异基因骨髓移植并发移植物抗宿主病小鼠体内IL-22的细胞来源

本研究探讨小鼠经异基因骨髓移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）时体内IL-22的细胞来源。分别以C57BL／6和BALB／c小鼠为供受鼠,受鼠经致死剂量全身照射后输注供鼠骨髓和脾淋巴细胞悬液,建立GVHD模型。实验分为正常组（normal）、单纯照射组（TBI）、骨髓移植组（BMT）和骨髓联合脾细胞诱导GVHD组（BS）。ELISA法检测小鼠血浆中IL-22的水平;流式细胞术检测IL-22的细胞来源及所属亚群情况。结果表明,Bs组小鼠血浆中IL-22水平最高,与正常小鼠相比差异有统计学意义（P〈0．01）;BS组小鼠脾、淋巴结和外周血中淋巴细胞均可产生IL-22,且IL-22＋CD4＋T细胞百分率高于IL-22＋CD8＋T细胞;除Th22细胞外,Th1细胞和Th17细胞也是GVHD小鼠体内IL-22的细胞来源,但以Th22细胞分泌IL-22为主。结论：GVHD小鼠体内可产生高水平的IL-22,其主要来源于IFN-γ-IL-17-IL-22＋的Th22细胞。     

UC-MSC 移植对 CIA 大鼠免疫细胞亚群免疫功能的调节作用简

本研究旨在观察脐带间充质干细胞（Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC）移植对CIA（collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA）大鼠外周血CD4＋ CD25＋调节性T细胞（Treg）、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群的调节作用.大鼠分为3组：CIA组（模型组）,UC-MSC治疗组及空白对照组.经尾静脉给CIA大鼠注射UC-MSC以流式细胞术（FCM）检测大鼠外周血CD4＋CD25＋细胞比例及中性粒细胞表面NCD11b表达,以酶联免疫吸附试验（ELISA）观察大鼠血清白介素-17（IL-17）水平.结果表明：模型组大鼠外周血NCD11b平均荧光强度（MFI）及IL-17水平均明显高于同期空白对照组,CD4＋ CD25＋细胞比例则显著降低（P＜0.05）,UC-MSC治疗组大鼠NCD11b及IL-17水平显著低于模型组（P＜0.05）,而CD4＋ CD25＋ Treg比例升高（P＜0.05）;至第5周UC-MSC治疗组上述指标均接近于空白对照组（P＞0.05）.结论：UC-MSC可上调CIA大鼠外周血Treg比例,抑制Th17细胞分泌IL-17及中性粒细胞的活性,减轻机体免疫性炎症反应,减少促炎因子的释放,诱导机体免疫重建.     

维生素D类似物对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的影响及机制研究

目的探究维生素D类似物钙泊三醇(CAL)对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的保护作用以及机制研究。方法构建银屑病模型小鼠,随机分为3组:模型组、钙泊三醇组、雷公藤组,每组10只,另设正常组10只。正常组小鼠于背部暴露处涂抹等量凡士林;模型组于小鼠背部涂抹42 mg 5%咪喹莫特乳膏,连续涂抹1周。钙泊三醇组:模型组基础上涂抹20 g钙泊三醇软膏,1次/d,连续涂抹1周。雷公藤组:灌胃10 mg/kg的雷公藤多苷片,1次/d,连续1周。末次给药后2 d、4 d、8 d、12 d评估小鼠皮肤受损指数(PASI),HE染色观察受损皮肤组织病理形态学;酶联免疫法检测血清中转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素17A(IL-17A)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素23(IL-23)水平,流式细胞术分析淋巴液中Th17、CD11c细胞比率;蛋白免疫印迹(WB)以及免疫组化法检测IL-17A、RORrt、IL-23蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠PASI评分、血清中TGF-β、IL-17、IL-4、IL-23水平、淋巴液中Th17、CD11c细胞比率、IL-17A、RORrt、IL-23蛋白表达升高(P 0. 05);与模型组相比,钙泊三醇组、雷公藤组小鼠PASI评分、血清中TGF-β、IL-17、IL-4、IL-23水平、淋巴液中Th17、CD11c细胞比率、IL-17A、RORrt、IL-23蛋白表达均降低(P 0. 05)。结论 CAL对银屑病小鼠皮肤受损具有一定的保护作用,其可能与抑制Th17、CD11c以及炎症因子IL-17/IL-23有关。     

儿童支气管哮喘患者外周血Th17百分数及FOXP3水平的变化及意义

目的探讨外周血Th17细胞百分数和叉头状转录因子P3(FOXP3)水平在儿童支气管哮喘患者中的变化及意义。方法选取支气管哮喘患儿(哮喘组)和健康儿童(对照组)各30例,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分数、实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IL-17和IL-10的表达水平。结果哮喘组外周血Th17细胞百分数及血浆IL-17水平均高于对照组(P<0.05);哮喘组外周血FOXP3表达及血浆IL-10水平均低于对照组(P<0.05)。结论 Th17/FOXP3的失衡可能在儿童支气管哮喘的发病机制中起重要作用。     

儿童肺炎支原体感染者血Th17/Treg的变化分析与临床意义

目的 探讨外周血辅助性T细胞17型(helper T cell type 17,Th17)和 CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)在肺炎支原体感染儿童体内的变化及临床意义.方法 肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染组32例,分为普通肺炎组18例、肺炎合并肺外症状组14例;健康对照组26名.常规分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测各组外周血Th17细胞、Treg的表达频率;ELISA方法 检测血清细胞因子IL-6、IL-17水平.结果 1.MP感染组外周血Th17细胞频率高于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Th17细胞频率水平高于普通肺炎组(P＜0.01);MP感染组外周血Treg细胞表达频率低于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Treg细胞频率低于普通肺炎组(P＜0.01).2.MP感染组血清IL-6、IL-17水平高于正常对照组(P＜0.01);肺外症状组血清IL-6、IL-17水平高于普通肺炎组(P＜0.01).结论 在儿童MP感染者体内存在Treg与Th17细胞频率明显改变,并伴有炎症性细胞因子水平升高,提示Treg与Th17细胞的频率异常在儿童MP感染的发病机制中起着重要的作用.     

重组脂联素对自然流产模型小鼠妊娠结局及Th17/Treg平衡的影响

目的探究重组脂联素(APN)对自然流产(SA)模型小鼠妊娠结局及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法将雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/c小鼠交配建立正常妊娠(NP)模型(n=10),雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠交配建立SA模型(n=20),造模成功后,将20只SA模型小鼠随机分为脂联素组(APN组,n=10)和生理盐水组(NS组,n=10),妊娠第5d,APN组腹腔注射10μg/(kg·d)重组脂联素,1次/d,NP组和NS组腹腔注射等量生理盐水,3组疗程为9 d。疗程结束,眼球取血,检测血清中白细胞介素17(IL-17)、脂联素、转化生长因子β(TGF-β)、IL-17/TGF-β水平;处死孕鼠,计算胚胎吸收率,检测脾脏淋巴细胞中Th17/Treg细胞分群。结果与NP组比较,NS组胚胎吸收率及血清中IL-17、IL-17/TGF-β水平及Th17/CD4+T细胞比例、Th17/Treg比值明显升高(P0.05),血清中脂联素、TGF-β水平及Treg/CD4+T细胞比例明显下降(P0.05);与NS组比较,APN组胚胎吸收率及血清中IL-17、IL-17/TGF-β水平及Th 17/CD4+T细胞比例、Th 17/Treg比值明显下降(P0.05),血清中脂联素、TGF-β水平及Treg/CD4+T细胞比例明显升高(P0.05);NP组、APN组胚胎吸收率及血清中脂联素、IL-17、TGF-β、IL-17/TGF-β水平及脾脏淋巴细胞中Th17、Treg细胞分群比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论重组脂联素治疗可能通过纠正Th17/Treg细胞失衡及相关细胞因子水平,改善SA模型小鼠的妊娠结局。     

哮喘- 慢阻肺重叠综合征患者外周血Th17 和Treg 细胞水平表达与肺功能的关系研究

目的　分析哮喘- 慢阻肺重叠综合征（ACOS）患者辅助性T 细胞17（Th17）和调节性T 细胞（Treg）表达水平,及其与肺功能的相关性。方法　采用流式细胞术检测60 例ACOS 患者（ACOS 组）、60 例哮喘患者（哮喘组）和60 例慢性阻塞性肺疾病患者（COPD 组）外周血Th17 和Treg 细胞的表达,比较分析其与肺功能指标的关系。结果　与哮喘组比较,COPD 组、ACOS 组外周血CD4+ 细胞中Th17 细胞表达及Th17/Treg 比例明显升高,而Treg细胞表达明显下降,差异均有统计学意义 (F=15.36~36.61,均P<0.05);与COPD 组比较,ACOS 组外周血CD4+ 细胞中Th17 细胞表达及Th17/Treg 比例明显升高,而Treg 细胞表达明显下降,差异有统计学意义 (F=36.61,21.18,15.26, P<0.05)。ACOS 组患者FVC%pred,FEV1%pred 和FEV1/FVC 明显低于哮喘组,差异均有统计学意义(F=7.36,11.36,9.68, P<0.05),但FVC%pred 与COPD 组患者比较,差异无统计意义(t=0.52, P>0.05)。ACOS 患者外周血Th17 和h17/Treg 表达与FVC%pred,FEV1%pred 和FEV1/FVC 呈显著负相关（r=-0.502~-0.407, 均P<0.05）。Treg与FVC%pred,FEV1%pred 和EV1/FVC 呈显著正相关（r=0.019~0.033, 均P<0.05）。结论　ACOS 患者外周血Th17 和Treg 细胞表达异常,存在Th17/Treg 比例失衡,且与肺功能下降密切相关。     

循环毒毒蛇咬伤患者外周血Th1/Th2细胞因子的表达及意义

目的分析外周血Th1/Th2细胞因子在循环毒毒蛇咬患者中的表达,探讨其在病情评估中的意义。方法收集2016年3月至2017年10月循环毒毒蛇咬伤患者108例,根据国际蛇伤诊断标准分为轻度蛇咬伤组82例与重度蛇咬伤组26例,另外选择同期体检健康者30例为对照组。通过流式细胞术检测并比较分析各组患者T淋巴细胞亚群的分布情况及外周血Th1/Th2细胞因子的表达。结果与对照组比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平偏低(P<0.01);细胞因子IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α表达水平升高(P<0.05)。蛇咬伤组两两比较,重度蛇咬伤组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞水平低于轻度蛇咬伤组(P<0.05),IL-4、IL-6、TNF-α表达水平均高于轻度蛇咬伤组(P<0.05)。结论循环毒毒蛇咬伤患者中存在有明显的T淋巴细胞数量的改变和Th1/Th2细胞因子表达紊乱,且与病情严重程度相关。     

人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化条件研究

目的探讨细胞因子水平对人外周血初始CD4~+T细胞向辅助性T细胞17(Th17细胞)分化的影响。方法选取人外周血单个核细胞分选初始CD4~+T细胞,在转化生长因子(TGF)-β存在下,以白细胞介素(IL)-1β和IL-23系列水平刺激其向Th17细胞分化。以流式细胞术检测IL-17A~+细胞比例,以荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测IL-17A、IL-17F、维A酸相关孤独受体(ROR)γt、RORα和IL-23R等相关因子表达水平。结果初始CD4~+T细胞经细胞因子刺激,IL-17A~+细胞比例显著升高(0.2%~1.0%),同时IL-17A等相关因子表达均显著增高,差异有统计学意义(P0.05),但IL-1β和IL-23系列水平刺激没有出现显著的量效关系,差异无统计学意义(P0.05)。结论现有条件可成功诱导人外周血初始CD4~+T细胞向Th17细胞分化,但分化效率不高,提高IL-1β和IL-23水平未显著提升分化效率,具体原因亟待进一步探索。     

RhoF介导的Th17极化在急性胰腺炎发生中的作用及机制

目的 探讨Rho相关GTP结合蛋白F(RhoF)介导的Th17极化在重度急性胰腺炎（SAP）发生中的作用及机制研究。方法 将RhoF转基因小鼠随机分为3组：对照组（n=10）、SAP组（n=10）和SAP+Y-27632组（n=10）。另将WT小鼠随机分为3组：对照组（n=10）、SAP组（n=10）和SAP+Y-27632组（n=10）。除对照组外,其他组建立SAP模型。SAP+Y-27632组在模型建立后,通过尾静脉输注Y-27632。分离小鼠血液样本中的T细胞,用于RhoF、p-MYPT1蛋白检测和ROCK活性测定,并采用流式细胞仪分析产生IL-17的淋巴CD4+T细胞的百分比。结果 与对照组相比,SAP组小鼠T细胞中RhoF、p-MYPT1表达量增加（P <0.01）,并且RhoF的水平与p-MYPT1的水平密切相关（P <0.05）。与WT组相比,RhoF组小鼠T细胞的RhoF蛋白水平的表达增加约30%,并且CD4+T细胞自发产生IL-17的水平显著增加（P <0.01）。与WT小鼠相比,RhoF转基因小鼠胰腺损伤的组织学评分,T细胞的RhoF、p-MYPT...