慢性饮酒大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用

目的：观察胃内灌注钝酒精对慢性饮酒大鼠胃粘膜的损害，并探讨慢性酒精刺激对大鼠胃粘膜细胞更新的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：以6％（V／V）的酒精作为大鼠饮水的惟一来源，分别在大鼠饮酒的不同时程内胃内灌注100％酒精，观察大鼠胃粘膜的损伤情况。同时用免疫组化和计算机图像处理技术观察饮酒不同时程的大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡，了解其细胞更新的情况。结果：100％酒精灌胃后大鼠胃粘膜的损伤和对照组相比，饮酒后1天的大鼠胃粘膜改变差异无显著性，饮酒后3－14天大鼠的胃粘膜损伤有显著性降低，饮酒后28天的大鼠差异又无显著性。饮酒3－14天的大鼠有粘膜的细胞增殖和凋亡同步增加，提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论：适当低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞更新并引起大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用。     

长期摄入低浓度酒精对大鼠胃黏膜热休克蛋白表达的影响

目的：探讨长期低浓度酒精刺激对大鼠黏膜热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法：以6％的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源，用免疫组化技术观察饮酒不同时程中大鼠黏膜HSP70阳性细胞的分布情况，并对不同的胃腺细胞通过形态学观察或HSP70与增殖细胞核反应抗原（PCNA）免疫双重染色进行鉴定，结果：正常对照组大鼠的主细胞呈HSP70弱阳性反应。饮用酒精水溶液1天的大鼠，胃腺表面黏液性细胞呈HSP70强阳性反应，主细胞弱阳性反应。饮用3－14天的大鼠，HSP70阳性细胞分布于胃黏膜表面，胃腺颈部和胃基底部，胃腺颈部HSP70阳性细胞经PCNA和HSP70免疫双重染色 实为胃腺干细胞，饮用28天的大鼠HSP70阳性细胞分布区域和饮用1天的大鼠相同。结论：适当低浓度的酒精刺激可引起胃黏膜干细胞HSP70的表达，并可能在大鼠胃黏膜的适应性细胞保护机制中起重要作用。     

慢性饮酒对大鼠胃粘膜细胞的凋亡与增殖的影响

目的 :研究大鼠慢性饮酒过程中胃粘膜的细胞凋亡和细胞增殖变化的规律 ,探讨慢性酒精刺激对胃粘膜的自我保护作用的影响。方法 :以 6% (V/V)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源 ,利用流式细胞仪定量分析大鼠饮酒的不同时程内胃粘膜细胞的细胞周期和细胞凋亡 ,同时用免疫组化方法定性观察了大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡情况。结果 :饮酒 3～ 2 8天的大鼠胃粘膜的细胞凋亡较对照组明显增加 ,在饮酒 3～ 14天的大鼠胃粘膜其细胞增殖也明显增加 ,提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论 :长期低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞凋亡并引起大鼠胃粘膜的自我保护作用减弱     

BMK1和ROS在慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖中作用的研究

目的：研究慢性饮酒引起大鼠胃黏膜细胞增殖的增加是否与ROS及ERK1/2和/或BMK1有关.方法：SD大鼠随机分4组：对照组;饮用6%酒精组;100mg/kg槲皮素灌胃组;饮酒加槲皮素灌胃组,均处理7天.用免疫印迹技术检测胃黏膜组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）和大分子MAPK（BMK1）的表达及活性;采用免疫荧光双重染色方法对胃黏膜组织石蜡切片PCNA和磷酸化的BMK1（p-BMK1）蛋白进行定位检测.结果：慢性饮酒组胃黏膜PCNA和CyclinD1表达上调;酒精组PCNA、p-BMK1双阳性细胞主要定位于胃底腺颈部;BMK1的表达、激活与酒精诱导的胃黏膜干细胞增殖呈正相关,ERK1/2的表达、激活与增殖无关;但饮酒加槲皮素灌胃阻止了慢性饮酒所致胃黏膜细胞增殖,而且抑制了酒精诱导的BMK1表达与激活.结论：慢性饮酒刺激胃黏膜底腺干细胞的增殖可能与酒精引起活性氧（ROS）增多有关,同时本研究还第1次发现慢性饮酒诱导胃底腺干细胞增殖是由BMK1所介导.     

慢性饮酒对大鼠胃粘膜氧自由基水平的影响

目的　探讨大鼠胃粘膜在慢性饮用低浓度酒精的不同时程 ,氧化应激水平的改变及其对胃粘膜细胞更新的影响。方法　以 6 % (v/v)酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源 ,饮用 1、3、7、14及 2 8天后 ,分别测定胃粘膜匀浆中氧化应激的相关指标以及胃粘膜的DNA含量。结果　和对照组大鼠相比 ,饮用酒精 1天的大鼠胃粘膜氧化应激损伤、DNA含量没有改变 ;饮用 3、7和 14天酒精的大鼠胃粘膜其氧化应激损伤加重、DNA的含量明显增加 ;饮用 2 8天酒精的大鼠胃粘膜 ,氧化应激损伤加重、DNA的含量明显减少。结论　一定时程的低浓度酒精刺激可使大鼠胃粘膜受到氧化应激损伤 ,并导致胃粘膜细胞更新加快。     

小剂量阿司匹林引起胃黏膜损伤机制的研究

目的：研究小剂量阿司匹林引起的胃黏膜损伤及肿瘤坏死因子TNF—α、细胞间黏附分子ICAM—1在其发病机制中的作用。方法：在既往实验的基础上，用5．021mg／kg小剂量阿司匹林灌服大鼠，观察大鼠胃黏膜损伤情况，免疫组化检测TNF—α及ICAM一1在胃黏膜细胞的表达。结果：用5．021mg／kg小剂量阿司匹林灌胃后3d出现胃黏膜损伤，14d损伤达高峰，损伤的发生率为83．3％。免疫组化结果示用小剂量阿司匹林后TNF—α3d开始表达，14d达高峰；ICAM-13d开始表达，21d达高峰。结论：小剂量阿司匹林可造成胃黏膜损伤，TNF-α及ICAM-1在小剂量阿司匹林引起的胃黏膜损伤中具有一定的作用。     

酒精性胃病

酒精性胃病是由于过量饮酒或长期饮酒后造成的胃黏膜的急性或慢性损伤 ,临床上常引起急性胃炎、慢性胃炎。酒精也是消化性溃疡的危险因素之一 ,但目前尚无证据证实酒精是消化性溃疡的独立致病因素。酒精与胃癌的关系目前尚无定论。1　发病机制酒精饮料可使胃黏膜产生红斑和糜烂损伤。动物实验证明当胃内酒精浓度超过 14%即可破坏胃黏膜屏障。黏膜损伤的程度与酒精的浓度及酒精与胃黏膜接触时间有密切关系。酒精不仅由于其亲脂性和脂溶性破坏黏膜内及黏膜下的正常组织结构 ,还可增加Ｈ 反弥散 ,亦可损伤正常的能量代谢 ,从而破坏细胞功能。…     

糖尿病大鼠胃黏膜内质网应激及大黄素调控

目的：探讨内质网应激是否参与糖尿病大鼠胃黏膜损伤以及大黄素对其调节。方法：SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组与大黄素组,成模10周后,免疫组化法检测各组胃黏膜细胞GRP78,Caspase12蛋白表达情况。结果：①与对照组相比,糖尿病组与大黄素组大鼠于造模后均出现多尿、多饮、多食症状,成模10周时,体重减轻（P〈0．05）;血糖浓度显著增高（P〈0．05）。②与对照组相比,糖尿病组大鼠胃黏膜GRP78、Caspase12蛋白阳性表达细胞显著增多（P〈0．05）;与糖尿病组相比,大黄素组GRP78、Caspase12蛋白阳性表达的胃黏膜细胞显著减少（P〈0．05）。结论：内质网应激途径可能介导了糖尿病大鼠胃黏膜损伤,大黄素可降低糖尿病大鼠胃黏膜细胞的内质网应激反应,从而实现对胃黏膜的修复。     

大鼠胃粘膜坏死愈合后的抗损伤作用

本实验用无水酒精和去甲肾上腺素造成大鼠胃粘膜大面积损伤(第一次损伤),观察在愈合后初期对于第二次相同损伤的抗损伤作用。结果表明,第一次损伤的自然愈合约需11天,在愈合后的初期造成胃粘膜的第二次损伤,则损伤面积由第一次的45.7％减少到21.9％。表明愈合后初期的大鼠胃粘膜具有明显的抗损伤作用,可认为是一种适应性细胞保护怍用。     

表皮生长因子在大鼠胃癌前病变的干预作用研究

目的：探讨表皮生长因子(EGF)在大鼠胃癌前病变过程中的干预作用。方法：实验将30只大鼠平均分为3组，均给予三联致萎缩因素(60％酒精、20mmol／L去氧胆酸钠、0．1％氨水)和甲基硝基亚硝基胍喂养刺激大鼠胃黏膜共24周，以建立大鼠胃癌前病变模型，1组给予EGF10ug／kg隔日皮下注射共24周，另1组给予注射用水2ml隔日皮下注射共24周作为对照。观察3组大鼠胃大体标本及组织学变化。结果：给予EGF皮下注射组与其它两组比较，胃窦、胃体部炎症程度降低，胃窦部固有层厚度增高，无细胞和腺体异型性改变。结论：EGF在胃癌前病变过程中有一定的干预治疗作用。     

Proliferation in rat gastric mucosal cells induced by chronic ethanol feeding through the ROS/BMK1 pathway

Objective： To investigate the correlation between the gastric mucosal cell proliferation and low-concentration alcohol intake in a chronic drinking rat model, and to investigate the possible role of ROS/BMK1 pathway in this process. Methods： SD rats were randomly divided into 4 groups： control group, administered with tap water; ethanol group, with 6% ethanol in the drinking water; quercetin group, with quercetin （100 mg/kg） by intragastric gavage twice a day; ethanol＋quercetin group, administered with quercetin combined with 6% ethanol. The cell proliferation in rat gastric mucosa was analyzed by flow cytometery and proliferating cell nuclear antigen （PCNA） immunohistochemical staining. Activation of ERKs and BMK1 was evaluated by the expression and phosphorylation of these kinases using Western Blot analysis. Results： Compared to the controls, the cell proliferation in gastric mucosa of rats exposed to the ethanol for 7 d was enhanced, and the activation of BMK1 was also increased in this period. Otherwise quercetin, as a free radical scavenger, attenuated increased cell proliferation and activation of BMK1 in rat stomach treated with ethanol. However, no changes of ERKs expression and phosphorylation occurred in the rats in all groups. Conclusion： These results suggested that the ROS and BMK1 activation may be a central mechanism, which underlies cell proliferation in rat gastric mucosa stimulus with the chronic low-concentration ethanol.     

英连金化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠PG-ⅠBigET-1、VEGF表达的影响

目的:观察英连金化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠的作用机理研究。方法:将120只大鼠随机分为空白组、模型组、中药大、中、小剂量组及胃复春组。采用N-甲基-N-硝基N-亚硝基胍(MNNG)溶液自由饮用,乙醇溶液灌胃,配合饥饱失常等综合方法诱导造模12周。造模成功后分组治疗,第24周后处死全部实验大鼠进行TUNEL细胞凋亡检测以及胃蛋白酶原Ⅰ(PG-Ⅰ)、内皮素(Big ET-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)等指标检测观察其改变情况。结果:空白组、中药治疗组、胃复春组与模型组比较血浆Big ET-1含量明显降低,胃黏膜组织VEGF阳性率明显降低,血清PG-Ⅰ含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:英连金化浊解毒方能够降低癌前病变大鼠血浆Big ET-1含量及胃黏膜VEGF蛋白的表达率,提高血清PG-Ⅰ含量,恢复正常胃黏膜及腺体细胞的功能。     

Morphological change in the MNNG-treated rat gastric mucosa

To investigate the process of carcinogenesis in gastric cancer, we studied the histological features of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG)-treated rats. Samples of the gastric mucosa from both MNNG-treated and control rats were histologically examined every 2 months, for 10 months. In 40% of the MNNG-treated rats, atrophy in the gastric mucosa was observed after 2 months, and regenerative epithelium was observed after 4 months, followed by adenomatous proliferation and disappearance of the tight junction electron microscopically after 6 months. A small intestinal cancer had developed in 2 rats at 6 months. While gastric cancer had developed in 3 rats at 8 months, and in one of these 3 rats, peritoneal dissemination was observed macroscopically and histologically. These results suggested that adenomatous proliferation and disappearance of the tight junction observed electron microscopically were characteristic pathological features of precancerous lesions in the stomach in MNNG-treated rat.     

胃癌及癌前病变细胞的凋亡与增殖

目的 了解胃癌及癌前病变中细胞凋亡和增殖状态的变化,探讨其在胃癌发生中的作用。方法 采用脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术和增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组织化学染色法观察58例胃癌、27例癌前病变和15例正常胃粘膜组织中细胞凋亡和增殖状态。结果 胃癌组织中细胞凋亡指数显著低于胃正常粘膜和胃癌前病变组织（2．8％,6．3％,12％,P＜0．05）;胃癌前病变细胞凋亡指数明显上升,显著高于正常胃粘膜（P＜0．05）;在正常胃粘膜、癌前病变及胃癌组织中凋亡／增殖比率呈递减趋势而细胞增殖指数则呈递增趋势（P＜0．05）;细胞凋亡指数与肿瘤组织类型、分化程度、浸润深度和转移状况无关（P＞0．05）,细胞增殖指数与肿瘤浸润深度和转移状况无关（P＜0．05）。结论 细胞凋亡和增殖的失衡可能是胃粘膜组织恶性转化的重要因素之一。     

幽门螺杆菌培养上清液对大鼠胃黏膜上皮细胞增殖的影响

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)的代谢产物在胃黏膜上皮细胞增殖中的作用.方法:用液体培养的方法培养产毒Hp菌株NCTC11637,然后提取上清液,用浓缩上清液(concentrated broth culture supernatant,CCS)灌鼠胃.采用放射免疫方法测定血请胃泌素,用免疫组织化学SP(streptavidin/perosidase)法检测胃黏膜增殖细胞核抗原 (proliferation cell nuclear antigen,PCNA)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达.结果:灌服CCS组与对照组比较,胃黏膜PCNA标记指数阳性率升高、差异具有显著性,胃黏膜细胞表皮生长因子受体在灌服CCS组有4/8阳性,对照组无1例阳性;血清胃泌素升高,但统计学上差异无显著性.结论:产毒Hp培养上清液可以促进胃黏膜上皮细胞的增殖,可能促进胃癌的发生.