循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路影响机制研究

目的:探讨循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路的作用及机制。方法:50只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、急性痛风性关节炎模型组(B)、常规中药治疗组(C)、常规中药治疗联合引经药组(D)、秋水仙碱组(E),共5组,每组10只,正常对照组采用采用右侧大鼠第1跖趾关节处注射生理盐水,其他实验组在相同部位注射尿酸钠溶液方法建立急性痛风性关节炎模型,所有分组大鼠共灌胃给药7 d,1日2次,灌胃3 d后予以动物模型制备,后继续给药至第7 d处死。期间进行一般观察,关节局部肿胀测定,步态观察。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,荧光定量RT-PCR分析Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA转录水平,HE染色观察组织病理学改变,免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果:与正常对照组(A)相比急性痛风性关节炎模型组(B)关节局部肿胀明显,跛行步态,血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量升高P0.05,Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA出现较高转录水平P0.05,HE染色观察组织见大量炎性细胞增生,浸润。免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达升高P0.05。常规中药治疗联合引经药组(D)相对于其他用药组具有减少关节局部肿胀,减轻跛行步态,血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量降低P0.05,Toll样受体4(TLR4)mRNA、NF-κB p65mRNA转录水平降低P0.05,HE染色观察组织见炎性细胞增生,浸润减少。免疫组化法检测Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65的表达降低P0.05,但相对于秋水仙碱组(E)血清中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量降低无差异性P0.05,其中秋水仙碱组(E)的白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达及免疫组化法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的表达降低程度较常规中药治疗联合引经药组(D)幅度大P0.05。结论:循经论治法对急性痛风性关节炎大鼠的Toll样受体4/NF-κB信号通路的具有一定的作用。     

黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞株分泌Toll样受体及相关免疫因子的影响

目的:通过研究黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞中死亡因子受体(Fas)的蛋白表达及分泌的免疫因子Toll样受体2(TLR2),Toll样受体4(TLR4),白细胞介素-10(IL-10),癌基因C-Raf转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨黔产莪术油对肿瘤细胞的免疫效应。方法:将水蒸气蒸馏提取的黔产莪术油,配置成空白组,黔产莪术油80,120,160,200 mg·L-1组,作用于直肠癌细胞SW1463细胞24 h后,采用免疫酶联免疫吸附测定(enzyme Linked immunosorbent assay,ELISA)检测不同质量浓度黔产莪术油对IL-10水平的影响,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Fas,TLR2,TLR4,C-Raf,TGF-β1蛋白表达对直肠癌细胞SW1463的增殖抑制作用。结果:ELISA检测发现,与空白组比较,莪术油组IL-10水平随着药物浓度的升高表达降低(F=23.11,P0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,莪术油组随着药物浓度的升高,TLR2,TLR4,C-Raf蛋白表达显著降低(P0.01);Fas,TGF-β1蛋白表达明显降低(P0.05)。结论:黔产莪术油抑制SW1463细胞的作用免疫作用机制可能与下调Fas/Fas L通路有关,使得Toll样受体TLR2,TLR4蛋白表达下调,导致相关因子TGF-β1的表达下调,从而使得细胞凋亡,起到免疫增强作用。     

大承气汤对急危重症患者急性肠功能障碍的影响及TLR/MyD88/NF-κB-p65信号通路调控机制研究

目的观察大承气汤对急危重症患者急性肠功能障碍的影响并探讨其对Toll样受体(TLR)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB-p65(NF-κB-p65)信号通路调控机制。方法 108例患者随机分为观察组与对照组各54例。对照组予以西医标准化方案治疗,观察组在对照组基础上加用大承气汤治疗。比较两组临床疗效及胃肠功能改善情况,治疗前后测定外周血中TLR/MyD88/NF-κB-p65信号通路相关因子水平,并与54例健康体检者(健康组)进行比较。结果观察组首次排便时间、首次排气时间、肠鸣音恢复时间、住院时间均短于对照组(P 0.05);观察组的28 d多系统器官功能衰竭(MSOF)发生率显著低于对照组(P 0.05),但两组28 d死亡率比较差异无统计学意义(P 0.05)。治疗第3、7、14日,观察组血清Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、MyD88、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65及其下游炎症细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著低于对照组(P 0.05),但两组治疗前后各指标水平均显著高于健康组(P 0.05)。结论大承气汤可有效防治急危重症患者急性肠功能障碍并改善临床预后,其机制可能与调节TLR/MyD88/NF-κB-p65信号通路过度激活及其下游炎症因子有关。     

基于Toll样受体信号通路探讨脑心通胶囊“脑心同治”的作用机制北大核心CSCD

以Toll样受体(TLR)信号通路为切入点,探讨脑缺血状态下脑心通胶囊“脑心同治”的作用机制。将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通组和阳性药组。模型组、脑心通组和阳性药组分别采用大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。采用Bederson评分标准进行神经功能评分;氯化三苯四氮唑(TTC)法测定脑梗死率;干湿重法检测脑组织水肿情况;苏木素-伊红(HE)染色和dUTP原位末端转移酶标记(TUNEL)染色观察并统计心肌组织凋亡;测定血液中的心肌酶谱数据。利用系统药理学方法预测机制,并用Western blot法检测大鼠大脑皮层和心脏中的α-干扰素(IFN-α)、干扰素调节因子3(IRF3)、干扰素调节因子7(IRF7)、Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体9(TLR9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)共8个Toll样受体信号通路相关蛋白的表达。与模型组相比,脑心通组大鼠脑梗死率、神经功能评分、脑组织含水量显著下降,同时大鼠心肌细胞凋亡率下降,血液中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(CK)、肌酸激酶(LDH)含量降低。系统药理学结果和前期研究表明,Toll样受体信号通路在免疫炎症反应中发挥重要作用,研究该通路及相关蛋白有助于阐明“脑心同治”机制。Western blot结果表明在脑缺血状态下,脑心通胶囊显著抑制大鼠大脑皮层以及心脏中IRF3、IRF7、TLR2、TLR7和TNF-α的表达。脑缺血对心脏的相关功能有一定影响,Toll样受体信号通路是脑心通胶囊“脑心同治”的作用途径之一。     

甲连盆腔胶囊对盆腔炎性后遗症大鼠子宫病理形态及TLR2、TLR4-NF-κB信号通路的影响

目的 观察甲连盆腔胶囊对盆腔炎性后遗症大鼠子宫组织病理结构及Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)-核因子kappa B(NF-κB)信号通路相关蛋白的影响.方法 选取雌性SD大鼠60只,随机分为空白组、假手术组、模型组、甲连盆腔胶囊组、妇科千金胶囊组,每组12只.正常组不做处理,假手术组仅开关腹,...     

复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响

目的:探讨复方甘草酸苷对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体介导的NF-κB信号通路的影响。方法:健康SD大鼠49只取10只作为正常对照组(A组),其余39只大鼠采用TNBS/乙醇联合建模法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,39只大鼠再随机平分为模型对照组(B组),柳氮磺吡啶组(C组)、复方甘草酸苷组(D组),分别给予生理盐水、柳氮磺吡啶与复方甘草酸苷干预处理。结果:肉眼与病理学观察发现大鼠溃疡性结肠炎模型造模成功。复方甘草酸苷组的血清TLR4与NF-κB p65表达量明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组及正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。正常对照组的NF-κB p65与TLR4蛋白阳性表达率明显低于模型对照组,与柳氮磺吡啶组与复方甘草酸苷组对比无明显差异(P0.05)。Pearson相关分析显示NF-κB p65与TLR4在溃疡性结肠炎模型中的表达呈正相关关系(P0.05)。结论:Toll样受体介导的核因子-κB信号通路在溃疡性结肠炎的发生发展中起重要作用,复方甘草酸苷可阻断该通路中TLR与NF-κB p65的表达,进而为临床用药提供理论依据。     

松针对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织TLR3、TLR4表达的影响

目的:通过观察松针对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织Toll样受体3(TLR3)及Toll样受体4(TLR4)蛋白表达的影响,探讨其治疗呼吸道合胞病毒感染的可能免疫调节机制。方法:采用美国癌症研究所(Institute of Cancer Research)培育的ICR小鼠60只随机分为6组:正常对照组、模型组、利巴韦林组、松针高剂量组、中剂量组呼、低剂量组,呼吸道合胞病毒滴鼻后给药,观察肺组织TLR3及TLR4蛋白的表达。结果:松针高剂量组可降低小鼠肺组织TLR3及TLR4蛋白的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:松针可抑制呼吸道合胞病毒感染小鼠肺组织中TLR3及TLR4蛋白的表达,可能为其免疫调节作用的机制之一。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠肝组织TLR2、TLR4和TNF-α mRNA表达的影响

目的:探讨解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭(ALF)大鼠Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)及细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达的影响及其拮抗肝衰竭的机制。方法:将120只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、中药组和阳性对照组,各30只。一次性腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)构建急性肝衰竭大鼠模型。观察各组大鼠存活率,检测各组大鼠血清ALT、AST水平,RT-PCR法检测肝组织中TLR2、TLR4和TNF-αmRNA的表达。结果:(1)与模型对照组比较,中药组及阳性对照组均能提高肝衰竭大鼠48 h的存活率(均P0.05),虽然中药组48 h存活率高于阳性对照组,但差异无统计学意义(P=0.464);(2)模型对照组大鼠血清AST、ALT水平均高于空白对照组(均P=0.000),中药组和阳性对照组均低于模型对照组(均P0.000),虽中药组与阳性对照组AST、ALT比较差异无统计学意义(均P0.05);(3)RT-PCR结果显示,中药组和阳性对照组TLR2、TLR4、TNF-αmRNA表达较模型对照组明显降低(均P=0.000),与阳性对照组比较,中药组TLR2、TLR4、TNF-αmRNA表达差异无统计学意义(均P0.05)。结论:解毒化瘀颗粒可通过降低TLR2、TLR4、TNF-αmRNA的表达,从而降低促炎因子的生成、提高肝衰竭大鼠存活率和拮抗肝衰竭。     

利用知识发现工具Arrowsmith探讨金荞麦及其有效成分与IBS的相关性

目的:探讨金荞麦及其有效成分治疗肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)的可能机制。方法:非相关文献知识工具ARROWSMITH软件。结果:金荞麦及其有效成分在分子或细胞水平对Toll样受体(toll-like receptor,TLR)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶(COX-2)相关因子具有调节作用,而上述指标的不同表达同时也是造成IBS的重要相关因素。结论:金荞麦及其有效成分可能通过下调病变肠道细胞TLR4、降低TNFα的分泌和释放、降低IBS患者异常高表达的VEGF、降低IBS患者肠道组织COX-2的表达等环节发挥治疗IBS的作用,基于非相关文献知识发现法能为实验室的验证性研究提供参考。     

金荞麦提取物对肠易激综合征大鼠肥大细胞,PAR-2,SP的影响

目的:观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)模型大鼠内脏高敏感的作用以及对肥大细胞(MC),蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP)的影响。方法:将清洁级新生雄性乳大鼠采用新生期母婴分离、乙酸灌肠、鸡卵清白蛋白腹腔注射的复合造模方法制备IBS内脏高敏感模型,大鼠随机分为正常组(生理盐水),模型组(生理盐水),Fag低、中、高剂量组(0.14,0.42,1.26 g·kg-1),酮替芬组(0.18 mg·kg-1),每组10只,连续灌胃14 d。采用腹壁撤退反应(AWR)评估大鼠内脏敏感性,免疫组化法(immunohistochemistry)检测大鼠结肠MC数量、脱颗粒程度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PAR-2蛋白表达,免疫组化、酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠结肠SP水平。结果:与正常组比较,模型组20,40,60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)压力下AWR评分明显升高,结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显上升(P0.05);与模型组比较,Fag中剂量组(20,40,60 mm Hg压力下),Fag高剂量组(20,40 mm Hg压力下)的AWR评分,远端结肠MC数量,脱颗粒程度,PAR-2,SP表达明显下降(P0.05);与酮替芬组比较,Fag高剂量组AWR评分(40 mm Hg压力下),SP水平降低(P0.05)。结论:Fag能降低IBS模型大鼠内脏敏感性,其机制与抑制MC数量及活化脱颗粒程度,下调PAR-2受体,降低SP有关,并且镇痛作用优于酮替芬。     

CaM/CaMKⅡ在肠易激综合征大鼠脑肠互动中的表达及大建中汤干预效应研究＊

目的研究大建中汤对肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠脑肠互动中钙调蛋白(Calmodulin,CaM)信号通路关键基因表达及大建中汤干预作用。方法 IBS内脏痛将采用母婴分离、鸡卵清白蛋白腹腔注射、乙酸灌肠等方法制备,大鼠随机分为正常对照组(生理盐水),模型组(生理盐水),大建中汤高、中、低剂量(2.16、1.08、0.62 g·kg^-1)治疗组,匹维溴铵(13.39mg·kg^-1)对照组。每组8只,连续灌胃14天。评估大鼠内脏敏感性采用腹壁撤退反应(Abdominal withdrawal reflex,AWR);采用HE染色方法观察各组大鼠结肠黏膜形态;采用Western Blot、RT-PCR等技术分别检测大鼠下丘脑、结肠CaM和CaMKⅡ表达水平,同时探讨大建中汤对IBS内脏痛大鼠的干预效应机制。结果与正常组比较,模型组60、40、2.0 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下AWR评分明显升高,下丘脑、结肠组织中CaM和CaMKⅡ表达升高(P <0.01);与模型组比较,大建中汤高剂量组(40、2.0 mmHg压力),大建中汤中剂量组(60、40、2.0 mmHg压力)的AWR评分降低(P <0.05),结肠、下丘脑组织中CaM和CaMKⅡ表达明显降低(P <0.01)。结论脑肠互动中CaM信号传导通路关键基因CaM、钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)与IBS内脏痛有关,大建中汤通过影响其表达对肠易激综合征内脏痛起到干预作用。     

黄连-干姜提取物对溃疡性结肠炎小鼠结肠上皮TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察中药黄连、干姜的主要成分黄连素和6-姜烯酚对溃疡性结肠炎小鼠结肠上皮细胞炎症信号通路Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)的影响。方法:50只昆明种小鼠随机分为正常组,模型组,黄连素组(100 mg·kg^-1),6-姜烯酚组(100 mg·kg^-1),6-姜烯酚合黄连素组(200 mg·kg^-1),每组10只。采用2%葡聚糖硫酸钠口服2周建立溃疡性结肠炎小鼠模型,各组给予相应剂量的药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,给药20 d后取血清及结肠组织样本,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.01),血清IL-1β,TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,6-姜烯酚组,黄连素组,6-姜烯酚合黄连素组小鼠结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.01),血清IL-1β,TNF-α含量显著降低(P<0.01);三组间比较,6-姜烯酚合黄连素组作用力最强(P<0.01)。结论:6-姜烯酚、黄连素均能够抑制结肠组织炎症,减轻炎症损伤,治疗溃疡性结肠炎,黄连素和6-姜烯酚联合应用有显著的协同增效作用,其机制与抑制TLR4/NF-κB通路的过度活化进而调节肠道非可控性炎症有关。     

Comparative study of electroacupuncture and moxibustion in influencing Tianshu (ST 25) regions mast cells in visceral hyperalgesia rats

Objective

To evaluate and compare electroacupunctures (EA) with different parameters and moxibustion at different temperatures influencing the activation of mast cells (MC) in Tianshu (ST 25) regions of visceral hyperalgesia model rats.

Methods

Rats (except for model group) respectively accepted 1 mA or 3 mA EA or moxibustion at 43 °C or 4 °C to stimulate Tianshu (ST 25) points after randomization of the fifty visceral hyperalgesia model rats, and then were compared with that in model and normal groups. Number, degranulation numbers, degranulation rates in Tianshu (ST 25) regions MC of rats in each group were observed using toluidine blue staining. Abdominal withdrawl reflex (AWR) score was used to evaluate the rat visceral hyperalgesia reactions.

Results

Compared with the normal group and the model group, MC numbers (P<0.05, P<0.01, P<0.01, P<0.01), degranulation numbers and degranulation rates (P<0.01, P<0.01, P<0.05, P<0.01) of Tianshu (ST 25) MC in regions tissues in 43 °C and 4 °C moxibustion groups, and 1 mA and 3 mA EA groups all increased significantly. Compared with the model group, AWR scores were significantly lower in 43 °C and 4 °C moxibustion groups, and 1 mA and 3 mA EA groups under the stimulation of 20 mmHg, 40 mmHg, 0 mmHg or 80 mmHg colorectal distension (CRD) (P<0.05 in 1 mA and 3 mA EA groups under the stimulation of 20 mmHg, P<0.01 in the other groups). AWR scores in 43 °C and 4 °C oxibustion groups under the stimulation of 20 mmHg, 40 mmHg, 0 mmHg or 80 mmHg CRD were not significantly different from those in the normal group (all P>0.05); AWR scores in 1 mA EA group under the stimulation of 0 mmHg or 80 mmHg were significantly higher than that in the normal group (P<0.01); AWR score in 3 mA EA group under the stimulation of 0 mmHg was significantly higher than that in the normal group (P<0.01), and AWR scores in 3 mA EA group under the stimulation of 20 mmHg or 80 mmHg were also higher than that in the normal group (P<0.05). AWR scores were higher in 1 mA EA group under the stimulation of 40 mmHg or 80 mmHg than that in 4 °C moxibustion group (P<0.05); AWR score was higher in 3 mA EA group under the stimulation of 40 mmHg than that in 4 °C moxibustion group (P<0.05).

Conclusion

There are differences among EA of different parameters and moxibustion of different temperatures in activating on Tianshu (ST 25) regions MC of visceral hyperalgesia model rats, as well as in improving the visceral hyperalgesia reaction. The effect of 4 °C moxibustion is the most significant.

     

肠康方对腹泻型肠易激综合征大鼠SP,VIP的影响

目的:观察肠康方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆P物质(SP)和大鼠组织血管活性肠肽(VIP)含量的变化,探讨肠康方对腹泻型肠易激综合征的治疗效果。方法:将60清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、马来酸曲美布汀组,肠康方低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组均采用番泻叶刺激加束缚应激的方法 4周,复制腹泻型肠易激综合征模型,造模成功后开始给药,马来酸曲美布汀组ig马来酸曲美布汀15 mg·kg-1,肠康方低、中、高剂量组分别予以肠康方1.1,2.2,4.4g·kg-1ig给药,正常及模型组ig等体积的生理盐水,每日1次,连续给药3周。给药结束后,进行腹壁撤退反射(AWR)评分,并采集腹主动脉血和盲肠上结肠组织,用酶联免疫分析法测定血浆SP和结肠组织VIP的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠AWR评分,血浆SP水平明显上升(P0.01),结肠VIP含量显著下降(P0.05);与模型组比较,肠康方高、中、低剂量组AWR评分明显降低(P0.01,P0.05),血浆SP水平明显降低(P0.05),肠康方高、中剂量组结肠VIP含量明显升高(P0.01,P0.05)。结论:肠康方可能通过改善内脏高敏感性、降低血浆中SP的含量和升高结肠黏膜中VIP的含量,治疗腹泻型肠易激综合征。     

艾灸“大肠俞”对大鼠内脏痛敏及骨髓细胞瞬时感受器电位香草酸受体亚型1表达的影响

目的:运用大鼠新生期结直肠扩张(CRD)形成成年内脏痛敏模型,探讨内脏痛敏及艾灸疗效与骨髓细胞瞬时感受器电位香草酸受体亚型(TRPV)1表达之间的关系。方法:新生SD雄性大鼠自出生8d后进行CRD刺激建立内脏痛敏模型。8周后对模型组和对照组进行"大肠俞"模拟热敏灸,灸前后CRD刺激,记录腹部撤回反射(AWR)评分及测定痛阈值,结束后90min内取各组大鼠骨髓细胞运用RT-PCR测TRPV 1mRNA表达。结果:①模型组AWR评分明显高于对照组(P<0.01),痛阈明显低于对照组(P<0.01)。②模型组艾灸后的AWR评分明显低于艾灸前(P<0.05,P<0.01),痛阈明显高于艾灸前(P<0.01)。对照组艾灸后40、60、80mmHg的AWR评分明显低于艾灸前(P<0.01),痛阈明显高于艾灸前(P<0.05)。③对照组TRPV 1mRNA相对表达量较低(0.655±0.400),艾灸对照组TRPV 1mRNA相对表达量降低(0.551±0.257,P>0.05),艾灸模型组TRPV 1mRNA相对表达量(2.423±2.730)较对照组、艾灸对照组略高(P>0.05),模型组TRPV 1mRNA相对表达量(6.550±2.308)明显高于对照组、艾灸对照组、艾灸模型组(P<0.01)。结论:新生期CRD可形成内脏痛敏,骨髓细胞TRPV 1mRNA表达明显增加。艾灸"大肠俞"明显减轻内脏痛敏,可减少骨髓细胞TRPV 1mRNA表达。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路影响

目的探讨艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路的影响。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只。模型组和艾灸组大鼠于左后肢足趾皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)制备佐剂性关节炎(AA)模型;造模成功后,艾灸组取左侧足三里施灸;正常组和模型组仅常规饲养,不做任何干预。3组均于15 d后用足趾容积测量仪测量大鼠左后肢足趾容积。用苏木精-伊红(HE)染色观察左后肢足趾关节滑膜组织形态,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠左后肢足趾关节滑膜组织白细胞介素(IL)-1b和肿瘤坏死因子(TNF)-a的浓度。用荧光定量PCR法(RT-q PCR)检测左后肢足趾关节滑膜组织Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-kB信号通路中髓样分化因子(Myd)88、TLR4、NF-kB p65、NF-kB抑制因子a(IkBa)、IkB激酶复合物b(IkKb)的m RNA表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠足趾容积显著升高(P<0.01),滑膜细胞出现增生,组织中可见大量炎细胞浸润,滑膜表面细胞排列不整齐,滑膜组织IL-1b和TNF-a浓度升高(P<0.01),而且Myd88、TLR4、NF-kB p65、IkBa、IkKb的m RNA表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠足趾容积和滑膜组织上述各项指标水平均明显降低(P<0.01)。结论艾灸能够通过抑制TLR4/NF-kB信号通路降低AA模型大鼠滑膜炎症反应,缓解足趾肿胀。     

芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺炎症损伤的作用

目的 观察芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺炎症损伤及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响.方法 48只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、硒酵母组(36μg/kg)及芪箭消瘿方低(1.8 g/kg)、中(3.6 g/kg)、高(7.2 g/kg)剂量组,每组8只.采用高碘水喂养联合皮下注射猪...     

电针对肥胖胰岛素抵抗大鼠下丘脑TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的:观察电针对肥胖胰岛素抵抗(OIR)大鼠下丘脑Toll样受体4(TLR4)/核因子κB抑制剂α(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨电针治疗OIR的机制.方法:从42只Wistar雄性大鼠中随机挑选8只作为正常组,剩余大鼠给予高脂饲料喂养8周,建立OIR大鼠模型.将造模成功的16只大鼠随机分为...     

电针对IBS内脏痛大鼠脊髓GFAP、P2X3受体的调节作用＊

目的 探讨脊髓星形胶质细胞和P2X3受体在电针缓解肠易激综合征（Irritable Bowel Syndrome，IBS）大鼠内脏痛的调节作用机制。方法 采用直结肠球囊扩张（Colorectal dilatation，CRD）刺激诱导IBS慢性内脏痛模型。将清洁级SD（Sprague-Dawley）雄性新生大鼠随机分为正常组和造模组。通过行为学评分和结肠形态学方法鉴定模型制备成功后将造模组随机分为模型组、电针组、氟代柠檬酸组。电针组取双侧上巨虚穴（S37）、天枢穴（S25）进行电针治疗，针刺深度为5 mm，30 min/次，每日1次，连续治疗7天。氟代柠檬酸组鞘内注射氟代柠檬酸10 μL，每周3次。治疗结束后，采用腹部撤回反射（Abdominal Withdrawal Reflex，AWR）评分评估电针对IBS内脏痛大鼠行为学影响；采用HE染色观察IBS内脏痛大鼠的结肠组织病理形态学变化；采用免疫组织化学、Western Blot等方法检测脊髓中星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein，GFAP）和P2X3受体蛋白表达。结果 与正常组相比，模型组大鼠AWR评分显著升高，脊髓中GFAP和P2X3受体表达水平明显增多；与模型组比较，电针组、氟代柠檬酸组大鼠AWR评分明显降低，脊髓中GFAP、P2X3受体的表达明显降低。结论 电针能够有效缓解IBS大鼠内脏痛敏，其镇痛效应可能与其抑制脊髓GFAP和P2X3受体表达有关。