胰岛素促进体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖

目的：研究胰岛素对体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响,探讨胰岛素的促增殖作用是否与浓度相关。方法：未成熟小鼠卵巢颗粒细胞原代培养,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定颗粒细胞增殖指数,观察不同浓度胰岛素对颗粒细胞增殖的影响。结果：与对照组相比,5ng·ml^-1。胰岛素对颗粒细胞没有促增殖作用（P〉0.05）,10ng·ml^-1有促增殖作用（P〈0.05）,100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1的促增殖作用更强（P〈0.01）,100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1作用无明显差异（P〉0.05）。结论：生理浓度的胰岛素能促进颗粒细胞增殖,高浓度胰岛素促增殖作用更强,本实验为进一步研究高胰岛素血症在多囊卵巢综合症（PCOS）的卵泡发育停滞机制奠定基础。     

健果颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠骨组织结构的影响

目的：观察健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠股骨颈超微结构的影响以及同期骨密度（BMD）的改变,探讨该药药效及作用机制。材料和方法：SD雌性大鼠去卵巢造模。随机分成健骨颗粒预防组和治疗组,并设生理盐水和骨松宝对照组。术后24周处死,分别行骨密度检测及股骨颈骨粒透射电镜观察。结果：去势12周,骨细胞以吸收相和退变相为主,BMD明显降低。生理盐水组骨细胞多表现为退变相,骨细胞性溶骨更加明显,且出现破骨细胞性溶骨现象,健骨颗粒治疗组和骨松宝组多见成骨相骨细胞,成骨细胞活性加强,BMD明显升高,健骨颗粒预防组活跃的成骨细胞数量明显增加,可见成骨细胞成骨过程,BMD接近假手术组。结论：健骨颗粒能有效防治骨质疏松的发生和发展;本文还就其作用机制进行了讨论。     

健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠骨组织结构的影响

目的 :观察健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模鼠股骨颈超微结构的影响以及同期骨密度 (BMD)的改变 ,探讨该药药效及作用机制。材料和方法 :SD雌性大鼠去卵巢造模 ,随机分成健骨颗粒预防组和治疗组 ,并设生理盐水和骨松宝对照组。术后 2 4周处死 ,分别行骨密度检测及股骨颈骨粒透射电镜观察。结果 :去势 1 2周 ,骨细胞以吸收相和退变相为主 ,BMD明显降低。生理盐水组骨细胞多表现为退变相 ,骨细胞性溶骨更加明显 ,且出现破骨细胞性溶骨现象。健骨颗粒治疗组和骨松宝组多见成骨相骨细胞 ,成骨细胞活性加强 ,BMD明显升高。健骨颗粒预防组活跃的成骨细胞数量明显增加 ,可见成骨细胞成骨过程 ,BMD接近假手术组。结论 :健骨颗粒能有效防治骨质疏松的发生和发展。本文还就其作用机制进行了讨论。     

敲除淀粉样前体蛋白基因促进铝诱导的小鼠认知障碍损伤

目的 淀粉样前体蛋白(APP)基因是与痴呆症发生发展相关的重要基因,利用APP基因敲除小鼠探讨铝诱导的认知障碍损伤,及APP对中
毒性认知障碍损伤的作用。方法 3月龄同窝阴性小鼠分为野生对照组（WT）和铝处理组（WT+Al）,APP敲除小鼠分为模型对照组（APP^-/- ）和
模型处理组（APP^-/- +Al）,每组10只。铝处理组在粮食中加入相应剂量的乳酸铝,同窝阴性小鼠和APP^-/-小鼠给予常规鼠粮作为对照,乳酸
铝处理8周后进行水迷宫实验。HE染色观察小鼠脑组织神经病理改变;Western blotting检测糖原合成激酶3β(GSK-3β)和Caspase-3的活性变
化。结果 与WT相比,WT+Al小鼠在原平台区域停留时间和穿越原平台区域次数减少了28.1%和18.8%,而APP^-/- +Al小鼠在原平台区域停留时间
和穿越原平台区域次数减少了44.1%和51%。Western blotting显示,WT+Al小鼠和APP^-/-+Al小鼠脑组织中p-GSK-3β分别减少了17.4%和46.4%。结论 APP基因敲除促进铝诱导的神经毒性和学习记忆损伤。APP基因敲除导致GSK-3β的磷酸化水平降低、活性增高。由于GSK-3β活性增加对痴呆症具有促进作用,推测APP通过抑制GSK-3β活性在痴呆症发生过程中发挥保护效应。     

去卵巢骨质疏松大鼠成骨细胞G_1期调节蛋白的改变

背景:G1期调节蛋白对调控增殖细胞的增殖周期具有重要作用,目前关于成骨细胞G1期调节蛋白的研究甚少,绝经后骨质疏松与成骨细胞G1期调节蛋白的关系更未被阐明。目的:观察去卵巢大鼠骨质疏松发病过程中成骨细胞G1期调节蛋白的改变,探讨绝经后骨质疏松症的发病机制。方法:100只6月龄SD雌性大鼠,随机分成假手术组和模型组各50只,模型组进行双侧卵巢结扎切除术,假手术组除未行卵巢结扎切除外,其余步骤与手术组相同。所有大鼠于术后4,8,12,18,24周分批取材,每批每组各处死10只,取大鼠腰椎。运用免疫组织化学方法检测骨组织中成骨细胞G1期调节蛋白CyclinD1、CDK4、p21蛋白表达。结果与结论:CyclinD1、CDK4蛋白阳性表达主要定位于骨小梁表面的成骨细胞。假手术组有CyclinD1、CDK4蛋白阳性表达,模型组表达强于假手术组。p21蛋白阳性表达部位与CyclinD1相似,假手术组和模型组均有明显阳性表达,但模型组的表达维持在较高水平,在各时期均明显高于同期假手术组(P0.01)。结果证实,去卵巢骨质疏松模型大鼠发病过程中,成骨细胞CyclinD1、CDK4、p21蛋白出现明显高表达。提示成骨细胞增殖加快,同时成骨细胞周期受阻滞亦增多,成骨细胞数量相对不足,骨形成低于骨吸收,导致骨质疏松的发生。     

去卵巢骨质疏松模型大鼠的番茄红素干预

背景：有研究表明番茄红素作为一种抗氧化物质能够减低患慢性疾病的风险。 目的：建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,通过给去卵巢大鼠灌服不同剂量的番茄红素,观察其对实验性骨质疏松的保护作用。 方法：切除6月龄SPF级雌性Wistar 未生育大鼠双侧卵巢1周,建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,分别给予苯甲酸雌二醇,番茄红素10 mg,20 mg进行干预。 结果与结论：各组给药12周后,番茄红素   高低剂量组与卵巢切除组比较子宫质量,血清中的钙、磷含量,骨小梁面积百分比,骨小梁数目增加,血清中超氧化物歧化酶活性,骨密度和骨生物学性能均明显增高       (P < 0.05);血清中碱性磷酸酶,尿中脱氧吡啶啉,丙二醛,骨小梁分离度和破骨细胞数均减少(P < 0.05)。结果证实,番茄红素能明显缓解去卵巢引起的子宫萎缩,清除体内的自由基,改善去卵巢大鼠的氧化应激状态,减少骨吸收增加骨形成。      

颗粒蛋白前体(PGRN)促进小鼠乳腺癌4T1细胞上皮间质转化与侵袭和迁移

目的 探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对小鼠乳腺癌4T1细胞侵袭和迁移的影响及其机制.方法 采用1 μg/mL PGRN处理乳腺癌4T1细胞24 h,通过TranswellTM侵袭实验检测4T1细胞的侵袭能力、划痕实验检测细胞的迁移能力,实时荧光定量PCR检测4T1细胞上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vim...     

颗粒蛋白前体在炎症性疾病中的作用研究进展

颗粒蛋白前体(PGRN)是一种多功能的分泌性生长因子,广泛表达于多种组织,尤其是快速生长的细胞中,参与胚胎发育、组织损伤修复、肿瘤发生、神经退行性变等病理生理过程。PGRN还是一个多功能的免疫调节分子,可以通过调节白细胞介素6(IL-6)信号途径,在肥胖和胰岛素抵抗性糖尿病小鼠模型中发挥促炎作用。与促炎作用相比,PGRN的抗炎作用更受关注,PGRN作为肿瘤坏死因子受体(TNFR)的一种新配体,能通过拮抗TNF-α信号通路、调节IL-10信号通路等,在类风湿性关节炎、炎症性肠病、银屑病等多种疾病中发挥抗炎作用。本文对PGRN在不同的炎症性疾病中的不同作用进行综述。     

缝隙连接蛋白43和黄体生成素受体在小鼠卵巢中的表达

目的 观察小鼠卵泡发育过程中缝隙连接蛋白43（Cx43）和黄体生成素受体（LHR）在小鼠卵巢中的表达以及黄体生成素(LH)对卵巢Cx43表达的影响,为这两种分子与卵泡发育的关系提供实验依据。 方法 选择出生后1d、4d、7d、2周、3周、4周、6周、8周龄雌性C57小鼠共8组,每组10只,取卵巢。HE染色观察卵巢形态、卵泡发育并测量颗粒细胞体积分数。免疫组织化学和Western blotting观察卵巢组织中Cx43及LHR的表达,Western blotting检测不同浓度黄体生成素（LH）孵育后对卵巢Cx43表达的影响。 结果 HE染色显示,出生1d小鼠卵巢中见原始卵泡,出生7d卵巢内出现初级卵泡,2周时出现窦前卵泡和少量窦卵泡,3周、4周时,出现较多大的窦卵泡,6～8周时出现黄体。卵泡颗粒细胞体积分数在2周后的卵巢中明显增加。Cx43表达在各阶段卵泡的颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。Cx43和LHR出生后2周卵巢中的表达开始明显增加,并随卵泡发育表达逐渐增强,在3周、4周、6周和8周维持相对较高水平。LH体外干预可增加卵巢组织Cx43的表达。 结论 Cx43和LHR在卵泡发育中发挥重要作用,LH可能通过LHR促进卵巢卵泡颗粒细胞Cx43的表达。     

去卵巢大、小鼠的动情周期现象

进行莪术抗生育有否孕激素活性实验时,发现去卵巢小鼠阴道涂片仍出现规律的动情周期,同一现象又呈现在昆明山海棠提取物的实验中,国内外尚未见有关此现象的报道。因此,先用小鼠后用大鼠复查此现象。     

辛伐他汀对去卵巢骨质疏松大鼠股骨生物力学的影响

目的研究辛伐他汀(Simvastatin,SIM)对去卵巢(OVX)骨质疏松大鼠股骨生物力学性能的影响。方法48只3月龄雌性SD大鼠,随机分成3组,假手术(SHAM)组、OVX组和OVX+SIM组,每组8只。适应性喂养一周后进行手术。术后8周开始给药,OVX+SIM组给予SIM 5mg.kg-1·d-1,其余两组用等量生理盐水灌服。用药后第4周每组随机处死半数大鼠,12周后处死剩余大鼠,取股骨进行三点弯曲试验,检测股骨最大载荷、弹性载荷、最大桡度、弹性桡度、弯曲刚度系数、弯曲韧度系数等生物力学性能。结果(1)用药4周,最大载荷:SHAM组较OVX组明显增加(P<0.05);弹性载荷:OVX+SIM组较OVX组明显降低(P<0.05);最大桡度:SHAM组较OVX组明显增加(P<0.05);弯曲韧度系数:OVX+SIM组较OVX组明显增加(P<0.01)。(2)用药12周,最大载荷:OVX+SIM组、SHAM组较OVX组明显增加(P<0.05,P<0.01);弹性载荷:OVX+SIM组较OVX组明显增加(P<0.05);弯曲韧度系数:OVX+SIM组、SHAM组较OVX组明显降低(P<0.05,P<0.01)。(3)用药12周较4周,OVX+SIM组最大载荷、弹性载简明显增加(P<0.01),OVX组弯曲韧度系数明显增加(P<0.01)。结论SIM能促进去势大鼠骨的再建,改变骨的空间微结构和骨组织有机成分和无机成分的比例及结合,随时间的延长能提高股骨的强度。     

毛蕊异黄酮防治去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的复制去卵巢大鼠骨质疏松动物模型,观察不同剂量的毛蕊异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用。方法 50只SD雌性大鼠,随机分成五组：设一假手术组;腹腔手术切除大鼠双侧卵巢,分为阴性对照组、毛蕊异黄酮低、高剂量组和雌激素对照组,分别给予标准饲料和不同剂量受试物,12周后进行骨密度、骨组织形态计量、生物力学测定,与雌激素对照,观察给与毛蕊异黄酮对绝经后骨质疏松的防治作用。结果大鼠去卵巢后骨密度显著下降,股骨的力学性能有较大变化,弯曲强度和弯曲弹性模量明显降低。给予毛蕊异黄酮后,可使骨密度显著提高（P〈0.01）,存在一定的剂量-效应关系,同时弯曲强度和弯曲弹性模量明显增加,但均低于雌激素对照组。结论通过去卵巢手术,成功建立绝经后骨质疏松动物模型;毛蕊异黄酮对去卵巢大鼠具有显著的骨保护效应,并存在一定的剂量效应关系,其作用弱于雌激素。     

去卵巢联合糖皮质激素诱发兔骨质疏松模型的研究

目的建立去卵巢联合糖皮质激素致兔骨质疏松模型,探讨去卵巢联合糖皮质激素对兔骨代谢的影响。方法将18只新西兰雌兔随机分为3组:假手术组(SHAM,生理盐水5 ml·kg-1·d-1);去卵巢组(OVX,生理盐水5 ml/kg/d);去卵巢联合糖皮质激素组(OVX+GC,地塞米松1 mg·kg-1·d-1)。实验第0、3和6周,检测各组大白兔腰椎(3~6)和右侧股骨的骨密度。实验结束时,取右侧股骨进行生物力学检测;取第3腰椎进行骨组织形态计量学检测。结果与SHAM组相比,OVX+GC组大白兔骨密度、骨生物力学性能(最大载荷、断裂载荷等)、骨小梁面积百分数、骨小梁厚度和骨小梁数量均显著降低(P<0.05),骨小梁分离度显著升高(P<0.05),而OVX组大白兔的均无显著差异。结论去卵巢联合糖皮质激素法建立兔骨质疏松模型切实可行,而且效果优于单纯去卵巢兔骨质疏松模型。     

去卵巢骨质疏松模型大鼠小肠钙结合蛋白mRNA表达与菟丝子黄酮的干预

背景：菟丝子是旋花科植物菟丝子Cuscutachinensis Lam.的成熟种子,为温补肾阳的要药,前期研究表明,由菟丝子组成的补肾复方在抑制骨量丢失,改善骨密度方面有明显疗效。 目的：探讨菟丝子黄酮对去卵巢骨质疏松模型大鼠股骨骨密度、血清和肾脏1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)₂ D₃)含量、小肠钙结合蛋白(CaBp-D9K)mRNA表达的影响。 方法：72只SD雌性大鼠,随机数字表法均分为6组(n=12)：假手术组、模型组、维生素 D3组和菟丝子黄酮小、中、大剂量组。假手术组仅行假手术,其余5组分别行卵巢切除,1周后分别灌胃给予维生素D3 (2 mg/kg)以及小、中、大剂量菟丝子黄酮连续给药3个月。腹主动脉取血,分离血清,取出肾脏,采用酶联免疫吸附法检测 1,25(OH)₂ D₃含量。之后处死动物,取出股骨,测定骨密度;取出第2腰椎,采用实时荧光反转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)测定腰椎和肾脏组织维生素D受体mRNA表达。取出小肠,采用RT-PCR测定小肠CaBp-D9K mRNA表达。 结果与结论：与假手术组相比,模型组股骨骨密度、血清和肾脏 1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达均下降。与模型组比较,菟丝子黄酮中、大剂量组和维生素D3组均可使股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达增加。菟丝子黄酮能够显著提高去卵巢大鼠股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)₂ D₃、腰椎组织维生素D受体mRNA、小肠CaBp-D9K mRNA表达,促进肠钙吸收与成骨细胞活性,增强骨质量。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

颗粒蛋白前体(PGRN)敲除小鼠的巨噬细胞抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制

目的探究颗粒蛋白前体基因敲除(PGRN~(-/-))小鼠的巨噬细胞与乳腺癌细胞侵袭和迁移的关系及机制。方法选择野生型和PGRN~(-/-)小鼠巨噬细胞条件培养基培养乳腺癌细胞,采用Transwell~(TM)实验、划痕实验检测癌细胞的侵袭、迁移能力,Western blot法检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。通过细胞因子芯片、实时定量PCR和ELISA检测野生型和PGRN~(-/-)小鼠巨噬细胞分泌的细胞因子差异;用筛选出的差异表达细胞因子白细胞介素6(IL-6)处理乳腺癌细胞,采用上述方法检测对癌细胞侵袭迁移能力的影响并采用Western blot法检测核因子κB(NF-κB)信号通路和Janus激酶/信号转导子和转录激活子3(JAK/STAT3)信号通路在其中的作用。结果 PGRN~(-/-)小鼠的巨噬细胞NF-κB信号通路被阻断,减少IL-6分泌,抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移; IL-6激活JAK/STAT3信号通路促进乳腺癌细胞侵袭迁移。结论 PGRN~(-/-)小鼠的巨噬细胞NF-κB信号通路被阻断,下调IL-6表达,进而抑制JAK/STAT3信号通路的激活,抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移。     

中国雪蛤酶解液预防去卵巢大鼠骨质疏松

背景:以往研究发现雪蛤具有预防绝经后相关疾病的作用,但是否具有预防绝经后骨质疏松的功效有待于深入研究。目的:验证雪蛤酶解液对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用。方法:健康成年Wistar大鼠72只,按随机数字表法分为6组,每组12只。假手术组大鼠不切除卵巢仅切除卵巢周围部分脂肪,其余各组均切除卵巢造成骨质疏松模型。于造模后第7天开始,各组等容灌胃,连续12周。假手术组和模型组每日灌胃等量蒸馏水;普雷马林组每日灌胃387.8g/L普雷马林(结合雌激素片)悬浮液6.67g/(kg·d);67.0,26.8,13.4g/(kg·d)蛤士蟆酶解液组每日分别按相应剂量灌胃。每个月测定食物利用率;实验12周末时,处死大鼠后取子宫,测定子宫质量;取左、右侧股骨和腰椎骨,双能X射线骨密度仪测定骨密度;电感偶合等离子体直读光谱仪测定骨钙、磷含量;脱脂、灰化后测定骨干质量、灰质量。结果与结论:在4组干预组中,67.0g/(kg·d)蛤士蟆酶解液组和普雷马林组的食物利用率最低(P0.05);在各切卵巢组中,普雷马林组的子宫质量最重(P0.05);26.8g/(kg·d)蛤士蟆酶解液和普雷马林可以延缓切卵巢大鼠股骨骨密度的下降(P0.05);67.0,26.8,13.4g/(kg·d)蛤士蟆酶解液组骨钙和骨磷与模型组比较均有明显提升(P0.05),与普雷马林组差异无显著性意义(P0.05)。提示雪蛤酶解液对去卵巢大鼠的骨质疏松具有预防作用,其疗效与结合雌激素片相当,且对子宫增生的不良反应低于结合雌激素片。     

植物雌激素对去卵巢大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响

目的观察植物雌激素对卵巢去势大鼠骨折愈合过程中骨痂骨密度的影响。方法复制卵巢去势大鼠骨质疏松模型并制造股骨中段闭合性骨折,然后进行克氏针髓腔内固定,观察大鼠骨折内固定后骨痂与近骨痂段股骨骨密度的变化。结果异黄酮组、雌二醇组和假手术组骨痂的骨密度高于无用药组,差异具有统计学意义(P<0.05);而异黄酮组、雌二醇组和假手术组之间没有显著差别。结论植物雌激素能够显著提高骨质疏松大鼠骨痂及近骨痂段骨组织的骨密度、促进骨折愈合,与雌二醇组作用相近。     

去卵巢大鼠骨质疏松对下丘脑雌激素α受体的影响

目的 观察去卵巢雌性大鼠骨质疏松对下丘脑雌激素α受体(estrogen receptor alpha,ERa)及基基因表达的影响。方法 将45只SD大鼠随机分为对照组、假手术对照组和去卵巢组,用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测下丘脑ERa及其mRNA表达。结果 去卵巢组ERa受体及其mRNA阳性细胞与对照组比较显著减少(P<0.01)。结论 下丘脑ERa受体及其mRNA阳性细胞的减少可能在绝经后骨质疏松发生起重要作用。     

卵巢细胞微囊移植对去卵巢小鼠的骨胶原代谢的影响

背景：性激素对维持骨骼的完整性是必要的,体外培养的卵巢细胞可以分泌雌激素和孕激素,海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸钠微球可以在移植物和受体间提供一个屏障,有利于异体移植物的存活。 目的：探讨异体移植的微囊化卵巢细胞在去卵巢小鼠体内的生存和分泌功能,以及对骨胶原代谢的作用。 方法：用6周龄雌性昆明小鼠分离培养卵巢细胞,并用海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸钠盐微囊化分离培养的卵巢细胞。将24只8周龄雌性昆明小鼠随机分为3组(n=8),正常组：未进行卵巢切割;去卵巢组：切除卵巢;移植组：卵巢切除后立即将微囊化的卵巢细胞移植入腹腔。射免疫分析法检测微囊化卵巢细胞培养液和小鼠血清雌二醇和/或孕激素水平,Van Gieson染色法显示骨基质中的Ⅰ型胶原纤维,测小鼠左侧股骨羟脯氨酸、钙和磷的含量。 结果与结论：卵巢细胞和微囊化卵巢细胞培养液中分泌雌二醇和孕激素水平没有显著差异,移植90 d后小鼠血清雌二醇浓度与正常组无显著差异,而去卵巢组血清雌二醇浓度明显低于正常组。Van Gieson染色显示,移植组的胶原纤维分布与正常组相似,而去卵巢组的骨小梁减少、游离末端增多,脱钙骨基质变薄,胶原纤维减少。与正常组比较,去卵巢组小鼠左侧股骨羟脯氨酸、钙和磷的含量降低。 提示,微囊化卵巢细胞异体移植后能继续生存并分泌雌激素,并能在某种程度上减缓由去卵巢引起的骨胶原的分解代谢。