脾脏吞噬细胞清除凋亡细胞的免疫学调控机制研究进展

<正>常组织新陈代谢中会产生大量的凋亡细胞,它们作为机体自身抗原的主要来源在诱导免疫耐受中发挥重要的作用。脾脏边缘区的巨噬细胞(如边缘区巨噬细胞和边缘区嗜金属巨噬细胞等)和脾脏中的树突状细胞通过"find-me"信号"eatme"信号快速识别并清除体内不断产生的凋亡细胞,以致于在体内很难检测到凋亡细胞。同时,凋亡细胞的清除可诱导机体对自身抗原的免疫耐受。并且已有研究指出,清除凋亡细胞诱导免疫耐受这一理论已被用于预防自身免疫病和诱导肿瘤免疫。本文主要综述了机体清除凋亡细胞的分子机制及临床意义。     

外泌体调控树突状细胞免疫功能的研究进展

树突状细胞（DC）是机体内抗原提呈能力最强的一类抗原提呈细胞（APC），是联系固有免疫和适应性免疫的纽带。外泌体为体内活细胞分泌的双层囊泡小体，携带多种生物活性物质，参与细胞间信息传递和物质交换。内容物含量、大小、细胞来源等特征的不同组合导致了外泌体的高度异质性，因此，外泌体对DC功能调节的方式及机制具有复杂性和不确定性。本文系统回顾近年外泌体参与DC功能调控的研究进展，并对工程化外泌体的开发策略与应用现状进行总结，以期为后续研究和应用提供参考。     

外泌体与结核分枝杆菌相互作用的研究进展

结核病是目前世界各国重点防控传染性疾病之一。外泌体(exosomes)是多种细胞分泌的一种含有特异性与非特异性蛋白成分的囊泡结构,是机体免疫细胞之间重要的信息传递介质,其在机体免疫反应中发挥着重要作用。外泌体能呈递表面抗原,激活多种细胞免疫因子,介导巨噬细胞杀伤结核杆菌的细胞免疫反应。外泌体与结核分枝杆菌相互作用研究已经成为当前重大研究热点,有望开发成预防结核病的新型疫苗。     

树突状细胞与抗肿瘤免疫

树突状细胞（dendritic cell，DC）因其胞膜向外伸出许多星状突起类似于神经细胞的树突，因而得名。DC首先由Steinman和Cohn于1973年从小鼠脾脏中分离出，是与巨噬细胞、粒细胞和淋巴细胞等白细胞形态、功能相异的重要免疫辅佐细胞。DC是免疫应答中重要的免疫细胞，是目前所知功能最强的一种专职抗原提呈细胞（antigen presenting cells，APC），也是体内唯一能激活初始型T细胞的抗原提呈细胞。对于维持正常机体免疫系统的自身稳态，DC起着重要作用。同时，作为机体免疫的始动者，DC在抗病毒、抗肿瘤免疫反应及免疫缺陷方面，发挥着十分重要的作用。近年来，随着肿瘤免疫学和分子生物学的快速发展，人们对DC的认识不断深入，DC已成为生物医学界研究抗肿瘤免疫的热点之一。因此，本文就与抗肿瘤免疫相关的DC研究做一简要综述。     

外泌体在机体免疫调节中的作用与研究进展北大核心CSCD

外泌体是细胞自发或在一定条件下旁分泌释放出的一种纳米级微泡,通过在细胞间转运信号分子,起到信息交流的媒介作用。目前,外泌体在免疫调节过程中发挥的作用受到越来越广泛的关注,其作用机制也正被逐步阐明。外泌体可通过介导免疫活性分子的传递调节固有免疫应答,并通过介导抗原提呈参与机体适应性免疫的调节。在机体感染和肿瘤的免疫调节过程中,外泌体扮演着协助免疫监视和促进免疫逃逸的双重角色。我们对外泌体参与调节固有免疫和适应性免疫的生物学功能,以及其在感染和肿瘤免疫过程中发挥的作用进行了综述。     

外泌体在机体免疫调节中的作用与研究进展

外泌体是细胞自发或在一定条件下旁分泌释放出的一种纳米级微泡,通过在细胞间转运信号分子,起到信息交流的媒介作用。目前,外泌体在免疫调节过程中发挥的作用受到越来越广泛的关注,其作用机制也正被逐步阐明。外泌体可通过介导免疫活性分子的传递调节固有免疫应答,并通过介导抗原提呈参与机体适应性免疫的调节。在机体感染和肿瘤的免疫调节过程中,外泌体扮演着协助免疫监视和促进免疫逃逸的双重角色。我们对外泌体参与调节固有免疫和适应性免疫的生物学功能,以及其在感染和肿瘤免疫过程中发挥的作用进行了综述。     

巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬与免疫调节

巨噬细胞,作为机体的专职高效吞噬细胞,在凋亡细胞的清除方面起着非常重要的作用,进而对凋亡细胞诱导的免疫反应也产生了举足轻重的影响。机体产生的自身抗原由巨噬细胞吞噬后向抗原特异性T细胞的提呈在免疫应答或维持自身免疫耐受中起着至关重要的作用。相反,凋亡细胞的吞噬通路异常则有可能导致系统性或器官特异性自身免疫性疾病的发生。本文综述了巨噬细胞吞噬凋亡细胞之后对机体免疫调节的影响,特别是凋亡细胞被吞噬之后在自身免疫性疾病与免疫耐受方面的影响。     

外泌体介导消化道恶性肿瘤中的免疫异常

外泌体是一种由磷脂双分子层包裹的细胞外囊泡,对免疫系统起重要调控作用.外泌体上的MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子、肿瘤相关抗原等可刺激免疫系统,而其免疫抑制性蛋白可通过诱导免疫抑制性细胞群产生、减少免疫细胞数、减弱免疫细胞杀伤效应等途径抑制免疫系统.外泌体在肿瘤微环境中发挥免疫抑制作用,即外泌体可介导结直肠癌、胃癌、肝癌、...     

肿瘤通过抑制树突状细胞功能逃避免疫监视的研究进展

树突状细胞(DC)在T细胞介导的免疫反应中起核心作用,可在体内外诱导强烈的抗肿瘤免疫反应.DC作为恶性肿瘤免疫治疗因子被广泛的研究.如今,开发了多种基于DC的抗肿瘤免疫治疗.然而肿瘤也会影响宿主的造血功能以及导致大量未成熟和免疫耐受的DC产生,这些直接抑制免疫反应.了解肿瘤相关DC的免疫抑制作用机制,可提高对肿瘤免疫逃逸的认识.     

肿瘤相关巨噬细胞来源外泌体激活IFN通路促进胃癌细胞免疫逃逸

为探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAM)外泌体促进胃癌细胞发生免疫逃逸的机制,采用体外诱导M2型巨噬细胞的方法模拟TAM,通过超速离心法提取M2型巨噬细胞外泌体(M2 macrophages'exosome,M2e),并与胃癌细胞共培养以获得摄取了M2e的胃癌细胞,再与C...     

肝癌细胞外泌体诱导巨噬细胞M2极化后促进肝癌细胞迁移及侵袭

目的：探讨外泌体在肝细胞癌（HCC）细胞与巨噬细胞间是否存在活性物质交通作用，分析肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）与HCC细胞转移的关系及机制。方法：采用超速离心法从Huh-7和RAW264.7细胞的培养基中提取外泌体，Western blot和透射电镜进行外泌体鉴定；激光共聚焦显微镜对外泌体与受体细胞结合内化进行追踪；qRT-PCR及ELISA检测巨噬细胞表型变化；miRNA模拟物进行功能性实验验证其作用；细胞划痕及Transwell试验检测TAMs对HCC细胞迁移及侵袭能力的影响。结果：HCC细胞外泌体可被巨噬细胞内吞；肝癌细胞外泌体及miR-151模拟物处理的巨噬细胞M2型标志物CD206、Arg-1 mRNA表达及IL-10、TGF-β蛋白表达显著高于对照组（P<0.05）;TAMs外泌体处理组HCC细胞迁移及侵袭能力高于其他组（P<0.05）。结论：HCC细胞来源外泌体miR-151可诱导巨噬细胞极化为TAMs,TAMs对肝癌细胞迁移及侵袭有促进作用。     

树突状细胞与免疫负向调控

以往多数学者认为树突状细胞(dendriticcells,DC)具有激活免疫的功能,但是,近年来愈来愈多的实验证明,DC具有负相调节免疫的功能,其可通过诱导T细胞失能、使免疫反应偏移、诱导调节性T细胞形成及促使活化的T细胞凋亡等方式使机体达到免疫稳定,但同时DC这些特性又会被病原体和肿瘤所利用而达到免疫逃逸。以下综述了各种状态下的DC与免疫负向调控的关系、DC参与免疫负向调控的机制等方面的研究进展。     

树突状细胞介导的肿瘤免疫治疗研究

树突状细胞是抗原递呈能力最强的抗原递呈细胞。树突状细胞可通过交叉致敏途径呈递外源性抗原如肿瘤抗原,诱导CD8+的CTL应答。应用不同形式的肿瘤抗原负载DC,将致敏DC作为疫苗回输体内可诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。     

M2型巨噬细胞来源外泌体对乳腺癌细胞系4T1干性特征的影响

目的探讨M2型巨噬细胞来源的外泌体对乳腺癌细胞系4T1细胞肿瘤干性特征的影响。方法用超速离心法分离M2型巨噬细胞来源的外泌体;用透射电子显微镜、纳米粒子追踪技术,Western blot等对其进行鉴定;然后以乳腺癌细胞系4T1为肿瘤模型,使用Dil染料标记M2型巨噬细胞来源的外泌体,通过免疫荧光技术观察其能否进入4T1细胞。此外,用流式细胞计量术、共培养体系和Transwell实验探究在M2型巨噬细胞来源的外泌体影响下的4T1细胞的干性特征。结果 M2型巨噬细胞在体外被成功诱导,分离并鉴定了M2型巨噬细胞来源的外泌体。通过免疫荧光,看到Dil标记的外泌体可成功进入4T1细胞。M2型巨噬细胞来源的外泌体与4T1细胞共孵育后,可明显增强4T1细胞的迁移能力(P0.001)和成球能力(P0.05);外泌体抑制剂GW4869可明显抑制4T1细胞的成球能力(P0.05)。同时,M2型巨噬细胞来源的外泌体可明显增加4T1细胞中CD44~(high)CD24~(low)细胞的比例(P0.001)。结论 M2型巨噬细胞来源的外泌体能够促进4T1肿瘤细胞的迁移和成球能力,并明显增加4T1细胞中肿瘤干细胞的比例。     

T-exo 负载DC 诱导抗肝癌细胞免疫效应研究

目的:观察肝癌细胞来源的外泌体(T-exo)负载DC体外诱导细胞毒T细胞(CTL)对肝癌细胞的杀伤作用。方法:采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体(T-exo),透射电镜鉴定形态,Western blot检测外泌体相关蛋白CD9、CD63、HSP70及肿瘤抗原分子AFP的表达;分离健康供者外周血单个核细胞(PBMC)培养DC,流式细胞术鉴定负载T-exo的DC细胞表型;用2-(4-碘苯)-3-(4硝基苯)-5-(2,4-磺苯基四氮唑)-2H-四唑单钠盐-1(WST-1)法检测负载T-exo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测负载T-exo的DC诱导CTL分别对AFP阳性Huh-7细胞及AFP阴性的SMMC7721细胞的杀伤作用。结果:透射电镜下可见T-exo为圆形或椭圆形双层膜囊泡状小体,大小不等,平均直径50~100 nm,表达外泌体膜相关分子及肿瘤抗原分子。负载T-exo的DC可促进初始T细胞增殖,T-exo致敏DC对AFP阳性的Huh-7肝癌细胞系杀伤活性明显高于AFP阴性的SMMC7721肝癌细胞组(P0.05)及未负载T-exo的对照组DC(P0.05)。结论:负载T-exo的DC能促进T细胞增殖,提高CTL细胞的细胞毒活性诱导特异性的抗肝癌效应。经T-exo抗原致敏DC诱导的CTL对肝癌细胞有明显的细胞毒作用,明显高于DC对照组(P0.05)。     

树突状细胞介导的肿瘤免疫治疗研究

树突状细胞是抗原递呈能力最强的抗原递呈细胞。树突状细胞可通过交叉致敏途径呈递外源性抗原如肿瘤抗原，诱导CD8 的CTL应答。应用不同形式的肿瘤抗原负载DC，将致敏DC作为疫苗回输体内可诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。     

CD4+CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞是调节性T细胞的亚群之一,主要来源于胸腺,具有多种独特的特征,包括可识别自身抗原肽、分泌抑制性细胞因子等.其功能是通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应、抑制传统T细胞的活化以及促进一些抑制性细胞因子的分泌等,在维持机体内环境的稳定、肿瘤免疫监测、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用.     

人角质形成细胞外泌体辅助超抗原SEB诱导淋巴细胞增殖

目的分离人角质形成细胞外泌体,探究负载细菌超抗原后人角质形成细胞分泌的外泌体诱导静息CD4~+、CD8~+T淋巴细胞增殖的作用。方法多步超速离心法分离体外培养的人永生化角质形成细胞外泌体(HaCaT cell exosomes,HaCaT-Exo),透射电子显微镜观察HaCaT-Exo的形态结构,Western blot检测HaCaT-Exo的标志蛋白CD63以及免疫相关分子MHCⅡ的表达,流式细胞术检测负载细菌超抗原后HaCaT分泌的外泌体诱导静息CD4~+、CD8~+T淋巴细胞增殖情况。结果提取的HaCaT-Exo符合外泌体特性并表达标志蛋白CD63;经IFN-γ刺激后HaCaT-Exo可以表达MHCⅡ分子,负载细菌超抗原SEB的HaCaT-Exo以及单独HaCaT-Exo均不能诱导淋巴细胞增殖,但经IFN-γ刺激后负载SEB的HaCaT-Exo可以诱导静息CD4~+、CD8~+T淋巴细胞增殖(P0.05)。结论经IFN-γ刺激后人角质形成细胞外泌体可表达MHCⅡ分子,并且负载细菌超抗原SEB后其分泌的外泌体具有诱导静息CD4~+、CD8~+T淋巴细胞增殖能力,这提示外泌体可能是角质形成细胞参与细菌超抗原相关免疫反应的新机制。     

树突状细胞的免疫治疗进展

树突状细胞(DC)是体内专职的抗原提呈细胞,具有摄取、处理和呈递抗原至T细胞的功能,这过程需要MHC分子参与,结合于MHC上的抗原多肽由不同的T细胞亚群所识别。将肿瘤相关抗原(TAA)致敏DC后,回输或接种至荷瘤宿主能显著地诱导机体产生保护性免疫反应。许多TAA在分子水平上的确认以及对DC抗原提呈作用的深入研究,使以DC为基础的肿瘤免疫治疗具有发展前景。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞研究进展

CD4^ CD25^ 调节性T细胞是调节性T细胞的亚群之一，主要来源于胸腺，具有多种独特的特征，包括可识别自身抗原肽、分泌抑制性细胞因子等。其功能是通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应、抑制传统T细胞的活化以及促进一些抑制性细胞因子的分泌等，在维持机体内环境的稳定、肿瘤免疫监测、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用。