类风湿关节炎患者外周血和滑液中CD4~+CD25~+调节性T细胞的水平变化

了解具有抑制功能的CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在类风湿关节炎(RA)中的水平变化。分离32例RA患者及35例正常对照者外周血和15例RA关节滑液中的单个核细胞,用荧光抗体标记细胞膜表面CD4、CD25分子和细胞内Foxp3转录因子,进行流式细胞分析,同时用RT-PCR方法测定单个核细胞中Foxp3 mRNA水平。实验发现RA外周血中CD4+CD25hT细胞比例(1.90±1.68)与健康人(1.81±1.79)无明显差异,而RA关节滑液中CD4+CD25+和CD4+CD25hT细胞含量却明显增高(14.98±12.52,8.94±9.67,P<0.01)。RA患者外周血单个核细胞中Foxp3+/CD4+T细胞比值(2.35±2.06)较正常人(7.25±3.98)明显降低(P<0.01),RA外周血中Foxp3 mRNA含量较正常人Treg减少,而RA关节液中Foxp3 mRNA含量较RA外周血更为低下(P<0.01)。RA患者存在CD4+CD25+Treg的异常改变,其外周血和关节液中具有抑制作用的Treg含量明显降低提示RA患者Treg数量减少及抑制功能下降可能是RA自身免疫反应亢强不能控制的原因之一。RA关节液中CD4+CD25hT细胞增高考虑与RA炎症反应造成T细胞过度活化有关。     

RA患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例及中性粒细胞表面CD200R1的分析

本研究探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的表达情况,并探讨其临床意义。采用流式细胞术分别检测RA患者和健康对照组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的百分含量和中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率。ELISA检测其血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和CCR2的表达水平。实验结果显示:RA患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞的比例明显低于健康对照组,中性粒细胞表面CD200R1的阳性表达率明显高于健康对照组,RA患者血清中MCP-1与CCR2的表达水平明显高于健康对照组。以上结果提示CD200/CD200R1信号异常,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞数量减少可能为RA的发病机制之一,调控CD200/CD200R1信号和CCR2~+Treg细胞输注可能成为RA治疗的新靶点。     

细粒棘球蚴感染者中Tim-3~+CD4~+CD25~+Treg细胞及相关因子的表达

目的通过检测细粒棘球蚴感染者外周血中Tim-3~+CD4~+CD25~+Treg细胞及相关因子的表达水平,探讨细粒棘球蚴感染者中Tim-3与CD4+CD25+Treg细胞的关系及Tim-3+CD4+CD25+Treg细胞对该疾病持续性发展的作用。方法选取30例细粒棘球蚴感染者和30例健康对照人群,用流式细胞术检测感染组和对照组外周血中Tim-3+CD4+CD25+Treg细胞的比例变化;实时荧光定量PCR法分别检测感染组和对照组外周血单个核细胞中Tim-3和Foxp3 mRNA的表达;ELISA法检测感染组和对照组血清中IL-10和TGF-β的水平;Pearson相关法分析感染者外周血中Tim-3 mRNA的表达与Foxp3 mRNA的相关性以及Tim-3+CD4+CD25+Treg细胞与IL-10和TGF-β的相关性。结果与对照组相比,细粒棘球蚴感染组外周血中Tim-3~+CD4~+CD25+Treg细胞的比例均显著升高(P0.001);外周血单个核细胞中Tim-3和Foxp3 mRNA水平显著升高(P0.001);血清中IL-10(P0.001)和TGF-β(P=0.046)水平显著升高;细粒棘球蚴患者外周血Tim-3 mRNA与Foxp3 mRNA表达水平呈正相关;Tim-3+CD4+CD25+Treg细胞与IL-10和TGF-β的水平均正相关。结论细粒棘球蚴感染者中Tim-3在CD4+CD25+Treg细胞上的过表达可能会促进CD4+CD25+Treg细胞的产生及其抑制功能的发挥,从而促使感染的持续性发展。     

CD39和CD73在CD4~+CD25~(high)Foxp3~+调节性T细胞发挥免疫抑制功能中的作用研究

本研究旨在检测正常人CD4~+CD25~(high)Foxp3~+Treg表面腺苷代谢分子的表达,并探索该分子在CD4~+CD25~(high)Foxp3~+Treg发挥抑制功能中的作用。采用流式细胞术检测10例健康献血者外周CD4~+CD25~(high) Foxp3~+Treg表面腺苷代谢分子CD39、CD73的表达,免疫组化染色检测了5例健康人皮肤中腺苷代谢分子CD39、CD73及Foxp3的表达。对5例健康献血者,流式细胞仪分选得到CD4~+CD25~(high)、CD4~+CD25~(high) CD39~+、CD4~+CD25~(high) CD39~+CD73~+共3部分细胞,采用3H-TdR掺入方法检测这3部分T细胞对CD4~+CD25-T细胞增殖的抑制作用。同样采用流式细胞术对10例斑块型银屑病患者外周CD4~+CD25~(high)Foxp3~+Treg表面CD39和CD73分子的表达进行分析。结果显示,正常人外周血CD4~+CD25~(high) Foxp3~+Treg与CD4~+CD25mid和CD4~+CD25-T细胞相比,CD39明显高表达(P<0.01),CD73低表达(P<0.05)。正常人皮肤中,CD39主要表达在表皮角质形成细胞,而CD73则主要分布于真皮中。CD39~+CD73~+Treg对CD4~+CD25-T细胞增殖的抑制最强(P<0.01)。银屑病患者外周血CD73~+CD4~+CD25~(high)Foxp3~+Treg比例较正常人明显降低(P<0.01)。由此推测腺苷代谢分子是CD4~+CD25~(high)Foxp3~+Treg发挥抑制功能的重要物质,并可能参与银屑病的发生。     

类风湿性关节炎患者外周血CD3~+CD8~+效应记忆T细胞和滤泡辅助性T细胞ICOS、 PD-1表达上调且与病情相关

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)和可诱导共刺激分子(ICOS)的表达,并确定其与疾病活动度之间的关系。方法募集RA患者30例、健康对照26例。流式细胞术检测外周血CD3~+CD8~+的效应记忆T细胞(Tem)和滤泡辅助性T(Tfh)细胞比例,而后检测淋巴细胞亚群中PD-1和ICOS阳性的细胞比例;通过Spearman相关性分析评估其与28个关节疾病活动度评分(DAS28)之间的相关性。结果与健康对照组相比, RA组患者外周血Tem和Tfh细胞绝对数增高, Tem和Tfh细胞的ICOS与PD-1表达增加; RA组患者外周血CD3~+CD8~+ Tem和Tfh细胞ICOS和PD-1表达水平与DAS28之间呈正相关。结论外周血CD3~+CD8~+ Tem和Tfh细胞PD-1和ICOS可能参与RA的发生发展,并可能作为RA活动度的评价指标。     

丙种球蛋白输注对川崎病患儿外周血CD4~+CD25~+调节T细胞与淋巴细胞亚群分布的影响

目的探讨丙种球蛋白输注对川崎病患儿外周血CD4~+CD25~+调节T细胞(Treg)与淋巴细胞亚群分布的影响及临床意义。方法流式细胞术检测40例川崎病患儿和30例体检健康儿童外周血中CD4~+CD25~+Treg细胞的表达水平以及108例川崎病患儿和41例体检健康儿童外周血中淋巴细胞亚群分布。ELISA法检测川崎病患儿血浆中TGF-β1浓度。108例川崎病患儿中有30例收集到对应的丙种球蛋白(IVIG)治疗后全血,流式细胞术检测CD4~+CD25~+Treg、TGF-β1及淋巴细胞亚群在川崎病患儿丙种球蛋白(IVIG)治疗前后表达水平的差异。结果与健康体检组相比,川崎病患儿CD4~+CD25~+Treg细胞及血浆TGF-β1的表达水平明显降低,外周血CD3+、CD8~+T细胞及NK细胞的表达水平明显降低,CD4~+T细胞、B细胞及CD4~+/CD8~+水平明显增高,差异均有统计学意义(均P0.01)。与IVIG治疗前相比,川崎病患儿IVIG治疗后外周血CD4~+CD25~+Treg细胞及血浆TGF-β1的表达水平明显增高(均P0.05),外周血CD3+、CD8~+T细胞及NK细胞的表达水平明显增高(均P0.05),CD4~+T细胞、B细胞及CD4~+/CD8~+水平明显降低(均P0.05)。治疗后患儿外周血CD4~+CD25~+Treg水平、血浆TGF-β1浓度及淋巴细胞亚群表达水平与健康对照相比无差异(P0.05)。结论 Treg细胞与淋巴细胞比例失常是导致儿童川崎病免疫紊乱的重要原因。检测CD4~+CD25~+调节T细胞及淋巴细胞亚群分布对评估川崎病患儿的细胞免疫状况,辅助诊断和指导治疗具有重要的临床价值。     

支气管哮喘患者外周血Th17、CD4~+CD25~+Treg细胞表达特征

目的:探讨外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在支气管哮喘患者中的表达特征。方法:41例慢性持续期哮喘患者,分为间歇-轻度组(n=23)和中重度组(n=18),行肺功能检查和哮喘控制问卷(ACQ)调查,20例正常人作为对照。通过流式细胞术检测外周血Th17和CD4+CD25+Treg细胞的比例。ELISA检测血浆以及植物血凝素刺激24小时后外周血单个核细胞(PBMC)上清液中的IL-17、IL-10、TGF-β水平。结果:中重度哮喘组外周血Th17细胞比例及血浆IL-17水平高于间歇-轻度哮喘和正常人组,而外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例及血浆IL-10、TGF-β水平则降低。中重度哮喘组PBMC上清液中IL-17水平增高。哮喘患者FEV1(%预计值)与Th17细胞及血浆IL-17表达成负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。ACQ平均得分与Th17细胞和血浆IL-17表达成正相关,与外周血CD4+CD25+Treg表达成负相关。结论:中重度哮喘中外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,哮喘的严重程度及症状控制与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。     

子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化

观察子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的数量变化,初步探讨其意义。采用流式细胞术检测20例健康对照者(对照组)及46例子宫内膜异位症患者(疾病组临床r-AFS分期:Ⅰ～Ⅱ期26例,Ⅲ～Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目,并计算CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞占CD4~+T淋巴细胞的百分率;分析不同分期子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化。结果显示,与健康对照组相比,疾病组PBMC中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T淋巴细胞的百分率及CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg绝对数均明显升高(P<0.01,P<0.05);疾病组中,Ⅲ～Ⅳ期的PBMC中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T淋巴细胞的百分比及CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg绝对值较Ⅰ～Ⅱ期均明显升高(P<0.01,P<0.05)。提示子宫内膜异位症患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数目和比例增多,可能存在自身免疫调节功能的紊乱,且与病程发展紧密相关。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+ CD25high CD127low 、CD8+ CD28- 调节性 T 细胞水平变化及临床意义

目的:探讨CD4~+CD25~(high)CD127~(low)、CD8~+CD28~-调节性T细胞(Treg)在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的表达及临床意义。方法:选取2017年9月～2019年3月于我院初次就诊的AS患者77例(非活动期47例、活动期30例)及健康对照者59例。流式细胞术(FCM)检测外周血CD4~+CD25~(high)CD127~(low)、CD8~+CD28~-Treg比例,流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-17A水平,分析Treg细胞与AS疾病活动度和临床炎症活动指标的相关性。结果:AS活动组CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Treg细胞比例低于AS非活动组和正常对照组(P0.05,P0.01);AS活动组和非活动组CD8~+CD28~-Treg细胞比例较健康对照组显著降低(P0.01)。AS活动组CD8~+CD28~+Tc细胞比例和CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-明显高于AS非活动组和健康对照组,且AS非活动组CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-高于健康对照组(P0.05)。与健康对照组相比,AS活动组和AS非活动组血清IL-6、TNF-α、IL-17A水平显著升高,且AS活动组血清IL-6、IL-17A水平显著高于AS非活动组(P0.05);3组志愿者IL-2水平差异无统计学意义(P0.05)。AS活动组血清IFN-γ水平显著高于AS非活动组和健康对照组(P0.05,P0.01),但AS非活动组与健康对照组差异无统计学意义(P0.05)。AS患者CD4~+CD25~(high)CD127~(low)Treg细胞比例与BASDAI、ESR、Hs-CRP呈负相关(r=0.654、0.517、0.577,P0.01)。CD8~+CD28~+Tc细胞比例及CD8~+CD28~+/CD8~+CD28~-与BASDAI呈正相关(r=0.276、0.246,P0.05)。结论:降低AS患者外周血CD4~+CD25~(high)CD127~(low)和CD8~+CD28~-Treg细胞比例、提高炎症细胞因子水平可能在AS疾病发生发展中起重要作用。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在子宫内膜癌患者外周血中的表达及意义

探讨在子宫内膜癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况及意义。采用流式细胞术检测84例术前子宫内膜癌患者及40例子宫肌瘤患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+细胞比例及Foxp3平均荧光强度,采用qRT-PCR检测两组患者外周血中Foxp3的mRNA表达情况,同时采用ELISA检测外周血中TGF-β1和IL-17含量。与子宫肌瘤组比较,子宫内膜癌患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例虽略有升高但没有统计学意义(P=0.08),而CD4+CD25+细胞内Foxp3的平均荧光强度明显升高(P<0.001)。子宫内膜癌患者外周血中Foxp3的mRNA表达要明显多于子宫肌瘤组(P<0.001)。子宫内膜癌患者外周血中TGF-β1、IL-17的含量要多于子宫肌瘤组。子宫内膜癌患者外周血中的Foxp3+Treg细胞表达增多,这些细胞可能通过增加细胞因子TGF-β和IL-17的分泌从而调节机体对肿瘤细胞免疫反应的方向,最终促进子宫内膜癌的发生和发展。     

CD4+ CD25high Treg和CD4+ CD25lowT细胞及PD-1分子在SLE和RA患者外周血中的表达分析

目的:分析SLE和RA患者外周血CD4+CD25highTreg和CD4+CD25low T细胞的数量变化以及两群细胞表面协同刺激分子PD-1分子的表达情况,初步探讨PD-1表达异常在SLE和RA患者细胞免疫失调中的意义.方法:流式细胞术(FCM)检测CD4+CD25highTreg和CD4+CD25lowT细胞的比率以及PD-1的表达率.结果:与健康对照组相比,SLE和RA患者组外周血CD4+CD25highTreg的比率均明显降低(P<0.05);两疾病组间相比,SLE组CD4+CD25highTreg的比率更低(P<0.05).RA患者组CD4+CD25highTreg表面PD-1的表达率明显低于健康对照和SLE组(P<0.05),而SLE组该指标与健康对照无统计学差异(P>0.05).CD4+CD25lowT细胞以及该群细胞上PD-1的表达率在三组间无统计学差异.结论:外周血CD4+CD25highTreg生成不足导致其对效应性T细胞的抑制能力减弱是SLE和RA患者的共同特征;PD-1表达降低可能是RA患者CD4+CD25high曲Treg免疫调节紊乱的重要机制,而在SLE患者PD-1分子并不是影响免疫稳态的主要因素.     

特发性血小板减少性紫癜患者CD4~+ CD25~+ Treg细胞和TGF-β1的相关研究

目的:研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平,探讨二者在ITP发病机制中的作用。方法:流式细胞术(FCM)检测31例ITP患者及25例健康志愿者外周血Treg细胞的数量,ELISA方法检测血清中TGF-β1的含量,并进行相关性分析。结果:ITP患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞数量显著低于正常对照组(P0.05),血清TGF-β1的含量也较正常对照组明显减低(P0.05),差异有统计学意义。但CD4+ CD25+调节性T细胞比例与TGF-β1的含量无相关性(P0.05)。结论:ITP患者CD4+ CD25+调节T细胞数量减少与ITP的细胞免疫失调有关,CD4+ CD25+调节性T细胞和TGF-β1在ITP中作用机制复杂,还需要进一步研究。     

CD4~+Foxp3~+调节性T细胞在恶性血液病中的变化及机制研究

目的:分析CD4+Foxp3+调节性T细胞(CD4+Foxp3+Treg)在恶性血液病患者外周血的比例变化,探讨CD4+Foxp3+Treg参与恶性血液病发病的可能机制。方法:用流式细胞仪检测急性白血病、淋巴瘤患者及健康对照外周血CD4+Foxp3+Treg细胞的比例;然后用小鼠的淋巴瘤细胞EL-4和红白血病瘤细胞FBL3的培养上清液与C57BL/6小鼠脾细胞共同培养72小时,RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达。结果:恶性血液病患者外周血CD4+Foxp3+Treg数量显著高于正常对照(14.9±2.92)%、(5.68±1.21)%,P<0.001。小鼠EL-4和FBL3细胞上清液均能够使小鼠脾细胞Foxp3 mRNA表达水平明显增高。结论:恶性血液病患者CD4+Foxp3+Treg比例增高可能导致抗肿瘤免疫功能低下,此外肿瘤细胞分泌的可溶性物质使Foxp3表达增高,增强了CD4+Foxp3+Treg细胞的抑制功能,使肿瘤易于生长和转移。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4~+CD25~+Treg与CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群的相关研究

目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量和CD4+CD8+T淋巴细胞亚群分布,两者之间相关性及与HBV的相关性。方法:采用流式细胞术检测50例慢性乙型肝炎患者和20例健康对照者外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达及CD3/CD4/CD8 T淋巴细胞亚群,荧光定量PCR法检测HBV DNA含量。结果:慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25highTreg明显高于健康对照组(P0.01),且随HBV DNA载量增加,患者外周血中CD4+CD25highTreg细胞的水平逐渐升高。慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞也相应增高,且与CD4+CD25highTreg细胞的变化成正相关(r=0.890,P0.001)。与健康对照组比较,患者组CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值均降低,而CD3+T细胞和CD8+T细胞百分率差异无显著性(P0.05)。CD4+CD25highTreg细胞与HBV DNA取对数后成正相关(r=0.782,P0.001),与谷丙转氨酶(ALT)成正相关(r=0.432,P0.005);与CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平及CD4+/CD8+比值均无相关性(P0.05)。CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及CD4+/CD8+比值与HBV DNA载量之间亦无相关性(P0.05)。结论:慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞增高,且与HBV的复制水平及ALT增高具有一致性,而T细胞亚群是否可作为监测CHB患者免疫状态的指标需进一步探讨。     

芳香烃受体在类风湿关节炎患者外周血CCR6~+CD4~+T细胞的表达及意义

目的检测类风湿关节炎(RA)患者外周血CCR6+CD4+T细胞芳香烃受体(AhR)水平,探讨AhR在RA发病机制中的意义。方法采用流式细胞术测定33例RA患者及14例健康对照者外周血CCR6+CD4+T细胞中AhR阳性细胞比例,分析其与RA患者临床指标的关系。结果 1)RA患者组外周血单个核细胞(PBMCs)中CCR6+CD4+T细胞占(10.75±2.92)%,高于健康对照组(4.96±2.28)%,差异有统计学意义(t=6.581,P0.01)。2)RA患者组内外周血CCR6+CD4+T细胞中AhR阳性细胞所占比例(46.02±14.68)%,高于CCR6-CD4+T细胞(21.62±6.94)%和PBMCs(34.22±10.33)%中AhR阳性细胞占比,差异均有统计学意义(z=-6.432,P0.01;t=-3.776,P0.01)。3)RA患者组外周血CCR6+CD4+T细胞中AhR阳性细胞所占比例(46.02±14.68)%,高于健康对照组(23.18±5.62)%,差异有统计学意义(z=-4.909,P0.01)。4)相关性分析:RA患者组外周血CCR6+CD4+T细胞中AhR阳性细胞所占比例与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体、DAS28评分、疾病病程均无相关性(P均0.05)。结论 AhR阳性细胞在RA患者外周血CCR6+CD4+T细胞中比例高,可能参与了RA发病,但其水平高低不能反映RA疾病活动程度。     

白细胞介素-35在Vogt-小柳原田综合征患者中的表达及其对CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞的调控作用

目的观察白细胞介素(IL)-35在Vogt-小柳原田(VKH)综合征患者外周血中的表达及其对CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)调节性T细胞(Treg)功能的影响。方法收集37例VKH综合征患者(活动期16例,静止期21例)和11例健康对照者(healthy control, HC),分离血浆和外周血单个核细胞,酶联免疫吸附试验检测血浆IL-35水平,流式细胞术检测CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg比例。分选CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg,检测Treg分泌IL-35的水平和Treg中p35、EBI3 mRNA的相对表达量。使用重组人IL-35刺激分选的Treg后与自体CD4+CD25-T细胞共培养,检测细胞增殖和分泌细胞因子的水平。结果活动期VKH综合征患者血浆IL-35水平低于静止期患者和HC(P0.000 1);活动期VKH综合征患者外周血CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg的比例(5.34±0.96%)也低于静止期患者和HC(P0.01)。活动期VKH综合征患者分选的CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg分泌IL-35的水平(P=0.003 6)以及Treg中p35和EBI3 mRNA的相对表达量(P0.000 1)均显著低于HC。重组人IL-35刺激不影响活动期VKH综合征患者CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg的增殖(P=0.323),但可增强Treg的免疫抑制功能,主要表现为共培养系统细胞增殖的下降(P=0.000 5),抑制性细胞因子IL-10和IL-35的分泌增加(P0.001),而促炎因子IFN-γ和TNF-α的水平降低(P0.05)。活动期VKH综合征患者接受糖皮质激素治疗后,血浆IL-35水平和外周血CD4~+CD25~+CD127~(dim/-)Treg比例均显著升高(P0.05)。结论 IL-35和Treg在VKH综合征患者中水平降低,IL-35可调控Treg的免疫抑制功能,参与VKH综合征的发病。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血中CD4+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达、功能及意义.方法 采用流式细胞术检测78例AS患者和50例健康志愿者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中β型转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平.从患者外周血单个核细胞中磁珠分选出CD4+CD25+ Treg细胞,混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture, MLC)分析其免疫抑制功能.结果 AS活动期患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+ T淋巴细胞的百分比为(4.36±1.21)%,MLC中CD4+CD25+ Treg抑制同种异体T淋巴细胞增殖功能低下,与其Treg分泌TGF-β减少相关,CD4+ Treg含量及功能均低于健康志愿者(P<0.05).AS患者外周血中CD4+CD25+CD127lo/- Treg水平与TGF-β呈正相关,与TNF-α呈负相关.结论 AS患者外周血中Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,可能参与AS免疫发病.     

CD4~+CD25~(high) Foxp3~+调节性T细胞在新生儿脐血及成人外周血的比较

目的:检测新生儿脐血及成人外周血中CD4+CD25~(high) Foxp3+调节性T细胞(Treg)的比例,探讨Treg在新生儿脐血中的临床意义.方法:采用流式细胞术(FCM)检测30例新生儿脐血单个核细胞中CD4+T细胞、CD4+CD25+/CD4~+、CD4~+CD25~(high) /CD4~+T细胞百分比以及绝对计数,进一步分析CD4~+CD25~+及CD4~+CD25~(high) T细胞中Foxp3~+的百分比,以及利用RT-PCR方法检测Foxp3 mRNA表达水平,并与27例成人外周血单个核细胞(PBMC)中的上述指标进行比较.结果:与成人PBMC比较,新生儿脐血单个核细胞中CD4~+T细胞百分比及绝对计数均增高(P＜0.01＝;CD4~+CD25~+/CD4~+及CD4~+CD25~(high) /CD4~+百分比减低(P＜0.05＝,但绝对计数增高(P＜0.01＝;新生儿脐血CD4~+CD25~+ 及CD4~+CD25~(high) T细胞中Foxp3~+表达较成人外周血减低(P＜0.01＝;新生儿脐血Foxp3 mRNA表达水平亦较成人外周血减低(P＜0.05＝.结论:新生儿脐血中存在单纯且数量较多的CD4~+CD25~(high) 调节性T细胞,但Foxp3的表达水平低于成人外周血,它们可能具有独特的免疫调节作用,但功能尚未成熟.     

乙肝病毒感染者外周血中CD4~+Foxp3~+T细胞亚群的表达及临床意义

目的研究外周血中3个CD4~+Foxp3~+T细胞亚群在乙肝病毒感染者外周血中频率及其可能的临床意义。方法分离来自无症状携带者(AsC)、慢性乙型肝炎患者(CHB)以及健康对照(Health)的外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术分析PBMC中3个CD4~+Foxp3~+T细胞亚群占CD4~+T细胞的比例,并分析其与临床参数间的相关性,同时将CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg作对比分析。结果CD4~+CD45RA~+Foxp3~(lo)(静息态Treg)频率在各实验组间无显著差别;CD4~+CD45RA~-Foxp3~(lo)(非Treg)频率在CHB组和AsC组间无明显差别,但两组相对Health组明显升高;CHB组CD4~+CD45RA~-Foxp3~(hi)(活动态Treg)明显高于AsC组和Health组。在CHB和AsC病例中活动态Treg与HBV病毒载量,HBeAg状态均无显著相关性。在CHB病例中活动态Treg与ALT水平不相关。结论相当比例的不具抑制功能的Foxp3~+T细胞可能混杂在CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg的分析中,因此活动态Treg比CD4~+CD25~...     

GD患者外周血CD4+CD28-T细胞亚群的表型特征及临床意义

检测Graves病(GD)患者外周血CD4~+CD28-T细胞水平及其表面CD45RO/CD45RA及ICOS的表达,探讨CD4~+ CD28-T细胞亚群在GD免疫致病机制中的作用。采用三色荧光抗体染色及流式细胞术检测了42例初发GD患者和30例健康者外周血中CD4~+CD28-T细胞的百分率及其表面CD45RO/CD45RA和ICOS表达水平,同时检测其甲状腺功能并进行相关性分析。结果GD患者外周血中CD4~+CD28-T细胞百分率明显高于健康对照组,并高表达ICOS分子,与FT3水平显著正相关;与健康对照组相比,GD患者CD4~+CD28~-CD45RO~+T细胞百分率也显著增高,而CD4~+CD28~-CD45RA~+T细胞呈下降趋势,FT3、FT4水平与CD4~+CD28-T细胞表面CD45RO的表达率呈正相关,而FT3水平与CD45RA表达呈负相关。结论GD患者外周血CD4~+CD28~-T细胞异常增高,表面高表达ICOS分子,具有记忆性细胞的表型特征,与甲状腺功能异常有一定的相关性,CD4~+CD28-T细胞可能是参与GD免疫病理反应的自身反应性T细胞。