氧自由基对再灌注损伤大鼠白细胞介素1活性的影响

探索大鼠严重烧伤肾组织内皮素－１（ＥＴ－１）动态变化规律。方法用凝固汽油烧伤Ｗｉｓｔａｒ大鼠背部制成３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，观察正常对照、烧伤后１、３、６、１２、２４小时共６组动物的肾静脉血浆、肾皮质、外髓、内髓ＥＴ－１浓度变化，肾组织ＥＴ－１光镜和电镜免疫组织化学变化，肾组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ斑点杂交和原位杂交变化。结果烧伤后１小时肾静脉及肾组织各层ＥＴ－１较对照组明显上升（Ｐ＜０．０１），６小时达到高峰，２４小时仍明显高于正常。免疫组织化学显示ＥＴ－１增强部位主要在血管内皮细胞及平滑肌细胞、系膜细胞、肾小管上皮细胞，且内皮细胞内ＥＴ－１分泌颗粒聚积在细胞基底面，而小管上皮细胞基底面、管腔面均有ＥＴ－１分泌颗粒。斑点杂交及原位杂交均显示ＥＴ－１ｍＲＮＡ烧伤后１小时明显升高，３小时达高峰，２４小时仍高于正常，主要分布与免疫组织化学结果一致。结论严重烧伤早期肾脏ＥＴ－１的分泌和基因表达明显增强。     

严重体表烧伤早期大鼠肾脏内皮素—1的基因表达

应用分子斑点杂交，原位杂交技术，观察了大鼠烧伤早期肾脏各时相点的内皮素－ｍＲＮＡ的表达和定位变化。结果表明：烧伤早期肾脏ＥＴ－ｍＲＮＴ含量明显上升，分布有所变化，且为肾脏自身分泌释放。文中还简要讨论了上述变化的原因。     

严重烧伤早期大鼠肾脏内皮素受体mRNA变化的研究

动态观察大鼠烧伤早期肾脏各时相点内皮素受体Ａ（ＥＴＡ），内皮素受体Ｂ（ＥＴＢ）ｍＲＮＡ定量和分布的变化规律，发现肾脏ＥＴＡ，ＥＴＢｍＲＮＡ百分占有率在烧伤后１ｈ已明显升高，前者３ｈ达高峰，后者６ｈ达高峰，皮质以ＥＴＡ为主，髓质以ＥＴＢ为主，提示烧伤后内皮素受体改变参与了肾功能损害。     

严重烧伤早期肾组织内皮素—1及其基因表达的动态变化

目的：探索大鼠严重烧伤早期肾脏内皮素－１（ＥＴ－１）动态变化的规律。方法：凝固汽油烧伤Ｗｉｓｔａｒ大级部皮肤制成３０％ＴＢＳＡⅡ度烧伤模型，观察正常对照、烧后、３、６、１２、２４ｈ共６组动物肾血浆、肾皮质、外髓、内髓ＥＴ－１浓度变化，肾组织ＥＴ－１免疫组织化学变化，肾组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ 交和原位杂交变化。结果：烧伤后１ｈ肾静脉血及肾组织和层ＥＴ－１较对照组明显上升，６ｈ达到高峰，２４ｈ仍明显高于     

内皮素—1及其基因在早期STZ糖尿病大鼠肾组织中的表达及其意义

为探讨内皮素－１（ＥＴ－１）及其基因在早期ＳＴＺ糖尿病大鼠肾脏组织的表达及其人意义,作者采用免疫组化ＡＢＣ法和原位杂交技术检测了２４只早期ＳＴＺ糖尿病大鼠肾组织中ＥＴ－１及ＥＴ－１ｍＲＮＡ的定位及半定量表达。实验分为４组,每组６只。结果：ＥＴ－１和ＥＴ－１ｍＲＮＡ的分布一致,主要分布于肾小球内皮细胞、系膜细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及肾小以细胞之中。随质中ＥＴ－１和ＥＴ－１ｍＲＮＡ的表达高于波细     

烧冲复合伤早期肺组织ET-1及ETAR转录表达的研究

目的：探讨内皮素－１（ＥＴ－１）、内皮素Ａ型受体（ＥＴＡＲ）及肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）在烧冲复合伤病理生理过程中的作用和地位。方法：应用放射免疫及原位杂交和斑点杂交等核酸分子生物学技术，观测大鼠烧伤和烧冲复合伤后肺组织ＥＴ－１、ＥＴＲ及ＴＮＦα的转录表达变化、相互关系及与组织细胞损伤的关系。结果：伤后早期肺组织ＴＮＦα及ＥＴ－１的ｍＲＮＡ转录及其产生分泌均显著增加，血浆一氧化氮（ＮＯ）也有所增加，肺组织中的内皮素Ａ型受体（ＥＴＡＲ）ｍＲＮＡ升高，但ＥＴＲ却“下调”，各项指标变化均以烧冲复合伤组为显著，并与肺组织病理变化相关。结论：ＥＴ－１及其受体ＥＴＡＲ等在烧冲复合伤后肺的病理生理过程中可能起着重要作用。     

烧冲复合伤早期肝组织ET—1及ETR转录表达的研究

目的：探讨烧冲复合伤后早期肝组织内皮素－１（ＥＴ－１）、内皮素受体（ＥＴＲ）及肿瘤二死因子（ＴＮＦ－α）的变化和意义。方法：采用原位发校和斑点杂交等核酸分子生物学技术，观测大鼠烧伤和烧冲复合伤后肝组织ＥＴ－１、ＥＴＲ及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的转录表达变化及相互关系。结果：致伤后早期肝组织ＴＮＦ－α及ＥＴ－１的ｍＲＮＡ转录及合成均显著增加，ＴＮＦ－α的峰时早ＥＴ－１，虽内皮互Ａ型受体（ＥＴＡＲ）     

人IL—1,IL—1ra及IL—6在胸腺上皮细胞中的表达

应用ＭＴＴ及原位杂交技术对本室建立的人胸腺上皮样细胞株（ＴＥＣ１）分泌的细胞因子活性蛋白及其ｍＲＮＡ的表达进行了测定。结果表明，ＴＥＣ１细胞自发性分泌ＩＬ－１及ＩＬ－６活性蛋白，ＴＥＣ１细胞的起始浓度为５×１０４／ｍｌ，培养５天后，ＴＥＣ１细胞培养上清液中ＩＬ－１的活性平均为８４．６±１２．０Ｕ／ｍｌ；ＩＬ－６的活性平均为６５．４±１４．０Ｕ／ｍｌ；经原位杂交发现ＴＥＣ１具有ＩＬ－１、ＩＬ－１ｒａ及ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。提示：ＴＥＣ１细胞分泌的上述三种细胞因子对Ｔ细胞的发育具有重要意义。     

一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮素基因表达的影响

目的探讨一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮细胞及平滑肌细胞内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ表达的影响，全面了解缺氧性肺动脉高压的发病机制。方法对经Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及Ｎω－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理的慢性缺氧大鼠（４０只）肺组织，以ＥＴ－１ｃＲＮＡ探针进行原位杂交。结果缺氧１周及缺氧２周大鼠大部分肺动脉（７５％±３％及７１％±６％）其１％～５０％的内皮细胞显示ＥＴ－１ｍＲＮＡ杂交阳性信号。Ｌ－Ａｒｇ使大鼠肺动脉内皮细胞ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显抑制，而Ｌ－ＮＡＭＥ使其表达明显增强。缺氧１周及缺氧２周大鼠大部分肺动脉（８５％±６％及９８％±２％）的平滑肌细胞无ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达，但Ｌ－ＮＡＭＥ使其表达增强。结论一氧化氮对慢性缺氧大鼠肺动脉内皮细胞及平滑肌细胞ＥＴ－１－ｍＲＮＡ表达均有抑制作用。     

大鼠严重烧伤早期肾组织中内皮素—1的动态变化

探索大鼠严重烧伤肾组织内皮素－１的动态变化规律。用凝固汽油烧伤Ｗｉｓｔａｒ大鼠背部制成３０％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型，观察正常对照，烧伤后１，３，６，１２，２４小时共６组动物的肾静脉血浆，肾皮质，外髓，内髓ＥＴ－１浓度变化，肾组织ＥＴ－１光镜和电镜免疫组织化学变化，肾组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ斑点杂交和原位杂交变化。烧伤后１小时肾静脉及肾组织各层ＥＴ－１较对照组明显上升，６小时达到高峰，２４小时仍明显高于正     

内皮素-1及其基因在早期STZ糖尿病大鼠肾组织中的表达及其意义

为探讨内皮素１（ Ｅ Ｔ１）及其基因在早期链脲　菌素 （ Ｓ Ｔ Ｚ） 糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及其意义,作者采用免疫组化 Ａ Ｂ Ｃ法和原位杂交技术检测了２４只早期 Ｓ Ｔ Ｚ糖尿病大鼠肾组织中 Ｅ Ｔ１及 Ｅ Ｔ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的定位及半定量表达。实验分为４组,每组６只。结果： Ｅ Ｔ１和 Ｅ Ｔ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的分布一致,主要分布于肾小球内皮细胞、系膜细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及肾小管上皮细胞之中。髓质中 Ｅ Ｔ１和 Ｅ Ｔ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达高于皮质, 在糖尿病发生后１～２周, 二者在肾小球内均明显减少 （ Ｐ＜ ００５）, 但在４周时开始增高 （ Ｐ＜ ００５）, 而且在髓质中持续性增高。上述结果表明, Ｅ Ｔ１及 Ｅ Ｔ１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 参与了早期 Ｓ Ｔ Ｚ糖尿病大鼠肾小球高灌注及有关小管间质损伤。     

肾脏特异性表达新基因在肾脏组织中的分布

目的Collectrin为新近克隆的肾脏特异性表达基因.该研究观察Collectrin在不同种属(人类、大鼠和小鼠)肾脏组织中的分布和表达,为探讨Collectrin的生物学功能奠定基础.方法采用原位杂交及免疫组化染色检测其在不同种属肾脏组织中的定位表达.结果人和大鼠Collectrin基因及蛋白产物主要在肾脏集合管细胞表达,与既往在小肾组织中的研究结果一致,除此而外,人和大鼠Collectrin在肾远曲小管细胞中也有表达.结论在人、大鼠与小鼠三个不同种属中Collectrin主要定位表达在肾脏集合管细胞.     

硝酸甘油、地塞米松对哮喘肺泡巨噬细胞源性一氧化氮、内皮素的影响

研究哮喘患者肺泡巨噬细胞 (AM)源性一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)的变化及硝酸甘油 (NTG)、地塞米松(DXM)对两者的影响及机制。对 15例轻、中度过敏性支气管哮喘发作期患者的AM(分为未干预组、DXM干预组、NTG干预组 ) ,7名健康自愿受试者的AM(未干预组 )培养 48h ,用镀铜镉还原法、放射免疫法和原位杂交法分别测定AM培养上清液中NO ,ET水平和iNOS mRNA ,ET mRNA的表达。结果发现 ,哮喘AMiNOS mRNA ,ET mRNA表达增强 ,分别导致NO ,ET水平升高 ;NTG以直接作用的方式促进AM源性NO的产生 ,反馈抑制iNOS mRNA表达并明显抑制ETmRNA的表达 ,降低ET的水平 ;DXM降低哮喘AM源性NO ,ET水平及iNOS mRNA ,ET mRNA的表达 ,尤以抑制iNOS mRNA表达和降低NO水平为甚 ,使NO ,ET处于低水平的异常状态。     

肾小管和内皮素与肾间质纤维化的关系

目的：研究肾小管和内皮素与肾间质纤维化的关系。方法：应用肾小管上皮细胞及肾成纤维细胞的体外培养,通过逆转录多聚酶链反应,免疫组织化学染色,放射免疫测定及双重免疫组织化学染色技术,并测定３ＨＴｄＲ掺入率,观察肾小管损伤时产生的内皮素１（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ１ＥＴ１）与肾成纤维细胞增殖的关系。结果：肾小管上皮细胞既有ＥＴ１ｍＲＮＡ的表达,又有ＥＴ的两种受体（ＥＴＡＲｍＲＮＡ和ＥＴＢＲｍＲＮＡ）的表达,还有ＥＴ１的蛋白合成及分泌。且肾小管损伤及再生过程中,ＥＴ１表达增加。对体外培养的大鼠肾成纤维细胞加入ＥＴ１,３ＨＴｄＲ掺入率较对照组明显增高。并证明肾成纤维细胞有ＥＴＲｍＲＮＡ的表达。结论：损伤及再生的肾小管上皮细胞较正常时合成和分泌更多的ＥＴ１,ＥＴ１通过ＥＴＲ的作用,促使肾成纤维细胞的增殖,从而促进肾间质纤维化     

肺表面活性物质对哮喘大鼠ET-1及ET-1 mRNA表达的影响

目的:观察吸入肺表面活性物质(PS)对哮喘大鼠模型哮喘发作、内皮素-1(ET-1)及支气管肺组织ET-1 mRNA表达的影响,探讨PS 防治哮喘的机制.方法:建立哮喘大鼠模型,氧气驱动雾化吸入PS,观察哮喘发作情况及肺组织病理变化;采用放射免疫法测定其血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中ET-1含量 ,以分子原位杂交技术检测支气管肺组织内ET-1 mRNA的表达.结果:哮喘组血浆、BALF中ET-1含量及支气管肺组织ET-1 mRNA表达明显增加;治疗组哮喘发作及病理改变减轻,ET-1含量、支气管肺组织内ET-1 mRNA的表达较哮喘组明显减少.结论:ET-1在哮喘发病机制中可能发挥重要作用,外源性PS能减轻哮喘发作,可能与抑制ET-1 合成及释放有关.     

Distribution of endotoxins in tissues and circulation and its effects following hemorrhagic shock

OBJECTIVE: To systemically investigate 1) distribution of endogenous endotoxin (ET) in tissues and circulation; 2) its relationship with shock duration and organ damage; and 3) its possible mechanism after hemorrhagic shock. METHODS: To further elucidate the intrinsic relationship between endogenous endotoxin translocation and hemorrhagic shock, the present study systematically investigated the distribution of endogenous ET into the liver, lungs, kidneys and circulation, and the relationship between ET levels and the corresponding organ dysfunction with limulus amebocyte lysate (LAL) chromogenic assay following hemorrhagic shock in rats. RESULTS: It was found that ET levels in hepatic homogenate markedly increased (P = 0.09) 1.5 hours following shock compared with that in the sham group. After resuscitation, ET levels in hepatic, pulmonary and renal tissues were all significantly elevated. The levels kept increasing with the prolonged experimental time, and reached as high as 3.88 +/- 0.95 EU (endotoxin unit)/g in the livers, 2.53 +/- 1.46 EU/g in the lungs and 2.51 +/- 0.89 EU/g in the kidneys 12 hours after shock. ET levels in plasma reached a peak of 1.13 +/- 0.42 EU/ml at 1 hour following resuscitation, then rapidly decreased to the sham levels 3 hours following resuscitation. There was a close relationship between endotoxin translocation and shock duration. Correlation analysis further indicated that the changes in glutamic-pyruvic transaminase (GPT), blood urea nitrogen (BUN) in plasma and angiotensin I-converting exzyme (ACE) in pulmonary homogenate were significantly and positively correlated with the ET levels in the liver, kidneys and lungs after hemorrhagic shock. CONCLUSIONS: Hemorrhagic shock can induce obvious endogenous ET translocation, which is closely related to the shock duration. Although only transient endotoxemia occurs after hemorrhagic shock, ET can massively accumulate in tissues (liver, lungs and kidneys), and may play an important role in the development of shock.     

内皮素的mRNA在实验性牙髓炎组织中的表达

目的通过检测内皮素-1(ET-1)在牙髓组织中的表达，探讨ET-1与正常及炎性牙髓组织的关系。方法以改良的单纯穿髓开放法建立Wistar大鼠实验性牙髓炎的动物模型，病理观察分析该型的牙髓组织情况；Nonhern杂交分析牙髓组织内ET-1的mRNA表达水平。结果ET-1mRNA在正常组及牙髓炎组均有表达，且在炎症时增长明显，以牙髓炎3天组表达量最多。结论ET-1参与了牙髓炎症的发生与发展过程。     

内皮素参与溶血磷脂酸促血管平滑肌细胞的增殖

目的 :观察内皮素 (endothelin ,ET)对溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用。方法 :离体培养的VSMCs经不同浓度的LPA孵育后测定 [3 H] 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入 ,ETmRNA含量及ET的合成和释放量。结果 :LPA(5、10和 2 0 μmol·L-1)增加VSMCsETmRNA表达 ,VSMCsETmRNA含量分别较对照组高 16 %、2 1%和 2 3%。LPA亦以浓度依赖的方式增加VSMCsET的合成释放。 5～2 0 μmol·L-1LPA处理组细胞培养上清中ET含量较对照组高 14 0 %～ 2 0 0 % (P <0 .0 1)。 5～ 2 0 μmol·L-1LPA以浓度依赖的方式促进VSMCsDNA合成 ,非选择性的ETA 受体拮抗剂BQ12 3显著拮抗LPA刺激的VSMCs的DNA合成增加。结论 :LPA可促进VSMCs的ET产生 ,LPA的促VSMCs增殖效应部分是通过ET/ETA 受体途径介导。提示LPA和ET作为内源性活性物质相互协调发挥其生物学效应     

卡托普利对慢性心衰大鼠内皮素受体系统表达的影响

目的 研究慢性心衰大鼠在心衰早期、晚期及应用卡托普利诒疗慢性心衰时的左心室内皮素A(ETA)和内皮素B(ETB)受体的mRNA的表达水平,了解心衰时心肌内皮素受体系统的变化及其与病程的关系,以及卡托普利慢性给药对心衰大鼠内皮素系统的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测冠脉结扎心衰模型大鼠和卡托普利治疗时大鼠的左心室ETA和ETB受体的mRNA的表达,以放射免疫技术检测血浆中内皮素1(ET1)和心钠素(ANF)的浓度。结果 冠脉结扎10d后,血浆ET1和ANF的水平以及ETA和ETB受体mRNA表达水平明显增加;冠脉结扎70d后,血浆ET1和ANF的水平进一步显著升高(P<0.01或0.05),ETA受体mRNA表达水平和假手术组相比差异无显著性(P>0.05),而ETB受体mRNA表达水平仍明显增加,但和冠脉结扎10d组相比表达水平显着降低。卡托普利慢性给药治疗60d后,血浆ANF水平显著低于冠脉结扎70d组(P<0.01或0.05),但血浆ET1、ETA、ETB受体mRNA表达水平与冠脉结扎70d组差异无显著性(P>0.05)。结论 在慢性心衰的不同阶段,左心室内皮素受体系统表达的改变参与机体心脏功能的调节;卡托普利对内皮素系统没有直接影响。