乙型肝炎肝纤维化组织差异蛋白的筛选及DDAH1的功能研究

目的:对比分析乙型肝炎纤维化和非纤维化肝组织的蛋白质组表达谱的差异,探讨二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶1(DDAH1)在肝纤维化发生发展中的功能.方法:利用双向凝胶电泳(2-DE)筛选肝纤维化和非纤维化肝组织差异表达的蛋白质,质谱鉴定差异蛋白质,Western-blot验证DDAH1的表达水平;测定肝组织中DDAH1活性,不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量,一氧化氮合酶(NOS)活性及NO2-/NO3-比值.结果:鉴定出DDAH1等25个2倍以上的差异蛋白质;肝纤维化组织中DDAH1的活性降低,ADMA含量增加,NOS活性下降,一氧化氮(NO)含量减少.结论:乙型肝炎肝纤维化与非纤维化肝组织的蛋白质表达谱有一定差异,DDAH1有可能通过调节ADMA的代谢而影响NO合成,参与了肝纤维化的发生发展.     

非对称二甲基精氨酸在大鼠脑缺血再灌注损伤诱导的急性肺损伤发病过程中的作用(英文)

目的研究非对称二甲基精氨酸(ADMA)在大鼠脑缺血再灌注(I/R)诱导的急性肺损伤发病过程中的作用。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(S)、模型组(I/R)、ADMA处理组(ADMA+I/R)和DDAH处理组(DDAH+I/R)。通过大鼠脑缺血2 h后恢复血流灌注诱导急性肺损伤。在恢复血流灌注24 h后,采用比色法检测各组大鼠肺组织一氧化氮合酶(NOS)活性和NO含量。采用RT-PCR和Western blotting分别检测肺组织蛋白激酶(PKC)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液及入肺血和出肺血血浆中的ADMA水平。结果脑I/R损伤大鼠支气管肺泡灌洗液和入肺血血浆中ADMA水平明显升高,肺组织中NO含量和NOS活性明显降低(P<0.05),同时MLCK和PKC mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05)。预先给予外源性DDAH后,脑缺血/再灌注损伤大鼠支气管肺泡灌洗液和入肺血血浆中ADMA水平明显降低,肺组织NO含量和NOS活性明显升高,MLCK和PKC mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论 ADMA通过上调肺组织MLCK和PKC的表达参与了脑I/R损伤后急性肺损伤的发病过程。ADMA可能是脑缺血/再灌注损伤诱导急性肺损伤的一个新的生物标志物和治疗靶点。     

ADMA在肾脏疾病中的研究进展

Kakimoto等于1970年首次从人的尿液中分离并鉴定出非对称性二甲基精氨酸(ADMA).含有精氨酸残基的蛋白质在蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)的作用下精氨酸残基发生甲基化,蛋白质水解后释放出ADMA.1992年Vallance等[1]首次提出ADMA能够竞争性抑制一氧化氮合酶(NOS)的活性,减少NO生成,导致血管内皮功能障碍.在过去的15年中,超过600余家科研单位报道了AD-MA与心血管疾病(CVD)的关系,这些报道认为ADMA不仅与传统的CVD危险因素密切相关,且独立于这些危险因素.同时,ADMA还与一些CVD相关的临床指标密切相关,例如颈动脉内膜厚度、左室体积等.ADMA被认为是慢性肾脏病(CKD)患者中CVD的独立危险因素.研究表明ADMA与透析患者中的全因死亡率和心血管事件具有强烈、独立的相关性.     

颈动脉狭窄与ADMA的相关性研究

目的探讨血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平与颈动脉狭窄之间的关系。方法选择90例患者根据狭窄程度分为轻度狭窄组(34例)、中度狭窄组(30例)和重度狭窄组(26例),另选健康体检者30例为健康对照组。通过高效液相色谱联合质谱法(HPLC)测定血浆ADMA含量。结果颈动脉狭窄组血浆ADMA水平高于健康对照组(P<0.01);重度狭窄组血浆ADMA水平高于中度狭窄组(P<0.05)及轻度狭窄组(P<0.01),中度狭窄组高于轻度狭窄组(P<0.05)。颈动脉狭窄程度与ADMA水平呈正相关(r=0.291,P<0.01)。结论ADMA高水平是动脉粥样硬化的重要危险因素,与颈动脉狭窄的严重程度相关。     

不对称二甲基精氨酸在子痫前期中的研究进展

不对称二甲基精氨酸（ADMA）是内源性一氧化氮合酶（NOS）抑制剂,影响一氧化氮（NO）的合成。子痫前期是严重影响母儿健康的妊娠期特有疾病,其发病机制复杂且涉及多种病理生理因素,至今仍不十分清楚。NO合成减少和/或活性降低在子痫前期发病过程中起重要作用。子痫前期NO生物活性受损可能并非由NOS水平或活性下降引起,而可能是由NOS内源性抑制剂ADMA水平升高所致。在氧化应激和炎症等情况下,体内ADMA水平升高,而在胎盘部位其降解酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）减少,推测子痫前期母体ADMA水平升高可能来源于胎盘,与胎盘部位DDAH活性降低有关,但具体机制仍有待进一步研究。研发特异性对抗或削弱ADMA的心血管效应的药物已成为现在研究的热点。子痫前期患者补充L-精氨酸对血压和妊娠结局是否有良好的效应还存在争议,而DDAH激动剂有望成为心血管疾病和子痫前期新的治疗选择。本文就ADMA在子痫前期发病过程中的作用及其机制、在临床诊疗中的应用前景等方面的研究进展进行综述。     

非对称性二甲基精氨酸在不明原因复发性流产患者绒毛及外周血的表达及其意义

目的 探讨不明原因复发性流产（URSA）患者绒毛及外周血非对称性二甲基精氨酸（ADMA）表达及其临床价值。方法 选取URSA患者168例,采用计算机产生随机数法将就诊患者以3〖DK〗∶1的比例分为训练集126例(URSA组)和测试集42例,另选取同期于我院进行终止妊娠的126例孕妇作为对照,对比训练集及对照组临床资料及外周血和绒毛组织ADMA表达,通过拟合曲线和阈值效应分析患者血清URSA表达与URSA发生的关系,采用多因素Logistics回归模型分析发生URSA的独立危险因素,构建列线图模型。结果 与对照组比较,URSA组患者IL-6、IL-117、Th17、Th17/Treg及血浆、绒毛组织ADMA表达显著增加,孕酮、IL-10、TGF-β及Treg显著降低（P＜0.05）。IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg及血浆ADMA、绒毛组织ADMA是发生URSA的独立危险因素,而IL-10、TGF-β及Treg是发生URSA的保护因素（P＜0.05）。当血浆ADMA≥1.43 μmol/L时,血浆ADMA每增加0.6 μmol/L,孕妇发生VRSA的风险增加17%,差异具有统计学意义（OR=0.115,95%CI：0.102~0.133,P＜0.05）;当绒毛ADMA≥1.92 μmol/L时,绒毛ADMA每增加0.6 μmol/L,孕妇发生URSA的风险增加14%,差异具有统计学意义（OR=1.192,95%CI：1.085~1.302,P＜0.05）。依据独立影响因素构建的列线图预测模型具有较高的区分度、准确性和临床适用性。结论 ADMA在URSA患者血浆及绒毛组织中的表达增加,是URSA发生的独立危险因素,对URSA的发生具有一定的预测价值     

脑血管病轻度认知障碍与血浆不对称二甲基精氨酸、同型半胱氨酸的相关性及预测价值研究

目的：研究脑血管病轻度认知障碍与血浆不对称二甲基精氨酸（ADMA）、同型半胱氨酸（Hcy）的相关性。方法：本研究采用前瞻性研究方法,以新余矿业医院2017年1月-2021年1月诊断的脑血管病患者120例作为研究对象,其中认知障碍患者48例,均为轻度认知障碍患者,纳为观察组,认知正常患者72例,纳为对照组。采用酶联免疫法对患者的ADMA及Hcy水平进行检测,比较两组患者ADMA及Hcy水平之间的差异,分析脑血管病患者轻度认知障碍与血浆ADMA、Hcy的相关性。结果：观察组MoCA评分低于对照组、ADMA及Hcy水平均显著高于对照组（P<0.05）;通过相关性分析,MoCA与ADMA、Hcy水平均呈负相关,ADMA、Hcy联合检测的敏感度、准确度均显著高于单独检测（P<0.05）;通过ROC曲线分析,联合检测的曲线下面积显著高于单独检测（P<0.05）,观察组ADMA、Hcy水平的临界值分别为0.68μmol/L、30.26μmol/L。结论：脑血管病轻度认知障碍与ADMA、Hcy呈现显著的相关性,可作为日后认知障碍的重要诊断参考。     

精氨酸甲基转移酶4及其产物不对称二甲基精氨酸在多囊卵巢综合征中的初步探讨

目的:研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者、人正常对照组血清及PCOS模型大鼠、大鼠对照组血清中不对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginines,ADMA)的含量,以及PCOS模型大鼠卵巢组织中蛋白质精氨酸甲基转移酶4(protein aiginine methyltransferase 4,PRMT4)的表达情况,研究二者与PCOS之间的关系。方法:运用ELISA测定49例PCOS患者、20例人正常对照组以及20例PCOS模型大鼠、20例大鼠对照组血清中ADMA的含量,并采用免疫组化SP法测定PCOS模型大鼠卵巢组织中PRMT4的表达。结果:(1)人血清中ADMA含量PCOS组为(0.49±0.35)μmol/L,对照组为(0.26±0.09)μmol/L,两组差异具有统计学意义(P=0.00);(2)大鼠血清中,PCOS模型组ADMA含量为(0.55±0.14)μmol/L,对照组为(0.23±0.08)μmol/L,两组差异具有统计学意义(P=0.00);(3)大鼠卵巢组织中,模型组PRMT4积分光密度(integral optical den-sity,IOD)值为(44.96±9.40)μmol/L,对照组为(18.27±3.83)μmol/L,两组差异具有统计学意义(P=0.00)。结论:PRMT4的含量累积可能导致其产物ADMA的生成增加,共同参与PCOS血管内皮功能紊乱产生,从而促进PCOS的发展。     

探讨非对称二甲基精氨酸诱导心肌细胞肥大的作用机制

目的探讨非对称二甲基精氨酸（ADMA）诱导心肌细胞肥大的作用机制。方法原代培养大鼠乳鼠心肌细胞。用不同浓度的ADMA诱导心肌细胞肥大,然后测定细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量、一氧化氮合酶（NOS）的活性,细胞内氧活性物质（ROS）的水平、RNA含量、总蛋白量以及心肌细胞表面积。结果①不同浓度的ADMA分别使细胞内NO的含量减少,NOS的活性降低（P〈0.05）;②高浓度的ADMA能使心肌细胞内ROS的水平升高、细胞内RNA含量和总蛋白含量增加以及心肌细胞表面积增加（P〈0.05）。结论 ADMA能够诱导心肌细胞肥大的机制主要与ADMA影响细胞内的NO含量、ROS水平、NOS活性、RNA含量、总蛋白含量、心肌细胞总面积有关。     

非对称二甲基精氨酸与线粒体功能的研究进展

线粒体功能障碍参与多种心血管疾病的发生与发展,其突出表现为线粒体生物合成减少和线粒体动力学改变,主要由一氧化氮(NO)减少及氧自由基增加所致。最新研究发现,内源性一氧化氮合酶抑制物(NOS)非对称二甲基精氨酸(ADMA),是导致NO水平下降和氧自由基水平升高的重要机制,也是动脉粥样硬化、高血压、糖尿病等心血管疾病中线粒体功能障碍的重要原因。本文对ADMA与线粒体功能障碍之间的关系及可能的机制进行简要综述。     

子痫前期患者血清中sEng、ADMA含量与胎盘缺氧损伤、细胞凋亡的相关性

目的:研究子痫前期患者血清中sEng、ADMA含量与胎盘缺氧损伤、细胞凋亡的相关性。方法:选择2014年5月~2016年3月期间在我院确诊为子痫前期的56例患者作为PE组,同期分娩的健康产妇作为对照组,采集血清并测定sEng、ADMA含量,采集胎盘组织并测定氧化应激指标、细胞凋亡分子的含量。结果:PE组患者血清中sEng、ADMA的含量均显著高于对照组;PE组胎盘组织中SOD、GSH-Px、CAT、SVCT1、SVCT2、Survivin、XIAP的含量均显著低于对照组,Beclin1含量、LC3-II/LC-I比值均显著高于对照组;PE组sEng、ADMA高含量组患者胎盘中Beclin1的含量以及LC3-II/LC-I的比值均显著高于sEng、ADMA低含量组,SOD、GSH-Px、CAT、SVCT1、SVCT2、Survivin、XIAP的含量均显著低于sEng、ADMA低含量组。结论:子痫前期患者血清中sEng、ADMA含量显著升高且与胎盘缺氧损伤、细胞凋亡程度密切相关。     

精氨酸甲基转移酶4及其产物不对称二甲基精氨酸在多囊卵巢综合征中的初步探讨

目的：研究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）患者、人正常对照组血清及PCOS模型大鼠、大鼠对照组血清中不对称二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginines,ADMA）的含量,以及PCOS模型大鼠卵巢组织中蛋白质精氨酸甲基转移酶4（protein aiginine methyltransferase 4,PRMT4）的表达情况,研究二者与PCOS之间的关系。方法：运用ELISA测定49例PCOS患者、20例人正常对照组以及20例PCOS模型大鼠、20例大鼠对照组血清中ADMA的含量,并采用免疫组化SP法测定PCOS模型大鼠卵巢组织中PRMT4的表达。结果：（1）人血清中ADMA含量PCOS组为（0.49±0.35） umol/L,对照组为（0.26±0.09） umol/L,两组差异具有统计学意义（P=0.00）;（2）大鼠血清中,PCOS模型组ADMA含量为（0.55±0.14） umol/L,对照组为（0.23±0.08） umol/L,两组差异具有统计学意义（P=0.00）;（3）大鼠卵巢组织中,模型组PRMT4积分光密度（integral optical den－sity,ＩＯＤ）值为（44.96±9.40） umol/L,对照组为（18.27±3.83）umol/L,两组差异具有统计学意义（P=0.00）。结论：PRMT4的含量累积可能导致其产物ADMA的生成增加,共同参与PCOS血管内皮功能紊乱产生,从而促进PCOS的发展。     

急性脑梗死患者血浆ADMA与血清Hcy的相关性

目的探讨急性脑梗死患者血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)与血清同型半胱氨酸(Hcy)的相关性。方法将126例急性脑梗死患者(脑梗死组)依据美国国立卫生研究所卒中量表评分(NIHSS)得分,分为轻、中及重型三个亚组,同期健康体检者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血浆ADMA浓度,化学发光法检测血清Hcy浓度。比较组间血浆ADMA及血清Hcy水平,分析血浆ADMA与血清Hcy水平的相关性。结果急性脑梗死各亚组及对照组血浆ADMA浓度分别为[(48.69±33.27)、(62.69±28.80)、(83.58±21.27)和(21.93±7.03)μmol/L],组间多重比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);血清Hcy浓度分别为[(12.99±8.78)、(15.99±7.74)、(22.16±7.35)和(11.97±4.87)μmol/L],轻型梗死组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中型、重型梗死组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素线性逐步回归分析,血浆ADMA与血清Hcy水平呈线性趋势(B=2.404,P<0.01),经过Logistic多元回归分析后,在排除传统的高血压、糖尿病以及高甘油三酯血症等危险因素后,结果提示Hcy和ADMA可能是脑梗死的独立危险因素。结论急性脑梗死患者血浆ADMA、血清Hcy水平均升高,且血浆ADMA与血清Hcy水平呈正相关。     

血清非对称二甲基精氨酸在盐敏感高血压患者中的测定及其意义

目的探讨血清非对称二甲基精氨酸（ADMA）在盐敏感高血压患者中的测定及其意义。方法选择2011年1月～2012年4月在深圳市福田区中医院住院盐敏感高血压患者60例作为观察组,同期选择血压正常的自愿者60例作为对照组,两组都进行ADMA与血压、血糖、血脂检测。结果观察组患者血中ADMA浓度明显高于对照组（P〈0.05）。ADMA与收缩压、舒张压、血糖、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇呈现正相关（P〈0.05）。结论血清ADMA水平升高与盐敏感性高血压的发生发展有着密切关系,ADMA与血压、血糖、血脂等一起参与了盐敏感性高血压的发生,对于判断盐敏感性高血压病情、指导治疗具有一定的临床价值。     

原发性高血压患者降压治疗前后血清不对称性二甲基精氨酸浓度的变化

目的： 探讨血清不对称性二甲基精氨酸(ADMA)浓度变化与原发性高血压患者血压水平、靶器官损害的关系及依那普利和洛沙坦治疗对其水平的影响。 方法： 42例新近诊断未经治疗的1,2级原发性高血压患者随机分为2组,分别接受依那普利和洛沙坦治疗8周;治疗前后检测血清ADMA,L-精氨酸及NO水平,同时检测23例健康体检者作为对照。结果： 高血压患者血清L-精氨酸及ADMA浓度明显高于而NO水平明显低于对照组（P<0.01）;ADMA及NO水平与血压高度及靶器官损害程度有关,L-精氨酸与其无关。依那普利和洛沙坦在有效降压的同时均使血清ADMA浓度下降、NO水平回升（P<0.01）,但不影响L-精氨酸水平。 结论： 高血压患者早期血清L-精氨酸及ADMA浓度增高、NO水平下降,依那普利和洛沙坦可通过降低ADMA浓度改善内皮细胞功能障碍。     

原发性高血压患者血清非对称性二甲基精氨酸的测定及临床意义的研究

目的探讨血清非对称性二甲基精氨酸(ADMA)与原发性高血压(EH)的关系及其临床意义。方法选择62例EH患者和24例健康体检者,分别测定血清中ADMA和一氧化氮(NO)水平并进行比较。结果EH组与对照组的血清ADMA、NO水平间差异有统计学意义(P<0.01)。对照组与高血压各亚组患者的血清ADMA水平间差异均有统计学意义(P<0.01);高血压Ⅰ期组与高血压Ⅱ、Ⅲ期组的血清ADMA水平间差异有统计学意义(P<0.05);高血压Ⅱ期组与Ⅲ期组的血清ADMA水平间差异有统计学意义(P<0.01)。结论ADMA的异常增高可能与EH发病有关;EH患者血清ADMA水平随病情的加重而增加。     

氯沙坦保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤与ADMA的关系

目的：探讨氯沙坦对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其与内源性一氧化氮合酶抑制物非对称性二甲基精氨酸（ADMA）的关系。方法：用ox-LDL（100mg／L）孵育人脐静脉内皮细胞株HUVEC12 24h或用10^-8～10^-6mmol／L的氯沙坦预孵育HUVEC12 30min后再与ox-LDL共孵育24h,测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、ADMA含量和细胞内二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）活性。结果ox-LDL孵育HUVEC12细胞24h后细胞培养液中LDH活性、TNF-α和ADMA含量明显增加（P〈0．05）,同时NO含量下降和细胞DDAH酶活性受到抑制（P〈0．05）;氯沙坦（10^-8～10^-6mmoL／L）可显著减轻ox-LDL诱导的LDH活性、TNF-α和ADMA含量的增加以及NO含量的降低（P〈0．05）,并呈浓度依赖性的增加DDAH活性（P〈0.05）。结论：氯沙坦对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,该作用可能与增加DDAH活性,降低ADMA浓度有关。     

虎杖苷对ADMA作用的正常兔主动脉血管条内皮功能的影响

目的 研究虎杖苷(PD)与非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对正常兔主动脉血管条内皮功能的影响及PD与ADMA之间的相互作用。方法 通过绘制主动脉条在ADMA与PD分别作用和共同作用时对苯肾上腺素(PE)的收缩量一效曲线，计算并比较Emax和Kd值。结果正常主动脉条对ADMA无反应，PD或ADMA预处理后亦不影响其对PE的收缩反应。但PD使受ADMA预处理的主动脉条对PE的收缩反应呈剂量依赖性减弱,并引起Kd值增大、Emax减小。结论 ADMA或PD单独作用并不影响正常主动脉条的收缩功能及PE对α-受体的亲和力和Emax；但在ADMA存在时,PD能非竞争性拮抗主动脉条对PE的收缩反应。     

超高通量聚醚砜膜对ADMA清除作用的临床研究

目的 非对称性二甲基精氨酸(asymmetrical dimethylarginine,ADMA)作为一种尿毒症毒素,是维持性血液透析患者心血管疾病和不良预后的独立危险因素.因其蛋白结合特性.常规血液透析、血液透析滤过对其清除能力有限.本研究拟评价具有高截留分子量的超高通量聚醚砜膜对ADMA的清除能力.方法 采取自身前...     

非对称二甲基精氨酸诱导大鼠心肌细胞肥大的作用

目的：探讨非对称二甲基精氨酸（ADMA）诱导心肌细胞肥大的作用机制。方法：原代取材新生SD大鼠的心肌细胞进行细胞培养。原代培养的第4天，用不同浓度的ADMA（4～16μmol／L）和L-精氨酸（L-arg）（0．8～3．2mmol/L）处理心肌细胞，24h后测定细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量、一氧化氮合酶（NOS）的活性，细胞内氧活性物质（ROS）的水平、RNA含量、总蛋白量以及心肌细胞表面积。结果：①4μmol／L，8μmol／L，16μmol／L的ADMA分别能剂量依赖性使细胞内NO的含量减少，NOS的活性降低（P〈0．05）；②16μmol／L的ADMA能使心肌细胞内ROS的水平升高、细胞内RNA含量和总蛋白含量增加以及心肌细胞表面积增加（P〈0．05）；⑧0．8mmol／L，1．6mmol／L，3．2mmol/L的L-arg对ADMA诱导的心肌细胞内ROS水平的升高、细胞内RNA含量和总蛋白含量的增加以及心肌细胞表面积的增加产生剂量依赖性的抑制作用（P〈0．05）。结论：ADMA能够诱导心肌细胞肥大，NO的前体L-arg能够剂量依赖性地抑制ADMA诱导的心肌细胞肥大。