LIGHT/TNFSF14研究进展

LIGHT／TNFSF14是近年来发现的肿瘤坏死因子超家族成员，具有共刺激T淋巴细胞、诱导iDC成熟、促进肿瘤细胞凋亡的生物学功能，在自身免疫病、移植物抗宿主病（GVHD）及抗肿瘤免疫中发挥重要的调节作用。     

Fgl2在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤中的作用及机制研究

目的 研究纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,Fgl2)在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用及其机制.方法 选取8～10周,雄性,体质量(20±2)g,C57BL/6背景的野生型的Fgl2+/...     

鹿茸水提物减轻顺铂所致的小鼠肾损伤

目的:探讨梅花鹿二杠茸和三岔茸水提物对顺铂(CDDP)所致小鼠肾损伤的影响。方法:采用灌胃给药方式,用顺铂(15 mg/kg)诱导小鼠肾损伤模型,测定小鼠肾脏指数(KI)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,并对肾脏组织进行HE染色,观察肾脏病理学变化,研究梅花鹿二杠茸和三岔茸的水提物各剂量对小鼠肾损伤的影响。结果:与顺铂组相比,各剂量鹿茸水提物可显著降低CDDP诱导肾损伤小鼠SCr、BUN水平及肾脏MDA含量,提高SOD和GSH-Px的活性(P0.05);明显改善肾组织病理学形态,减轻CDDP对肾小管上皮细胞的损伤程度,且同等浓度下,与三岔茸相比,二杠茸水提物能更好地改善肾功能及减轻病理损伤。结论:鹿茸水提物减轻顺铂引起的小鼠肾损伤,其作用机制可能与鹿茸水提物增强小鼠肾脏组织的抗氧化能力有关。     

卡维地洛减轻顺铂的肾损害

目的：研究顺铂肾损害中肾小管上皮细胞凋亡情况；以卡维地洛干预，探讨Bax、Bcl-2在其中的作用及机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水（NS）对照组、卡维地洛对照组、顺铂组、卡维地洛治疗组。测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）、肾组织中丙二醛（MDA）、抑制羟自由基能力(IHR)；过碘酸-希夫氏碱（PAS）染色观察肾脏病理改变；原位末端标记法（TUNEL）与DNA琼脂糖凝胶电泳观察肾小管上皮细胞凋亡；免疫组化法检测肾组织Bax、Bcl-2的表达。结果:顺铂组大鼠血中BUN、SCr明显高于其它各组，肾脏病理改变明显加重。DNA电泳及TUNEL染色可见大量的肾小管上皮细胞凋亡； MDA含量增加，IHR降低；肾组织Bax表达增加，Bcl-2无明显变化。卡维地洛治疗组大鼠肾功能障碍、肾脏的病理变化减轻； MDA含量下降，IHR增加；肾小管上皮细胞凋亡减少，Bax表达减少，Bcl-2表达增加。结论:肾小管上皮细胞凋亡是顺铂肾毒性的重要原因。卡维地洛可通过减少活性氧族 (ROS)，减少Bax、增加Bcl-2的表达，使Bcl-2/Bax上调，阻止线粒体膜孔(MPT)的开放，抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻顺铂的肾损害。     

羟氯喹减轻氟尿嘧啶诱导的小鼠肠炎及机制

目的探讨羟氯喹(HCQ)在化疗药物诱导的肠炎中的治疗作用及其可能的分子机制。方法 30只C57B6/J小鼠随机分为0、 1、 3、 5、 7 d组,第1～3天腹腔注射氟尿嘧啶(5-FU)200μL/d(50 mg/kg),分别于第0、 1、 3、 5、 7天处死,双链DNA(dsDNA)定量试剂盒检测血清及小肠液dsDNA水平,腹泻评分评估小鼠肠炎病情。体外培养HCT-116细胞,分别以(0、 0.01、 0.1、 0.5、 1、 10)μmol/L 5-FU处理72 h或1μmol/L 5-FU处理24、 48、 72 h,dsDNA定量试剂盒检测各组细胞培养上清dsDNA水平。24只C57B6/J小鼠随机分为:对照组(腹腔注射并灌胃生理盐水200μL/d)、模型组(腹腔注射50 mg/kg 5-FU 200μL/d、灌胃生理盐水200μL/d)、 HCQ治疗组(腹腔注射50 mg/kg 5-FU 200μL/d前一天起灌胃60 mg/kg HCQ溶液200μL/d)、 HCQ单药组(灌胃60 mg/kg HCQ溶液200μL/d),处理6 d处死小鼠。HE染色观察小肠病变,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠小肠细胞凋亡情况,免疫荧光组织化学染色法检测小肠组织CD11c、 Toll样受体9(TLR9)、核因子κB (NF-κB)的表达水平, ELISA检测血清IL-1β水平。体外培养小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC), Lipofectamine~(TM) 3000转染dsDNA以刺激BMDC,蛋白印迹法检测BMDC中TLR9表达,免疫荧光细胞化学染色法检测NF-κB表达, ELISA检测细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果 5-FU处理的小鼠肠上皮细胞明显凋亡,血清及小肠灌洗液中dsDNA水平动态变化与腹泻评分变化一致; 5-FU处理的HCT-116细胞上清中dsDNA水平随5-FU浓度和时间的增加而增加。HCQ处理可减轻小鼠小肠上皮的破坏,降低小肠组织TLR9、 NF-κB表达及血清IL-1β水平。模型小鼠小肠存在大量DC的浸润,用dsDNA刺激BMDC后,其TLR9、 NF-κB、 IL-1β表达均明显增加,而HCQ预处理后均显著降低。结论 HCQ减轻5-FU诱导的小鼠肠道炎症,抑制DC中TLR9、 NF-κB依赖的DNA感受通路和IL-1β的释放。     

亚硝酸钠减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:明确亚硝酸钠对急性肺损伤(ALI)的治疗作用及可能机制。方法:用脂多糖(LPS4mg/kg)气道滴入制备小鼠ALI模型。随机分为生理盐水组、LPS模型组、亚硝酸钠4.8nmol/L、48nmol/L、480nmol/L治疗组。测定肺湿/干重比值、肺通透性,常规细胞形态学检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数量变化,苏木精曙红染色观察肺组织病理改变,用试剂盒检测肺组织白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:腹腔注射4.8nmol/L、48nmol/L亚硝酸钠可明显降低LPS诱导的ALI小鼠肺湿/干重比值;减少BALF中的白细胞总数及中性粒细胞的比例;降低肺毛细血管通透性;改善肺组织病理变化;降低肺组织TNF-α/IL-10比值、抑制总NOS活性及诱导型NOS(iNOS)活性的增加。480nmol/L亚硝酸钠对LPS诱导的ALI小鼠肺组织上述指标除NOS活性外,均无显著影响(P0.05)。与对照组相比,480nmol/L亚硝酸钠显著增加了肺组织NO水平。结论:低、中剂量亚硝酸钠能够对抗LPS诱导的小鼠急性肺损伤,低剂量亚硝酸钠还原产生的NO对iNOS活性的抑制及下调TNF-α/IL-10比值可能在ALI中起重要作用。     

白藜芦醇减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的观察白藜芦醇在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠中的作用,以及白藜芦醇对小鼠肺组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法将小鼠分为对照组,ALI模型组(经气管滴注5 mg/kg的LPS建立小鼠ALI模型),白藜芦醇干预组(经腹腔注射30 mg/kg白藜芦醇,2 h后,经气管滴注5 mg/kg的LPS)。检测小鼠呼吸功能;HE染色及病理评分观察小鼠肺组织形态的变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并观察中性粒细胞的活化; ELISA检测BALF中IL-1β和IL-18的蛋白水平;real-time PCR检测小鼠肺组织IL-1β、IL-18、nlrp3、asc及pro-caspase-1 mRNA的表达;Western blot检测肺组织IκB的蛋白表达。结果白藜芦醇可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;降低ALI小鼠BALF中IL-1β和IL-18的蛋白水平(P0.05);减少ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、pro-caspase-1的表达,增加IκB的蛋白表达(P0.05)。结论白藜芦醇可能抑制NLPR3炎性反应小体活化后产物的表达,最终可减轻LPS诱导的小鼠ALI。     

藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的探讨藤黄酸(GA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法采用尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型。实验将小鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、藤黄酸组(GA组)和藤黄酸预处理组(GA+LPS组),6 h后测定肺湿/干重比值(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和白细胞计数;ELISA检测肺匀浆中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果模型组小鼠肺W/D、MPO活性、BALF中蛋白含量和白细胞数量均增加,肺组织IL-1β和TNF-α水平升高(均P0.01);藤黄酸预处理可减轻LPS引起的以上指标变化(均P0.05)。结论 GA可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织IL-1β和TNF-α的含量、抑制中性粒细胞在肺部的聚集和减轻肺部水肿相关。     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。     

亚精胺减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的　观察亚精胺（spermidine）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）的影响。 方法　采用5 mg/kg的LPS经气管滴注,建立ALI小鼠模型。用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;观察亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、总细胞数及中性粒细胞数目,并检测髓过氧化物酶（MPO）的水平;qPCR检测ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达;ELISA检测ALI小鼠BALF中sTREM-1的蛋白水平。 结果　亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能;减轻LPS诱导的肺部病理损伤;减少蛋白渗出和中性粒细胞浸润;降低ALI小鼠肺内炎症放大受体TREM-1的表达。 结论　亚精胺能减少炎症细胞浸润,抑制炎症因子表达,从而减轻LPS诱导的ALI,其机制可能与亚精胺可抑制ALI小鼠肺组织TREM-1表达有关。     

顺铂诱导食管癌细胞系ECA109损伤机制

目的探讨顺铂诱导食管癌细胞系ECA109 DNA机制。方法用MTT法测定ECA109细胞增殖,绘制细胞增殖曲线,筛选出低细胞毒性药物浓度用于后续实验。用免疫荧光法检测顺铂作用24 h后50个ECA109细胞内r-H2AX、P-STAT1和CHK2-T68核内斑点(IF)平均数量。分别检测沉默H2AX基因和沉默STAT1基因前后,顺铂作用24 h后50个ECA109细胞内r-H2AX、P-STAT1和CHK2-T68核内斑点(IF)平均数量。结果顺铂呈时间剂量依赖性抑制ECA109细胞增殖。顺铂可以诱导ECA109细胞产生r-H2AX、P-STAT1和CHK2-T68核内斑点(IF)(P0.05)。沉默H2AX基因使顺铂诱导的r-H2AX、P-STAT1和CHK2-T68核内斑点(IF)均减少(P0.05)。沉默STAT1基因可以减少顺铂诱导的P-STAT1和CHK2-T68核内斑点(IF)生成(P0.05)。结论顺铂可以诱导食管癌细胞损伤,产生多种核内斑点(IF)。在这一损伤通路中,H2AX位于上游,调控STAT1和CHK2;STAT1位于H2AX下游,CHK2上游,可调控CHK2。     

顺铂致小鼠急性肾损伤肾组织中炎症反应与Klotho蛋白表达相关性分析

目的分析由顺铂诱导小鼠急性肾损伤(AKI)肾组织中炎症与Klotho蛋白的表达变化及相关性,探讨Klotho在顺铂致AKI中的作用及可能机制。方法 18只雄性C57BL/6小鼠随机分为0 d组、 1 d组、 3 d组,每组6只。给予单次腹腔注射顺铂25 mg/kg,分别于0、 1、 3 d处死小鼠,留取血清、肾脏组织。生化分析仪检测肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)含量, HE染色观察肾脏组织病理变化, Western blot法检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、 Klotho、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表;采用Spearman秩相关检验进行相关性分析。结果与0 d组相比, 1 d和3 d组血清Scr、 BUN含量均显著性增高; 1 d和3 d组小鼠肾组织间质出现炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞脱落、水肿、细胞碎片大量堆积; 3 d组肾组织NGAL、 TNF-α、 NLRP3、 p-STAT3、 STAT3、 p-NF-κB、 NF-κB蛋白含量明显增高,其中TNF-α、 p-STAT3、 STAT3表达量增高呈时间依赖性; 1 d和3 d组Klotho表达量降低呈时间依赖性; NGAL、 TNF-α、 NLRP3、 p-STAT3、 p-NF-κB与Klotho的表达均呈显著负相关。结论 Klotho激活STAT3/NF-κB通路参与调控顺铂诱导小鼠AKI的发生发展。     

过表达P21减轻顺铂诱导的HK-2细胞损伤

目的:探讨P21在顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)及Western blot法检测顺铂诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中P21的表达水平。在HK-2细胞中过表达P21后,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力及细胞凋亡;Western blot检测急性肾损伤标志物肾损伤因子1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的表达及细胞凋亡效应蛋白caspase-3的表达;此外,还同时检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白水平及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译起始因子2α(e IF2α)的磷酸化水平以反映细胞内质网应激相关信号通路的活性。结果:在肾小管上皮细胞中,顺铂可剂量及时间依赖性上调P21的mRNA及蛋白表达。过表达P21可逆转顺铂诱导的HK-2细胞凋亡,并使KIM-1、NGAL、GRP78、p-PERK、p-e IF2α、CHOP和cleaved caspase-3的蛋白水平明显减少。结论:过表达P21可减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞急性损伤,其机制可能与调控HK-2细胞内质网应激信号通路,抑制细胞凋亡有关。     

雷帕霉素减轻碘佛醇诱导的模型大鼠急性肾损伤

目的 探讨自噬在造影剂诱导的大鼠急性肾损伤(CI-AKI)中的作用,并探讨其可能机制。方法 将SD大鼠随机分为对照(control)组、CI-AKI模型(尾静脉注射造影剂碘佛醇;model)组、雷帕霉素(RAPA)组和羟基氯喹(HCQ)组。测定血清中尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)含量;HE染色检测肾脏组织病理学;透射电镜观察自噬超微结构;Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、泛素结合蛋白p62及组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)蛋白表达;RT-qPCR观察HDAC4 mRNA表达。结果 与对照组相比,模型组、HCQ组中BUN、Scr含量及HDAC4表达升高(P<0.01),肾脏近端小管出现明显损伤,其中模型组中自噬小体和自噬溶酶体增加,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,p62水平降低(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,RAPA组出现较多自噬小体和自噬溶酶体,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高和p62、HDAC4表达下降(P<0.05,P<0.01)。而HCQ组自噬相关结构明显减少,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62表...     

原卟啉钠减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤

原卟啉钠(protoporphyrin disodium,NAPP)是一种卟吩衍生物,可由动物血液中血红素提取制得,具有改善肝功能、促进组织细胞呼吸、改善蛋白质和糖代谢等作用,主要作为保肝药物应用于临床。目前有关原卟啉钠的保肝降酶机制尚不清楚。因此,为探讨原卟啉钠保肝作用是否与其增强机体     

丹酚酸B减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的 研究丹酚酸B(SAB)能否减轻脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤.方法 将48只小鼠随机分为对照组、模型组(气管滴注LPS)、SAB低/中/高剂量干预组、莱菔硫烷阳性对照组,检测肺湿/干重比(W/D)值;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度;HE染色法评价肺组织病理损伤;ELISA检测BALF中TNF-α、IL-1...     

氧自由基在顺铂诱导的鼠急性肾衰中的作用

由缺血再灌注或肾中毒诱发的肾功能不全中,氧自由基起重要作用,本文研究了自由基清除剂对顺铂诱导的急性肾衰（ＡＲＦ）的影响。１３７只雄性ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠,体重２８０～３２０ｇ,随机分为６组：１组,盐水处理对照组（２６只）;２组,顺铂处理组（３７只）;３组,顺铂处理加二甲基硫脲（ＤＭＴＵ,自由基清除剂）组（２８只）;４组,顺铂加苯甲酸钠（另一种自由基清除剂）组（６只）;５组,顺铂加游离超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）组（７只）;６组,顺铂加卵磷脂超氧化物歧化酶（ＬＳＯＤ）组（３３只）。处理５…     

倍半萜内酯减轻糖尿病小鼠胰岛素抵抗及早期肾损伤

目的观察C57BKS db/db小鼠胰岛素抵抗、慢性炎性反应及糖尿病肾病进展,并探讨倍半萜内酯(PTN)的作用。方法以db/m鼠为对照组(db/m),db/db鼠为实验组(db/db),后者腹腔注射PTN(1.0 mg/kg隔日一次)为干预组(db/db+PTN)。于8、12和16周取血、尿及肝肾组织,酶法测定血尿生化指标、ELISA检测血单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及IL-6含量,肝脏病理HE、肾脏PAS染色及免疫组化染色检测NF-кB、MCP-1表达。结果 1)与db/m组相比,db/db组小鼠出现血糖、血脂、胰岛素及尿白蛋白显著升高(P0.05),肝脏脂肪化、肾小球肥大及基质扩张表现,血清及肾脏局部炎性因子表达增加(P0.05);2)与db/db组相比,12周db/db+PTN组血清MCP-1、IL-6以及肾脏NF-кB和MCP-1表达减低(P0.05);16周db/db+PTN组胰岛素抵抗指数下降(P0.05),肾小球肥大、系膜基质增生与肝脏脂肪化减轻。结论 PTN可减少慢性炎性反应及胰岛素抵抗,从而改善肝脏脂肪化及早期糖尿病肾病预后。     

甘草素对急性肾损伤小鼠的保护机制研究

目的 探究甘草素对脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤小鼠的保护作用机制。方法 将雄性昆明小鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+甘草素3.75 mg/kg组、LPS+甘草素7.5 mg/kg组、LPS+甘草素15 mg/kg组和LPS+地塞米松组,每组8只。苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织病理变化;全自动生化分析仪检测血清肌酐和血清尿素氮水平。酶联免疫吸附测定（ELISA）检测肾组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平;Western blot检测肾组织中IκBα和NF-κBp65蛋白的磷酸化水平和Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。结果 与对照组相比,LPS组小鼠肾组织中有大量炎症细胞浸润,血清肌酐、血清尿素氮、IL-6、IL-1β、TNF-α水平及p-IκBα/IκBα、p-NF-κBp65/NF-κBp65、TLR4、NLRP3、Caspase-1、IL-1β均显著上调,差异均有统计学意义（P<0.05）。然而在LPS+甘草素7.5 mg/kg组、LPS+甘草素15 mg/kg组和LPS...