小檗碱对神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙升高的影响

以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂，利用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子系统测定小檗碱（Ｂｅｒ）对新生大鼠脑细胞静息Ｃａ２＋和神经递质引起的脑细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响．Ｂｅｒ１，１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１对脑静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响．Ｂｅｒ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量依赖的抑制谷氨酸引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高．Ｂｅｒ１０μｍｏｌ·Ｌ－１能降低Ｈａｎｋｓ液有Ｃａ２＋和无Ｃａ２＋时去甲肾上腺素引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，且能降低５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高（在细胞外液有Ｃａ２＋时）．结果提示Ｂｅｒ可降低谷氨酸，去甲肾上腺素和５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，这可能是其抗脑缺血机理之一．     

汉防己甲素抑制三种神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙的升高

应用Ｐｕｒａ－２技术测定游离新生大鼠脑［Ｃａ２＋］ｉ浓度的技术、研究了Ｔｅｔ对静息脑［Ｃａ２＋］ｉ和３种递质引起的脑［Ｃａ２］ｉ变化的影响。Ｔｅｔ（１，１０和２０μｍｏｌ·Ｌ－１）对静息脑［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响。Ｔｅｔ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可降低Ｌ－Ｇｌｎ（０．１、１．０和１０μｍｏｌ·Ｌ－１）引起的脑（Ｃａ２＋）ｉ的升高。在Ｈａｎｋ＇ｓ液Ｃａ２＋为１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，Ｔｅｔ１０μｍｏｌ·Ｌ－１可降低Ｈｉｓ（５０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１）和５－ＨＴ（０．１、１．０、１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１）引起的脑［Ｃａ２＋］ｉ的升高。但不能降低Ｈａｎｋ＇ｓ液无Ｃａ２＋时Ｈｉｓ和５－ＨＴ引起的脑［Ｃａ２＋］ｉ的升高。研究表明Ｔｅｔ可阻滞Ｌ－Ｇｉｎ、Ｈｉｓ和５－ＨＴ受体调控的钙通道。但对Ｈｉｓ和５－ＨＴ引起的细胞内贮存钙的释放并无明显影响。Ｔｅｔ的这种降低脑［Ｃａ２＋］ｉ的作用可能是其治疗脑缺血性疾病的机理之一。Ｐ＜０．０１在Ｔｅｔ１０μｍｏｌ·Ｌ－１作用下，相同浓度的细胞外液钙和Ｈｉｓ（０、５０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１），脑［Ｃａ２＋］ｉ分别是２２１±５、２４５±５和３０２±６ｎｍｏｌ·Ｌ－１。增加了１１．８?     

洛沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞c-fos表达及对细胞内游离钙升高的拮抗作用

目的研究血管紧张素AT1 亚型受体拮抗剂洛沙坦(losartan,LT)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞c_fos表达及细胞内游离钙变化的影响。方法斑点杂交及Fura_2技术。结果AngⅡ10nmol/L能诱导培养乳鼠心肌细胞c_fos的一过性高表达及[Ca2 ]的显著升高。LT20μmol/L能显著抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞c_fos的高表达 ,而血管紧张素AT2 亚型受体拮抗剂PD123319则无明显作用。LT1～100μmol/L能剂量依赖性地抑制AngⅡ引起的[Ca2 ]i升高。结论Ang Ⅱ诱导的心肌细胞c_fos高表达及[Ca2 ]i升高可能是通过AT1 亚型受体介导而实现的 ,LT可能是一种治疗心肌肥厚的有效药物     

小檗碱对局灶性脑缺血大鼠原癌基因c-fos表达的影响

目的研究大鼠局灶性脑缺血过程中c_fosmRNA表达的动态变化 ,并观察小檗碱(Ber)对其作用。方法运用斑点杂交技术 ,观察Ber对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮质及海马组织c_fosmRNA表达的影响。结果大鼠局灶性脑缺血2h再灌注0.5～4h ,脑皮质及海马组织c_fosmRNA出现一过性高表达 ,2h达高峰 ,分别为对照组的4.5和4.7倍。Ber20mg/(kg·d)ip显著抑制大鼠脑缺血诱导的c_fos高表达 ,降低病灶侧海马和皮层组织水、钙含量。结论脑缺血过程中c_fos原癌基因呈现一过性高表达 ,Ber可降低c_fosmRNA水平 ,该作用可能是其抗脑缺血机理之一     

小檗碱对培养大鼠神经细胞内游离Ca^2＋的影响

以Ｆｕｒａ２／ＡＭ为细胞内钙离子的荧光指示剂，用ＡＲＣＭＭＩＣ阳离子测定系统，直接测定了体外培养的新生大鼠神经细胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）值，并观察了小檗碱（Ｂｅｒ）的影响。结果表明，Ｂｅｒ对神经细胞静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，Ｂｅｒ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１能剂量依赖地抑制去甲肾上腺素和Ｈ２Ｏ２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，其ＩＣ５０分别为３９．９和１７．９μｍｏｌ·Ｌ－１。高剂量Ｂｅｒ（１０～１００μｍｏｌ·Ｌ－１）能抑制高Ｋ＋引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高。姐果提示，Ｂｅｒ对去甲肾上腺素，高Ｋ＋及Ｈ２Ｏ２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高的抑制作用可能是其抗脑缺血作用机制之一。     

小檗碱对培养大鼠神经细胞内游离Ca2+的影响

以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接测定了体外培养的新生大鼠神经细胞内游离钙([Ca²⁺]i)值,并观察了小檗碱(Ber)的影响。结果表明,Ber对神经细胞静息[Ca²⁺]i无明显影响,Ber1～100μmol·L^-1能剂量依赖地抑制去甲肾上腺素和H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高,其IC₅₀分别为39.9和17.9μmol·L^-1。高剂量Ber(10～100μmol·L^-1)能抑制高K+引起的[Ca²⁺]i升高。姐果提示,Ber对去甲肾上腺素,高K⁺及H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高的抑制作用可能是其抗脑缺血作用机制之一。     

汉防己甲素抑制三种神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙的…

应用Ｆｕｒａ－２技术测定游离新生大鼠脑浓度技术，研究了Ｔｅｔ对静息脑和３种递质引起的脑变化的影响。     

神经生长因子对谷氨酸及过氧化氢介导的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度升高的影响(英)

以Fura－2／AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,测定谷氨酸（Glu）及过氧化氢（H_2O_2）诱导的新生大鼠脑细胞内游离Ca~2 浓度（［Ca~2 ］_i）升高,并观察了神经生长因子（NGF）的影响。结果显示,新生大鼠脑细胞内静息［Ca~2 ］_i为208±22nmol·L~-1,NGF对神经细胞静息［Ca~2 ］_i无明显影响。NGF1,3,10,30及100μg·L~-1能剂量依赖地抑制Glu和H_2O_2引起的［Ca~2 ］_i升高,其IC_50分别为42.5和27.3μg·L~-1。这表明,NGF降低［Ca~2 ］_i的水平可能是其保护大脑皮质神经元抗谷氨酸毒性及过氧化氢损伤的机制之一。     

神经生长因子对新生大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

目的 观察神经生长因子（NGF）对分离的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法 以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂，测定谷氨酸（Glu)及过氧化氢（H2O2）诱导的新生大鼠脑细胞内[Ca^2 ]i，观察NGF对此影响。结果 新生大鼠脑细胞内静息[Ca^2 ]i 208±22nmol/L,NGF对神经细胞静息[Ca^2 ]i无明显影响，NGF 1－100μg/L能剂量依赖地抑制Glu和H2O2引起的[Ca^2 ]i升高，其IC50分别为42．5和27．3μg/L。结论 NGF通过降低[Ca^2 ]i的水平来保护大脑皮质神经元抗谷氨酸毒性及过氧化氢损伤。     

Effects of hyperin on free intracellular calcium in dissociated neonatal rat brain cells

目的：研究金丝桃苷（Ｈｙｐ）对新生大鼠的脑细胞内游离钙浓度的作用．方法：分离新生大鼠的脑细胞;用钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ２测定静息和激动剂存在时新生鼠脑细胞内游离钙浓度．结果：在ＣａＣｌ２１３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的Ｈａｎｋｓ液中,静息［Ｃａ２＋］ｉ为（２０８±１２）ｎｍｏｌ·Ｌ－１（ｎ＝１７）,Ｈｙｐ对静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响;Ｈｙｐ１０,４０,１６０μｍｏｌ·Ｌ－１呈浓度依赖性显著抑制ＫＣｌ５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１致［Ｃａ２＋］ｉ增高;Ｈｙｐ１６０μｍｏｌ·Ｌ－１显著抑制去甲肾上腺素１,２,４和８μｍｏｌ·Ｌ－１诱发的［Ｃａ２＋］ｉ的增高;Ｈｙｐ１６０μｍｏｌ·Ｌ－１还可显著抑制谷氨酸和５羟色胺致［Ｃａ２＋］ｉ增高．结论：Ｈｙｐ对新生大鼠脑细胞钙内流有阻滞作用．     

生长抑素和电针抑制关节炎大鼠脊髓c-fos的表达

目的：观察鞘内注射生长抑素及电针“夹脊”穴对病理性疼痛情况下大鼠脊髓ｃｆｏｓ原癌基因蛋白表达的影响．方法：用急性佐剂性关节炎大鼠作为病理性疼痛的实验模型，免疫组织化学法检测ｃｆｏｓ样免疫反应细胞．结果：佐剂性关节炎可诱发大鼠脊髓内多层神经元ｃｆｏｓ蛋白表达，接种后２４ｈ，以背角Ⅰ－Ⅱ，Ⅴ－Ⅵ层内最多，而生长抑素和电针均可抑制其表达，表现为ｃｆｏｓ蛋白形成减少．结论：生长抑素和电针缓解病理性疼痛的作用与抑制伤害性痛反应诱发的脊髓ｃｆｏｓ表达有关．     

Inhibitory effects of melatonin on free intracellular calcium in mouse brain cells

目的：研究褪黑激素（Ｍｅｌ）对老年小鼠大脑皮层突触体内钙含量以及激动剂诱发的新生小鼠脑细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高的影响,以探讨Ｍｅｌ抗衰老的作用机理．方法：钙离子荧光染料Ｆｕｒａ２ＡＭ负载已制备的突触体或细胞,用ＲＦ５０００型双波长荧光分光光度计测定［Ｃａ２＋］ｉ．结果：长期使用Ｍｅｌ抑制老年小鼠大脑皮层Ｃａ２＋超负荷,Ｍｅｌ也降低钙通道激活剂ＢａｙＫ８６４４,高浓度氯化钾（ＫＣｌ）和谷氨酸钠诱发的分离的新生小鼠脑细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高．结论：Ｍｅｌ对中枢神经元［Ｃａ２＋］ｉ超载的抑制作用与其抗衰老作用有关．     

Effect of tetrandrine on proto-oncogene c-fos expression in rat cerebrum

目的：本研究旨在探讨Ｔｅｔ对林丹—一种通过细胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）介导大脑ｃｆｏｓ基因表达的神经毒剂—诱导的大鼠大脑ｃｆｏｓ基因表达的影响．方法：Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交，斑点杂交技术及双波长薄层色谱扫描分析．结果：大鼠口服林丹３０ｍｇ·ｋｇ－１１小时后大脑ｃｆｏｓ基因表达明显增强至１４６ｍｍ２，而在口服林丹前３０ｍｉｎ分别口服Ｔｅｔ１，２及４ｍｇ·ｋｇ－１，大鼠大脑ｃｆｏｓ基因表达被明显抑制（分别为８６，４０和３９ｍｍ２），其抑制程度呈剂量依赖关系．结论：Ｔｅｔ抑制Ｃａ２＋激动剂类神经毒剂—林丹诱导的大鼠大脑ｃｆｏｓ基因转录水平的表达．     

促皮质素对甲醛引起大鼠脊髓c-fos表达的影响及受体分析

促皮质素对甲醛引起大鼠脊髓ｃｆｏｓ表达的影响及受体分析黎海蒂１，李希成，阮怀珍（第三军医大学生理教研室，重庆４０００３８，中国）１ＣｏｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅｔｏＰｒｏｆＬＩＨａｉＤｉ．Ｐｈｎ８６２３６８７５２２６９．Ｆａｘ８６２３６５３...     

甲基黄酮醇胺对分离的胎鼠脑细胞内游离钙浓度的影响(英文)

目的:观察甲基黄酮醇胺(MFA)对胎鼠脑细胞内游离钙浓度在静息以及激动剂存在时的作用。方法:用钙离子荧光染料Fura 2-AM负载后,测定分离的胎鼠脑细胞内游离钙浓度([Ca~(2 )]_i)及其变化。结果:在含钙1.3mmoL·L~(-1)的Hanks’液中,[Ca~(2 )]_i为197±20nmol·L~(-1)(n=44)。MFA0.15mmol·L~(-1)对静息脑细胞内钙浓度无明显影响。在细胞外钙1.3mmol·L~(-1)条件下,MFA(0.03—0.3 mmoL·L~(-1))浓度依赖性地抑制高钾去极化导致的[Ca~(2 )]_i升高,IC_(50)为0.14(95％可信限:0.05—0.42)mmoL·L~(-1)。在较高浓度时,MFA(0.15—0.3mmoL·L~(-1))也可抑制谷氨酸兴奋所引起的[Ca~(2 )]_i,IC_(50)为0.20(95％可信限:0.01—3.40)mmoL·L~(-1)。结论:MFA抑制高钾去极化引起的[Ca~(2 )]_i升高,在较高浓度时也拮抗谷氨酸兴奋所致的[Ca~(2 )]_i升高。     

人疱疹病毒增强谷氨酸神经毒性作用

人疱疹病毒(HVH,0.2 ml/mouse ip)加重谷氨酸单钠(MSG,2.5 g·kg~(-1)sc)对下丘脑弓状核的损毁,同时,下丘脑和脊髓的线粒体膜结合钙明显降低。Fura-2单细胞检测表明,MSG既可引起胞外Ca_(2 )内流,又可促进胞内钙库释放Ca~(2 ),使胞内Ca~(2 )超载,最终导致细胞死亡。结果提示,MSG可引起胞内Ca~(2 )超载而破坏神经元排空或封存Ca~(2 )的能力,从而损伤细胞。而HVH可增强上述损伤效应。     

金丝桃苷对分离的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

AIM: To study the effects of hyperin (Hyp) on free intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) of brain cells. METHODS: The neonatal rat brain cells were dissociated. [Ca2+]i in presence and absence of extracellular high K+, L-glutamic acid (Glu), 5-hydroxytryptamine (5-HT), and norepinephrine (NE) were assayed with Fura 2-AM. RESULTS: The resting [Ca2+]i in Hanks' solution (CaCl2 1.3 mmol.L-1) was (208 +/- 12) nmol.L-1 (n = 17). Hyp had no significant effects on the resting [Ca2+]i. Hyp 1.0, 4.0, and 16.0 mumol.L-1 markedly inhibited the increase of [Ca2+]i evoked by K+ 50 mmol.L-1 in a concentration-dependent manner. Hyp 16.0 mumol.L-1 inhibited the increases of [Ca2+]i induced by NE 1, 2, 4, and 8 mumol.L-1. Hyp (16.0 mumol.L-1) also markedly attenuated 5-HT and Glu-induced increase of [Ca2+]i. CONCLUSION: Hyp possessed inhibitory effects on influx of Ca2+ in the neonatal rat brain cells.