NMDA受体亚单元NR2A和NR2B mRNA在缺血大鼠海马的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨短暂性前脑缺血后大鼠海马NR2A和NR2B mRNA的表达变化及其与海马缺血性细胞凋亡的关系。方法 四动脉阻断法建立脑缺血再灌注动物模型、原位杂交、TUNEL染色和图像分析与统计处理。结果 ①缺血后，NR2A和NR2B mRNA在海马各区呈现出一种相对一致的表达规律。在CA1区，NR2A和NR2B mRNA的表达分别在缺血再灌6h和12h降至低谷，然后回升，在缺血再灌48h都升至高峰，之后表达再次下降，直至缺血后7d；在CA3区，该变化规律依然存在，不同的是表达变化的幅度明显减小；而在齿状回，缺血再灌0．5～72h，二者的表达未见显著性变化；72h后，表达下降，直至缺血后7d。②缺血后24h，凋亡细胞出现，主要位于海马CA1区，进行性增多，48h增加更为明显，缺血后72h达高峰；然后凋亡细胞有所减少，但至缺血后7d，依然存在。结论 短暂性前脑缺血后，大鼠海马各区NR2A和NR2B mRNA的表达变化及细胞凋亡均存在着显著性差异；这种差异提示，缺血后，NR2A和NR2B mRNA的表达变化与海马的选择性易损现象和缺血性细胞凋亡之间可能存在着某种密切的关系。     

重症肌无力患者外周血Bcl-2基因mRNA与蛋白的表达及其意义

重症肌无力（myasthenia grasis，MG）是一种重点累及神经-肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体（AChR）的自身免疫性疾病。近年来有研究表明，细胞凋亡缺陷与MG的发生、发展有着密切的关系，我们采用逆转录-PCR（RT-PCR）检测Bcl-2 mRNA在MG患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达，流式细胞仪测定T、B淋巴细胞Bcl-2蛋白表达，旨在探讨其与MG发病的关系。     

CYP2C19基因多态性与难治性精神分裂症的关系

目的 探讨细胞色素P450家族成员2C19(CYP2C19)基因多态性与难治性精神分裂症的关系。方法 选取108例难治性精神分裂症患者、90例非难治性精神分裂症患者,分别记为难治组和非难治组。检测CYP2C19基因多态性,并分为广泛代谢型（EM）、中间代谢型（IM）和慢代谢型（PM）。对比难治组和非难治组患者临床资料和CYP2C19基因多态性代谢情况。Logistic回归分析影响难治性精神分裂症的相关因素。结果 难治组病程、简明精神科量表（BPRS）评分、阳性和阴性症状量表（PANSS）评分、临床大体印象量表严重程度量表（CGI-S）评分及泌乳素（Prolactin,PRL）水平高于非难治组（P<0.05）,CYP2C19基因EM占比低于非难治组（P<0.05）,IM、PM占比则高于非难治组（P<0.05）。多因素分析结果显示：CGI-S评分、PRL、CYP2C19基因为IM/PM均为难治性精神分裂症的危险因素（P<0.05）。结论 CYP2C19基因多态性与精神分裂症难治性相关,IM、PM型精神分裂症难治性的风险较高。     

大鼠听皮质NMDA受体来单位NR2BmRNA年龄—依赖性表达

应用原位杂交技术，研究了大鼠生后发育过程中，听皮质神经元NMDA受体亚单位NR2B mRNA年龄－依赖性的表达变化。特异性DIG标记寡核苷酸探针检测显示，NR2B亚单位mRNA阳性神经元数量从出生后即有高水平表达，之后，随着天龄增长逐渐递减，在出生后14d出现一过性表达高峰，14－21d时表达水平急剧降低（＞50．0％），21d后保持低水平表达至成年。研究结果为进一步在皮质水平上探讨出生后听觉功能发育可塑性的分子机制提供了重要资料。     

人NR2B基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的 克隆人NR2B基因,构建其真核表达载体,获得暂态表达NR2B的CHO细胞.方法 RT-PCR方法克隆人NR2B基因,并插入真核表达载体pcDNA3.1中,将该重组载体转染至CHO细胞.通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光鉴定细胞中NR2B的表达,通过流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 成功获得人NR2B基因,转染的CHO细胞可检测到NR2B的表达,表达NR2B的CHO细胞并不会凋亡.结论 成功克隆和构建了人NR2B基因的真核表达载体,并在CHO细胞中得到了表达.     

脑温不同对大鼠缺血脑组织c—fos和bcl—2表达的影响

目的：研究脑缺血后不同脑温对相关基因表达的影响,探讨亚低温脑保护作用的机制。方法：Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为常温（37－38℃）脑缺血、亚低温（31－32℃）脑缺血、高温（41－42℃）脑缺血和假手术组,每组12只动物。脑缺血动物模型采用改良的Pulsinelli四动脉阻断法。脑组织中Fos和bcl-2蛋白的检测采用链菌素亲生物素－过氧化酶连接法（SP）免疫组织化学技术。结果：脑缺血再灌注可诱导Fos蛋白的表达,亚低温可使Fos蛋白的表达提早而增多,高温却使脑缺血时Fos蛋白的表达减少。常温脑缺血再灌注可诱导大脑皮质bcl-2蛋白表达;亚低温增加bcl-2蛋白表达;高温减少bcl-2蛋白表达。结论：脑缺血后即时开始亚低温可增加Fos和bcl-2蛋白的表达,是亚低温脑保护作用的机制;脑缺血后高温则加剧脑缺血损伤。     

Bcl-2蛋白家族及其诱导的神经元凋亡

癫发作可启动神经元凋亡通路,线粒体位于凋亡通路的核心位置。Bcl-2家族蛋白是其上游重要的调控因子,它们通过转录水平、磷酸化-去磷酸化修饰、二聚体形成或水解剪切等机制精确调控内、外源性凋亡途径,最终决定神经元的存亡。对Bcl-2家族蛋白成员以及调控机制的研究有助于寻找新的干预手段,减少癫所致的神经元损伤。     

NMDA受体亚单位NR2A在凝血酶诱导的脑出血后脑损伤中的研究

目的 探讨NMDA受体亚单位NR2A在脑出血后脑损伤中的作用机制.方法 成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水组,脑出血组,凝血酶组,凝血酶＋阿加曲班组.各组在手术后48 h采用不同方法观察其分布及动态变化规律.结果 NMDA受体亚单位NR2A在72h达高峰,阿加曲班可以减少其在72 h时的表达.阿加曲班可以改善血脑屏障的通透性、减轻脑水肿.结论 NMDA受体亚单位NR2A参与了脑出血后脑损伤的病理生理过程;阿加曲班通过抑制NMDA受体亚单位NR2A的激活而发挥神经保护作用.     

精神分裂症与5—HT2c受体基因的关系

目的探讨上海地区汉族人５－ＨＴ２ｃ受体基因Ｃｙｓ２３Ｓｅｒ多态性的发生率及其与精神分裂症之间的关系。方法随机抽取２７４例精神分裂症患者作研究,以１８７例正常人作对照。用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）扩增及单链构橡多态性（ＳＳＣＰ）分析、限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）技术检测所研究对象的５－ＨＴ２ｃ受体基因Ｃｙｓ２３Ｓｅｒ多态性。结果仅在１个正常个体发现Ｃｙｓ－２３－Ｓｅｒ突变,精神分裂症患者中均未见     

大鼠大脑皮层损伤后N-甲基D-天门冬氨酸受体亚单位NR1、NR2A和NR2B的表达研究

目的 分析研究急性损伤后大鼠大脑皮层N-甲基D-天门冬氨酸受体(NMDA)亚单位NR1，NR2A和NR2B的表达。方法 建立开放式挫伤型机械脑损伤大鼠模型，采用NMDA受体的NR1，NR2A和NR2B3种亚单位的特异性抗体，对不同时间点的皮层组织3种亚单位蛋白作定量免疫印迹分析。结果 以健侧大脑皮层作为对照组，NR1亚单位在各时间点的含量保持基本稳定。NR2A的含量在3h内升高明显，至3h达到高峰，随后降至正常；NR2B在1h时略有上升后随即下降，至3h时最低，尔后又明显升高，于6h时达高峰，随后又恢复正常。结论 大鼠脑皮层损伤NMDA受体NR2A和NR2B亚单位的表达发生了改变。     

microRNA-181c在重症肌无力患者外周血单个核细胞中的表达及其意义

目的探讨microRNA-181c(miR-181c)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者中的表达水平及其临床意义。方法收集2015年6月-2017年6月收治的22例MG患者和20例健康人的外周静脉血样,提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中总RNA,采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测PBMC中miR-181c的相对表达水平,并分析miR-181c表达水平与患者的MG定量评分体系(quantitative myasthenia gravis score,QMG)的相关性。结果 MG患者PBMC中miR-181c的相对表达水平(0.303±0.150)较对照组(1.000±0.262)显著降低(P0.01),其中全身型患者(0.182±0.056)低于眼肌型患者(0.404±0.126)(P0.05),同时miR-181c表达水平与QMG呈负相关(R2=-0.359,P0.05)。结论 MG患者PBMC中miR-181c表达水平的降低可能与病情严重程度有关。     

Tie-2受体在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的测定Tie-2受体在人脑胶质瘤组织中的表达水平,评价其与肿瘤血管生成及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化方法,检测42例人脑胶质瘤组织中Tie-2、CD34的蛋白表达情况,并测定肿瘤组织的微血管密度(MVD)。结果Tie-2受体阳性表达主要位于血管内皮细胞内,在肿瘤细胞内仅有少量表达。Tie-2受体表达水平与胶质瘤的临床病理分级、肿瘤内MVD显著相关(P<0.01),而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关。结论Tie-2受体可能在胶质瘤血管生成和肿瘤恶性发展中起重要调控作用,有望成为判断胶质瘤恶性程度和预后的重要指标。     

5-HT2C受体在癫患者脑组织的表达

目的研究5-羟色胺2C受体(5-HT2C受体)在癫患者脑组织的表达,探索其临床意义。方法用免疫组化方法检测46例癫患者术后脑组织5-HT2C受体的表达,研究比较不同部位不同病程脑组织表达。结果癫患者额叶脑组织5-HT2C受体的含量较颞叶海马明显增高,长病程组表达低于短病程组。结论 5-HT2C受体可能参与了癫的发病机制,改变5-HT2C受体的表达有望成为癫新的治疗靶点。     

NMDA受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤作用机制的研究

目的探讨N-甲基-D天冬氨酸受体(NMDA)受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤中的作用机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组、凝血酶组、凝血酶+阿加曲班组,建立大鼠脑出血模型。造模后48h,采用伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)的通透性,干-湿重法测脑组织的含水量。采用Western-blot方法观察出血后各时间点(0h、0.5h、6h、24h、72h、120h)血肿周围脑组织NR2A分布及动态变化规律。结果 (1)阿加曲班可以明显改善大鼠脑出血BBB通透性(P<0.05),血肿周围脑水肿明显减轻(P<0.05)。(2)Western-blot结果显示,NR2A在6h时开始增加,72h达到高峰,在120h时基本恢复。阿加曲班可以明显减少NR2A在72h时的表达(P<0.05)。结论 (1)NR2A参与了凝血酶诱导的脑出血后脑损伤的病理生理过程。(2)凝血酶可能通过上调NR2A表达引起脑出血后脑组织的损伤。     

NF2基因及其蛋白merlin的生物学研究进展

NF2基因是一种瘤抑制基因,其失活可导致蛋白质的变性并可诱导肿瘤的发生。其编码的merlin蛋白与细胞的运动和增殖有着较密切的关系,磷酸化使merlin蛋白丧失了抑制肿瘤生长的能力。通过对NF2及merlin蛋白的研究,为研制抗肿瘤药物或干预的靶点提供其理论基础。     

Fermitin家族成员1在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的 分析Fermitin家族成员1(FERMT1)在脑胶质瘤中的表达特征,并探讨其临床意义及在脑胶质瘤发生发展中的生物学作用.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)mRNA测序数据库中309例样本,按照FERMT1表达量分为高表达组和低表达组,分析其表达特征.将癌症基因组图谱计划(TCGA)mRNA测序数据...     

脑缺血再灌注大鼠皮质NMDA受体亚单位NR2A/B蛋白的表达变化

目的 采用免疫细胞化学技术，探讨急性脑缺血再灌注不同时间段大鼠脑顶皮质NMDA受体亚单位NR2A及NR2B蛋白的表达变化。方法 雄性Wistar大鼠70只,随机分成正常对照组、假手术对照组、脑缺血再灌注对照组；以颈动脉引流法行全脑缺血7min再灌注造模，术后分6h、24h、72h3个时间段取脑．脑组织恒冷箱连续冠状切片,免疫细胞化学ABC反应，图像分析系统行顶皮质Ⅰ区V层免疫阳性面积检测。结果 （1）麻醉及假手术可导致顶皮质NR2A、NR2B蛋白表达短暂增多，24h内恢复正常；（2）缺血再灌注后6h前后形成表达高峰,24h恢复正常，随后表达急剧减少，持续至72h以后。结论（1）脑缺血再灌注可导致顶皮质神经元NR2A、NR2B蛋白表达变化，且表达存在明显的时间依赖性；（2）缺血再灌注早期皮质NR2A、NR2B蛋白高度表达可能是导致迟发性神经元丢失的重要原因。     

TRAIL/APO-2L及其受体系统在脑肿瘤中的研究进展

TRAIL/APO - 2L及其受体是TNF家族中的新成员。该系统以其独特的凋亡诱导方式参与抗病毒免疫 ,免疫赦免以及肿瘤细胞的免疫逃逸等生理作用。TRAIL能诱导多种脑肿瘤细胞系发生凋亡而对神经细胞没有毒性 ,这为恶性脑肿瘤的治疗提供了新的途径     

ABCB1基因C3435T多态性与癫痫耐药关系的Meta分析

目的 运用Meta分析的方法综合评价ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白基因(ABCB1)C3435T多态性与癫痫耐药的相关性. 方法 制定原始文献的纳入和排除标准及检索策略,检索中外文数据库,收集有关ABCB1 C3435T多态性与抗癫痫药物(AEDs)治疗反应相关性的研究报告,采用等位基因型(C vs T)以及共显性模型(CC vs TT,CT vs TT)、显性模型(CC+CT vs TT)和隐性模型(CC vs CT+TT)等基因遗传模型进行对比与定量综合分析,同时按人种所属地域(亚裔人与白种人)进行亚组分析. 结果 共23篇文献纳入Meta分析,包括3704例癫痫耐药患者和4160例治疗有效患者,入选文献无发表偏倚.统计分析显示:C3435T位点多态性与癫痫耐药无统计学关联;等位基因C与T相比,随机效应模型:OR=1.05,95％ CI:0.94～1.18,P=0.390.各基因型对比以及进行亚组分析后也未发现统计学关联. 结论 ABCB1 C3435T多态性与癫痫耐药无关联.     

MMP-2、TIMP-2在脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 分析MMP-2、TIMP-2的表达与脑胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系。方法 采用免疫组化和原位杂交的方法,检测42例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中,MMP-2 mRNA、MMP-2和TIMP-2蛋白表达。结果 MMP-2蛋白表达水平(LI)与肿瘤的分级呈正相关(r=0.872,P<0.01);Ⅲ、Ⅳ级与正常脑组织、Ⅰ～Ⅱ级之间均有显著的差异(P<0.01)。MMP-2mRNA表达与肿瘤的分级同样呈正相关(P<0.01);Ⅲ、Ⅳ级与正常脑组织、Ⅰ～Ⅱ级之间均有显著的差异(P<0.01)。MMP-2蛋白表达增高时TIMP-2蛋白表达也增高;但随着肿瘤恶性程度的增加,TIMP-2表达强度增加的幅度较MMP-2明显减缓。结论 MMP-2的高表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关;TIMP-2与MMP-2间的平衡失调与脑胶质瘤的侵袭性和恶性程度密切相关。