慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑及生长因子的研究

目的 观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型气道重塑的特点及在肺功能损害中的作用,探讨转化生长因子β1（TGF－β1）、表皮生长因子（EGF）及碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF)与气道重塑的关系及不同药物干预的影响。方法 两次气管内注入脂多糖（LPS）及每日熏香烟的复合刺激法建立大鼠COPD模型（模型组）12只,TGF－β1单抗组6只于制作模型后第6、19d经尾静脉注射TGF－β1单抗各0．5mg。其它各药物干预组于制作模型第8d起分别雾化吸入布地奈德（布地奈德组,12只）、溴化异丙托品（溴化异丙托品组,12只）和肝素（肝素组,6只）溶液。4周后检测小支气管平滑肌及胶原厚度,用免疫组化法及原位杂交法观察各生长因子在支气管肺内的表达,用放免法检测血清和BALF中细胞外基质（ECM）成分Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（Ln)及透明质酸（HA）。结果 模型组小支气管平滑肌及胶原纤维较对照组增厚,其厚度均与通气功能指标0．3秒用力呼气容积（FEV0．3）呈显著负相关;模型组与TGF－β1单抗组比较,小支气管及小动脉胶原增生明显,与肝素组比较,小支气管平滑肌厚度增加。大鼠模型组血清、BALF中PCⅢ,Ln及HA均较对照组有不同程度增高;TGF－β1、EGF及b-FGF在支气管粘膜上皮等组织表达显著增强。各药物干预组PⅢ,Ln及HA在不同程度上低于模型组。结论 模型组小支气管平滑肌及胶原纤维显著增厚,构成气道重塑的主要病理基础;ECM过度沉积是COPD的显著特点,TGF－β1、EGF及b-FGF在气道重塑及肺小动脉重建中可能起重要作用,针对TGF－β1等生长因子进行干预、长期雾吸肝素,有可能为COPD气道重塑的防治提供线索。     

碱性成纤维细胞生长因子在COPD大鼠模型气道重塑中的作用

目的通过构建慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在COPD气道重塑的作用和可能机制。方法2005年7月至8月,于广西医科大学动物实验中心,将40只8周龄、雄性、平均体重为(220±15)g的Wistar大鼠随机分为COPD组(A组)、COPD bFGF组(B组)、COPD anti-bF-GF组(C组)和对照组(D组),每组10只。A、B、C3组COPD模型制备:经气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟,复制成。A组为COPD对照组;B组:每周1次经尾静脉内注入0·1μgbFGF;C组:每周1次经尾静脉内注入0·1μganti-bFGF;D组:舱外饲养4周。4周后对各组大鼠气道进行病理学评分;检测并比较各组支气管平滑肌指数(平滑肌厚度/气道内径)及胶原指数(胶原厚度/气道内径);用免疫组化法观察bFGF在支气管肺内表达。结果与D组相比,A组、B组、C组大鼠的小气道都存在不同程度病理改变,差异均有显著性意义。与A组比较,B组肺组织病理评分显著增高、平均肺泡面积显著扩大、支气管平滑肌指数和胶原指数显著增高、bFGF吸光值均显著增高,而C组肺组织病理评分显著降低、平均肺泡面积显著缩小、支气管平滑肌指数和胶原指数显著降低、bF-GF吸光值均显著减少。结论bFGF参与了大鼠COPD模型气道炎症和气道重塑过程,而anti-bFGF可以抑制这一过程。     

细胞外基质重塑在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型气流阻塞中的作用

目的　制备大鼠慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型 ,探讨气道细胞外基质 (ECM)重塑的病理特点及其在气流阻塞中的作用 ,以及不同干预因素的影响。方法　熏香烟加气管注入小量内毒素法建立大鼠COPD模型 ,观察气道重塑的病理特点 ,测定肺功能及血气、气道各层横截面积 ,支气管肺组织匀浆羟脯氨酸 (Hy)含量 ;粘膜下成纤维细胞 (Fb)、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞计数 ;放射免疫法测定血清中透明质酸、层粘连素含量。观察蛋白激酶C抑制剂H7、氧自由基清除剂N 乙酰半胱氨酸(NAC)和转化生长因子 (TGF) β单抗干预对大鼠模型气道重塑的影响。 结果　所建模型的病理及病理生理学改变基本符合人类COPD特点 ,I型胶原为主的ECM气道壁过度沉积 ;小支气管上皮层、平滑肌层截面积 (各为 2 1114 μm2 、16 0 6 1μm2 )与对照组 (各为 130 5 6 μm2 及 6 6 92 μm2 )比较 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 0 1)。NAC组、H7组及TCF β单抗组上皮层截面积分别为 12 70 1μm2 、11836 μm2 及112 4 4 μm2 ;平滑肌层截面积分别为 70 5 1μm2 、6 4 2 6 μm2 及 6 4 2 0 μm2 ,与模型组比较差异有显著性(P均 <0 0 0 1)。模型组粘膜下Fb数为 13.6± 4 .2 ,对照组为 6 .8± 1.4 ,且功能活跃 ,淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数亦显著增高。NAC组及TGF      

川芎嗪对大鼠支气管哮喘模型气道重塑的影响及机制

目的　观察川芎嗪对支气管哮喘 (简称哮喘 )大鼠模型气道重塑的抑制作用并探讨其作用机制。方法　 32只SD大鼠按随机数字表法分成正常对照组 (A组 )、哮喘模型组 (B组 )、小剂量川芎嗪组 (C组 ,4 0mg/kg)和大剂量川芎嗪组 (D组 ,80mg/kg) ,以卵白蛋白 (OVA)致敏并长期吸入激发制备大鼠慢性哮喘模型。采用免疫组化半定量法测定气道壁胶原和转化生长因子 β1(TGF β1)含量 ,同时测定气道内、外径及平滑肌层、网状基底膜的厚度。结果　D组气道平滑肌层、网状基底膜的厚度为 (11 3± 1 3) μm、(11 3± 1 7) μm ,B组分别为 (19 7± 1 8) μm、(19 8± 1 6 ) μm ,两组比较差异有统计学意义 (P均 <0 0 1) ,但D组与A组 [(10 6± 1 2 ) μm、(9 8± 1 6 ) μm]、C组 [(11 6± 0 9) μm、(12 3± 1 8) μm]比较差异无统计学意义 (P均 >0 0 5 ) ;D组气道内外径比值为 0 77± 0 0 6 ,B组为0 6 3± 0 0 5 ,D组与B组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;D组气道壁Ⅲ型胶原及TGF β1含量吸光度 (A)值分别为 2 1± 5、2 6± 5 ,B组分别为 5 5± 7、6 9± 14 ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ,D组与C组 (32± 8、38± 10 )比较差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,C组与B组比较差异也有统计学意义 (P <0 0     

孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症和重塑的影响及其机制

目的探讨孟鲁司特对慢阻肺大鼠气道炎症及重塑的作用及其影响气道重塑的机制。方法采用烟熏联合气管内注入脂多糖的方法建立大鼠慢阻肺模型(B组),对照组(A组)大鼠正常饲养,C组和D组大鼠分别在制作模型过程的最后2周给予孟鲁司特1mg/(kg·d)和孟鲁司特4mg/(kg·d)灌胃处理。实验结束后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞计数及分类。观察肺组织病理切片的气道炎症及重建情况,并行气道炎症评分及气道平滑肌厚度测定。免疫组化法检测大鼠肺组织碱性成纤维生长因子(b FGF)表达情况。结果与A组相比,B组大鼠BALF中白细胞总数及气道炎症评分明显增高,气道平滑肌显著增厚,b FGF表达水平显著增高(P0.05)。C组和D组大鼠BALF中白细胞总数及气道炎症评分较B组降低,气道平滑肌增厚不如B组明显,b FGF表达水平较B组降低(P0.05)。以上各项指标在C组和D组之间无明显差异(P0.05)。b FGF的表达与支气管平滑肌厚度正相关(r=0.78,P0.01)。结论孟鲁司特有抑制气道炎症及气道重塑的作用,其抑制气道重塑的机制与其抑制b FGF的表达有关。     

哮喘患者气道平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达

研究发现哮喘患者支气管组织中转化生长因子 (TGF β)的基因表达增加 ,支气管黏膜下嗜酸细胞中TGF β免疫活性增加。TGF β可增加气道平滑肌细胞释放胶原蛋白 ,然而其作用机制尚不明了。本研究旨在验证TGF β可以诱导人气道平滑肌细胞结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)的表达和释放 ,并比较哮喘和非哮喘患者气道平滑肌细胞中TGF β的效应。材料与方法　哮喘组气道平滑肌细胞来源于 1例肺捐赠哮喘患者、1例死于哮喘持续状态患者和 4例深部支气管活检哮喘患者 ;非哮喘组气道平滑肌细胞来源于 3例肺移植切除的气…     

H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用

目的探讨H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用。方法观察正常对照组、COPD模型组及松弛素治疗组大鼠肺组织的病理变化,比较各组大鼠支气管壁及平滑肌厚度,检测基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达水平及MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值。结果与正常对照组大鼠相比,COPD模型组大鼠肺支气管壁及平滑肌厚度显著增厚,且松弛素治疗组大鼠肺支气管壁厚度及平滑肌厚度与COPD模型组大鼠相比显著降低(P0.05)。COPD模型组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达水平均高于正常对照组(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与正常对照组相比,呈现明显升高趋势(P0.05);而对比COPD模型组大鼠,松弛素治疗组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达有所降低(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与COPD模型组相比均降低(P0.05)。结论松弛素能抑制大鼠肺组织结构病理变化,抑制COPD气道平滑肌的增殖。     

转化生长因子β1和血小板衍化生长因子的表达与嗜酸粒细胞性支气管炎气道重建的关系

目的　研究嗜酸粒细胞性支气管炎 (EB)气道管壁结构改变与转化生长因子 β1(TGF β1)和血小板衍化生长因子 (PDGF)在气道黏膜中表达之间的关系。方法　选择 12例EB(A组 )、10例哮喘 (B组 )和 10例早期周围型肺癌 (C组 )患者 ,经纤维支气管镜作肺下叶段支气管黏膜活组织检查 (简称活检 ) ,C组患者活检取健侧肺。苏木精 伊红 (HE)染色观察气道上皮下基膜 (SBM )厚度 ;免疫组化技术检测TGF β1和PDGF在气道黏膜中的表达。结果　A组SBM厚度为 (6 3± 1 4 ) μm、B组为 (8 2± 1 5 ) μm、C组为 (4 1± 1 2 ) μm ,三组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;A组气道黏膜以及黏膜下层中TGF β1和PDGF每平方毫米阳性细胞数分别为 (5 9± 9)个、(4 7± 7)个、B组分别为(85± 12 )个、(76± 11)个、C组分别为 (31± 4 )个、(2 0± 3)个 ,三组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,且TGF β1和PDGF与SBM厚度呈正相关关系 (r分别 =0 76、0 5 2 ,P <0 0 5 )。结论　EB患者可以出现类似于支气管哮喘的气道SBM增厚的病理改变 ,且TGF β1和PDGF在EB气道黏膜下纤维化的病理改变中发挥了重要作用。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型病理形态学比较研究

目的:动态观察比较2组慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型气道炎症及重塑的特点。方法:根据熏香烟天数与反复气管内注入少量内毒素次数不同建立2组COPD大鼠模型,运用HE染色及半定量图像分析法对比研究2组模型肺组织及小支气管的病理形态学改变。结果:2组COPD大鼠模型均符合人类COPD的病理形态学特点;模型Ⅱ组的气道慢性炎症、重塑改变及气流阻塞情况均较Ⅰ组严重;模型Ⅰ组、Ⅱ组各时间段管壁及平滑肌层均较正常对照组显著增厚(P均<0·01),模型Ⅱ组管壁及平滑肌层均较Ⅰ组显著增厚(P<0.05及P<0·01),造模第20天时模型Ⅱ组管壁及平滑肌层均较Ⅰ组显著增厚(P均<0·05),而第40天及60天时模型Ⅱ组仅管壁较Ⅰ组显著增厚(P<0·05)。结论:慢性气道炎症的反复刺激引起管壁纤维性增生增厚及平滑肌层增厚,即气道重塑,最终导致气流受限;模型Ⅱ组的气道炎症及气道重塑均较Ⅰ组显著。     

慢性支气管炎与肺气肿大鼠气道炎症与重塑的实验研究

目的　观察慢性支气管炎 (简称慢支 )和肺气肿大鼠模型气道炎症及重塑的发病特点以及红霉素药物干预的影响。方法　将 4 3只雄性Wistar大鼠分 8组 ;正常对照组 (A组 ,5只 )、生理盐水对照组 (P组 ,5只 )、慢支组 (L组 ,6只 )、慢支 +肺气肿组 (S组 ,6只 )、低剂量红霉素治疗组 (E1组 ,5只 )、高剂量红霉素治疗组 (E2 组 ,6只 )、低剂量红霉素预防治疗组 (E10 组 ,5只 )、低剂量红霉素预防治疗组 (E2 0 组 ,5只 )。用气管内注入脂多糖 (LPS)及每天烟熏的混合刺激方法制作慢支与肺气肿动物模型 ,4周后收集支气管肺泡灌洗液 (BALF)进行细胞学计数和分类检查 ,对大鼠肺脏进行病理学检查 ,检测各组细小支气管平滑肌和胶原层厚度 ,并用免疫组化法观察转化生长因子 β1(TGF β1)在支气管肺内的表达 ,用放射免疫法检测血清和BALF中Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、透明质酸 (HA)的变化。结果　 (1)S组BALF中中性粒细胞分类计数为 [(17 1± 10 8)× 10 5/ml],A组为 [(0 9± 0 7)×10 5/ml],两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;(2 )病理积分 :S组为 (32 9± 114 )分 ,A组为 (6 7± 2 5 )分 ;S组细小支气管平滑肌及胶原层厚度为 (9 6± 2 6 ) % ,A组为 (6 1± 1 8) % ,两组比较差异有显著性(P分别为 <0 0 1、<0 0 5 ) ;     

碱性成纤维细胞生长因子在慢性支气管炎、肺气肿大鼠模型血管重塑中的作用

目的 通过构建慢性支气管炎、肺气肿大鼠模型,探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)在慢性支气管炎、肺气肿血管重塑中的可能作用.方法 将8周龄、雄性、体质量(220±15)g Wistar大鼠40只随机分为慢性支气管炎、肺气肿组(A组)、bFGF干预组(B组)、anti-bFGF干预组(C组)和对照组(D组),每组10只.A组:经血管内注入脂多糖和反复烟熏复制成慢性支气管炎、肺气肿模型;B组:每周一次经尾静脉内注入0.1 pg bFGF,其他制备方法同慢性支气管炎、肺气肿组;C组;每周一次经尾静脉内注入0.1μg anti-bFGF,其他制备方法同慢性支气管炎、肺气肿组;D组:舱外饲养4周.4周后处死动物,取肺组织切片后苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色,在光学显微镜下对各组小血管及肺泡组织进行病理学评分和比较;检测并比较各组肺小动脉平滑肌指数及胶原指数;测定并比较各组支气管平滑肌bFGF的相对含量.结果 A组肺组织病理评分、肺小动脉平滑肌指数、胶原指数和bFGF吸光值分别为362±31、0.5125±0.0256、25.79±0.8854和38.14±1.012.B组分别为453±24、0.6536±0.0356、35.13±0.7687和63.33±2.048,与A组比较均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05).C组分别为306±28、0.4171±0.0133、18.53±0.6321和26.38±1.102,与A组比较均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 bFGF参与了大鼠慢性支气管炎、肺气肿模型血管重塑过程,而anti-bFGF可以抑制这一过程.     

氨溴索对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑的干预研究

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型肺内表达与气道重塑的关系以及氨溴索的干预作用.方法 气管内注入脂多糖以及熏香烟法建立大鼠COPD模型,干预组于模型建立后腹腔注射氨溴索溶液.观察病理特点,测定血气以及支气管肺组织匀浆羟脯氨酸含量,检测支气管管壁厚度和内周长,用原位杂交法检测TGF-β1基因表达的相对含量.结果 与对照组比较,模型组支气管肺组织羟脯氨酸含量显著增高(P<0.01).支气管管壁厚度显著增加(P<0.01),TGF-β1在支气管肺组织的表达增强(P<0.01),且TGF-β1基因表达的相对含量与支气管管壁厚度以及肺组织羟脯氨酸含量呈显著正相关(r=0.949,P<0.01;r=0.932,P<0.01).与模型组比较,氨溴索干预组支气管肺组织羟脯氨酸含量、支气管管壁厚度、TGF-β1在支气管肺组织的表达强度有减少趋势.结论 TGF-β1在气道重塑中起重要作用.应用氨溴索可以明显抑制COPD气道炎症及其气道重塑.     

慢性气道炎症大鼠肺血管结构和生长因子变化的实验研究

目的探讨慢性气道炎症与肺血管重建的相关关系以及慢性气道炎症对斑管内皮生长因子（VEGF）及内皮素-1（ET-1）的影响。方法复制慢性支气管炎和肺气肿动物模型。用图像分析仪观察支气管肺组织和肺血管结构病理变化情况。酶联免疫法检测血清VEGF。放射免疫法测定血浆ET-1水平。结果模型组大鼠发生明显的慢性气道炎症和肺气肿改变。细小支气管中膜肌层增厚，但肺血管结构与对照组比较无明显改变．血清VEGF和血浆ET-书平与对照组比较亦无显著性差异（P〉0．05）。结论 慢性气道炎症对大鼠肺血管重建和、VEGF和ET-1无明显直接影响。但慢性气道炎症的持续发展是慢性阻塞性肺疾病（COPD）产生低氧的主要病理基础，因此对COPD的防治重点之一应放在气道炎症的防治。     

氨茶碱对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型转化生长因子β1和胶原的干预作用

目的 观察慢性阻塞性肺疾病( COPD)大鼠模型支气管肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的变化以及氨茶碱药物干预的影响。方法 将35只雄性Wistar大鼠分3组;正常对照组（A组,10只）、COPD模型组（B组,15只）、氨茶碱治疗组（C组,10只）。气管内注入脂多糖(LPS)及每天烟熏法制作...     

白介素17在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达及与气道炎症及重塑的关系

目的 探讨白介素17(IL-17)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症及重塑中的作用.方法 采用被动吸烟80 d来制备大鼠COPD模型.支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数和百分比;采用半定量图像分析法测量小气道管壁和平滑肌层厚度;免疫组织化学法检测肺组织IL-17的表达;酶联免疫吸附试验法检...     

吸烟对支气管哮喘大鼠气道转化生长因子β1 mRNA和Ⅲ型胶原表达的影响

目的 探讨吸烟对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道壁厚度及转化生长因子β1 mRNA(TGF-β1 mRNA)和Ⅲ型胶原表达的影响及作用机制.方法 健康雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为对照组、哮喘组和吸烟组,每组10只.用卵白蛋白致敏并吸入激发制备哮喘模型.吸烟组定量吸入香烟烟雾.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测量TGF-β1 mRNA和免疫组化法测量Ⅲ型胶原表达.采用SPSS 11.0软件,所有数据以-x±s表示,组间比较采用单因素方差分析,组间差异比较采用LSD方差分析法,采用Pearson相关分析.结果 (1)吸烟组TGF-β1 mRNA、Ⅲ型胶原表达的吸光度(A)值分别为0.42±0.04、25.8±2.3,哮喘组分别为0.39±0.04、22.9±3.1,对照组分别为0.26±0.04、16.3±2.3,3组间比较差异有统计学意义(F值分别为55.97,35.61,P均＜0.05);(2)Pearson相关分析结果表明TGF-β1 mRNA与Ⅲ型胶原的表达呈正相关(r=0.71,P＜0.05);(3)气道壁厚度吸烟组为(23.3±2.4)μm2/μm,哮喘组为(20.1±2.9)μm2/μm,对照组为(11.6±2.4)μm2/μm,3组间比较差异有统计学意义(F=53.68,P＜0.05).结论 吸烟通过促进哮喘大鼠气道TGF-β1 mRNA的过度表达,增加气道Ⅲ型胶原表达,加重气道重塑的发生.