Wnt2在植入胎盘组织中的表达及其对滋养细胞迁移和侵袭功能的影响

目的检测Wnt2在植入胎盘组织中的表达,分析Wnt2对滋养细胞凋亡、迁移和侵袭功能的影响。方法收集2020年7月至2021年1月于武汉大学中南医院妇产科行剖宫产的胎盘植入孕产妇胎盘组织15例(植入组)和正常孕产妇胎盘组织15例(对照组)。RT-PCR法和Western blot法检测胎盘组织中Wnt2表达水平,采用siRNA敲低HTR-8/Svneo细胞中Wnt2表达水平,流式细胞学法检测细胞凋亡,Transwell侵袭和迁移实验评估细胞的迁移和侵袭能力,RT-PCR法和Western blot法检测β-catenin、Bcl-2、Caspase-3、MMP-2和MMP-9表达水平。结果与对照组相比,植入组胎盘组织中Wnt2、MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达量均显著升高(均P<0.05)。转染敲低HTR-8/Svneo细胞Wnt2水平后,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),细胞迁移和侵袭能力显著抑制(P<0.01),β-catenin、Bcl-2、MMP-2和MMP-9表达显著下降(均P<0.05),而Caspase-3表达显著升高(P<0.05)。结论植入胎盘组织中Wnt2蛋白表达显著升高,且Wnt2可能通过wnt/β-catenin信号通路参与了胎盘滋养细胞的凋亡、迁移和侵袭。     

胎盘细胞凋亡与胎儿生长受限关系的研究

目的　探讨胎盘细胞调亡与胎儿生长受限 (FGR)发生的关系。方法　应用透射电镜和DNA缺口末端标记法检测 18例FGR患者 (FGR组 )及 14例正常妊娠妇女 (正常妊娠组 )的胎盘细胞凋亡情况。同时观察两组的胎盘重量及新生儿平均出生体重。结果　FGR组胎盘凋亡细胞核比率为12 1‰ ,电镜下凋亡细胞核呈明显致密状 ,染色质结块 ,胎盘平均重量为 (2 3 6± 2 4)g ,新生儿平均出生体重为 (2 0 71± 42 8)g;正常妊娠组胎盘凋亡细胞核比率为 7 3‰ ,胎盘平均重量为 (3 5 4± 63 )g ,新生儿平均出生体重为 (3 411± 5 88)g。FGR组胎盘凋亡细胞核比率明显高于正常妊娠组 (P <0 0 5 )。结论　胎盘细胞凋亡增加与FGR的发生有关     

内质网应激介导的胎盘滋养细胞凋亡在妊娠期糖尿病合并胎儿生长受限中的研究

目的探讨内质网应激介导的胎盘滋养细胞凋亡在妊娠期糖尿病合并胎儿生长受限中的作用。方法选取37例妊娠期糖尿病合并胎儿生长受限的孕妇为GDM+FGR组,同期产检的50例妊娠期糖尿病合并正常新生儿出生体重的孕妇为对照组,分析两组孕妇妊娠结局、胎盘功能、胎盘内质网应激指标GRP78、内质网应激转录因子CHOP、凋亡相关分子Bax及Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平。结果 (1)与对照组相比,GDM+FGR组孕期血糖控制较差,易并发生妊娠期高血压疾病、胎儿宫内窘迫、剖宫产及新生儿窒息(P0.01);(2)GDM+FGR组血清胎盘泌乳素水平下降,S/D比值增高,胎盘功能明显下降(P0.01);(3)与对照组相比,GDM+FGR组GRP78、CHOP及Bax的mRNA及蛋白水平均明显升高,Bcl-2则显著下降(P0.01),GDM+FGR组存在明显内质网应激介导的胎盘滋养细胞凋亡。结论妊娠期糖尿病合并胎儿生长受限的不良妊娠结局可能与内质网应激介导的胎盘滋养细胞凋亡密切相关。     

胎盘生长因子在妊娠期糖尿病患者胎盘中抑制滋养细胞凋亡的作用研究

目的:探讨胎盘生长因子(PLGF)对妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘滋养细胞凋亡的影响。方法:收集20例GDM和20例正常孕妇胎盘组织,采用HE染色法观察GDM患者胎盘组织形态学变化。TUNEL染色以及Caspase-3活性检测胎盘中细胞凋亡情况。Western blot检测胎盘中PLGF蛋白表达情况,免疫组化观察PLGF的原位表达。离体培养人绒毛滋养细胞(HTR-8/SVneo),分为对照组、高糖组(HG)、PLGF+高糖组(PLGF+HG)和PLGF组,应用流式细胞术检测各组HTR-8/SVneo滋养细胞的凋亡率。结果:与对照组相比,GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡明显减少,Caspase-3活性明显减弱。PLGF在GDM胎盘中的表达明显高于对照组;高糖诱导HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加,PLGF预处理明显逆转高糖诱导的HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加。结论:GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡明显减少,而胎盘中PLGF表达升高。离体实验进一步证明PLGF能够抑制高糖所致HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡增加,因此PLGF表达升高可能是GDM患者胎盘中滋养细胞凋亡减少的原因。     

CCL2通过抑制白细胞介素-24表达增强人绒毛膜滋养细胞株的细胞活力

目的探讨白细胞介素-24(interleukin-24,IL-24)对人滋养细胞活力的调节作用。方法免疫组织化学法检测IL-24及其受体(IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1)在正常早孕期绒毛组织的表达;In-cell Western法分析重组胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和趋化因子CCL2对人绒毛膜滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞中IL-24表达的影响;MTT法分析重组IL-24和CCL2对HTR-8/SVneo细胞活力的影响。结果 IL-24及其受体均在正常早孕期绒毛组织滋养细胞中强阳性表达。与对照组相比,重组CCL2体外刺激后HTR-8/SVneo细胞IL-24表达水平显著下降(P0.001)。重组IL-24处理后,HTR-8/SVneo细胞活力显著降低(P0.05或P0.001);相反,IL-24中和性抗体明显促进其细胞活力(P0.05或P0.01),重组CCL2(100 ng/mL)可体外增强HTR-8/SVneo细胞活力(P0.01),但这一作用可被重组IL-24所抑制。结论 CCL2通过抑制IL-24分泌增强人滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞的体外活力,从而可能利于囊胚植入和胎盘发育。     

胎儿生长受限孕妇的胎盘GLUT1表达与血清皮质醇的关系

目的探讨胎盘葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT)的表达在胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)发生发展中的作用及其与孕妇血清皮质醇(cortisol,CORT)水平的相关性.方法用免疫组织化学法检测20例FGR孕妇(FGR组)及24例正常妊娠孕妇(对照组)胎盘GLUT1的表达.利用放射免疫分析法测定两组孕妇产前血清CORT水平.同时测量新生儿出生体重和胎盘重量.结果FGR胎盘GLUT1表达水平(149.8±8.2)较对照组(155.9±6.5)明显降低(P＜0.05),胎盘合体滋养层基底膜面GLUT1的表达水平(135.3±4.2)较对照组(153.9±8.5)明显降低(P＜0.01).胎盘GLUT1表达水平与孕妇血清CORT水平呈负相关(r=-0.803,P＜0.01).结论胎盘组织中,特别是基底膜面的GLUT1表达水平下降可能是FGR的病因之一,CORT可能通过抑制胎盘GLUT1的表达,参与FGR的发病过程.     

细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)在早产宫内感染中的价值

目的 探讨与感染有关的细胞因子(interleukin-1β,IL-1β)、(interleukin-6,IL-6)、(tumor necrosis factor-a,TNF-α)在早产中的应用.方法 取30例早产孕妇和31例足月临产孕妇,46例足月未临产孕妇的血和羊水标本,分别行血IL-6、羊水中IL-1β、IL-6及TNF-α和胎盘行病理检查.结果 (1)早产组的羊水中IL-1β、IL-6、TNF-α及血浆中IL-6水平显著高于妊娠足月组(包括临产组和未临产组).早产组中有宫内感染孕妇的细胞因子水平显著高于无宫内感染者.(2)羊水和血浆中IL-6水平有明显的相关性.结论 早产有宫内感染者血浆及羊水中细胞因子水平高于无宫内感染者,血浆IL-6水平与羊水IL-6水平密切相关.     

妊娠期糖尿病孕妇胎盘和大网膜脂肪组织TNF-α及IL-1β的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘和大网膜脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达及其与胰岛素抵抗的相关性.方法:采用荧光实时定量PCR检测20例GDM孕妇(GDM组)和20例正常孕妇(对照组)胎盘和大网膜脂肪组织中TNF-α、IL-1β mRNA的相对表达量,测定两组孕妇空腹血浆葡萄糖(FPG)、胰岛素(FIN)水平,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并进行相关性分析.结果:①与对照组相比,GDM组孕妇胎盘和脂肪组织中TNF-α mRNA的表达量升高,差异有统计学意义(P=0.01;P=0.01).②两组孕妇胎盘和脂肪组织中IL-1β mRNA的表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).③GDM组孕妇胎盘和大网膜脂肪组织TNF-α mRNA表达水平与HOMA-IR呈明显正相关(r=0.54,P=0.01;r=0.61,P=0.01);对照组大网膜脂肪组织TNF-α mRNA表达水平与HOMA-IR呈明显正相关(r =0.52,P=0.02).④两组孕妇胎盘和大网膜脂肪组织IL-1β mRNA表达水平与HO-MA-IR均无明显相关性(P＞0.05).结论:胎盘和脂肪组织TNF-α的过度表达可能是GDM孕妇胰岛素抵抗的重要原因,IL-1β在胰岛素抵抗过程中发挥的作用并不明显.     

微小RNA-101在子痫前期胎盘组织中表达及调控机制研究

目的探讨微小RNA-101(miR-101)在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达和作用及可能的调控机制。方法收集2012年1月至2015年12月咸宁市中心医院收治的40例PE患者和40例正常孕妇胎盘组织,采用荧光定量PCR分析胎盘组织中miR-101的表达情况。体外转染miR-101抑制物至人滋养层细胞系(HTR-8/SVneo),并观察其对细胞侵袭及凋亡的影响。通过生物信息学,双荧光素酶报告基因试验及蛋白质印迹分析miR-101靶基因。结果 miR-101在PE患者胎盘组织的表达量明显高于正常胎盘组织(P0.05),而基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在PE患者胎盘组织的表达量明显低于正常胎盘组织(P0.05),二者表达水平呈明显负相关(P0.05)。体外敲低miR-101可明显促进HTR-8/SVneo细胞的侵袭(P0.05),并抑制细胞凋亡(P0.05)。MMP-1是miR-101的靶基因,miR-101可通过与MMP-1信使RNA的3’-非编码区(3’-UTR)结合并抑制其翻译。体外敲低miR-101可显著增加MMP-1的蛋白表达水平(P0.05)。结论 miR-101在PE患者胎盘组织中呈现高表达,敲低miR-101可显著促进胎盘细胞的侵袭并抑制其凋亡。MMP-1是miR-101的下游直接靶基因,提示miR-101可能通过负性调控MMP-1参与子痫前期的发生发展过程。     

双胎妊娠孕期体质量增长与妊娠结局关系的研究

目的:探讨孕前不同体质量指数(BMI)的双胎孕妇孕期体质量增长的适宜值,及其与妊娠结局的关系。方法:回顾性分析2018年1月至2020年12月在桂林医学院附属医院产科住院分娩的313例双胎孕妇,按照中国肥胖问题研究专题组提出的判断标准,按孕前BMI将调查对象划分为4组：<18.5 kg/m~2为低体质量组(10例),18.5～24.0 kg/m~2为正常体质量组(192例),24.0～28.0 kg/m~2为超重组(93例),≥28.0 kg/m~2为肥胖组(18例)。按照IOM推荐的双胎足月孕期增重范围,分为增重不足组(120例)、增重适宜组(153例)和增重过多组(40例),研究孕期增重与母体并发症及新生儿出生结局的关系。选择孕周≥37周且活产双胎新生儿平均出生体质量≥2500 g的孕妇共计131例,计算不同BMI双胎孕妇孕期增重的P25～P75,确定孕期体质量增长的适宜范围。采用(印)χ(正)~2检验和多因素Logistic回归分析方法对数据进行统计学分析。结果:(1)与孕前正常体质量组相比,孕前超重组及肥胖组均减少了新生儿平均出生体质量<2500 g的风险[超重组((印)OR(正) 0.551,95%CI 0.334～0.909),肥胖组((印)OR(正) 0.321,95%CI 0.115～0.891)],孕前超重组出现新生儿窒息的风险减少((印)OR(正) 0.353,95%CI 0.151～0.826),但孕前肥胖可增加妊娠期糖尿病((印)OR(正) 3.914,95%CI 1.443～10.618)及子痫前期((印)OR(正) 5.147,95%CI 1.715～15.451)的风险,差异均有统计学意义((印)P(正)<0.05)。(2)与孕期增重适宜组相比,孕期增重不足增加早产((印)OR(正) 3.297,95%CI 2.000～5.433)和至少有1个为小于胎龄儿((印)OR(正) 2.732,95%CI 1.648～4.530)及新生儿平均出生体质量<2500 g((印)OR(正) 3.922,95%CI 2.319～6.635)的风险,但是可降低剖宫产风险((印)OR(正) 0.407,95%CI 0.217～0.765);与孕期增重适宜组相比,孕期增重过多则增加妊娠期糖尿病((印)OR(正) 2.558,95%CI 1.254～5.219)及子痫前期((印)OR(正) 3.429,95%CI 1.475～7.970)的风险,差异有统计学意义((印)P(正)<0.05)。(3)孕周≥37周分娩,且新生儿平均出生体质量≥2500 g的131例孕妇,孕期总增重P25～P75范围分别为：孕前低体质量为15.50～18.75 kg,正常体质量为12.00～20.00 kg,超重为10.75～19.50 kg,肥胖为10.00～16.50 kg,均低于IOM推荐范围。结论:双胎妊娠孕妇孕期体质量增长与其母婴结局密切相关,应对双胎妊娠孕妇孕期体质量管理加以指导,降低不良妊娠结局的发生风险。     

LncRNA H19通过调节miR-let7/MMP-9分子轴促进滋养细胞侵袭及迁移

目的:通过检测妊娠期高血压疾病(HDP)患者胎盘组织中lncRNA H19、miR-let7、MMP-9表达，探索HDP发病机制。方法:收集2019年12月至2021年3月在昆明医科大学第一附属医院分娩的妊娠期高血压疾病(HDP)患者86例(PIH 26例，PE 29例，sPE 31例)和正常妊娠孕妇20例。分别对HTR-8/Svneo细胞进行敲减或过表达H19,过表达H19与miR-let7e-5p mimics共转染。RT-qPCR法检测胎盘组织及HTR-8/Svneo细胞中lncRNA H19、miR-let7、MMP-9 mRNA表达水平，免疫组化法检测胎盘组织中MMP-9蛋白表达水平。Transwell试验检测细胞侵袭力，细胞划痕实验检测细胞迁移力，CCK-8试验检测细胞活力。结果:与正常妊娠组相比，HDP患者胎盘组织中lncRNA H19表达明显上调，miR-let7b-5p、miR-let7e-5p及MMP-9蛋白表达均下调；PIH及sPE患者胎盘组织中MMP-9 mRNA表达下调。HTR/SVneo细胞中敲减H19后，lncRNA H19及MMP-9 mRNA表达减少，...     

特发性胎儿生长受限与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系

目的 探讨特发性胎儿生长受限(FGR)与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系.方法 应用透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)、流式细胞技术(FCM)检测特发性FGR孕妇(FGR组)及正常妊娠妇女(对照组)各15例的胎盘细胞凋亡情况,并采用RT-PCR技术观察两组胎盘细胞中bcl-2基因相对表达量.结果 电镜下观察到FGR组胎盘合体滋养细胞核膜皱缩,核仁消失,染色质致密、凝聚;TUNEL 检测 FGR 组胎盘细胞凋亡率为13.68%,高于对照组的4.05%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测胎盘S期细胞比率FGR组为3.4%,对照组为2.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),FCM检测的胎盘细胞凋亡率变化趋势与TUNEL检测结果一致;FGR组胎盘细胞bcl-2基因相对表达量为0.19±0.13,对照组为0.55±0.17,两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 特发性FGR的发生与胎盘细胞凋亡增加有关,胎盘细胞凋亡增加与胎盘细胞中bcl-2基因表达下调有一定关系.     

胎儿生长受限患者血清和胎盘的Fas与FasL蛋白变化及意义

目的:探讨孕妇血清和胎盘Fas/FasL系统的表达与胎儿宫内生长发育的关系。方法:35例胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)患者,采用ELISA方法测定血清sFas和sFasL水平,采用Western blotting检测胎盘Fas和FasL的蛋白含量,并以45例正常孕妇为对照。结果:FGR组与对照组血清sFas水平分别为3.63±0.29 mg/L和1.17±0.53 mg/L,FGR组高于对照组(P<0.05)。FGR组胎盘组织FasL含量(0.341±0.371)与正常组(0.917±0.15)比较显著下降(P<0.05),并且FasL含量与胎盘相对重量和新生儿体质量呈显著正相关,相关系数分别为0.791和0.638。结论:FGR患者血清sFas水平升高,胎盘组织FasL下降与胎盘相对重量及新生儿体质量相关,提示母-胎界面免疫耐受异常亦可能是胎儿生长受限发病机制中的重要因素之一。     

细胞因子IL-6mRNA与IL-10mRNA在早产合并绒毛膜羊膜炎胎盘组织中的表达水平及意义

目的:研究白细胞介素-6 mRNA(IL-6 mRNA)和白细胞介素-10 mRNA(IL-10 mRNA)在早产合并绒毛膜羊膜炎孕妇胎盘组织中的表达水平,探讨IL-6及IL-10在妊娠中的作用,以及其在早产合并绒毛膜羊膜炎中的变化及意义。方法:取足月分娩及早产孕妇部分胎盘胎膜组织做病理检查,根据病检结果分为3组:早产感染组20例、早产非感染组20例和足月组20例。采用二步法RT-PCR法测定3组胎盘组织中IL-6 mRNA和IL-10 mRNA的表达。结果:早产感染组胎盘组织中IL-6 mRNA表达水平明显高于早产非感染组和足月组,差异有显著性(P<0.05);而IL-10 mRNA表达水平明显低于另外两组,差异有显著性(P<0.05)。结论:感染可引起细胞因子IL-6 mRNA、IL-10 mRNA在胎盘组织中的表达发生改变,推测IL-6可促进分娩发动,使妊娠提前终止,而IL-10在维持正常妊娠中可能起重要作用。     

MicroRNA-155通过调控Wnt/β-catenin通路对滋养细胞生物学行为的影响

目的:探讨miR-155是否通过调控Wnt/β-catenin通路影响滋养细胞的生物学行为,参与子痫前期(PE)的发生。方法:收集20例PE孕妇(PE组)及20例正常孕妇(Normal组)的胎盘组织,qRT-PCR检测组织中miR-155表达,qRT-PCR及Western blot检测β-catenin表达。HTR-8/SVneo细胞分别转染miR-155 mimic、miR-155 inhibitor及miR-155 NC,qRT-PCR检测其转染效率及β-catenin mRNA表达,Western blot检测β-catenin及Wnt3a蛋白表达,CCK-8、Transwell、流式细胞术分别检测细胞的增殖、迁移及凋亡。转染miR-155 inhibitor后,用β-catenin抑制剂处理细胞,检测相关蛋白表达及细胞的增殖、迁移和凋亡。结果:PE组胎盘组织中miR-155表达较Normal组升高(P<0.001),β-catenin表达降低(P<0.01)。过表达miR-155后,β-catenin及Wnt3a表达、细胞增殖、迁移能力均下降(P<0.01)...     

细胞因子信号传导负调控因子3在妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘组织中的表达及其意义

目的 探讨细胞因子信号传导负调控因子3(SOCS3)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇胎盘组织中的表达及其意义.方法 选择2008年4月至2009年1月在中南大学湘雅二医院产科剖宫产分娩的ICP孕妇44例为ICP组(其中重型21例、轻型23例),选择同期健康孕妇25例为对照组.采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法测定SOCS3在孕妇胎盘组织中的定位与表达水平(以阳性细胞率及平均灰度值表示),酶联免疫吸附试验测定胎盘组织中自细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)水平.结果 (1)SOCS3在两组孕妇胎盘滋养细胞中均有表达,SOCS3主要表达于胎盘滋养细胞胞质中,呈现淡黄色、棕黄色或棕褐色染色颗粒,其中在ICP组重型孕妇胎盘滋养细胞中呈弱阳性表达,在轻型孕妇胎盘滋养细胞中呈阳性表达,在对照组孕妇胎盘滋养细胞中呈强阳性表达;而在滋养细胞的细胞核和细胞膜上基本无表达.(2)ICP组重型孕妇胎盘滋养细胞中SOCS3阳性细胞率为(0.15±0.08)%,明显低于对照组的(0.69±0.12)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);也明显低于ICP组轻型孕妇的(0.42±0.09)%,两者比较,差异也有统计学意义(P<0.01).ICP组重型孕妇胎盘滋养细胞中SOCS3平均灰度值为204±7,明显高于对照组的81±7,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);也明显高于轻型孕妇的147±7,两者比较,差异也有统计学意义(P<0.01).(3)ICP组重型孕妇胎盘滋养细胞中IL-10水平为(1.16±0.68)g/L,明显低于对照组的(1.39±0.08)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);也明显低于轻型孕妇的(1.22±0.75)μg/L,两者比较,差异也有统计学意义(P<0.01).(4)ICP组重型孕妇胎盘组织滋养细胞中IFN-γ水平为(16.8±0.7)μg/L、IFN-γ/IL-10比值为16.02±2.79,分别高于对照组的(10.5±0.3)μg/L及8.56±0.14,分别比较,差异有统计学意义(P<0.01);也分别高于ICP组轻型孕妇的(13.4±0.5)μg/L及8.56±0.14,两者比较,差异也有统计学意义(P<0.01).(5)ICP组轻型及重型孕妇胎盘滋养细胞中SOCS3表达阳性细胞率与胎盘滋养细胞中IFN-γ/IL-10比值呈负相关(r=-0.685及-0.702,P<0.01),而SOCS3平均灰度值与IFN-γ/IL-10比值呈正相关(r=0.621及0.891,P<0.01).结论 (1)SOCS3在ICP孕妇胎盘组织中呈低表达,而且病情越重降低越明显,提示SOCS3可能参与了ICP的发病,并且与病情进展有关.(2)ICP胎盘组织中SOCS3表达与胎盘组织中IFN-γ/IL-10比值呈负相关,提示SOCS3可能在ICP患者细胞因子免疫调节中起了一定作用.     

HBV感染胎盘BCRP的表达与IL-1β的相关性

目的:探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘组织中的表达及其意义.方法:选取被HBV感染的足月胎盘20例(乙肝组),同时选取未被HBV感染的足月胎盘20例(正常对照组).采用实时荧光定量(RT-PCR)分别检测两组胎盘组织BCRP mRNA表达.蛋白免疫印迹法分别检测两组胎盘组织BCRP的表达.ELISA分别检测两组胎盘中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达.结果:①各组RT-PCR检测BCRP mRNA的相对表达量:乙肝组0.424±0.358,正常对照组0.144±0.116,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.003).②蛋白免疫印迹法检测BCRP表达量:乙肝组0.4250±0.3106,正常对照组0.1129±0.1045,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.000).③ELISA法分别检测胎盘中IL-1β的表达:乙肝组290.145±229.393 pg/ml;正常对照组66.522±61.832 pg/ml,两组相比,差异有高度统计学意义(P=0.000).④经Spearson相关分析,IL-1β与BCRP mRNA和BCRP表达呈正相关关系(r=0.930,P=0.000;r=0.887,P=0.000).结论:BCRP在HBV感染胎盘组织中表达的升高,可能与HBV感染胎盘组织中IL-1β表达的升高有关.     

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘合体滋养细胞中白细胞介素18和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1表达及其意义

目的通过检测妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘合体滋养细胞中白细胞介素18(IL-18)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的定位和表达及caspase-1的生物学活性,探讨其与ICP发病的关系。方法 2011年3月至11月在重庆医科大学附属第一医院选择ICP孕妇40例为研究对象,包括ICP轻度组(20例),ICP重度组(20例),以同期行择期剖宫产术的20例正常孕妇为对照组。采用免疫组化检测IL-18和caspase-1的表达。结果 ICP重度组孕妇血清中IL-18及丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平显著高于轻度组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP重度组胎盘合体滋养细胞中IL-18和caspase-1表达水平显著高于轻度组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-18和caspase-1信号通路介导的免疫损伤可能参与了ICP孕妇的肝功能损害。     

LncRNA NEAT1通过靶向miR-103a-3p/SDF2轴调节滋养层细胞增殖、凋亡和侵袭

目的:探讨lncRNA NEAT1在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及对滋养层细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测lncRNA NEAT1在PE患者胎盘组织中的表达,将人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo随机分为对照(control)组、pcDNA-NC组、pcDNA-NEAT1组、si-NC组、si-NEAT1组、si-NEAT1+inhibitor NC组、si-NEAT1+miR-103a-3p inhibitor组,分别检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,Western blot检测SDF2蛋白表达。双荧光素酶报告基因验证LncRNA NEAT1、SDF2与miR-103a-3p的靶向关系。结果:LncRNA NEAT1在PE患者胎盘组织中表达水平升高。与pcDNA-NC组比较,pcDNA-NEAT1组lncRNA NEAT1表达、SDF2蛋白表达、细胞凋亡率显著升高,miR-103a-3p表达及细胞增殖活性、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-NEAT1组lncRNA NEAT1表达...     

子痫前期孕妇母胎界面炎症介质的表达与线粒体自噬的相关性研究

目的:探讨子痫前期(PE)孕妇母胎界面炎症介质的表达量以及线粒体自噬的发生情况,并探究两者的相关性。方法:选取2018年6月—2019年2月于南方医科大学附属深圳妇幼保健院住院的35例正常孕妇(对照组)、33例轻度PE孕妇(轻度PE组)及37例重度PE(重度PE组)。检测胎盘剥离面血清IL-1β、IL-18、TNF-α的表达量,分析母胎界面炎症形态学变化,观察胎盘滋养细胞线粒体发生情况,检测自噬相关分子BNIP3及DRAM1 mRNA及蛋白的表达变化,并进行炎症介质与线粒体自噬的相关性分析。结果:PE孕妇胎盘剥离面血清IL-1β、IL-18、TNF-α表达量显著高于对照组(P0.01),重度PE组表达量明显高于轻度PE组(P0.01)。HE染色显示PE孕妇胎盘组织炎症细胞浸润程度高于对照组。透射电镜可见重度PE组孕妇胎盘滋养细胞线粒体自噬阳性率为(2.61±1.07)%,轻度PE组为(7.65±3.19)%,均明显低于对照组[(14.07±3.11)%,P0.01]。PE孕妇BNIP3及DRAM1 mRNA及蛋白表达均低于对照组(P0.01)。相关性分析表明PE孕妇IL-1β、IL-18、TNF-α等炎症介质的表达量与线粒体自噬阳性率呈负相关。结论:PE孕妇滋养细胞线粒体自噬活性下降,受损线粒体积累可能导致母胎界面IL-1β、IL-18、TNF-α等炎症介质升高,从而参与PE发病。