优化石榴皮中安石榴苷的分离与纯化工艺

摘 要 目的：研究石榴皮中安石榴苷的提取、分离纯化和定量方法。 方法: 采用20倍量50%乙醇常温超声波辅助法提取制备石榴皮粗提物,并采用HPLC法对粗提物中安石榴苷的含量进行测定。通过静态吸附和解吸性能的研究,优选D101、A8-8、NKA-9、HPD-100和HPD 500中对石榴皮多酚富集纯化效果最佳的大孔吸附树脂,并优化大孔吸附树脂富集纯化石榴皮多酚的工艺条件,得到安石榴苷。通过反相MCI GEL CHP20P色谱柱对安石榴苷进一步分离纯化。结果: 5种树脂中,HPD 500型树脂对石榴皮中安石榴苷有较好的吸附和分离性能。最优工艺条件为：上样液质量浓度15 mg·mL^-1,上样量2BV, pH为2,乙醇洗脱剂体积分数30%,洗脱剂体积8BV,可使安石榴苷含量从10.3%提高至30.7%。反相树脂MCI GEL CHP20P 色谱柱对30%乙醇洗脱部份进一步分离纯化,纯化后安石榴苷的含量可提高至61.2%。结论:富集纯化石榴皮安石榴苷的最优大孔吸附树脂为HPD 500型树脂;反相MCI GEL CHP20P色谱柱进一步纯化可显著提高安石榴苷纯化物的含量;工艺的重复性和稳定性良好。     

大孔吸附树脂-高速逆流色谱法分离纯化玄参中哈巴俄苷和斩龙剑苷A

目的 以玄参的干燥根为原料,建立大孔吸附树脂-高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化玄参中哈巴俄苷与斩龙剑苷A的方法。方法 玄参粗提物先经过大孔吸附树脂初步分离,富集目标化合物。然后以正丁醇-乙酸乙酯-水(1∶9∶10)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速1.5 mL·min^-1,检测波长210 nm,利用制备型HSCCC分离纯化哈巴俄苷和斩龙剑苷A。结果 经过大孔吸附树脂-高速逆流色谱法分离后,一次性得到哈巴俄苷和斩龙剑苷A,经HPLC检测其纯度分别为98.1%和97.2%。经¹H-NMR和¹³C-NMR鉴定结构为哈巴俄苷和斩龙剑苷A。结论 该方法能够简便、高效地制备玄参中的哈巴俄苷和斩龙剑苷A。     

土圞儿总生物碱的提取和纯化工艺研究

目的 确定土圞儿中总生物碱最佳的提取、纯化条件,为其开发和利用提供科学的理论依据。方法 采用L₉（3⁴）正交试验,加酸水加热回流提取,考察溶剂用量、提取时间、提取次数3个因素对土圞儿中总生物碱得率的影响。结合静态和动态吸附实验,分别比较了6种不同型号的大孔树脂（D101,H-30,LSD-001,HPD450,DM130,AB-8）对土圞儿总生物碱的吸附和解吸性能,并以吸附量、洗脱量为考察指标,对大孔树脂纯化总生物碱的条件进行了筛选。以盐酸小檗碱为对照品,采用紫外分光光度法测定土圞儿总生物碱的含量。结果 土圞儿中总生物碱的最佳提取工艺条件为15倍量酸水加热回流提取2次,每次1 h。HPD450型树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,其最佳纯化条件：上样液总生物碱浓度为1.6 mg·mL^-1,pH 8.0,先以5倍柱体积的水洗去杂质,再以4倍柱体积40%乙醇洗脱,最后用4倍柱体积90%乙醇洗脱,得总生物碱量是纯化前总生物碱量80%左右。结论 该提取、纯化条件简单可行,具有良好的应用前景。     

Box-Behnken设计优化金雀花中总黄酮纯化工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂纯化金雀花中总黄酮的工艺条件。方法 以乌鲁木齐石人沟采集的金雀花为原料,以超声提取的方法得到总黄酮粗提物,对比7种大孔吸附树脂对金雀花中总黄酮的吸附-解吸效果,采用Box-Behnken设计优化总黄酮纯化工艺,以树脂的吸附率和解吸率为指标,考察进样液浓度、进样体积、进样流速、洗脱液、洗脱体积、洗脱流速等因素对纯化效果的影响。结果 筛选得到AB-8型大孔吸附树脂为最适树脂,并获得最佳吸附条件和解吸条件,吸附条件：进样浓度为1.14 mg·mL^-1、进样体积为2.8 BV、进样流速为2.5 mL·min^-1;解吸条件：洗脱液浓度为70%、洗脱体积为2.0 BV、洗脱流速为3.0 mL·min^-1。在此条件下的总黄酮百分含量从1.72%提高到了22.95%,纯度升高了13.3倍。结论 本纯化工艺操作简便、可行,为金雀花中总黄酮的进一步研究提供了实验依据。     

HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定消疲灵颗粒中的7种成分

目的 建立同时测定消疲灵颗粒中7种成分含量的HPLC波长切换联合梯度洗脱方法。方法 采用Venusil MP-C₁₈色谱柱,流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液,流速为0.9 mL·min^-1,梯度洗脱,柱温为30 ℃,进样量为10 μL。结果 牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素检测浓度分别在2.56~51.20 μg·mL^-1,14.87~297.40 μg·mL^-1,2.14~42.80 μg·mL^-1,3.16~63.20 μg·mL^-1,3.80~76.00 μg·mL^-1,2.14~42.80 μg·mL^-1,4.81~ 96.20 μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 1）,平均回收率97.0%~100.0%,RSD 0.55%~1.67%,精密度和重复性良好,供试品溶液在室温条件下12 h内稳定。结论 该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于消疲灵颗粒中7种有效成分含量的同时测定。     

大孔吸附树脂纯化富集伊贝母总生物碱的工艺研究

目的 优选大孔吸附树脂分离纯化伊贝母中总生物碱的工艺条件。方法 以伊贝母总生物碱的比吸附量、比解吸量、总生物碱含量为考察指标,通过静态、动态试验考察12种不同类型大孔吸附树脂对伊贝母总生物碱纯化效果的影响,通过单因素试验优选上样液质量浓度、上样量、洗脱剂种类及用量等工艺参数。结果 HPD-100 型大孔树脂对伊贝母总生物碱有较好的富集纯化性能,最佳工艺条件：径高比为1∶9的树脂柱,上样药液质量浓度为0.25 g·mL^-1,pH 值为11,最大上样量为15 mL,8倍柱体积水洗除杂,9倍柱体积的70%乙醇洗脱总生物碱,洗脱流速1 mL·min^-1。按照此工艺条件纯化的伊贝母总生物碱含量达到70.50%,收率达到4.30%。结论 纯化工艺简便、稳定,适合伊贝母总生物碱的纯化。     

大孔树脂纯化铁皮石斛叶中总黄酮的研究

目的 优选大孔吸附树脂纯化铁皮石斛叶总黄酮的工艺条件。方法 采用静态吸附-解吸方法,以吸附量和解吸率为指标,优选大孔吸附树脂型号;采用单因素试验分别考察上样浓度、上样体积、洗脱剂及其用量,以铁皮石斛叶总黄酮的纯度为指标,优选大孔吸附树脂纯化铁皮石斛叶总黄酮的最佳工艺条件。结果 ADS-17型大孔吸附树脂对铁皮石斛叶总黄酮的纯化效果最优,最优纯化工艺条件为上样液总黄酮浓度0.7 mg·mL^-1,上样体积30 mL,洗脱剂为50%乙醇,洗脱剂用量为7 BV。总黄酮的纯度为（18.07±0.42）%,回收率为（39.91±0.30）%。结论 ADS-17型大孔吸附树脂在所确定的工艺条件下能有效分离纯化铁皮石斛叶中的总黄酮成分,黄酮纯度提升17倍左右。     

大孔树脂对丁香叶抗菌有效部位分离富集工艺研究

摘 要 目的： 探讨用大孔吸附树脂法富集丁香叶抗菌有效部位。方法: 以静态吸附与解吸附实验对大孔吸附树脂进行筛选。选定D101树脂进行分离工艺优化,包括树脂用量、径高比、洗脱流速、洗脱液浓度及用量等。结果: 结果表明,最佳的条件为55%乙醇洗脱,吸附流速1 BV·h^-1,洗脱流速5 BV·h^-1,6 BV25%乙醇去除杂质,8 BV的55%乙醇洗脱得到有效部位。结论:提取液经D101树脂纯化后抗菌有效成分的含量达到65%以上,表明本方法适用于大规模制备丁香叶抗菌有效部位。     

UPLC同时测定中成药和保健食品中16种非法添加的抗过敏类药物

目的 建立UPLC测定中成药和保健食品中16种非法添加的抗过敏类药物。方法 采用Waters BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以甲醇-20 mmol·L^-1磷酸二氢钠（用磷酸调节pH值至3.0）为流动相,梯度洗脱,检测波长为220 nm。结果 16种抗过敏类药物在2.5~40 μg·mL^-1内呈良好线性关系（r²>0.999）,平均回收率为90.77%~113.35%,RSD为0.06%~1.21%;定量限为0.18~3.92 μg·mL^-1,检出限为0.09~0.78 μg·mL^-1。结论 该方法简便、灵敏度高,可有效地判断中成药及保健品中是否非法掺入16种抗过敏类药物。     

食品虾仁中土霉素、四环素、金霉素含量测定方法的建立

目的：建立高效液相色谱法测定虾仁中土霉素、四环素、金霉素的含量。方法：采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;梯度洗脱,以甲醇为流动相A,乙腈为流动相B,10 mmol·L^-1三氟乙酸为流动相C;流速1.5 mL·min^-1;检测波长为350 nm。结果：土霉素、四环素、金霉素检出限分别为0.005、0.005和0.020 mg·kg^-1,土霉素、四环素线性范围为0.05~1.00 μg·mL^-1,相关系数为0.9996及0.9995,金霉素线性范围为0.20~4.00 μg·mL^-1,相关系数为0.9998;加标回收率为73.5%~94.2%。结论：本方法简便、灵敏、专属,重复性好,可用于同时测定虾仁中土霉素、四环素、金霉素的含量。     

15个产地玄参中哈巴苷与哈巴俄苷含量测定

目的 建立HPLC法同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷的含量.方法 采用HPLC-PDA法测定,固定相采用Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈–0.03％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 ml/min;检测波长210、280 nm.结果 哈巴苷、哈巴俄苷分别在0.1020～0.5100 mg/ml(r...     

AB-8大孔树脂纯化五味子木脂素工艺研究

目的 研究AB-8大孔吸附树脂分离纯化五味子木脂素的工艺条件。方法 采用高效液相色谱法对五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素进行定量分析,通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选AB-8大孔吸附树脂分离纯化五味子木脂素的最佳工艺条件,对加样量、上样液浓度、洗脱速度和乙醇浓度进行考察。结果 AB-8大孔树脂分离五味子木脂素的最佳工艺条件为：上样量1 BV（bed volume）,上样液质量浓度9.159~16.523 mg/ml,树脂柱径高比1：5,吸附流速2.5 BV/h,吸附后用5 BV的30%乙醇洗脱,再以10 BV的95%乙醇洗脱,纯化处理后五味子木脂素总含量达到22.06%,转移率高达77.07%。结论 AB-8大孔吸附树脂能有效分离纯化五味子木脂素,该方法具有操作简单、成本低廉等突出优点,有较高的工业生产应用价值。     

大孔吸附树脂分离纯化肉苁蓉中苯乙醇苷工艺研究

目的 筛选富集肉苁蓉中苯乙醇苷的最佳树脂和工艺条件,使分离纯化工艺达到最优化。方法 选择7种大孔吸附树脂(AB-8、DM301、DM130、D1400、DA-201、HPD-100、D-101-I),通过树脂对苯乙醇苷的静态吸附和解析能力,筛选出最佳树脂,再通过树脂的静态特性和动态特性的筛选优化工艺。结果 DA-201的吸附解析最佳条件为：上样流速为1.5 mL·min-1,洗脱剂为90%的乙醇。按最佳工艺苯乙醇苷的纯度由25.1%上升为51.2%。结论 该法简便、可行,为肉苁蓉中苯乙醇苷的纯化提供了参考。     

大孔吸附树脂纯化延灯滴丸中有效成分的工艺研究

目的筛选分离纯化延灯滴丸有效成分的最佳树脂,并确定其工艺条件。方法以有效成分中灯盏乙素的吸附量和解析率为考察指标,采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附法确定分离条件。结果 AB-8树脂对延灯滴丸有效成分具有良好的吸附分离性能。其动态分离纯化工艺条件为：延灯滴丸提取物混悬液浓度为8 mg·mL-1,吸附流速为5 mL·min-1,水洗量为13倍柱体积,洗脱剂为60%乙醇,洗脱量为2倍柱体积,洗脱速度为1 mL·min-1。结论 AB-8树脂分离延灯滴丸有效成分最佳工艺稳定高效,可推广应用于生产。     

大孔吸附树脂分离纯化延胡索总生物碱

目的用大孔吸附树脂对延胡索总生物碱进行分离纯化研究。方法以总生物碱的吸附量和解吸附率为考察指标,选择纯化工艺。结果D101型大孔吸附树脂对延胡索生物碱具有较大吸附量。洗脱方法为先以纯水除去杂质,再以0.2mol·L-1盐酸50%乙醇洗脱,收集洗脱液。结论用本法分离纯化延胡索总生物碱简单、可行。     

半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮的提取及纯化工艺研究

目的 筛选出半枝莲和白花蛇舌草药对中总黄酮提取及纯化的最佳工艺条件。方法 以总黄酮提取率和浸膏量为评价指标,选择两者配比、乙醇体积分数、料液比、提取时间4个因素作为考察对象,L₉（3⁴）正交试验优选总黄酮提取工艺。然后结合静态和动态实验方法,以吸附率、解吸率为指标,确定聚酰胺树脂纯化的工艺条件及参数。结果 确定药对中总黄酮提取的工艺条件：半枝莲与白花蛇舌草药对的配比为4：1,25倍量体积分数为70%的乙醇,提取3次,每次2 h。聚酰胺树脂纯化药对中总黄酮的工艺条件：上样液中总黄酮浓度为63.14 mg/ml,pH为4.0,以1.5 ml/min的流速上样,先用流速为3 ml/min的3.1床容积（BV）的水洗脱,再用流速为3 ml/min的9.3 BV体积分数为65%的乙醇洗脱,收集洗脱液,测得总黄酮纯度为40.39%,转移率为81.57%。结论 优化的提取工艺条件稳定、可行,黄酮提取率较高。聚酰胺树脂纯化的工艺条件简便,效果良好。     

响应面法优化雪松松针中金丝桃苷的回流提取工艺

目的 优化雪松松针中金丝桃苷的回流提取工艺。方法 采用HPLC测定雪松松针中金丝桃苷的含量;基于单因素试验结果,以金丝桃苷含量为指标,根据Box-Behnken设计对影响回流提取的3个因素（料液比、乙醇浓度、提取时间）进行考察;通过响应面分析优化雪松松针中金丝桃苷的最佳回流提取工艺。结果 优化得到的最佳回流提取工艺参数为乙醇浓度60%、料液比1︰16（g·mL^-1）、回流提取1次,时间为100 min;在此工艺条件下提取得到的金丝桃苷平均含量为0.119 6 mg·g^-1,与预测值0.119 4 mg·g^-1的相对偏差较小。结论 优选得到的雪松松针中金丝桃苷回流提取工艺合理、可行。