和GR mRNA的表达;采用MRI和HE染色观察海马形态结构。结果： 激光共聚焦显微镜下,对照组可见海马CA1区、CA3区及齿状回区细胞GR表达丰富,荧光强度较高,表达GR的细胞排列紧密有序,形态饱满。与对照组比较,随着应激时间的增加,模型组大鼠海马各区GR的荧光表达强度依次减弱,GR阳性细胞数量减少,形态趋向紊乱。GR免疫反应细胞计数显示模型组海马GR阳性细胞数量明显低于对照组(P<0.01)。RT PCR显示模型组海马组织GR mRNA表达较对照组明显降低(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠海马形态发生显著变化,随着刺激时间的延长,2周,4周,6周模型组大鼠海马细胞排列逐渐紊乱,细胞数量逐渐减少,形态不规则。结论： CUMS抑郁模型大鼠海马神经元内GR表达明显减少,此可能为大鼠海马神经元受损的机制之一。     

抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化

目的观察抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化。方法雌性SD大鼠20只,随机分为正常组和模型组,每组10只。正常组不给予任何处理,模型组给予孤养加21d慢性不可预见性的温和应激（CUMS）。采用Open-Field、糖水消耗量及Morris水迷宫测试大鼠的行为学表现;光镜以及透射电镜观察大鼠海马组织结构。结果与正常组相比,模型组大鼠行为学测试显示其直立活动得分及水平活动得分均减少、糖水摄入百分比减少及学习记忆力下降;HE染色显示模型组大鼠海马锥体细胞层变薄,细胞间隙增大,排列紊乱,疏松,细胞结构不完整,甚至有大量细胞缺失;透射电镜下,模型组海马神经元较少,细胞核呈现皱缩改变,核膜凹凸不整模糊不清,并有局部断裂;胞质内线粒体肿胀变性,嵴消失。结论孤养加21d CUMS可造成大鼠抑郁症模型;模型组大鼠学习记忆力下降可能与应激造成海马形态结构改变有关。     

慢性不可预见性应激模型大鼠海马MAPKs信号蛋白的差异表达

目的 研究慢性不可预见性应激大鼠的认知功能,以及不同的促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号蛋白在慢性不可预见性应激大鼠海马的差异表达.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组和慢性不可预见性应激组(CUS),CUS组大鼠每天接受一种应激,共21d,正常对照组不接受任何应激.应激结束后, Morris水迷宫检测空间忆功功能,免疫组织化学和western blot检测MAPKs通路信号蛋白在海马的表达.结果 前5次的定位航行试验,CUS组大鼠找到站台所用的时间显著多于对照组大鼠(F=5.258～10.225,P<0.05),后3次2组大鼠间差异无显著性(F=4.458～4.590,P>0.05);CUS组大鼠在空间探索试中,穿越站台的次数显著少于对照组大鼠[(1.8±0.5)次,(7.0±3.9)次,t=3.741,P<0.05].免疫组织化学法示CUS组大鼠齿状回pCREB标记指数显著低于对照组.Western blot示CREB、ERK1、P-ERK1、ERK2、P-ERK2、P38、P-P38和 JNK信号蛋白水平在2组大鼠海马的表达差异无显著性.但CUS组大鼠的P-CREB水平[(13.6±8.3)%,(36.0±14.5)%,t=3.792,P<0.05]和P-JNK水平[(30.8±7.8)%,(113.8±55.3),t=4.204,P<0.05]显著低于正常对照组.结论 JNK-CREB信号通路异常在21 d 慢性不可预见性应激中起着重要作用.CUS大鼠空间记忆功能是降低的,但通过锻炼,空间忆功功能可以恢复到正常水平.     

慢性应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的增殖、存活和分化

目的 探讨慢性应激抑郁状态对大鼠海马神经干细胞的影响.方法 应用慢性不可预知温和应激和孤养法建立抑郁模型,分为对照组、CUMS 14 d组、CUMS 28 d组,采用免疫组化、免疫荧光,测定大鼠海马神经干细胞的增殖、存活和分化的改变.结果 海马神经干细胞增殖:与对照组( 2919.50±188.80)比较,14d CUMS组(2254.17±164.41)和28 d CUMS组(1900.33±104.10)海马齿状回BrdU阳性细胞数均减少,差异有统计学意义(P＜0.01).海马神经干细胞存活:与对照组( 2404.50±148.77)相比,CUMS 28 d组(1845.33±126.88) BrdU阳性细胞数明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01).海马神经干细胞分化:与对照组[ NeuN/BrdU(71.63±10.21),GFAP/BrdU( 14.34±2.03)]比较,CUMS 28d组[NeuN/BrdU(69.11±11.30),GFAP/BrdU( 17.27±2.93)]细胞分化无明显变化(P＞0.05).结论 慢性应激抑郁模型大鼠海马齿状回神经干细胞的增殖和存活受到抑制,但干细胞的分化无明显改变.     

解郁丸对慢性应激大鼠行为和不同脑区单胺氧化酶的影响

目的 观察解郁丸对慢性应激抑郁模型大鼠的行为,以及下丘脑、海马和前额叶皮层单胺氧化酶的影响,探讨其可能的抗抑郁机制。方法 采用慢性不可预见性应激造成大鼠抑郁模型,运用开场法和糖水消耗实验测定动物行为,用荧光法测定慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑、海马和前额叶皮层单胺氧化酶的活性。结果 慢性应激大鼠的水平和垂直活动得分和糖水消耗量下降;下丘脑、海马和前额叶皮层单胺氧化酶的活性增高。解郁丸可提高慢性应激大鼠的水平和垂直活动得分,增加糖水消耗量。53mg/kg,106mg/kg,212mg/kg的解郁丸连续给药21d后,大鼠海马单胺氧化酶-A（MAO-A）活性抑制率分别是10.81%、20.93%和21.51%;对下丘脑MAO-A活性抑制率分别是12.21%,17.28%和21.10%;而对前额叶皮层MAO-A活性抑制率,在剂量为106mg/kg和212mg/kg分别是18.78%,16.08%。解中组和解高组对海马单胺氧化酶-B（MAO-B）抑制率分别是24.25%,32.33%;对前额叶皮层MAO-B抑制率分别是6.24%,10.40%。解低组、解中组和解高组对慢性应激大鼠下丘脑MAO-B活性抑制率分别是12.96%,19.32%和17.66%。结论 解郁丸的抗抑郁作用可能与降低慢性应激大鼠下丘脑、海马和前额叶皮层的单胺氧化酶活性有关。     

抑郁模型大鼠再应激后海马细胞支架蛋白的改变

目的 研究抑郁模型大鼠接受再次急性和慢性应激后细胞支架微管系统的动态性改变,并探讨可能的机制.方法 将40只大鼠按随机数字表法分为5组:对照组(空白对照+生理盐水),CUMS组(CUMS+生理盐水),氟西汀组(CUMS+氟西汀),急性再应激组(CUMS+氟西汀+药物清洗期+急性游泳应激),CUMS再应激组(CUMS+氟西汀+药物清洗期+CUMS).实验结束后进行行为学观察,并使用免疫印迹法( western blotting)检测大鼠海马乙酰化微管蛋白(Acet-Tub),酪氨酸化微管蛋白(Tyr-Tub),微管结合蛋白2(MAP-2)及磷酸化微管结合蛋白2(phospho-MAP-2).结果 (1)CUMS再应激组糖水偏好[ (43.38±7.84)％],总行程[(859.21±653.62)cm],运动平均速度[(2.05±0.60)cm/s]及直立次数[(0.12±0.30)次]均减少,与对照组及CUMS组相比均差异有显著性(P＜0.01).急性再应激组行为与对照组比较差异无显著性.氟西汀组糖水偏好和旷场实验相关指标与对照组差异无显著性,与CUMS组差异有显著性(P＜0.01).(2) CUMS再应激组Acet-Tub表达升高[(244.24±8.90)％],Tyr-Tub表达降低[ (30.92±11.00)％],与对照组及CUMS组差异均有显著性(P＜0.01).MAP-2的表达与对照组及CUMS组比较差异无显著性,phospho-M AP-2的表达减少[(24.75±8.83)％],与对照组及CUMS组均差异有显著性(P＜0.01).急性再应激组各蛋白水平与对照组比较差异无显著性.氟西汀组各蛋白的表达与对照组比较差异无显著性(P＞0.05),与CUMS组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 动物再次暴露于CUMS后,其行为和微管动态性损害更严重,同时伴随微管相关蛋白磷酸化的变化,提示临床抑郁症的发生以及复发的町能机制.     

支气管哮喘伴发抑郁大鼠模型的建立

目的 探讨建立支气管哮喘伴发抑郁动物模型的方法 .方法 选择Wistar大鼠,随机分为对照组与模型组,模型组采用卵蛋白(ovalbumin,OVA)激发法建立哮喘模型,在此基础上给予慢性轻度不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)28 d,观察大鼠体质量、体征、肺组织结构、支气管肺泡灌洗液白细胞计数等变化,并用Open-field实验评价大鼠活动度和好奇心,通过糖水消耗实验评价大鼠快感缺乏与否.结果 与对照组相比,模型组大鼠体质量增长明显缓慢(P<0.05);肺组织呈哮喘样病理改变;支气管肺泡灌洗液白细胞总数、嗜酸粒细胞及淋巴细胞增多;Open-field实验,大鼠垂直活动得分、水平活动得分显著降低(P<0.05);糖水消耗量明显减少(P<0.05).结论 OVA激发复合CUMS可成功制备支气管哮喘伴发抑郁大鼠模型.     

缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠大脑海马5-羟色胺水平、细胞增殖及神经元数量的影响

目的：探讨缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠大脑海马5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）水平、细胞增殖及神经元数量的影响。 方法：70只大鼠被分成正常对照组、未用药模型组、阴性对照模型组、阳性对照模型组和低、中、高剂量缬草治疗组，每组10只。除正常对照组外，给予其余6组大鼠4周慢性应激建立抑郁症模型。除未用药模型组大鼠正常饲养外．其余6组大鼠在模型建立后分别灌服5％羧甲基纤维素钠、氟西汀以及低、中、高剂量缬草．灌药周期均为3周。灌药结束后，体内注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（bromodeoxyuridine，BrdU）标记海马增殖细胞．应用高效液相色谱法检测海马组织5-羟色胺水平，采用形态计量学方法计数海马神经元数量。 结果：与正常对照组比较，低、中剂量缬草治疗组的海马5HT含量增加，并恢复至正常水平。灌服低剂量缬草3周后．抑郁大鼠海马BrdU阳性细胞数目和神经元数量恢复性增加至正常对照组大鼠的水平。 结论：小剂量缬草能够促进抑郁大鼠大脑海马5HT水平及细胞增殖数量恢复至正常状况，同时具有保护海马受损伤神经元的作用。     

不同年龄慢性轻度不可预见性应激模型大鼠不同脑区内乙酰胆碱酯酶的表达

目的观察慢性轻度不可预见性应激（CUMS）时不同年龄组大鼠不同脑区内乙酰胆碱酯酶的影响。方法采用免疫组织化学方法分析老年、中年和青年大鼠额叶皮质、海马、下丘脑内乙酰胆碱酯酶在慢性轻度不可预见性应激21天后的变化。结果模型组不同脑区AchE的表达比对照组有显著差异（P〈0．05）。结论慢性不可预见性应激导致不同年龄组大鼠不同脑区AchE的表达增高。     

慢性应激抑郁模型的建立及其评价

目的 探讨慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型建立的可行性和此模型的有效性。方法 选用SD雄性大鼠制作慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型。观察动物体重和摄食量的变化，记录动物敞箱试验(open—field test)和液体消耗试验。结果 与对照组比较，经历慢性轻度不可预见性应激的动物体重、摄食量显著下降；敞箱试验中的水平运动、垂直运动得分显著下降，中央格停留时间明显延长，清洁动作次数显著下降；液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比明显下降，而纯水消耗显著提高。结论 慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型动物活动能力显著下降、兴趣丧失、快感缺乏与抑郁症临床表现中的精神运动性阻抑症状极为相似，且行为学改变可维持较长时间，是较理想可靠的抑郁动物模型。     

文拉法辛对慢性应激抑郁模型老年大鼠海马血管生成素-1的影响

目的 探讨文拉法辛对老年抑郁大鼠海马血管生成素-1(ANG-1)的影响.方法 老年(20个月)雄性SD大鼠共36只,随机分为模型组、文拉法辛组和对照组,每组各12只.给予慢性不可预知的温和的应激结合孤养共5周,文拉法辛组于应激第3周末开始同时给予文拉法辛治疗持续14d,模型组同时给予生理盐水,对照组不给予任何处理.采用敞箱实验和蔗糖消耗实验评估大鼠抑郁模型.用免疫印迹( western blotting,wB)检测海马ANG-1蛋白表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测ANG-lnRNA表达.结果 ①敞箱实验、蔗糖消耗实验显示模型组、文拉法辛组抑郁复制成功.②海马ANG-1表达情况:WB和RT-PCR显示,与对照组比较,文拉法辛组与模型组海马ANG-1蛋白及ANG-1 mRNA均增加,差异有统计学意义(P＜0.05);比较模型组,文拉法辛组ANG-1蛋白及ANG-1mRNA明显增加,差异有统计学意义(P ＜0.01).结论 慢性应激抑郁老年大鼠可能存在血管源性损害,文拉法辛可提高老年抑郁大鼠ANG-1表达,并可能对血管新生起到干预作用.     

CUMS抑郁模型大鼠脑组织DA、5-HT及其代谢产物的浓度变化

目的:通过分析抑郁模型大鼠脑组织DA、5-HT及其代谢产物的浓度变化,探讨抑郁症发病的神经生化机制。方法:将24只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和氟西汀组3组;采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)结合孤养建立抑郁大鼠模型,随后取脑并分离内侧前额皮质(mPFC)和海马,采用库仑阵列电化学高效液相色谱法测定上述脑区DA、5-HT及其代谢产物的浓度。结果:与对照组比较,模型组大鼠mPFC区DA、高香草酸(HVA)、5-HT及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)浓度均显著降低(P<0.01或0.05),海马DA、HVA和5-HT浓度显著降低(P<0.01或0.05);与模型组比较,氟西汀组大鼠mPFC区DA、HVA和5-HT浓度显著升高(P<0.01或0.05);海马DA、5-HT和5-HIAA浓度显著升高(P<0.05)。结论:CUMS抑郁模型大鼠mPFC和海马组织存在DA和5-HT递质系统功能紊乱。     

慢性应激抑郁模型的建立及其评价

目的探讨慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型建立的可行性和此模型的有效性.方法选用SD雄性大鼠制作慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型.观察动物体重和摄食量的变化,记录动物敞箱试验(open-field test)和液体消耗试验.结果与对照组比较,经历慢性轻度不可预见性应激的动物体重、摄食量显著下降;敞箱试验中的水平运动、垂直运动得分显著下降,中央格停留时间明显延长,清洁动作次数显著下降;液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比明显下降,而纯水消耗显著提高.结论慢性轻度不可预见性的应激抑郁模型动物活动能力显著下降、兴趣丧失、快感缺乏与抑郁症临床表现中的精神运动性阻抑症状极为相似,且行为学改变可维持较长时间,是较理想可靠的抑郁动物模型.     

氟西汀对慢性温和应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的影响

目的观察氟西汀对慢性温和应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的作用。方法 24只雄性大鼠分为对照组、模型组和氟西汀组,每组8只。采用慢性中等应激制作大鼠抑郁模型,敞箱实验法测定大鼠行为学变化,免疫组织化学技术检测巢蛋白(Nestin)表达以评价大鼠神经干细胞增殖情况。结果模型组大鼠的行为学得分较对照组明显降低,海马齿状回Nestin表达减少,与模型组比较,氟西汀治疗后大鼠的行为学得分升高,Nestin表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氟西汀能翻转慢性应激对大鼠行为的损害,这可能与其促进神经干细胞增殖有关。     

去神经支配大鼠海马内MTSS1蛋白的表达变化

目的：探讨切割穹窿海马伞去神经支配大鼠海马内（metastasis suppressor 1,MTSS1）蛋白的表达变化.方法：SD大鼠随机分成正常组和切割穹窿海马伞后1、3、5、7、14 d组,采用Western Blot法检测穹窿海马伞切割后海马内MTSS1蛋白表达水平的变化.结果：海马内MTSS1蛋白的相对表达量在切割后1 d开始升高（P〈0.05）,3 d继续升高（P〈0.01）,5 d达到最高水平（P〈0.01）,7 d开始下降（P〈0.01）,14 d时基本恢复至正常水平（P〉0.05）.结论：切割穹窿海马伞去神经支配后海马内MTSS1蛋白表达水平明显上调,可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元的分化有关.