丹参注射液对糖尿病模型大鼠脊髓背角神经元凋亡及cyclinD1表达的影响

目的 研究丹参注射液对糖尿病大鼠脊髓背角神经元凋亡及cyclinD1表达的影响及其机制。方法 成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为糖尿病模型组（A组）、丹参治疗组（B组）和正常对照组（C组）各10只。A组和B组腹腔注射链脲佐菌素（STZ）60 mg•kg-1建立糖尿病模型,分别于注射STZ前及注射后1,2,3,4,5周测定大鼠右后爪缩足反应阈值。B组机械性痛阈＜8 g开始腹腔注射丹参注射液3 mL•kg-1,qd,连续4周。于注射STZ后5周处死大鼠,取L4～6脊髓,采用尼氏染色法光镜下观察脊髓背角组织病理学变化,TUNEL原位末端标记法检测脊髓背角神经元凋亡,免疫组化法测定脊髓背角神经元cyclinD1表达。结果 与C组比较,A组与B组机械性痛阈降低,脊髓背角组织病理学损伤明显,神经元凋亡指数及cyclinD1表达均升高（均P＜0.05）;与A组比较,B组经丹参注射液治疗4周后机械性痛阈升高,脊髓背角组织病理学损伤减轻,神经元凋亡指数及cyclinD1表达均低于A组（均P＜0.05）。结论 丹参注射液对糖尿病神经病变有一定保护作用,能够减轻神经病理性疼痛,其机制可能与下调脊髓背角神经元cyclinD1表达、抑制神经元凋亡有关。     

胍丁胺鞘内注射对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓CXCL13表达的影响

目的 探讨胍丁胺鞘内注射对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓趋化因子CXC配体13（CXCL13）表达的影响。方法 成年雌性SD大鼠60只,体质量200~220 g,采用随机数字表法分为3组：假手术组（A组）、骨癌痛组（B组）、骨癌痛+胍丁胺组（C组）,各20只。B、C组采用大鼠胫骨上端骨髓腔内注入Walker 256癌细胞的方法建立骨癌痛模型,A组胫骨髓腔内注射等量生理盐水,B、C两组鞘内置管。造模成功后,C组鞘内注射胍丁胺160 mg/kg,连续6天;B组鞘内给予等量生理盐水,连续6天;A组不作处理。于造模后第12天用von Frey丝测定3组大鼠机械缩足反射阈值（MWT）;痛阈测定结束后,麻醉处死大鼠,取脊髓组织,采用免疫荧光法检测CXCL13在神经元中的表达;采用Western blot法分析CXCL13蛋白表达及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测CXCLl3 mRNA的表达。结果 建模后12天,与A组比较,B、C组大鼠MWT明显低于A组,与B组比较,C组MWT高于B组,差异均有统计学意义（P<0.05）。建模后12天,与A组比较,B、C组大鼠CXCL13在脊髓背角神经元中表达增加,CXCL13蛋白及其mRNA表达明显增加（P<0.05）;与B组比较,C组大鼠CXCL13在脊髓背角神经元中表达降低,CXCL13蛋白及其mRNA表达明显减少（P<0.05）。结论 鞘内注射胍丁胺可有效改善大鼠骨癌痛痛觉过敏行为,其机制可能与抑制大鼠脊髓CXCL13表达有关。     

独一味单体抑制脊髓背角内AKT-mTOR信号通路缓解大鼠神经病理性痛

摘 要 目的：观察鞘内给予独一味单体8-O-乙酰山栀苷甲酯（8 O acetyl SM,8 OaS）对慢性神经病理性痛大鼠脊髓背角内丝苏氨酸蛋白激酶B（protein kinase B,AKT） 哺乳动物雷帕霉素靶点（the mammalian target of rapamycin,mTOR）信号转导通路表达的影响。方法: 采用大鼠腰5脊神经结扎（spinal nerve ligation,SNL）构建神经病理性痛模型,使用Von Frey 细丝连续观察造模后大鼠术侧后足的痛阈改变;应用Westernblot法定量分析大鼠腰膨大节段AKT和mTOR的磷酸化水平;采用免疫荧光组织化学染色观察pAKT和磷酸化mTOR(pmTOR)在脊髓背角内的细胞定位。结果: 由行为学数据可见,SNL模型大鼠机械性痛阈明显降低（P＜0.01）。术后1～7 d鞘内连续给予8 OaS进行人为干预,与给药前对比差异有统计学意义（P<0.05）;免疫荧光双重标记记实验结果显示,脊髓背角内pAKT与星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）存在大量共表达,pmTOR在星形胶质细胞和神经元上均观察到大量阳性染色。Western blot实验结果提示,8 OaS能显著下调脊髓背角内pAKT和pmTOR蛋白的表达水平。结论: 鞘内给予8 OaS可有效缓解由SNL诱导的机械性痛阈,其机制可能是8 OaS通过下调脊髓背角内AKT-mTOR信号通路的表达水平,进而抑制了星形胶质细胞的活化,从而达到缓解神经病理性痛的效果。     

安络小皮伞醇提取物对神经病理性疼痛模型大鼠的镇痛作用研究

目的 研究安络小皮伞醇提取物（MAEE）对坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）所致神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用并探索其作用机制。方法 40只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组及MAEE高、中、低剂量（800、400、200 mg/kg）组,每组8只。CCI术后14 d,连续ig给药7 d。于1、3、5、7 d给药后2 h测定大鼠机械痛阈（MWT）值和热痛阈（TWL）值,并在停药后连续测定3 d。于给药7 d后,取各组大鼠脊髓L₄-L₆节段,ELISA及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-1β（IL-1β）的表达,Western blotting法检测MAPK家族蛋白p-ERK、p-p38、p-JNK的表达变化。结果 与模型组比较,连续7 d给予MAEE能够剂量依赖性的缓解CCI诱导的大鼠机械学过敏及热痛学超敏（P<0.05、0.01）;下调CCI大鼠脊髓L₄-L₆节段炎症因子TNF-α和IL-1β的水平以及p-ERK、p-p38、p-JNK的蛋白表达（P<0.05、0.01）。结论 MAEE剂量依赖性的缓解CCI诱导的机械学超敏及热痛学过敏,该作用可能与其抑制CCI大鼠脊髓TNF-α、IL-1β等炎性细胞因子的表达及降低MAPK磷酸化蛋白表达相关。     

脊髓背角神经元上调Nav1.8通道参与缺血再灌注损伤后痛觉过敏的机制

目的观察鞘内注射钠通道抑制剂619C89对脊髓缺血再灌注损伤引起的痛觉过敏大鼠的痛阈、脊髓背角神经元中Nav1.8通道表达的影响。方法 SD大鼠随机分为3组:假手术组(S组)、痛觉过敏组(H组,缺血再灌注前3 d鞘内注射30μL生理盐水)、钠通道抑制剂组(I组,缺血再灌注前3 d鞘内注射619C895μg/30μL)。S组仅暴露主动脉弓而不结扎,其他各组开胸后无创动脉夹夹闭主动脉弓14 min后再开放,建立SCIRI引起的痛觉过敏模型。各组手术前均于L_(5-6)鞘内置管并连续注射3 d。术后1、3、5、7、14 d分别测定各组大鼠的热痛阈及机械性痛阈;取第4~6节腰段脊髓,采用免疫双荧光法观察背角神经元状态及其Nav1.8的表达,Real time-PCR法检测各组大鼠脊髓组织Nav1.8表达。结果与S组相比,术后各观察点(尤以第7天为著)H组大鼠热痛阈和机械性痛阈降低,损伤后7 d脊髓组织中Nav1.8 mRNA的表达增加(P<0.05);I组大鼠热痛阈和机械性痛阈值明显提高(P<0.05),脊髓组织中Nav1.8 mRNA的表达降低(P<0.05)。免疫双荧光染色显示,损伤后7 d,H组大鼠脊髓背角Nav1.8的荧光强度明显增加,且主要表达在NeuN表达阳性的神经元的胞浆中;且与S组相比,H组中NeuN/Nav1.8双阳性的细胞数量明显增多,而I组双阳性的细胞数量减少(P<0.05)。结论脊髓背角神经元通过上调Nav1.8通道参与缺血再灌注损伤后痛觉过敏的形成。     

转化生长因子-β1/Smad信号转导途径在大黄酸保护糖尿病大鼠肾脏中的机制探讨

目的 研究大黄酸对高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法 采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素（STZ）35 mg/kg诱导2型糖尿病大鼠模型,分为模型组,大黄酸低、中、高剂量（50、100、150 mg/kg）组,二甲双胍（300 mg/kg）组,另设正常对照组。分别于0、2、4、8周测定大鼠血糖、尿微量白蛋白;8周末检测大鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）与三酰甘油（TG）水平;HE染色观察肾脏组织病理;蛋白印记法检测大黄酸对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子-β₁（TGF-β₁）与Smad3蛋白表达的影响。结果 模型组大鼠血糖及尿微量白蛋白较正常对照组均明显升高,大黄酸各剂量组均能降低糖尿病大鼠血糖及尿微量白蛋白水平,其中,大黄酸高剂量组能显著降低糖尿病大鼠血糖及尿微量白蛋白水平（P<0.05）;与模型组相比,大黄酸各剂量组可降低大鼠血清Cr、BUN、TC与TG值,但是大黄酸高剂量组能显著降低糖尿病大鼠血清Cr、BUN、TC与TG值（P<0.05）;病理学观察显示模型组大鼠肾组织病变较为明显,大黄酸高剂量组肾组织病变明显改善,且糖尿病大鼠肾组织TGF-β₁与Smad3蛋白表达显著下降（P<0.05）。结论 大黄酸对糖尿病肾病有预防作用,其机制可能与改善肾功能、调节血脂及下调肾组织TGF-β₁与Smad3蛋白的表达有关。     

樟芝多糖辅助bFGF对于大鼠机械性脊髓损伤后神经功能修复的作用研究

目的 研究樟芝多糖联合碱性成纤维细胞因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对于机械性脊髓损伤的大鼠神经功能修复的作用。方法 采用改良的Allens法构建大鼠脊髓机械性损伤模型,将大鼠分为对照组、模型组、bFGF组、樟芝多糖组、bFGF+樟芝多糖组,药物干预时间为30 d。在药物干预后第1,7,14,21,30天对大鼠进行脊髓损伤（Basso-Beattie-Bresnahan,BBB）评分、诱发电位（somatosensory evoked potential,SEP）试验、运动诱发电位（motor evokedpotential,MEP）试验,30 d后处死大鼠,提取脊髓组织后进行HE染色和Nissl染色,Elisa检测组织中炎症因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、趋化因子10（CXCL-10）、集落刺激因子（GM-CSF）和白介素10（IL-10）的表达。结果 bFGF、樟芝多糖单一使用对小鼠神经功能BBB评分和SEP、MEP试验结果均优于模型组（P<0.05）,而bFGF+樟芝多糖组的BBB评分和SEP、MEP试验优于单一用药组（P<0.05）。bFGF组、樟芝多糖组、bFGF+樟芝多糖组的脊髓组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、CXCL-10的表达显著低于模型组（P<0.05）,而GM-CSF和IL-10的表达高于模型组（P<0.05）,且bFGF+樟芝多糖组显著优于bFGF组和樟芝多糖组（P<0.05）。结论 樟芝多糖辅助bFGF对于机械性脊髓损伤大鼠有着良好的神经功能修复作用,且优于使用单一的bFGF,其作用可能与抗炎症因子的表达,促进神经细胞的存活有关。     

小剂量乙酰半胱氨酸治疗慢性肝损伤作用及其机制

目的 研究小剂量乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）对CCl₄所致慢性肝损伤的疗效及其作用机制。方法 将大鼠分为正常对照组、模型组、小剂量NAC低、中、高剂量组和阳性对照组。小剂量NAC低、中、高剂量组分别给予45,90,180 mg·kg^-1,阳性对照组给予阿拓莫兰54 mg·kg^-1,正常对照组和模型组腹腔注射等容积灭菌生理盐水。采用CCl₄复制大鼠慢性肝损伤模型,末次给药后24 h麻醉大鼠,腹主动脉取血,检测血清ALT、AST含量以及肝组织中SOD、MDA、GSH和Hyp含量,观察肝脏组织病理学变化,免疫组化检测肝组织Nrf2、HO-1的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、MDA和Hyp含量明显升高（P<0.01）,SOD、GSH虽有下降趋势,但结果无统计学差异,Nrf2、HO-1蛋白表达均增加,但差异无统计学意义。与模型组比较,小剂量NAC低、中、高剂量组ALT、AST水平明显降低（P<0.01）,低、中剂量组SOD、GSH、Hyp含量差异均有显著性（P<0.01或P<0.05）,高剂量组GSH、Hyp含量差异均有显著性（P<0.01或P<0.05）,各剂量组MDA均有下降趋势,但无统计学意义,低、中、高剂量组Nrf2、HO-1蛋白表达均增加,其中低剂量组差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论 小剂量乙酰半胱氨酸对CCl₄诱导大鼠慢性肝损伤具有较好的治疗作用,其作用机制可能通过Nrf2/HO-1通路发挥抗氧化应激作用。     

糖肾宁对糖尿病肾病大鼠早期肾功能及LOX-1 mRNA表达的影响

摘 要 目的:观察糖肾宁对糖尿病肾病模型大鼠早期肾功能及肾脏组织中LOX-1 mRNA表达的影响。方法: 用三联造模法（单侧肾摘除+高糖高脂+小剂量链脲佐菌素腹腔注射）建立早期糖尿病肾病大鼠模型,糖肾宁干预12周后,采用RT-PCR方法观察大鼠肾脏组织中LOX-1 mRNA表达的变化。结果 用三联造模法可成功复制早期糖尿病肾病大鼠模型,模型大鼠的肾脏组织中LOX-1 mRNA表达增多,糖肾宁可减少LOX-1 mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达。结论 LOX-1的异常表达是糖尿病肾病的发病机制之一,糖肾宁可能通过降低LOX-1mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达对肾功能起到保护作用,值得进一步深入研究。     

抑制小胶质细胞激活对骨癌痛小鼠疼痛维持的影响

目的研究鞘内注射小胶质细胞特异性抑制剂米诺环素(minocycline,MC)抑制脊髓小胶质细胞的激活对骨癌痛维持的影响。方法采用小鼠跟骨癌痛模型,♂C3H/He小鼠42只,随机分为3组(n=14),sarcoma+PBS(phosphatebuffered saline)组和sarcoma+MC组行小鼠跟骨癌痛模型制作,跟骨内注射肿瘤细胞;sham+PBS组行假手术,跟骨内注射PBS。造模后11天(post-implantation day11,PID11),每组随机取10只小鼠,sham+PBS组和sarcoma+PBS组单次鞘内注射MC溶媒(PBS 5μl),sarcoma+MC组单次鞘内注射MC(1 nmol,5μl)。各组分别在鞘内注射前、注射后0.5、1、2、4、8、24 h测定机械性痛觉超敏、冷痛觉过敏。各组剩余4只小鼠在PID12鞘内注射后1 h行非伤害性触摸右侧足底90min,分析脊髓背角c-fos蛋白的表达。结果骨癌痛导致小鼠机械性痛阈和冷痛阈降低,脊髓背角c-fos蛋白的表达上调;单次鞘内注射MC能暂时提高小鼠疼痛阈值,并抑制脊髓背角c-fos蛋白的表达。结论小胶质细胞的激活对骨癌痛的维持具有重要作用。     

糖尿病神经痛大鼠脊髓背角NMDA受体表达的变化

目的探讨糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的变化。方法 SD雄性大鼠24只,4周龄,体重130～150g,随机分为2组,DNP组(D组,n=15)腹腔注射链尿佐菌素(STZ)50mg/kg制备成DNP模型,正常对照组(C组,n=9)给予等容量0.9%氯化钠溶液。给予STZ或0.9%氯化钠溶液后3、5、7周时分别取D组(5只)和C组(3只)大鼠,测量体重,采集静脉血样,测定空腹血糖浓度,然后测定机械缩足阈值,取脊髓组织,采用免疫组织化学法分别测定脊髓背角NR1和NR2B亚单位表达水平。结果与C组比较,在各时间点,D组体重下降,血糖升高,机械缩足阈值明显降低(P<0.05),脊髓背角NR1和NR2B亚单位免疫阳性细胞数表达明显增加(P<0.05)。结论脊髓背角NMDA受体在脊髓水平参与了大鼠糖尿病神经病理性痛的形成。     

Spinal nerve ligation reduces nitric oxide synthase activity and expression: effect of resveratrol

The effect of resveratrol on activity and expression of nitric oxide synthase (NOS) in the spinal cord of neuropathic rats was assessed. Spinal nerve ligation produced tactile allodynia along with a reduction of catalytic activity of the constitutive Ca²⁺-dependent NOS (eNOS and nNOS isoforms) in the ipsilateral dorsal horn, but not contralateral dorsal or ipsilateral or contralateral ventral, spinal cord at 1, 5, 10 and 15 days after surgery compared to naïve and sham-operated animals. Nerve ligation also induced a reduction of nNOS expression in the ipsilateral dorsal horn spinal cord at 10 and 15 days after surgery. Intrathecal resveratrol reduced allodynia and reversed the reduction of constitutive Ca²⁺-dependent NOS activity in the ipsilateral dorsal spinal cord. Moreover, resveratrol significantly reversed the reduction of nNOS expression in the ipsilateral dorsal horn spinal cord. Results show that spinal nerve ligation leads to development of tactile allodynia along with a reduction in constitutive Ca²⁺-dependent NOS activity and nNOS isoform expression in the ipsilateral dorsal horn. Data suggest that resveratrol may reduce tactile allodynia in neuropathic rats by restoring altered NOS activity and expression.     

Spinal nerve ligation reduces nitric oxide synthase activity and expression: Effect of resveratrol

The effect of resveratrol on activity and expression of nitric oxide synthase (NOS) in the spinal cord of neuropathic rats was assessed. Spinal nerve ligation produced tactile allodynia along with a reduction of catalytic activity of the constitutive Ca²⁺-dependent NOS (eNOS and nNOS isoforms) in the ipsilateral dorsal horn, but not contralateral dorsal or ipsilateral or contralateral ventral, spinal cord at 1, 5, 10 and 15 days after surgery compared to naïve and sham-operated animals. Nerve ligation also induced a reduction of nNOS expression in the ipsilateral dorsal horn spinal cord at 10 and 15 days after surgery. Intrathecal resveratrol reduced allodynia and reversed the reduction of constitutive Ca²⁺-dependent NOS activity in the ipsilateral dorsal spinal cord. Moreover, resveratrol significantly reversed the reduction of nNOS expression in the ipsilateral dorsal horn spinal cord. Results show that spinal nerve ligation leads to development of tactile allodynia along with a reduction in constitutive Ca²⁺-dependent NOS activity and nNOS isoform expression in the ipsilateral dorsal horn. Data suggest that resveratrol may reduce tactile allodynia in neuropathic rats by restoring altered NOS activity and expression.     

鞘内注射氟代柠檬酸对炎性痛敏大鼠的镇痛作用

目的研究鞘内注射氟代柠檬酸(fluorocitrate,Fc)对致炎大鼠痛觉过敏的影响。方法采用大鼠右后爪踝关节外侧皮下注射完全弗氏佐剂(complete freunds adjuvant,CFA)50μl致炎模型。测定给予CFA或Fc前后大鼠机械性缩爪阈值(MWT)和热刺激缩爪潜伏期(TWL)。免疫组化分析脊髓背角星形胶质细胞标记物(GFAP)和小胶质细胞标记物(OX-42)的表达。结果大鼠皮下注射CFA24h后出现明显的炎性痛敏,鞘内注射Fc后4,6,8,10,12h,与CFA组大鼠比较,大鼠MWT明显提高(P<0.01),TWL明显延长(P<0.01)。鞘内注射Fc6h后,降低脊髓背角GFAP和OX-42表达。结论脊髓胶质细胞可能参与炎性痛敏的发生和维持,氟代柠檬酸可能通过抑制其生物活性而发挥镇痛作用。     

心肌及蛛网膜下腔NGF基因转染对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用

目的 探讨以重组腺相关病毒（rAAV）为载体,评价心肌点注射和蛛网膜下腔注射转导神经生长因子（NGF）基因对1型糖尿病大鼠心脏损伤的保护作用。方法 全实验包括两个子实验。实验一：将12只SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为2组（n=6）：对照组、糖尿病（DM）组,DM组大鼠通过注射链脲佐菌素（STZ）建立1型糖尿病模型,2组大鼠于注射STZ前1 d及后第1、2、4、6、8、9周测甩尾反射潜伏期,并在第9周时通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组织中的NGF、降钙素基因相关肽（CGRP）含量。实验二：24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组（n=6）：糖尿病心脏转染对照组（MC）组、糖尿病心脏转染（ME）组、糖尿病脊髓转染对照（SC）组、糖尿病脊髓转染（SE）组,采用2×2析因设计,4组糖尿病模型建模方法同DM组,成模后第4周,MC组和ME组以心脏点注射分别转染滴度为0.8×1013 μg/L携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的重组腺相关病毒（rAAV9-GFP）和相同滴度的携带NGF基因的rAAV-GFP（rAAV9-NGF-GFP）,各100 μL;SC组和SE组以蛛网膜下腔注射分别转染滴度为0.8×1012 μg/L的rAAV2-GFP和相同滴度的rAAV2-NGF-GFP,各25 μL。5周后,测各组大鼠心功能指标。取心肌、T1-T5段脊髓及背根神经节组织,荧光显微镜下观察GFP的表达情况;采用ELISA测各组织中的NGF、CGRP含量。结果 实验一中,与对照组相比,DM组的甩尾反射潜伏期在第4周后明显延长（P＜0.05）,心肌组织中的NGF、CGRP明显下调（P＜0.05）。实验二中,心肌点注射法转染rAAV9-NGF-GFP可改善大鼠的各项心功能指标（P＜0.05）,上调心肌组织中NGF、CGRP蛋白含量（P＜0.05）;且实验过程中的转染物与转染途径之间存在交互效应,两者联用改善心功能和上调心肌组织中NGF、CGRP的效果更显著（P＜0.05）。结论 心肌点注射rAAV-NGF-GFP可以更有效地提高1型糖尿病大鼠心肌组织中NGF的表达,产生更有效的心脏保护作用。     

Removing TRPV1-expressing primary afferent neurons potentiates the spinal analgesic effect of delta-opioid agonists on mechano-nociception

Most delta-opioid receptors are located on the presynaptic terminals of primary afferent neurons in the spinal cord. However, their presence in different phenotypes of primary afferent neurons and their contribution to the analgesic effect of delta-opioid agonists are not fully known. Resiniferatoxin (RTX) is an ultra-potent transient receptor potential vanilloid type 1 channel (TRPV1) agonist and can selectively remove TRPV1-expressing primary afferent neurons. In this study, we determined the role of delta-opioid receptors expressed on TRPV1 sensory neurons in the antinociceptive effect of the delta-opioid receptor agonists [D-Pen(2),D-Pen(5)]-enkephalin and [D-Ala(2),Glu(4)]-deltorphin. Nociception was measured by testing the mechanical withdrawal threshold in the hindpaw of rats. Changes in the delta-opioid receptors were assessed using immunocytochemistry and the [(3)H]-naltrindole radioligand binding. In RTX-treated rats, the delta-opioid receptor on TRPV1-immunoreactive dorsal root ganglion neurons and afferent terminals in the spinal cord was diminished. RTX treatment also significantly reduced the maximal specific binding sites (31%) of the delta-opioid receptors in the dorsal spinal cord. Interestingly, intrathecal injection of [D-Pen(2),d-Pen(5)]-enkephalin or [D-Ala(2),Glu(4)]-deltorphin produced a large and prolonged increase in the nociceptive threshold in RTX-treated rats. These findings indicate that loss of TRPV1-expressing afferent neurons leads to a substantial reduction in presynaptic delta-opioid receptors in the spinal dorsal horn. However, the effect of delta-opioid agonists on mechano-nociception is paradoxically potentiated in the absence of TRPV1-expressing sensory neurons. This information is important to our understanding of the cellular sites and mechanisms underlying the spinal analgesic effect of delta-opioid agonists.     

糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓背角凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化

目的探讨糖尿病神经病理性痛（DNP）大鼠脊髓背角凋亡细胞及与之相联系的凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化。方法健康雄性sD大鼠60只,随机分为DNP组和正常对照组,每组30例。DNP组：腹腔注射链脲霉素（STZ）50mg／kg制备成DNP模型;正常对照组给予等容量0．9％氯化钠溶液。分别给予注射STZ或0．9％氯化钠溶液后3、5、7周时取10只大鼠,采集静脉血样,测定空腹血糖浓度,然后测定机械缩足阈值,取2组大鼠L1-5脊髓组织,采用原位末端标记法（TUNEL）检测2组大鼠脊髓背角神经细胞凋亡的变化。采用免疫组织化学染色法观察凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化。结果与正常对照组比较,DNP组血糖升高,机械缩足阈值降低（P〈0．05）,凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达逐渐增加（P〈0．05）。结论DNP大鼠脊髓背角凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达上调。     

非线性混合效应模型法计算1型糖尿病大鼠环孢素药代动力学参数

目的 研究糖尿病对环孢素(Ciclosporin, CsA)体内药物代谢动力学的影响。方法 大鼠腹腔注射65 mg·kg^-1链脲菌素(STZ)建立1型糖尿病大鼠模型。造模5周后通过荧光偏振免疫分析(FPIA)法检测大鼠灌胃环孢素(10 mg·kg^-1)后全血中的环孢素浓度,采用非线性混合效应法(Nonlinear mixed effect model, NONMEM)建立药物代谢动力学模型,贝叶斯(Bayes)反馈法获取个体参数并比较。结果 STZ注射1周后,大鼠空腹血糖超过11.1 mmol·L^-1,确认1型糖尿病大鼠造模成功。造模5周后,糖尿病大鼠的血糖显著增高。给药后,环孢素在大鼠体内呈现一房室模型,群体典型值及个体间差异(Between Subject Variability, BSV)分别为：CL/F=0.525 L·h^-1, BSV=32.1%;V/F=5.18 L, BSV=35.6%; Ka=1.82,BSV= 71.1%。正常组与糖尿病组大鼠CL/F无显著性差异(P>0.05);V/F无显著性差异(P>0.05);Ka有显著性差异(P<0.05) 。结论 1型糖尿病大鼠灌胃环孢素的吸收速率常数显著改变,且存在较大的个体间差异,提示糖尿病状态下会影响环孢素的吸收。     

坐骨神经慢性压迫损伤性疼痛与脊髓背角P物质关系研究

目的观察大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）后脊髓背角P物质表达的变化,探讨P物质在疼痛发生机制中的作用。方法SD雄性大鼠60只,随机分为：A组：CCI组（30只）;B组：对照组（30只）。术前及术后3、7、14、28 d分别测定大鼠热痛阈值、机械痛阈值和行为学评分。术后3、7、14、28d每组取4只,麻醉后用4%多聚甲醛灌注固定,取L4-6段脊髓,以备免疫组化,测定SP的变化。结果所有CCI动物从术后第3天起,出现明显的疼痛行为学改变和热痛阈值、机械痛阈值的降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。免疫组织化学结果表明,A组术后术侧明显高于B组（P〈0.05或P〈0.01）;A组术侧明显高于健侧（P〈0.05或P〈0.01）;而B组仅在第4天术侧高于健侧（P〈0.05）。结论慢性坐骨神经损伤后,脊髓背角SP的表达增加,而且表达增加与CCI大鼠的痛觉过敏、行为变化在时相上基本一致,说明CCI大鼠痛觉过敏与脊髓背角SP的表达增加有关。