前胡丙素对培养心肌细胞~（45）Ca~（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。     

三七皂甙单体Rb_1对心肌细胞Ca~（2＋）内流作用的研究

应用Ｆｕｒａ－２荧光技术及放射配基结合实验探讨三七皂甙单体Ｒｂ１对心肌细胞胞外Ｃａ２＋内流的作用。０．０４ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｒｂ１可以抑制高钾引起的大鼠心肌细胞胞浆Ｃａ２＋浓度的升高，且呈浓度依赖性；可以完全阻断高钾基础上的异丙肾上腺素的作用。其作用与钙通道拮抗剂维拉帕米类似。Ｒｂ１对大鼠心肌细胞膜上β受体亲和力和受体数均无明显影响。结果提示：Ｒｂ１对心肌细胞电压依赖性钙通道开放引起的胞内钙升高有抑制作用；对β受体相关联的钙通道开放引起的胞浆Ｃａ２＋升高也有抑制作用。而不影响β受体本身。     

胺碘酮对离体心肌的负性肌力作用

对离体左,右心房肌,胺碘酮(Ami)1～100μmol·L~(-1)均有负性肌力作用,30μmol·L~1明显抑制心肌静息后收缩,正阶梯和成对刺激效应,1～10μmol·L~1使苯福林,异丙肾上腺素,组胺和CaCl_2正性肌力作用的量效曲线呈非竞争性拮抗作用,心肌动作电位和收缩力同步记录发现,Ami 30μmol·L~1减弱心肌收缩,延长APD,但对平台期和V_(max)无影响.故Ami的负性肌力作用可能是抑制心肌细胞外Ca~(2+)内流和细胞内Ca~(2+)释放所致,并非选择性阻滞心肌α,β和H_2受体以及电压依赖性钙通道引起 .     

萘甲异喹对大鼠主动脉平滑肌~（45）Ca转运的影响

萘甲异喹（ＮＩ１，１０μｍｏｌ·Ｌ－１）和硝苯吡啶（Ｎｉｆ０．５μｍｏｌ·Ｌ－１）对大鼠主动脉平滑肌４５Ｃａ溢流无影响，ＮＩ（１～３０μｍｏｌ·Ｌ－１）能浓度依赖地抑制高钾和苯肾上腺素引起的大鼠主动脉平滑肌４５Ｃａ内流，抑制率分别为２７％～８１％和１７％～７７％，ＮＩ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）尚可明显抑制由苯肾上腺素引起的４５Ｃａ外溢。这些结果提示ＮＩ能抑制平滑肌细胞膜ＰＤＣ和ＲＯＣ两类钙通道及细胞内钙释放。     

雌激素对大鼠心肌细胞钙的调控作用研究

目的　观察雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。方法　应用膜片钳全细胞记录方法观察L型钙通道电流 (ICa .L) ,共聚焦显微镜系统分析细胞内钙浓度 ([Ca2 + ]i)的变化。结果　应用 10 μmol·L-1和 30 μmol·L-1的 17β Estradiol,分别使ICa .L 抑制到正常的 48 1%± 4 5 %and2 9 3%± 5 2 % (n =5 ,P <0 0 1)。 10 μmol·L-1的 17β Estradiol可升高静息的培养心肌细胞 [Ca2 + ]i,荧光强度 (FI)值由 5 4 2± 13 6增加到 86 5± 15 3(n =6 ,P <0 0 5 ) ;而对具有自发收缩的心肌细胞钙瞬变幅度有明显的抑制作用 ,由给药前的 18 5± 4 3减小到 11 4± 3 9(n =6 ,P <0 0 5 )。17β Estradiol可剂量依赖性地抑制ICa.L。结论　L型钙通道等多种机制参与雌激素对大鼠心肌细胞钙转运的调控作用。     

牛磺酸镁配合物对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞钙通道的影响

目的研究牛磺酸镁配合物(TMCC)对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞L型钙电流(I_(Ca,L))的影响。方法酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,乌头碱诱导大鼠心律失常模型,胺碘酮作为阳性对照,100、200和400μmol·L~(-1)TMCC作用于心肌细胞。应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞I_(Ca,L)的变化。结果 400μmol·L~(-1)TMCC显著增加大鼠正常心肌细胞I_(Ca,L),胺碘酮则使之减小。1μmol·L~(-1)乌头碱使I_(Ca,L)电流密度由(4.3±1.6)pA·pF~(-1)增加到(6.4±1.9)pA·pF~(-1)(p<0.01),400μmol·L~(-1)TMCC能显著降低乌头碱诱导的I_(Ca,L)增加。胺碘酮则能使之恢复为(3.7±1.4)pA·pF~(-1)。结论 400μmol·L~(-1)TMCC能增加正常细胞的I_(Ca,L),对钙内流有促进作用,并可减少乌头碱诱导的心律失常大鼠心肌细胞异常增加的电流。     

蝙蝠葛苏林碱对HEK293细胞中L-型钙通道CaV1.2的作用

摘 要 目的：探讨蝙蝠葛苏林碱（DS）对人胚肾细胞（HEK293）上表达的L 型钙通道Cav1.2的作用。方法: 采用脂质体转染法,将L 型钙通道Cav1.2蛋白基因转染到HEK293细胞上,全细胞膜片钳技术记录L 型钙电流ICav1.2,观察DS对L 型钙通道电生理特性的影响。结果:DS在1, 3, 10 μmol·L-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制ICav1.2 电流,其抑制率分别为（14.68±4.02）%、（32.37±6.63）% 和（59.63±5.23）%;3 μmol·L-1 的DS对ICav1.2的抑制率与相同浓度的伊拉地平比较,其抑制强度约为伊拉地平的40%。结论:DS可浓度依赖性抑制HEK293细胞上表达的Cav1.2,其作用强度比特异性L 型钙通道阻断药伊拉地平要弱。     

DDPH抑制豚鼠单个心室肌细胞L-钙电流和钠电流(英文)

目的:研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流的作用。方法:全细胞膜片箝技术。结果:(1)DDPH(3-300μmol·L~(-1))浓度依赖性地抑制L-型钙电流,IC_(50)为28.5μmol·L~(-1)(95％可信限:14.3-42.7μmol·L~(-1))。维拉帕米0.3-30μmol/L浓度依赖性地抑制钙电流,IC_(50)为1.8μmol·L~(-1)(95％可信限:1.3-2.3μmol·L~(-1))。美西律100μmol·L~(-1)对钙电流无影响。DDPH30μmol·L~(-1)使用依赖性阻滞钙电流,1Hz时抑制率为58％±13％(n=5,P<0.01),3Hz时为76％±11％(n=5,P<0.01)。(2)DDPH(20-320μmol·L~(-1))浓度依赖性抑制钠电流,IC_(50)为89.0μmol·L~(-1)(95％可信限:68.7-109.3μmol·L~(-1))。美西律抑制钠电流的IC_(50)为32.2μmol·L~(-1)(95％可信限:11.7-52.7μmol·L~(-1))。维拉帕米10μmol·L~(-1)对钠电流无影响(P>0.05).DDPH80μmol·L~(-1)对钠电流无使用依赖性阻滞。结论:DDPH抑制豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流,但抑制钙电流的作用弱于维拉帕米,抑制钠电流的作用弱于美西律。     

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心肌细胞内钙离子的影响

目的:研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心肌细胞内钙离子([Ca2+]i)的影响。方法:采用钙荧光染料Fluo-3-AM负载心肌细胞,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内钙离子的变化。结果:在含钙(1.8mmol·L-1)台式液中,60mmol·L-1KCl使细胞内钙荧光强度由1.0增高至1.84±0.35(P<0.01,n=50),分别用0.1、1、10μmol·L-1F2预先孵育心肌细胞,F2可以浓度依赖地抑制钙荧光强度的增高,IC50为1.61μmol·L-1。0.1、1、10μmol·L-1F2使得KCl诱导增高的钙荧光强度从1.92±0.42分别降至1.88±0.39、1.31±0.36和1.09±0.05(P分别>0.05、<0.01和<0.01,n=50),IC50为1.78μmol·L-1。F2不影响静息状态下的细胞内钙的浓度。对咖啡因和三磷酸肌醇介导的细胞内钙的释放均无作用。结论:F2通过阻断心肌细胞膜电压依赖性钙通道降低心肌细胞内钙浓度,这可能是保护心肌缺血/再灌注损伤的机制。     

粉防己碱对大鼠脑细胞内游离钙的影响

利用荧光钙指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，测定脑细胞内游离钙的浓度，细胞内静息钙浓度为２２１±１８ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１对细胞内静息钙无影响。Ｔｅｔ（１－１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１）能抑制胞外高钾引起的胞内钙升高，其ＩＣ５０为８．２（９５％可信限为１．８９－３２．９０μｍｏｌ·Ｌ＾－１）。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１可抑制去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ＾－１引起细胞内钙升高，其幅…     

酪氨酸激酶抑制剂对cyclopiazoni cacid引起的大鼠主动脉血管环收缩效应的影响

目的　探讨酪氨酸激酶在Ca2 +池操纵性Ca2 +内流中的作用。方法　记录大鼠胸主动脉环收缩反应。结果　①不同剂量酪氨酸激酶抑制剂 genistein (1～ 10 0 μmol·L-1)和tyrphostin 2 5 (Tyr 2 5 ,1～ 30 μmol·L-1)均以浓度依赖性抑制cyclopiazonicacid (CPA)引起的平滑肌收缩平台期。Tyr 2 5的最大作用浓度为 10 μmol·L-1,抑制率为 42 %±11%。② 10 μmol·L-1Tyr 2 5和 1μmol·L-1nifedipine(Nif)对CPA引起电压依赖性Ca2 +通道 (VDCC)开放过程的抑制作用存在部分交叉。③ 1μmol·L-1Nif预处理阻断VDCC作用后 ,10 μmol·L-1Tyr 2 5只能部分阻断CPA引起的Ca2 +池操纵性Ca2 +通道 (SOCC)开放过程 ,再加入 6 0 μmol·L-1SK&F96 36 5可完全阻断SOCC的开放过程。结论　CPA引起平滑肌的收缩过程中 ,蛋白质酪氨酸激酶参与了开启VDCC和SOCC的信号转导过程     

苯丙-甲硫-精-苯丙氨酸多肽对豚鼠心室肌细胞Na~+/Ca~(2+)交换尾电流的影响

目的　研究苯丙 -甲硫 -精 -苯丙氨酸 (FMRFa)多肽对心肌细胞膜钙瞬变触发的 Na+ / Ca2 + 交换尾电流的影响。方法　采用蛋白酶 E急性分离的豚鼠心室肌细胞。利用全细胞膜片钳技术观察 FMRFa多肽对心肌细胞膜 Na+ / Ca2 + 交换尾电流的作用。结果　 FMRFa多肽 1、5、10、2 0μm可分别抑制 Na+ / Ca2 + 交换尾电流(13± 3) % ,(2 5± 7) % ,(73± 9) %和 (110± 10 ) %。结论　 FMRFa多肽可剂量依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞膜钙瞬变触发的 Na+ / Ca2 +交换尾电流     

钌红对豚鼠离体心室肌细胞钙激活电流的影响

<正> 钌红(ruthenium red,RR)是电镜研究中常用的一种组织染料。近来发现RR具有抑制线粒体钙摄取和肌质网钙释放等作用。但RR对心肌细胞内Ca~(2+)浓度的影响目前尚未见报道。本文通过观察RR对豚鼠离体心室肌细胞钙激活电流的影响,对这一问题作一探讨。     

E—4031通过反向钠钙交换增加正常和心肌肥厚大鼠心肌细胞钙瞬变和收缩

目的:观察I_K阻断剂E-4031对正常和心肌肥厚大鼠钙瞬变和细胞收缩的影响.方法:应用带CCD Cam-era的离子影象分析系统(Ion Imaging System)测定离体大鼠心肌细胞钙瞬变和细胞长度.结果:E-4031(10 μmol/L)分别使正常组钙瞬变和细胞缩短从对照组的(210±49)和(3.0±0.8)μm增加到(245±47)和(3.6±1.0)μm(P<0.05),使心肌肥厚组钙瞬变和细胞缩短分别从对照组的(196±54)和(3.0±1.3)μm增加到(240±49)和(3.6±1.3)μm(P<0.05),而对钙敏感性无显著影响.KB-R7943可完全阻断正常组和肥厚组心肌细胞由E-4031诱导的激动作用.尼卡地平不能阻断E-4031的增加作用.结论:E-4031可通过刺激反向钠钙交换增加正常和心肌肥厚大鼠心肌细胞钙瞬变和细胞收缩,同时并不影响钙敏感性.且对肥厚心肌细胞的影响大于正常心肌细胞.     

虎杖苷对休克大鼠微血管平滑肌细胞内钙、pH和膜电位的影响

目的探讨虎杖苷（ＰＤ）改善休克动物微循环的作用机制。方法股动脉放血复制休克模型，取肠系膜微动脉用链霉蛋白酶Ｅ消化以分离单个血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），再用不同荧光染料分别标记细胞，在激光共聚焦显微镜上测定细胞内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、ｐＨ和膜电位的变化。结果ＰＤ（０４ｍｍｏｌ·Ｌ－１）使休克大鼠ＶＳＭＣ［Ｃａ２＋］ｉ浓度在１０ｍｉｎ内显著下降至加药前的７８４％±５６％、ｐＨ下降至原来的７２８％±８２％；而正常对照组ＶＳＭＣ［Ｃａ２＋］ｉ升高１７５％±６３％、ｐＨ上升３４％±１０１％。当ＰＤ加入前１０ｍｉｎ用钙通道阻断剂维拉帕米（５０μｍｏｌ·Ｌ－１）预处理后，则动物不论休克与否，其［Ｃａ２＋］ｉ、ｐＨ都显著下降。另外ＰＤ使正常及休克大鼠ＶＳＭＣ膜电位负值下降，出现去极化反应。加入ＥＧＴＡ和维拉帕米预处理不能阻断ＰＤ作用，但加入钠通道阻断剂河豚毒素（１μｍｏｌ·Ｌ－１）则可完全阻断ＰＤ的去极化作用。结论ＰＤ对细胞内钙、ｐＨ有双向调节作用，正常情况下ＰＤ增加细胞内游离钙及升高ｐＨ以提高血管张力，休克时ＰＤ降低细胞内钙浓度及降低细胞内ｐＨ以降低血管张力，使血管扩张。此外ＰＤ还可能通过促进细胞外钠离子?     

钙调素拮抗剂E6对大鼠神经细胞内钙的影响

目的　观察钙调素拮抗剂E6对神经细胞静息[Ca2 +]i、KCl (5 0mmol·L-1)和谷氨酸 (glutamicacid ,Glu ,0 1mmol·L-1)引起的神经细胞 [Ca2 +]i 升高的影响。方法　用Ca2 +敏感荧光指示剂Fura 2 /AM负载大鼠脑细胞 ,测定神经细胞内游离Ca2 +浓度 ([Ca2 +]i)。结果　E6可升高神经细胞静息 [Ca2 +]i,EC50 为 6 6 8μmol·L-1;无外Ca2 +条件下 ,也升高 [Ca2 +]i,EC50 为 1 30 μmol·L-1,说明E6主要是通过促进细胞内贮存Ca2 +释放引起内Ca2 +升高。E6抑制KCl升高细胞 [Ca2 +]i 的IC50 为 6 0 μmol·L-1;抑制Glu激发的细胞 [Ca2 +]i 升高的IC50 为 0 15 μmol·L-1。结论　E6可能是通过与细胞内钙调素 (Calmodulin ,CaM)结合后 ,影响兴奋性氨基酸受体的开放和电压依赖性钙通道的活性状态 ,表现出对由去极化或受体激动剂引起的内Ca2 +升高的抑制作用     

虎杖苷对VSMC内钙信号的调节机制初探

目的　观察虎杖苷对大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)内游离钙浓度的变化 ,以探讨虎杖苷对血管平滑肌细胞的调节机制。方法　用荧光染料Fluo 3 AM标记细胞 ,在粘附式细胞仪上测定细胞内游离钙的变化。结果　给予虎杖苷 5min后 ,VSMC内游离钙浓度升高。当虎杖苷加入前 10min用河豚毒素和优降糖分别预处理后 ,其VSMC内游离钙都不再明显升高 ;而给予普萘洛尔、甲氰咪胍及亚甲蓝分别预处理时 ,细胞内钙浓度反而升得更高 ,与单纯虎杖苷作用相比差异都有显著性。结论　虎杖苷可增加细胞内游离钙浓度 ,其作用可能与钠、钾通道开放有关 ,并且受 β肾上腺素能受体、H2 受体系统及鸟苷酸环化酶系统的反向调节。     

蛋白激酶C与血管平滑肌α_1肾上腺素受体触发Ca~（2＋）内流的关系

在酶新鲜分离的犬肠系膜上动脉平滑肌细胞，蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的激活剂佛波二丁酯（ＰＤＢ）引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被ＰＫＣ抑制剂１－（５－异喹啉磺酰）－２－甲基哌嗪（Ｈ７）所阻断，而哌唑嗪和普萘洛尔则不能阻断ＰＤＢ的这一作用；１０μｍｏｌ·Ｌ－１苯福林引起的胞内Ｃａ２＋增高作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７部分阻断；在无Ｃａ２＋液，Ｈ７可部分抑制苯福林引起的内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，两者分别被抑制了３３±３％和５８±６％；ＫＣｌ（２０－１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可浓度依赖性地引起胞内钙升高，这一作用可被１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｈ７不同程度地阻断；ＰＤＢ引起的胞内Ｃａ２＋增高也可分别被１．２５和２．５μｍｏｌ·Ｌ－１维拉帕米部分和全部阻断。上述结果提示ＰＫＣ参与苯福林引起的部分内Ｃａ２＋释放和外Ｃａ２＋内流，但以参与外Ｃａ２＋内流为主；这一作用可能与ＰＫＣ激活，引起电压依赖性Ｃａ２＋通道开放有关。     

盐酸丙哌维林对豚鼠离体膀胱平滑肌条的钙拮抗作用

目的　研究盐酸丙哌维林 (P 4)对豚鼠离体膀胱平滑肌条的钙拮抗作用及作用机制。方法　采用离体平滑肌条浴槽实验方法 ,以维拉帕米为对照 ,测定P 4对CaCl2 和组胺 (His)所致离体膀胱平滑肌条的收缩及对乙酰胆碱 (ACh)所致膀胱平滑肌依赖细胞内钙、外钙收缩的影响。结果　P 41～ 1 0 0 μmol·L- 1 使CaCl2 累积量效曲线非平行右移 ,最大反应降低 ,pD2 ′为 4 73± 0 1 4。P 41 μmol·L- 1 使His量效曲线平行右移 ,最大效应不变 ,pA2 为 5 44± 0 1 4 ;1 0～ 1 0 0μmol·L- 1 使His量效曲线非平行右移 ,最大效应降低 ,pD2 ′为 4 71± 0 1 0。P 41、1 0和 1 0 0 μmol·L- 1 对ACh所致依赖细胞内钙收缩的抑制率分别为 45 77%± 6 54 %、86 2 6 %± 5 59%和 90 55 %± 3 1 1 % ,对依赖细胞外钙收缩的抑制率分别为 7 30 %± 2 89%、49 1 6 %± 6 0 9%和 88 2 5 %±3 70 %。结论　P 4低浓度时竞争性拮抗His所致膀胱平滑肌条的收缩反应 ,明显抑制膀胱平滑肌条依赖细胞内钙释放的收缩反应 ;高浓度时非竞争性拮抗His和CaCl2 所致膀胱平滑肌条的收缩反应 ,明显抑制膀胱平滑肌条依赖细胞内钙释放和外钙经钙通道内流所致收缩反应