Tspan 1及Integrin α6在人胰腺导管腺癌中的表达及其与临床特征的关系

目的 探讨Tspan 1及Integrinα6在胰腺导管腺癌(PDAC)及胰腺癌细胞中的表达与临床病理学参数的关系.方法 收集2004年5月至2013年1月收治的95例PDAC患者的组织石蜡切片及55例癌旁正常组织石蜡切片进行免疫组化检测.以Western blot法和实时定量(qRT)-PCR法检测16对配对冷冻保存的新鲜PDAC、癌旁组织及6株胰腺癌细胞中Tspan 1及Integrin α6蛋白和mRNA表达水平.分别采用x2检验、Spearman-rank相关分析、Kaplan-Meier法、多因素回归分析等对数据进行统计分析.结果 Tspan 1及Integrinα6在PDAC细胞膜表达高于癌旁胰腺组织(x2=7.429,P＜0.05;x2=15.100,p＜0.01);Tspan 1表达与淋巴结转移、TNM分期及复发率呈正相关(x2=6.688,P＜0.01;x2=13.055,P＜0.01;x2 =6.116,P＜0.05).Integrin α6表达与TNM分期呈正相关(x2=8.896,P＜0.05);Tspan 1及Integrin α6的相关性有统计学意义(r=0.223,P＜0.05);Tspan 1及Integrin α6高表达与生存期呈负相关(x2=5.263,P＜0.05;x2=10.124,P＜0.01);多因素分析结果显示,Tspan 1及Integrinα6表达水平可以作为PDAC预后的独立预测因素(x2=6.152,P＜0.05;x2=9.479,P＜0.01).16例胰腺癌组织中Tspan 1及Integrin α6的蛋白(t=2.278,P＜0.05;t=3.153,P＜0.05)和mRNA(t=2.439,P＜0.05;t=3.258,P＜0.05)表达均高于配对的癌旁正常组织;6株细胞株中Tspan 1及Integrin α6在蛋白水平及mRNA水平均有表达,来自转移灶的人胰腺腺癌细胞株SW1990中Tspan 1及Integrin α6在蛋白及mRNA水平表达高于来自原发灶的细胞株(P＜0.05).结论 Tspan 1及Integrinα6表达对于PDAC的转移及浸润有促进作用,可能可以作为判断PDAC预后的独立因素.     

核基质结合蛋白1在胰腺导管腺癌中的表达及意义

目的 探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中核基质结合蛋白1(SATB1)的mRNA和蛋白表达水平及其与临床病理特征的关系,评价SATB1在PDAC预后判断中的价值.方法 应用免疫组织化学法检测49例PDAC组织及配对的癌旁组织石蜡标本SATB1蛋白表达水平,利用Western blot 和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测16对配对冷冻保存的新鲜PDAC组织、癌旁组织中SATB1蛋白和mRNA表达水平.结果 免疫组织化学结果显示,SATB1在13例PDAC中呈高表达,癌旁组织有5例高表达(26.5％比10.2％).SATB1的表达与PDAC分化程度(x2=4.131,P＜0.05)、淋巴结转移(x2 =5.000,P＜0.05)、T分期(x2=14.348,P＜0.05)和TNM分期(x2=6.69,P＜0.05)相关.阳性表达SATB1的PDAC患者术后中位生存时间为353 d,阴性表达SATB1者为508 d.RT-PCR和Western blot结果显示SATB1在PDAC患者中mRNA表达高于癌旁组织(t=2.432,P＜0.05),蛋白表达水平差异无统计学意义(t=0.324,P＞0.05).结论 SATB1在PDAC中表达呈上调状态,与PDAC临床病理因素及预后相关.     

Gli1在胰腺癌中表达的临床病理意义

目的 探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中Gli1、MDM2和p53表达的相关性及临床病理意义.方法 应用免疫组化方法检测57对配对的PDAC及癌旁组织石蜡标本中Gli1、MDM2和p53蛋白表达水平,观察其与患者临床病理参数的关系;再以实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测14对配对冷冻保存的新鲜PDAC标本中Gli1 mRNA表达水平.siRNA干扰进一步检测三者之间的相关性.结果 免疫组化结果显示,Gli1、MDM2和p53在癌组织中表达(分别为50.9％、57.9％、56.1％)明显高于配对的癌旁组织(分别为33.3％、26.3％、17.5％,t=2.413、2.848、2.960,均P＜0.05);Gli1表达与肿瘤TNM分期(x2 =8.211,P=0.004)、浸润深度(x2=4.247,P=0.039)及MDM2表达(r=0.299,x2=5.105,P=0.024)相关;MDM2和p53表达分别与胰腺癌浸润深度及TNM分期相关(x2=5.182,P=0.023;x2=5.696,P=0.017).单因素及多因素分析发现,Gli1是影响胰腺癌患者预后的一个独立危险因素(RR=2.290,95％ CI:1.051 ～4.992,P=0.037),并且含Gli1和MDM2共同表达的胰腺癌患者预后更差(P =0.034).Gli1在14例PDAC标本中mRNA表达水平同样高于癌旁组织(t =2.926,P=0.012);在p53突变型AsPC-1细胞中,Gli1敲除引起MDM2的下调,但p53蛋白表达不受影响.反之,在p53野生型Capan-2细胞中,Gli1敲除同时引起p53的上调及MDM2的下调.结论 Gli1、MDM2和p53在胰腺癌中均呈高表达,并有助于判断胰腺癌患者的预后.Gli1能够调控MDM2及野生型p53表达.三者可能共同参与了胰腺癌的发生进展.     

SIPA1基因在肝癌中的表达及其与肝癌预后的关系

目的研究SIPAI（signal-induced proliferation-associated gene 1）基因在肝细胞癌（HCC）中的表达情况及其临床意义。方法采用实时定量PCR检测30例新鲜HCC标本中SIPA1 mRNA相对含量。用免疫组织化学S-P法检测86例石蜡HCC标本和8例正常肝组织中SIPA1的表达情况,研究其与HCC临床病理学资料及预后的关系。结果与癌旁组织比较,在癌组织中SIPA1 mRNA表达下调（t=2.216,P=0.045）。86例HCC中,SIPA1在癌组织的阳性表达率和癌旁组织中阳性表达率分别为43.0%（37/86）和87.2%（75/86）（χ^2=36.96,P〈0.01）。有静脉侵袭的肝癌标本中癌旁组织SIPA1呈低表达（U=647.50,P=0.019）。SIPA1蛋白在癌旁组织中表达存在个体差异,低表达组术后复发率较高（P=0.000）,生存期较短（P=0.006）。结论SIPA1在HCC中可能发挥肿瘤抑制基因的作用,且对抑制HCC的复发转移有重要作用。     

PI3KCA及Akt1在人胆管腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨PI3KCA与Akt1表达与胆管癌病理特征的关系及其对胆管癌预后的预测价值。方法采用免疫组化检测PI3KCA、Akt1在人胆管腺癌及癌旁正常胆管组织中的表达;采用Western blotting法及(q RT)-PCR法检测新鲜人胆管腺癌及癌旁正常胆管组织中PI3KCA、Akt1在蛋白及m RNA水平表达。结果PI3KCA和Akt1表达于胆管腺癌细胞质,在癌旁正常胆管组织中PI3KCA、Akt1无表达或轻度表达,差异有统计学意义(x2=2.659,P0.05;x2=1.353,P0.05);PI3KCA高表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移有正相关性(x2=3.526,P0.05;x2=5.295,P0.05;x2=8.174,P0.05);Akt1高表达与肿瘤直径、肿瘤TNM分期、淋巴结转移有正相关性(x2=7.102,P0.05;x2=3.142,P0.05;x2=5.491,P0.05);Spearman rank相关分析结果显示,PI3KCA、Akt1呈统计学正相关性(r=0.376,P0.05);Western blotting显示,PI3KCA、Akt1蛋白表达在胆管癌组织中明显高于配对的癌旁正常组织(t=2.142,P0.05;t=3.549,P0.05);PI3KCA、Akt1在胆管腺癌组织中m RNA表达明显高于配对的癌旁正常组织(t=3.276,P0.05;t=4.901,P0.05)。结论 PI3KCA及Akt1在人胆管腺癌中高表达,其表达上调提示胆管癌预后不良,PI3KCA可能通过PI3K/Akt信号通路调节胆管癌的恶性行为。     

MK-1抗原和再生基因蛋白Ⅳ在胆囊良恶性病变组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胆囊良恶性病变组织中MK-1抗原(MK-1)和再生基因蛋白Ⅳ(RegⅣ)的表达水平及其临床病理意义。方法 108例胆囊腺癌、46例癌旁组织、15例腺瘤性息肉和35例慢性胆囊炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,MK-1和RegⅣ染色方法均为EnVisionTM免疫组织化学方法。结果 胆囊腺癌MK-1和RegⅣ表达阳性率均明显高于癌旁组织(x2MK-1=18.76,P＜0.01;x2RegⅣ=9.92,P＜0.01)、腺瘤性息肉(x2MK-1=9.49,P＜0.01;x2RegⅣ=8.59,P＜0.01)和慢性胆囊炎(x2MK-1=24.11,P＜0.01;x2RegⅣ=19.24,P＜0.01);MK-1和RegⅣ表达阳性的良性病例的胆囊上皮均呈中至重度不典型增生。高分化、无淋巴结转移、未侵犯周围组织的病例MK-1表达阳性率明显高于低分化、淋巴结转移和侵犯周围组织的病例(P＜0.05或P＜0.01);高分化腺癌、无淋巴结转移和未侵犯周围组织的病例RegⅣ表达阳性率明显低于低分化腺癌、淋巴结转移和侵犯周围组织病例(P＜0.05或P＜0.01)。经Kaplan-Meier生存分析发现MK-1表达阳性病例术后生存期明显高于阴性表达病例(P＜0.01),但RegⅣ表达阳性病例术后生存期明显低于阴性表达病例(P＜0.01);Cox多变量回归分析显示,MK-1阴性表达和(或)RegⅣ阳性表达可反映胆囊腺癌预后不良。结论 MK-1和RegⅣ表达与胆囊腺癌发生、临床生物学行为及预后密切相关。     

肝细胞癌Period1 表达与预后的关系

目的：探讨Period1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及意义。 方法：用RT-PCR与Western blot法检测30例HCC组织与其癌旁肝组织及5例正常肝组织中Period1 mRNA与蛋白表达;甲基化特异性PCR检测HCC组织与癌旁肝组织中Period1启动子甲基化水平;免疫组化检测67例HCC组织及其癌旁肝组织石蜡切片中Period1蛋白的表达;分析Period1的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。 结果：HCC组织Period1 mRNA和蛋白的表达水平均较癌旁肝组织与正常肝组织明显降低（均P<0.05）,而两者在癌旁肝组织与正常肝组织间差异无统计学意义（均P>0.05）;HCC组织Period1启动子甲基化水平较其癌旁肝组织明显增高（均P<0.05）。HCC组织石蜡切片中Period1阳性表达率为47.8%,而癌旁肝组织阳性表达率为83.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;Period1表达与HCC分化程度、结节数目、有无静脉浸润有关（均P<0.05）;Period1阳性表达HCC患者中位复时间与中位生存时间均明显短于阳性者（均P<0.05）。 结论：Period1在肝癌中表达下调可能与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关;启动子甲基化可能是Period1表达下调的重要机制。     

粪便miRNAs在胰腺导管腺癌筛查诊断中的应用价值

目的 检测胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）患者癌组织、配对癌旁组织及粪便miRNAs,评价粪便miRNAs筛查诊断PDAC的价值.方法 收集30例PDAC患者癌组织、癌旁组织及其粪便标本,10例慢性胰腺炎（CP）患者及15例健康志愿者粪便标本,抽提组织及粪便miRNAs,应用实时定量PCR法检测各组样本miR-21、miR-155、miR-196a、miR-216及miR-217的表达量.应用受试者工作曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）及其曲线下面积（AUC）评估粪便miRNAs对PDAC的诊断价值.结果 目的miRNAs在癌组织、癌旁组织及粪便标本中均可被检测.粪便miRNAs抽提及检测方法具有可重复性.MiR-21、miR-155、miR-196a在PDAC组织中表达水平高于癌旁组织,而miR-216、miR-217在PDAC组织中表达水平低于癌旁组织（P＜0.01）.与慢性胰腺炎及健康对照组相比,PDAC患者粪便中miR-21及miR-155的相对表达水平都增加,miR-216的相对表达水平降低（P＜0.05）.PDAC组与对照组相比,miR-21、miR-155及miR-216两两组合后的AUC均比单个miRNA的AUC高,而三者联合后的AUC在所有组合中最高达到0.8667（95％CI：0.7722-0.9612）,诊断胰腺癌的敏感性和特异性分别为83.33％和83.33％,两组比较差异有统计学意义（P＜0.0001）.结论 粪便miRNAs的抽提和检测具有可重复性.粪便中miR-21、miR-155和miR-216有可能成为PDAC诊断的潜在分子标记物.     

转移抑制基因Kiss-1和KAI-1在胃癌组织中表达的原位杂交研究

目的研究胃癌及其癌旁组织Kiss-1和KAI-1转移抑制基因信使核糖核酸（Kiss-1mRNA和KAI-1 mRNA）的表达水平及其临床意义。方法将49例胃癌组织和20例癌旁组织常规制作石蜡包埋切片．用Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA染色方法作为原位杂交染色法。结果胃癌组织中Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率明显低于癌旁组织（P〈0．01）；正常至轻度不典型增生癌旁组织两者Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率及其评分明显高于中至重度不典型增生病例（P〈0．05，P〈0．01）。侵袭深度T1～T2、区域淋巴结无转移、第1站淋巴结转移及无远处转移的胃癌Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达阳性率及其评分明显高于侵袭深度T3～T4、区域淋巴结有转移、第2站或第3站淋巴结转移及有远处转移的病例（P〈0．05，P〈0．01）；但两者的表达与胃癌其他临床病理特征无明显关系。胃癌组织中Kiss-1 mRNA表达评分与KAI-1 mRNA表达评分呈密切正相关（r=0．53，P〈0．01）。结论Kiss-1 mRNA和KAI-1 mRNA表达可能是反映胃癌侵袭和转移潜力及预后的重要生物学标记物，对胃良性病变者检测Kiss-1 mRNA和／或KAI-1 mRNA可能对早期发现及预防胃癌发生有重要临床意义。     

胰腺癌组织微血管密度及淋巴管密度的改变及临床意义

目的：研究胰腺癌组织中微皿管密度（MVD）和淋巴管密度（LVD）的变化、与胰腺癌临床病理的联系及相互关系。方法：采用免疫组织化学SABC法应用CD34检测41例胰腺导管腺癌患者配对癌组织和正常胰腺组织中MVD的表达情况,应用D2—40检测配对癌组织、癌旁组织及正常胰腺组织中LVD的表达情况,分析MVD和LVD与肿瘤分化程度、分期和淋巴转移间的相关性以及癌组织MVD与癌旁组织LVD表达之间的关系。结果：癌组织及正常胰腺组织MVD分别为46585±16,935和11．100±4．036,两组差异有统计学意义（P=0．000）。癌组织、癌旁及正常胰腺组织LVD分别为11．244±4．800、15．829±7．470和13．512±5．139;其中癌旁组织与正常胰腺组织LVD差异无统计学意义（P=0．060）,癌旁组织与癌组织的LVD差异有统计学意义（P=0．000）。胰腺癌组织MVD与癌旁组织LVD间存在相关性（P=0.025〈0．05）。结论：胰腺导管腺癌组织中MVD及LVD与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴转移相关;胰腺癌组织内MVD与癌旁组织LVD间存在相关性。     

肝细胞肝癌中5-LOX的表达及其与bcl-2和bax表达的关系

目的研究肝细胞癌（HCC）中5-脂氧合酶（5-LOX）的表达与bcl-2和bax表达的关系及其可能机制。方法检测48例HCC癌组织及其癌旁组织,应用RT-PCR和免疫组织化学S-P法检测5-LOX、bcl-2和bax的表达情况。结果在癌、癌旁组织中5-LOX、bcl-2和bax基因mRNA表达分别是30/48、33/48、24/48和12/48、9/48、36/48,与癌旁组织比较,差异有显著性（P〈0.05）。HCC中5-LOX蛋白阳性率为56.3%,与bcl-2蛋白的表达呈显著正相关（r=0.447,P〈0.01）,但与bax蛋白表达呈显著负相关（r=-0.567,P〈0.01）。结论5-LOX与肝细胞肝癌的发生、发展关系密切;其机制可能是通过上调bcl-2及同时下调bax等凋亡相关调节因子表达水平有关。     

circ-MTHFD1L促进胰腺导管腺癌进展的作用机制

目的 探讨circ-MTHFD1L在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的作用,并分析其与miR-217与E2F3的相互调控关系,为PDAC的标志物选择和靶向疗法提供依据.方法 利用Arraystar Human cir-cRNAs微阵列分析法分析20例PDAC组织和癌旁组织中差异表达的circRNAs.通过qRT-PCR检...     

肝癌细胞中端粒酶逆转录酶与c-myc表达的关系

目的探讨肝细胞肝癌（HCC）中端粒酶逆转录酶（hTERT）与C—myc蛋白表达情况及其相关性。方法采用免疫组化SP法检测52例HCC癌组织及相应癌旁组织中hTERT与c—myc蛋白表达,并用TRAP—ELISA法检测上述组织中的端粒酶活性。结果HCC组织中hTERT与C—myc蛋白阳性率分别为86．5％（45／52）和78．8％（41／52）,它们与相应癌旁组织比较差异有统计学意义（P〈0．01）;HCC癌组织中端粒酶活性阳性率为80．8％（42／52）,明显高于相应癌旁组织（15．4％,8／52）;HCC癌组织中端粒酶活性、hTERT及C—myc蛋白阳性表达率两两均呈显著正相关（r=0．761,P〈0．001;r=0．654,P〈0．001;r=0．486,P〈0．001）。结论HCC癌组织中hTERT与C—myc蛋白过度表达,两者相互作用而共同参与肝癌端粒酶活性的调控。     

胰腺癌组织中类肝素酶的表达及其临床意义

目的 探讨类肝素酶1(heparanasel,Hpal)在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌发生、发展的关系.方法 采用real-time PCR、Western blot法检测37例胰腺癌组织中Hpal基因和蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 real-time PCR检测结果 显示,Hpal mRNA在胰腺癌中相对表达量为23.53±4.13、在正常胰腺组织中为4.08±2.14、在癌旁组织中为16.93±3.06(P<0.01).Western blot检测结果 显示,Hpal蛋白在正常胰腺组织中的相对表达量为0.36±0.14、在胰腺癌旁组织中为1.21±0.37、在胰腺癌组织中为1.76±0.28(P<0.05).胰腺癌组织中Hpal mRNA与Hpal蛋白表达均高于癌旁组织和正常胰腺组织.胰腺癌组织中Hpal mRNA表达与胰腺癌TNM分期、浸润神经和血管以及淋巴转移有关(P<0.05),但是与组织学分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 胰腺癌组织中Hpal蛋白呈高表达,Hpal蛋白的高表达可能与胰腺癌的发生及发展有关.     

胃癌组织中Livin的表达及意义

目的 检测胃癌组织以及胃癌细胞株中Livin的表达,研究其与胃癌发生、发展的关系.方法 (1)采用免疫细胞化学染色确定Livin在胃癌中表达的部位.(2)用RT-PCR和Western blot检测Livin mRNA和蛋白在胃癌、癌旁、胃溃疡组织中的表达.结果 Livin在胃癌细胞株SGC-7901的细胞核和细胞质中均有表达.30例胃癌组织中Livin-α阳性表达率为67%(20/30).癌旁和胃溃疡组织中没有Livin-α、Livin-β表达.胃癌组织中Livin-α阳性表达率随TNM分期增加而增高(x2=11.719,P<0.05).Livin的表达率在胃癌的分化程度、生长部位、年龄、性别等方面比较差异无统计学意义(x2=1.607,0.000,0.156,0.419,P>0.05).结论 Livin-α在胃癌组织中的高表达,与胃癌的临床病理分级、分期有关,并在胃癌的发生、发展过程中起重要作用.     

特异性核基质结合区结合蛋白1和微小RNA-495-3P在甲状腺乳头状癌侵袭和转移中的作用

目的:探讨特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)和微小RNA(microRNA,miR)-495-3P在甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭和转移中的作用。方法:2019年9月至2020年4月,福建医科大学附属第二医院甲状腺乳腺外科采集肿瘤标本,将取得的40对PTC组织作为实验组,与之对应40对癌旁正常组织作为对照组。采用...     

肝细胞癌中APC基因启动子甲基化和mRNA表达检测

目的探讨肝细胞癌中APC基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例肝细胞癌及相应的癌旁组织和10例正常对照肝组织中APC基因启动子甲基化状态和mRNA表达水平,分析甲基化与临床资料以及与mRNA表达的关系。结果在肝细胞癌、癌旁及正常对照肝组织中检测到APC基因启动子甲基化率分别是46.6%、16.6%、0%。肝细胞癌组织中APC基因启动子甲基化率明显高于相应的癌旁和对照组(P<0.05),并且与年龄和癌肿有无假包膜有相关性(P<0.05)。各组织中APC基因mRNA表达无显著差异。结论APC基因启动子甲基化与肝细胞癌形成和侵袭有关,但不影响癌组织中mRNA表达。     

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨肝癌相关的新基因BC047440在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测36例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC047440 mRNA的表达，并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组，分析其与肿瘤病理变化的关系。〖KG(*8〗结果：36例HCC中BC047440基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2594±0.0928和0.0942±0.0443,差异有极显著性意义（P<0.01）;过高表达组与较高表达组相比较，前者肝癌直径较大，门静脉受侵较严重，差异有显著性（P<0.05）。结论：BC047440基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。