中医药调控Wnt/β-catenin信号通路防治肾间质纤维化研究进展

慢性肾脏病(CKD)已经成为世界范围内的公共健康问题,肾间质纤维化(RIF)是各种CKD重要病理特征和最终病理结果。因此,抗纤维化治疗对于延缓CKD进程,改善CKD患者预后具有重要的现实意义。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号传导途径是一种进化保守的发育信号传导途径,在胚胎发育过程中对器官形成,组织稳态和疾病进展发挥着至关重要的作用。越来越多的研究证实,Wnt/β-catenin信号通路是多种肾脏疾病的关键信号通路之一,该信号通路的激活与RIF密切相关,通过特异性调控下游靶基因的表达,如成纤维细胞、锌指转录因子1(Snail1),M2巨噬细胞,基质金属蛋白酶-7(MMP-7),纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),肾素-血管紧张素系统(RAS)而促进肾纤维化,而靶向该信号通路,如Klotho,Dickkopf相关蛋白1(DKK1),分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1),吲哚氰绿-001(ICG-001)可缓解RIF。此外,RIF中西医病理观不谋而合,中医药基于中医虚实夹杂的病因病机,以补虚、泄浊、解毒、祛瘀及标本兼治等法调控促纤维化介质,多靶点、多层次、多途径进行整体调节,抑制Wnt/β-catenin信号通路而发挥重要肾保护作用。该文综述了Wnt/β-catenin信号通路在RIF中的调控机制及靶向调控该信号通路对肾功能的保护作用,重点探讨了中医药延缓RIF进展的潜在作用,以期为防治RIF提供新靶点和新策略。     

三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 观察三黄糖肾康对糖尿病大鼠骨组织Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 采用高糖高脂饮食4周联合左下腹腔内注射新鲜配制的2%链脲佐菌素（pH 4.5）30 mg·kg^-1体质量制备糖尿病模型,成模大鼠按血糖水平随机分为模型组、三黄糖肾康低、高剂量组（12.8、38.4 g·kg^-1）、骨疏康组（1.8 g·kg^-1）,另设同周龄喂食普通饲料大鼠为空白组。各组予相应药物或生理盐水灌胃12周后,全自动生化仪检测各组大鼠空腹血糖（FBG）;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清空腹胰岛素（FINS）、骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）;计算机微断层扫描（Micro-CT）扫描大鼠股骨,观察骨组织微结构,检测骨密度（BMD）;苏木素-伊红（HE）染色、番红O-固绿染色观察大鼠股骨组织病理变化;免疫组化（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Wnt3a、低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP-5）及β-catenin蛋白的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠FBG、FINS、TRAP显著升高（P<0.01）,BALP显著降低（P<0.01）,BMD显著降低（P<0.01）,骨小梁结构松散不规则,细长疏稀,出现断裂,脂滴增多,Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达下降（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,三黄糖肾康低、高剂量组FBG降低、BALP升高（P<0.05）,三黄糖肾康低剂量组FINS降低（P<0.05）,各给药组TRAP均显著降低（P<0.01）;各给药组BMD均有不同程度提高（P<0.05,P<0.01）;各给药组大鼠股骨骨小梁增多、增粗,排列较紧密、整齐,脂滴数量减少,骨微结构形态得到一定的改善;各给药组Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白平均光密度值均有不同程度提高（P<0.05,P<0.01）;Wnt3a、LRP-5和β-catenin蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01）。结论 三黄糖肾康可能通过提高骨组织Wnt3a、LRP-5及β-catenin蛋白的表达,调节Wnt/β-catenin信号传导通路的失调状态,促进骨形成,减少骨吸收,降低血糖,从而达到防治糖尿病骨质疏松症的效果。     

保肺康颗粒通过调控Wnt/β-catenin信号通路干预大鼠肺纤维化

目的:基于保肺康颗粒对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨其对于肺纤维化大鼠模型的干预作用。方法:将50只健康大鼠适应性喂养1周后,随机选取8只作为空白组,其余42只大鼠采用常规麻醉后气管内注入硫酸博莱霉素溶液(5 mg·kg^-1)的方法制备肺纤维化模型,空白组以相同操作方法注入等量生理盐水。造模后第7天,将剩余33只存活的博莱霉素造模大鼠随机剔除1只,其余32只随机分为模型组、醋酸泼尼松组、保肺康低、高剂量组,每组8只。保肺康高、低剂量组分别给予保肺康颗粒27.18,13.59 g·kg^-1灌胃,醋酸泼尼松组给予醋酸泼尼松片1.17 mg·kg^-1灌胃,空白组和模型组以等量生理盐水灌胃,每天1次,连续21 d。比较各组大鼠肺顺应性和通气功能、病理学改变和纤维化程度评分、肺组织内Ⅰ型胶原(ColⅠ)和血清内羟脯氨酸(HYP)水平及肺组织中Wnt3a,β-catenin蛋白相对表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺功能指标用力肺活量(FVC),用力最大呼气流速(PEF),肺总阻力(RL)和动态顺应性(Cydn)均明显下降(P<0.05,P<0.01),模型组肺组织形态严重毁损,大量连续纤维化灶形成,纤维化严重程度评分显著升高(P<0.01),肺组织内ColⅠ和血清内HYP水平均显著升高(P<0.01),Wnt3a,β-catenin蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,醋酸泼尼松组、保肺康低、高剂量组FVC,PEF,Cydn均明显提高(P<0.05,P<0.01);醋酸泼尼松组、保肺康低、高剂量组病理学表现均有所改善,纤维化程度评分低于模型组(P<0.05,P<0.01),保肺康高、低剂量组评分低于醋酸泼尼松组(P<0.01);醋酸泼尼松组、保肺康低、高剂量组肺组织ColⅠ,HYP水平均低于模型组(P<0.05,P<0.01),保肺康高剂量组ColⅠ水平低于醋酸泼尼松组(P<0.01),保肺康高、低剂量组血清内HYP的水平均低于醋酸泼尼松组(P<0.01);保肺康高剂量组Wnt3a蛋白表达水平低于模型组(P<0.05),醋酸泼尼松组、保肺康低剂量组和保肺康高剂量组β-catenin蛋白表达水平低于模型组(P<0.05,P<0.01),且保肺康高剂量组表达水平低于醋酸泼尼松组(P<0.01)。结论:保肺康颗粒能够减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化,减少胶原沉积,改善肺顺应性,提高肺通气功能,对Wnt/β-catenin信号通路的抑制可能是其机制之一。     

四妙勇安汤对糖尿病溃疡大鼠Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的观察糖尿病溃疡模型大鼠中Wnt/β-catenin信号通路表达的变化及四妙勇安汤对该通路的影响。方法雌性Wistar大鼠按随机数字表随机分为正常对照组(对照组,17只)和糖尿病组(DM组,34只)。对照组给予普通饲料继续饲养,糖尿病组采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素液腹腔注射法制备糖尿病模型。随后将造模成功大鼠分为糖尿病溃疡组(DU组)、糖尿病溃疡-四妙勇安汤组(DU-四妙组),每组各15只。于对照组选取15只,作为溃疡对照组(CU组)。DU-四妙组采用四妙勇安汤灌胃,CU组及DU组采用生理盐水灌胃。观察创面造模后第3、7、14日各组创面愈合情况的变化,并采用HE染色法检测创面组织形态结构的变化,采用ELISA法、RT-PCR法检测创面组织中β-连环素(β-catenin)、糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、R-脊椎蛋白3(R-spondin 3,Rspo-3)蛋白及mRNA的变化。结果创面造模后第3、7、14日,各组大鼠创面愈合率均为CU组DU-四妙组DU组,差异有统计学意义(P0.05)。创面造模后第3、7、14日,与CU组比较,DU组创面组织中β-catenin及Rspo-3蛋白含量及mRNA表达降低,GSK-3β蛋白含量及mRNA表达升高(P0.05);与DU组比较,DU-四妙组β-catenin蛋白含量及mRNA表达升高,GSK-3β蛋白含量及mRNA表达降低(P0.05),DU组与DU-四妙组间Rspo-3蛋白含量及mRNA表达比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 Wnt/β-catenin通路的下调有可能导致了糖尿病溃疡的难愈,而四妙勇安汤也可能通过对Wnt/β-catenin信号通路进行调节而促进了糖尿病溃疡的愈合。     

益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究

目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。     

基于Wnt/β-连环素通路探讨补骨脂素对骨质疏松症大鼠的影响

目的：探讨补骨脂素基于Wnt/β-连环素(β-Catenin)信号通路对骨质疏松症(OS)大鼠的影响。方法：将78只SD大鼠随机分为对照组13只及造模组65只。造模组用双卵巢切除法建立OS模型,对照组予以假手术。造模成功者分为模型组、阿仑膦酸钠组及补骨脂素低、中、高浓度组,每组13只。模型组及对照组给予双蒸水,阿仑膦酸钠组给予0.2 mg/mL阿仑膦酸钠,补骨脂素低、中、高浓度组分别予0.4 mg/mL、0.8 mg/mL、1.6 mg/mL补骨脂素;各组灌胃剂量5 mL/kg,连续12周。检测比较骨密度(BMD),骨小梁厚度(Tb.Th)、数量(Tb.N)及分离度(Tb.Sp),血清及骨组织护骨因子(OPG)、骨钙蛋白(BGP)水平,以及骨组织低密度脂蛋白受体相关蛋白6(Lrp6)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、β-catenin、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA表达水平。结果：与模型组比较,各组第4腰椎及左、右股骨BMD较高,Tb.Th、Tb.N较高、Tb.Sp较低,血清及骨组织OPG水平较高,BGP较低,骨组织Lrp6、β-catenin、Runx2 mRNA水平...     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:健康SD大鼠120只,随机取20只作为正常组,另100只大鼠用于制备慢性不可预见性温和应激(CUMS)抑郁模型。再将CUMS抑郁大鼠随机分为模型组,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组,氟西汀组,每组20只。柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组分别灌胃3.25,6.5,13 g·kg~(-1);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀10 mg·kg~(-1);正常组和模型组灌胃等量生理盐水;1次/d,共干预21 d。应用糖水偏好和强迫游泳实验评估抑郁行为,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠大脑海马组织中PI3K,Akt,GSK3β以及β-catenin蛋白水平及其磷酸化水平。结果:给药21 d后,与正常组比较,模型组糖水偏好显著下降(P0.01);强迫游泳不动时间显著延长(P0.01);PI3K,p-PI3K p110,p-PI3K p85蛋白水平均显著降低(P0.01);Akt,p-Akt Thr308,p-Akt Ser473,p-GSK3βSer9,β-catenin水平均显著降低(P0.01);GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤中、高组大鼠糖水偏好显著增加(P0.01);强迫游泳不动时间显著缩短(P0.01);PI3K总蛋白,PI3K p110和PI3K p85亚基蛋白磷酸化水平均显著增高(P0.01);p-Akt Thr308和p-Akt Ser473水平均显著升高(P0.01);p-GSK3β Ser9,β-catenin水平显著增高(P0.01),而GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平却明显降低(P0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤通过提高大鼠海马组织PI3K蛋白水平及活性,激活Akt,抑制GSK3β活性,阻止β-catenin降解,即提高大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,保护海马神经元。     

灯盏花对血管内皮细胞损伤大鼠Wnt/β-catenin信号通路及炎症介质的影响

目的：研究灯盏花素对血管内皮细胞损伤大鼠的保护机制及对Wnt/β-catenin信号通路的作用机制。方法：选取60只SD大鼠,随机分为健康组、模型组、灯盏花素低剂量组(BL组)、灯盏花素高剂量组(BH组),每组15只。采用苏木精-伊红(HE)染色观察血管形态;逆转录PCR测Wnt信使RNA(mRNA)、卷曲蛋白1(FZD1) mRNA、轴蛋白1(AXIN1) mRNA、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β) mRNA、β-连环素mRNA、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA;酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP);显微镜观察血管内皮细胞形态;MTT测血管内皮细胞增殖;蛋白质印迹法(Western Blotting)测Wnt、FZD 1、AXIN1、GSK-3β、β-连环素、VEGF水平。结果：健康组大鼠血管内无明显改变;模型组有明显血管损伤;BL组与BH组大鼠血管损伤有所改善,且以BH组效果明显。与健康组比较,模型组血管内皮细胞间隙宽、细胞形态变小、脱落;BL组血管内皮细胞与模型组较为接近;BH组血管内皮细胞间隙变窄且凋亡减少,形态有所改善。与健康组比...     

Wnt/β-catenin信号通路在脂溢性脱发中的作用及中药干预的研究进展

脂溢性脱发是一种多因素引起的慢性皮肤科疾病,多发病于20~30岁的青壮年男性,临床表现主要为头发油腻、瘙痒、多屑、发际线后移、头顶部毛发稀疏脱落、额颞区进行性脱发等。脂溢性脱发虽不致命,但有碍容颜,严重影响患者自尊,给患者带来极大的心理困扰。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路广泛存在于多细胞真核生物中,是一种基本的生长调控途径,具有调节细胞的增生、分化,维持干细胞的活性及器官稳态,影响细胞的迁移等作用。目前,国内外已有研究报道,Wnt/β-catenin信号通路与脂溢性脱发的发生发展及药物作用机制密切相关。中药具有多成分、多靶点、多途径的治疗优势,可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进毛囊基板发生、毛囊干细胞增殖、分化及毛囊周期性变化等,从而改善脂溢性脱发。本文综述了Wnt/β-catenin信号通路及其中关键靶点蛋白因子与脂溢性脱发的关系,以明确Wnt/β-catenin信号通路对脂溢性脱发的重要作用。同时,对靶向调控Wnt/β-catenin信号通路从而治疗脂溢性脱发疾病的中药进行系统性总结,以期为脂溢性脱发疾病的治疗以及进一步的药物开发提供理论依据。     

肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的调控作用及机制。方法：SD大鼠115只随机分为正常组（20只）、造模组。造模组予以1 g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02 mL·g^-1·d^-1的0.185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组（45只）,肝豆汤组（25只）和青霉胺（PCA）组（25只）;模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0.02 mL·g^-1·d^-1生理盐水,0.4 g·kg^-1·d^-1的中药肝豆汤和0.09 g·kg^-1·d^-1青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测：电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果：ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高（P<0.01）;肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量（P<0.05）,PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量（P<0.01）;HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示：肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷（8-Hydroxyguanosine）,硝基酪氨酸（Nitrotyrosine）蛋白表达量（P<0.01）;Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白（β-catenin）,磷酸化糖原合成激酶3β（glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β）,原癌基因（cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc）蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论：肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。     

基于MicroRNA介导Wnt/β-catenin通路防治绝经后骨质疏松的中西医研究进展

<正>骨质疏松症是一种以骨量低下,骨正常形态结构被破坏,导致骨强度减弱,易发生骨折为特征的全身性骨病,其分为原发性和继发性两大类,而绝经后骨质疏松则属于原发性骨质疏松症中的I型。病情较轻时患者常无明显症状,或仅出现腰背部或手足疼痛,伴有乏力等,严重患者其正常机体活动常受到显著阻碍,随着病程进展,多数患者其下肢肌肉往往会出现轻重不同的萎缩现象;更有甚者,在无明显诱因或轻微外力接触、损伤或碰撞的情况下即可发生骨折等严重并发症,大大增加了老年人的病     

基于PI3K/Akt信号通路的骨松益骨方对去势大鼠的骨保护作用

目的 基于网络药理学和动物实验探究骨松益骨方（黄芪、党参、当归等组成）治疗绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）的机制。方法 通过TCMSP分析平台收集骨松益骨方活性成分、对应靶点;GeneCards、TTD等数据库收集疾病靶点;运用R语言将共同靶点取交集,绘制韦恩图;STRING数据库构建蛋白质互作网络;最后对所得共同靶点进行GO功能富集、KEGG通路富集。动物实验采用去卵巢SD大鼠动物模型,骨松益骨方灌胃12周,HE染色观察骨组织形态变化,分别采用qRT-PCR和Western Blot法检测胫骨近端骨组织中PI3K和Akt mRNA和蛋白质的表达。结果 获得骨松益骨方治疗绝经后骨质疏松症的91个活性成分、70个药物与疾病共有靶点;GO富集分析主要包含DNA结合转录激活剂活性、RNA聚合酶Ⅱ特异性,泛素蛋白连接酶结合等生物功能;KEGG通路主要包括PI3K/Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、细胞凋亡等相关通路。动物实验表明骨松益骨方组骨组织形态明显改善,PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达水平均明显升高（P<0.01）。结论...     

中药有效成分通过Wnt/β-catenin信号通路抗肝癌作用的研究进展

肝癌作为全球范围内最常见的消化系统恶性肿瘤之一,是导致癌症相关死亡事件发生的主要因素之一,并且发病率有逐年上升趋势,严重威胁人类健康。目前临床中主要通过手术切除、肝移植、放射和药物治疗肝癌,但在治疗的同时会产生一定的不良反应且存在高复发率与低生存率问题。中药在提高治疗肝癌综合疗效、减少不良反应方面具有独特优势,其含有的多种有效成分可通过多种靶点诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞增殖、迁移和逆转多药耐药等发挥抗肝癌作用,已成为防治肝癌的重要手段和抗肝癌药物的丰富研发资源。Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路是癌症中最经典的通路之一,其参与肿瘤细胞的增殖、细胞周期运行、迁移侵袭及肿瘤组织血管生成等过程,近年来许多研究报道中药有效成分可通过该通路发挥抗肝癌作用。因此该文总结近年来国内外文献,分析Wnt/β-catenin信号通路与肝癌发生发展具体机制间的关系,梳理黄酮类、萜类、生物碱类、多糖类及其他中药有效成分通过Wnt/β-catenin信号通路发挥诱导肝癌细胞凋亡、调节细胞周期运行、抑制肝癌细胞侵袭转移等作用的研究文献,分析并总结相关中药有效成分抗肝癌的研究进展,探讨中药有效成分通过Wnt/β-catenin信号通路发挥抗肝癌作用的具体机制,为进一步利用中药有效成分研发抗肝癌药物提供理论参考。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠作用机制

目的 观察红芪多糖（HPS）对糖尿病肾病db/db小鼠Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响。方法 将50只db/db小鼠按体质量随机分为模型组、厄贝沙坦组、HPS高、中、低剂量组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。正常组和模型组给予5 mL·kg^-1·d^-1蒸馏水,厄贝沙坦组给予22.75 mg·kg^-1·d^-1厄贝沙坦溶液,HPS高、中、低剂量组分别给予200、100、50 mg·kg^-1·d^-1 HPS溶液。6组小鼠每日灌胃1次,连续给药12周。检测各组小鼠一般状态、血糖（GLU）、24 h尿蛋白（UTP）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）,苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肾脏中Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化糖原合成激酶-3β（p-GSK-3β）的蛋白及mRNA的表达水平。结果 治疗12周后,与正常组比较,模型组小鼠一般状态较差且肾脏组织病理超微结构病变显著,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组小鼠一般状态及肾脏组织病理超微结构均得到一定程度改善,其GLU、24 h UTP、SCr、BUN水平均降低（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,HPS高、中剂量组Wnt1、β-catenin、GSK-3β及p-GSK-3β mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论 HPS可在一定程度上减轻糖尿病肾病的肾损伤,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨槲皮素对自身免疫性葡萄膜炎大鼠的影响机制

目的 探讨槲皮素调控Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的影响机制。方法 运用网络药理学技术对槲皮素与EAU的调控作用关系进行初步判定;通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）与临床分级评分对模型进行鉴定,再通过ELISA对信号通路中重要炎性因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α进行检测,通过分子对接技术对通路中重要靶点因子进行结合验证,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测信号通路下相关靶点蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测信号通路下相关靶点基因的表达水平。结果 通过ELISA与临床分级评分模型制作成功,ELISA检测信号通路中重要炎性因子IL-6、TNF-α,显示模型组、二甲基亚砜（DMSO）组二者表达最高,槲皮素低剂量和槲皮素高剂量组干预后均降低,趋势相同;分子对接显示槲皮素与β-catenin;低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）对接结合能十分理想;Western blot检测β-catenin、LRP6,模型组表达最高,随着不同剂量的槲皮素使用表达降低,二者趋势相同,槲皮素低剂量与槲皮素高剂量组比较差异无统计学意义;Real-time PCR结果显示β-catenin、MYC、AXIN2和TCF均为模型组表达最高,槲皮素高剂量组最低,槲皮素低剂量组降低表达,槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组之间比较差异无统计学意义。结论 槲皮素通过调控Wnt/β-catenin信号通路可降低EAU疾病的炎性表达,减轻患者的病痛。     

Wnt/β-catenin信号通路在白芍总苷干预大鼠心肌肥厚中的作用

目的观察Wnt/β连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路在白芍总苷干预大鼠心肌肥厚中的作用。方法皮下注射异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,随机分为正常对照组、心肌肥厚组,低、中、高剂量白芍总苷组[50、100、200 mg/(kg·d)]。8周后动脉插管,观察各组动物心脏功能的变化,Masson染色观察心肌结构变化,测量心肌肥厚指标(心脏质量指数、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积),Western blot检测心肌组织Wnt3a、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin的表达水平。结果与心肌肥厚组相比,白芍总苷呈剂量依赖性降低心脏质量指数、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积,减少心肌Wnt3a、p-GSK-3β和β-catenin蛋白表达。结论白芍总苷能改善心肌肥厚,且其作用与Wnt/β-catenin信号通路相关。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药治疗糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病（DKD）是糖尿病的常见并发症,也是造成终末期肾病的主要原因。其病理机制较为复杂,治疗难度较大,逐渐成为一个全球范围内的重大公共健康问题。DKD的主要病理改变之一是肾小管间质纤维化,临床表现为蛋白尿和肾功能下降,给患者日常生活造成了严重影响。目前临床上西医常用控制血糖血压、减少蛋白尿等方式治疗DKD,但疗效欠佳且存在诸多不良反应。研究表明,中医药（TCM）治疗DKD具有价格低廉、疗效明显、不良反应少等诸多优势,越来越多的DKD研究者将目光投向TCM,国内外相关研究取得了一定进展。Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路较为进化保守,在生物正常发育和整个生命过程中都至关重要。有研究证明,Wnt/β-catenin信号异常激活与肾脏纤维化有关,这与TCM的“络病理论”不谋而合。通过查阅相关文献,对Wnt/β-catenin信号通路概况及其在DKD中的作用,中药单体、单味中药提取物及中药复方通过改善肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞和足细胞损伤等方式来改善肾纤维化治疗DKD的研究现状进行综述,以期为TCM治疗DKD提供新的思路和方向。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黑逍遥散对AD模型大鼠神经炎症的影响

目的 研究黑逍遥散是否可以通过调控激活Wnt β-连环蛋白（β-catenin）信号通路抑制阿尔茨海默病（AD）大鼠海马区炎症反应,改善AD大鼠认知和记忆功能障碍。方法 90只雄性Wistar大鼠先随机分别选择12只作为空白组和假手术组,剩余大鼠在左右两侧海马区注射β淀粉样蛋白₄₂（Aβ₄₂）制造AD模型大鼠,随机分为模型组、黑逍遥散低、中、高剂量组和多奈哌齐组,每组12只,并连续42 d给予相应剂量黑逍遥散和多奈哌齐灌胃。尼氏染色观察海马CA1区病理形态学变化;Morris水迷宫实验检测1~5 d大鼠逃避潜伏期的变化,第6天的空间探索能力。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠海马组织和血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测检测海马中海马区糖原合成激酶-3β（GSK-3β）、β-catenin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠GSK-3β、β-catenin、PPARγ mRNA的水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元数量明显减少,排布不均,细胞体损坏比较明显,尼式小体不清;模型组大鼠第3~5天的逃避潜伏期均相比治疗组显著延长（P<0.01）,跨台次数显著减少（P<0.01）;模型组大鼠血清和海马组织中IL-10水平显著降低,IL-6、TNF-α水平显著升高（P<0.01）;模型组GSK-3β蛋白和mRNA显著升高,β-catenin、PPARγ蛋白表达显著降低（P<0.01）,差异较为明显;与模型组比较,黑逍遥散中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组大鼠神经元细胞数量分布较多,排列整齐,结构完整,尼式小体清晰明确;黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组的第3~5天逃避潜伏期显著缩短（P<0.01）,跨越平台次数显著增多（P<0.01）;大鼠海马组织和血清中IL-10的表达水平明显升高,IL-6和TNF-α显著降低（P<0.01）;大鼠海马中GSK-3β蛋白和GSK-3β mRNA表达明显降低,β-catenin、PPARγ蛋白和β-catenin、PPARγ mRNA表达水平显著升高（P<0.01）。盐酸多奈哌齐组与黑逍遥散高剂量组之间各指标比较,差异无统计学意义。结论 黑逍遥散可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制AD大鼠海马区炎症反应,改善AD模型大鼠认知和记忆障碍。     

南蛇藤提取物调控Lgr5/Wnt/β-catenin信号通路逆转胃癌前病变的机制

目的 基于胃类器官损伤模型探究南蛇藤提取物（COE）调控富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5 （Lgr5）/配体分泌介质（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路影响胃类器官增殖分化及Lgr5表达从而逆转胃癌前病变（PLGC）的作用机制。方法 通过小鼠胃腺体干细胞建立胃类器官,使用N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基胍（MNNG,0.02 mg·L^-1）处理胃类器官构建胃类器官损伤模型;将胃类器官损伤模型随机分为正常组、模型组（0.02 mg·L^-1 MNNG）、COE低、中、高质量浓度组（5、10、20 mg·L^-1）、Wnt抑制剂Dickkopf相关蛋白1（DKK1）（0.5 mg·L^-1）组并分别用不同药物处理24 h;镜下观察不同药物浓度胃类器官的数量与体积;采用噻唑蓝（MTT）比色法检测胃类器官损伤模型活力;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察胃类器官形态与病理学;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测不同药物浓度胃类器官中Lgr5、黏蛋白2 （MUC2）、黏蛋白5AC （MUC5AC）、黏蛋白6 （MUC6）、Wnt和β-catenin表达情况。结果 与正常组比较,模型组胃类器官数量显著减少（P<0.01）,体积显著减小（P<0.01）,活力显著降低（P<0.01）,Lgr5、MUC2、Wnt与β-catenin表达显著升高（P<0.01）,MUC5AC、MUC6表达显著降低（P<0.01）。与模型组比较,COE低、中、高质量浓度组胃类器官数量及体积均显著升高（P<0.01）;胃类器官活力显著增强（P<0.01）,且在COE质量浓度为20 mg·L^-1时效果最显著（P<0.01）;COE中、高质量浓度组Lgr5、MUC2表达显著降低（P<0.01）,COE低、中、高质量浓度组MUC5AC、MUC6的表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,Wnt抑制剂能够明显促进胃类器官MUC5AC、MUC6的表达（P<0.05,P<0.01）,显著降低MUC2、Wnt与β-catenin的表达（P<0.01）,COE高质量浓度与Wnt抑制剂共同使用能够促进这一趋势（P<0.01）。结论 COE通过抑制Lgr5、MUC2、Wnt、β-catenin的表达和促进MUC5AC及MUC6的表达,抑制Wnt/β-catenin通路,促进胃类器官增殖分化,逆转PLGC过程。     

左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠肾脏 TGF-β1/Smad4 mRNA表达的影响

目的:研究左归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制.方法:SD雌性大鼠分为正常组,假手术组,模型组,左归丸高、中、低剂量组,及尼尔雌醇组,采用去卵巢的方法建立绝经后骨质疏松症模型,术后21 d开始给药:正常组,假手术组ig生理盐水;左归丸高、中、低剂量组分别ig6.4,3.2,1.6g·kg-1,1次/d;尼尔雌醇组ig0.021 g·kg-1,1次/周,连续60d.取大鼠左后肢股骨远端1/3做病理切片,光镜下观察骨组织形态学变化,测定骨小梁面积百分比(Tb· Ar);采用双能X射线骨密度仪测定右后肢离体股骨近端1/3及股骨整体的骨密度(BMD);采用RT-PCR法检测大鼠肾髓质的转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4 mRNA表达.结果:与模型组比较,左归丸高、中剂量组骨小梁面积百分率(Tb· Ar)显著升高(P＜0.05),左归丸高、中剂量组的股骨的骨密度显著升高(P＜0.05);各组肾脏组织病理形态学未见明显病理变化;与正常组相比,模型空白组TGF-β1,Smad4 mRNA水平过高表达(P＜0.05);与模型组相比,各给药组肾组织中TGF-β1,Smad4 mRNA表达均显著下调(P＜0.05),且左归丸各剂量组的下调力度均强于尼尔雌醇组,但以左归丸低剂量组下调最为显著.结论:左归丸能有效防治绝经后骨质疏松症,其作用机制之一可能与其干预肾组织中TGF-β1/Smad4的信号转导通路有关.