运用同一波长HPLC法测定大鼠血清色氨酸及其代谢产物

目的:运用高效液相色谱-紫外检测法建立一种简单、快速同时测定大鼠血清中的色氨酸(Trp)及主要代谢产物5-羟色胺(5-HT)和犬尿氨酸(Kyn)的检测方法。方法:以20%高氯酸为血清蛋白质沉淀剂,采用C18(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/l磷酸二氢钾-甲醇(80∶20,v/v),于波长225nm处对大鼠血清进行检测。结果:15min内可以完成本实验分析过程,大鼠血清中Trp、5-HT、Kyn平均回收率分别为90.69%、103.21%、101.15%,RSD分别为1.78%、0.81%、1.12%(n=9);分别在0μg~27.0336μg、0μg~1.47456μg、0μg~1.51552μg的范围内成较好的线性关系,相关系数r均为0.9995。结论:通过对实验中多个环节的考察,建立了大鼠血清中色氨酸及其代谢产物5-羟色胺与犬尿氨酸含量测定的方法,该方法准确性较好,能快速简单地完成检测过程。     

发酵液中色氨酸含量的HPLC法测定

目的建立用HPLC法测定色氨酸含量的方法。方法采用C18柱（250mm×4．6ram,5μm）,流动相为0．15mol／L的乙酸钠缓冲液（pH3．5）一乙腈（920：80）,流速1．0ml／min,检测波长为226nm,进样量10μl。结果线性范围50．0μg—1000．0μg／ml（r=0．9997）,平均加标回收率为100．1％（RSD=0．55％,n=6）。结论方法简便,结果准确,适用于该产品的质量控制。     

反相HPLC法测定氯霉素注射液及其分解产物的含量

氯霉素及其液体制剂在生产和贮存过程中会引入杂质及分解产物,其主要分解产物为1一(4-硝基苯基)-2-氨基-1,3-丙二醇(简称氨基物),它们均会影响其抗菌活性。为确保产品的质量,必须对它们含量进行测定。目前常规氯霉素的微生物效价法较麻烦费时,且不能同     

肠道菌群对色氨酸代谢的影响研究进展

肠道菌群作为一个复杂的微生态系统,与宿主建立了密切联系,在调节与营养、免疫系统激活和宿主防御相关的生理功能中起着核心作用.肠道菌群与宿主之间相互作用的主要方式之一是通过代谢产物.色氨酸(tryptophan,TRP)作为一种必需氨基酸,参与体内多种生理功能,影响人体的生长和健康.TRP代谢的异常与许多疾病有关.肠道菌群...     

基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

 目的 建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性。方法 血清用6%高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样,采用标准加入法定量。选用ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-醋酸钠(15 mmol/L,冰醋酸调pH至 4.0),流速1.1 mL/min,柱温30 ℃,犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm。结果 犬尿氨酸保留时间为6.10 min,线性范围为0.25～10 μmol/L,检测限为0.09 μmol/L;色氨酸保留时间10.12 min,线性范围为25～1 000 μmol/L,检测限为0.25 μmol/L。精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定。结论 建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法,采用标准加入定量方式,可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度,并成功应用于实际生物样本的测定。     

高效液相色谱法测定孕妇血清中色氨酸及其代谢产物Kynurenine

[目的]建立一种高效液相色谱法测定孕妇血清中的色氨酸（Tyrptophan）及其代谢产物Kynurenine的方法。[方法]反相高效液相色谱法。外标法，ZORBAX Extend-C18柱，4．6mmID×250mm，流动相为甲醇：0．001mol／L磷酸二氢钾（采用PH=4）（12：88），流速1．3ml／min，检测波长245nm。[结果]色氨酸线性范围2．56～307．06μmol／L，r=0．9999；Kynurenine线性范围0．12～5．05μmol／L，r=0．9997。30例孕妇血清色氨酸为49．73±7．48μmol／L，其代谢产物KN为：0．74±0．33μmol／L。[结论]本法简便，准确，适用于临床和科研。     

慢性乙型肝炎及乙型肝炎性肝硬化患者色氨酸代谢变化及其相关性分析

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎性肝硬化(HBC)患者色氨酸(Trp)代谢变化及相关性.方法 选取2015年10月至2016年1月在重庆医科大学附属第一医院住院的CHB 81例和HBC 40例患者为研究对象,40例健康者为对照.采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)对各组受试者血浆中Trp及代谢产物犬尿氨酸(Kyn)、5-羟色胺(5-HT)水平进行测定,实时荧光定量PCR检测HBV-DNA病毒复制数,分析3组间血清学指标差异,采用Pearson相关分析和Logistic回归分析筛选危险因素.结果 与对照组比较,CHB组、HBC组受试者血浆中Trp和5-HT水平明显降低(P<0.01);HBC组受试者血浆中Kyn/Trp明显高于其他两组(P<0.01).HBC组Kyn/Trp与A/G呈负相关(r=-0.686,P<0.01),CHB组Kyn/Trp与Log DNA呈正相关(r=0.784,P<0.01).Logistic回归分析显示Kyn/Trp为CHB和HBC的危险因素.结论 检测血浆中Trp及其代谢产物可作为辅助指标评估乙型肝炎进展情况.     

色氨酸代谢与炎性肠病相关研究进展

炎性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,其发生与环境、遗传、免疫相关,肠道菌群的改变不同程度影响了宿主与肠道细菌间的共生关系.而色氨酸作为哺乳动物必需的一种氨基酸,参与了包括神经元功能、免疫力和肠道稳态等多种生理过程.微生物群分解色氨酸产生的代谢物包括芳香烃受体配体、犬尿氨酸及血清素(5-羟色胺),3种代谢途径相...     

HPLC法测定氯化钾葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量

目的:采用HPLC法测定氯化钾葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量.方法:色谱柱为迪马C18柱;流动相为甲醇-水(20∶80);检测波长284nm;柱温:室温;流速:1.0mL·min-1.结果:5-羟甲基糠醛在0.519~20.76μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),最小检出量为0.04ng.结论:本法结果准确可靠,辅料无干扰,可作为该成分的质量控制方法.     

人血浆中磺胺甲噁唑和代谢产物的HPLC法测定及其药代动力学研究

目的建立人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC测定法,研究磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学特征。方法血样经高氯酸预处理后,进行HPLC分析,色谱柱为Lichrospher C18（5μm,250inm×4．6mm）,流动相为乙腈-水-冰乙酸-三乙胺（38：62：0．4：0．3,v／v）,流速为1．0ml／min,检测波长为240／lm。结果磺胺甲噁唑和N4-乙酰磺胺甲噁唑分别在1～160μg／ml和0．5～20μg／ml的范围内浓度与峰面积线性关系良好,定量限分别为1μg/ml和0．5μg/ml,日内精密度分别为0．91％～6．83％和1．80％-7．66％,日间精密度分别为2．12％～6．09％和4．16％～8．15％,回收率分别为95．9％～106．0％和98．8％～110．3％。结论建立的人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC分析方法灵敏、准确、简便,适合于磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学研究。     

糖尿病肾病患者血清色氨酸代谢谱的靶向研究*

目的: 研究糖尿病肾病(DKD)患者与健康对照人群血清色氨酸不同代谢通路中代谢物的差异,分析差异代谢物与临床指标之间的相关性。方法: 以包头医学院第一附属医院肾内科和内分泌科住院部患者为研究对象,选取10例DKD患者为疾病研究组,10例健康体检者为正常对照组,收集血液标本。采用靶向代谢组学方法分析两组人群中血清色氨酸及其代谢物的差异,进行生物信息学和统计学分析,阐明其在DKD中的意义。结果: 在两组血清中鉴定出5个差异代谢物,其中DKD患者血清中L-色氨酸(L-TRP)、5-羟色胺(5-HT)的水平明显低于健康对照组(P＜0.05),而5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿氨酸(KYN)和3-吲哚丙酸(IPA)的水平则增加,差异具有统计学意义(P＜0.05),5-HIAA和IPA均与血肌酐呈显著正相关,与肾小球滤过率呈显著负相关。结论: DKD患者血清色氨酸代谢物水平与健康对照组相比具有明显的差异,其中的某些差异代谢物还与DKD的发生发展具有明显的相关性。     

液相色谱-电喷雾串联质谱法分析大肠癌患者尿液色氨酸及其代谢产物

目的：通过液相色谱-电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）测定尿液色氨酸及其代谢产物浓度,探讨大肠癌患者体内色氨酸代谢变化及其与机体免疫之间的关系。方法通过 LC-ESI-MS/MS法测定大肠癌患者和健康者（对照组）尿液色氨酸代谢物浓度,并通过犬尿氨酸/色氨酸比值来评估代谢过程中的酶活性。结果大肠癌患者尿液犬尿氨酸、3-羟基犬尿氨酸（HK）、羟基氨茴酰酸（HAA）、吲哚-3-乳酸（ILA）、吲哚-3-丙酸（IPA）、邻氨基苯甲酸（AA）浓度显著升高（P＜0．05,P＜0．01）;而大肠癌患者尿液犬尿烯酸浓度较对照组显著下降（P＜0．05）;大肠癌患者犬尿氨酸/色氨酸比值较对照组显著提高（P＜0．01）。结论大肠癌患者尿液色氨酸代谢发生紊乱,色氨酸代谢物检测或可为大肠癌发病机制、预测和防治研究奠定基础。     

HPLC法测定养血安神糖浆中5-羟甲基糠醛的含量

目的测定养血安神糖浆中5-羟甲基糠醛的含量。方法采用HPLC法测定5-羟甲基糠醛的含量。色谱柱：SHISEIDO CAPCELL PAKC18柱,250mm×4．60mm,5μm;流动相：甲醇-0．1mol／L磷酸溶液（10：90）;检测波长：284nm;柱温：45℃;流速：0．8ml／min;进样量：loμl。结果y=899702．71x＋26090．44,R=09997,线性范围为0．40μg／ml～19．70μg／ml,平均回收率为98．3％。结论方法简便,快速,准确,为提高和完善该制剂的质量标准提供了依据。     

HPLC法测定己酮可可碱葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛限量

目的:采用HPLC法测定己酮可可碱葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛限量。方法:ODSC18柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇:水:三乙胺(50:50:0.1)为流动相,检测波长为284nm。结果:回归方程A=4100.91+53467.52C(r=0.999,n=5),在浓度1μg/ml～20μg/ml的范围内线性良好,加样回收率为99.89%,RSD=0.19%。结论:本方法准确而灵敏,能有效地控制5-羟甲基糠醛的限量。     

色氨酸-犬尿氨酸代谢通路与神经退行性疾病及中医药干预作用的研究进展

色氨酸代谢是一个可高度调控的生理过程，犬尿氨酸通路是色氨酸代谢的主要途径，色氨酸-犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应，代谢生成的多种生物活性物质统称为“犬尿氨酸能物质”。越来越多的研究表明，这些犬尿氨酸能物质与很多神经系统疾病的发生、发展有着密切关联，异常的色氨酸-犬尿酸代谢与诸如帕金森氏病、亨廷顿病和阿尔茨海默症等神经退行性疾病认知功能低下有关。文章就色氨酸-犬尿氨酸通路的代谢、生成的神经生物学活性物质、相关的神经系统疾病以及以此为靶点的中医药干预作用进行综述，为研究和治疗相应神经系统疾病提供一定策略与参考。     

HPLC法测定血浆中丹参脂质体的原儿茶醛浓度

丹参(Salvia miltiorrhiza)具有活血化瘀、理气开窍,扩张血管与增加冠动脉血流量的作用。其水溶性成分为丹参素,原儿茶醛等。丹参脂质体,临床上用于预防手术病人的肠粘连。为了解该制剂体内吸收、消除情况,我们用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),采用离子抑制技术分离     

HPLC法测定人血液中5-氟尿嘧啶的浓度

5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）是嘧啶类抗代谢的抗癌药物,进入体内后在酶的催化作用下转变为氟尿嘧啶脱氧核苷酸,抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶,从而抑制DNA的生物合成。临床上用于治疗各种晚期肿瘤,主要是消化道肿瘤,其疗效肯定,但也有一定毒性,尤其对消化道和骨髓。近年来,国外有文献报道5-Fu毒性及血药浓度变化具有时辰性,其机理尚不清楚,被认为可能与5-Fu重要分解限速酶二氢尿嘧啶脱氢酶（DPD）的昼夜节律变化有关。     

高效液相色谱测定脑脊液单胺递质及其代谢产物

介绍同时测定脑脊液中单胺类遂质及代谢产物5-HT,5-HTP,Trp,MHPG,HVA和5-HIAA的高效液相色谱法。50μ脑脊液样品,不需预处理,20分钟可完成6种物质的分析。本文还讨论了室温、流动相pH值、检测器检测条件等因素对分离及检测的影响。