结肠肿瘤干细胞巢研究--从潘氏细胞谈起北大核心CSCD

近年来,对肿瘤干细胞巢的深入研究开启了肿瘤研究的"巢"时代,结直肠癌是实体肿瘤的典型代表,有较为典型的发生发展机制,是肿瘤干细胞巢研究的可靠模型。潘氏细胞是正常肠上皮的重要组成细胞,对肠干细胞具有重要的支持、保护等作用,是肠干细胞巢的关键成分之一。然而目前在结肠上皮恶性转化中,以潘氏细胞为代表的干细胞巢成分的作用如何尚有待研究,进一步研究潘氏细胞和肠干细胞的相互关系,从而推导其在结肠肿瘤不同发展阶段的可能作用,将有助于对肿瘤干细胞巢的进一步了解,同时也可为结直肠癌临床治疗提供潜在的新靶点。     

人结肠癌CCL187细胞肿瘤球细胞干细胞特性研究

目的：研究体外培养条件下人结肠癌CCL187细胞系肿瘤球细胞的干细胞特性。方法：用无血清培养液和低吸附6孔培养板培养CCL187细胞,显微镜观察肿瘤球形成,荧光染料Hoechst33342染色观察干样细胞,用24孔培养板接种绘制CCL187细胞和肿瘤球细胞的生长曲线,顺铂和依托泊苷处理检测两种细胞抵抗化疗的能力。结果：CCL187细胞在无血清培养条件下可形成肿瘤球,肿瘤球细胞中存在浅染的干样细胞。两种细胞的生长曲线显示肿瘤球细胞的自我繁殖能力大于CCL187细胞。化疗药物处理显示肿瘤球细胞比一般肿瘤细胞具有更强的化疗抵抗性。结论：CCL187细胞的肿瘤球细胞具有肿瘤干细胞特性。     

武汉市江岸区2006—2013年肿瘤流行状况分析

了解武汉市江岸区2006—2013年肿瘤发病的变化趋势,为进一步制定和调整肿瘤防治对策提供理论依据。方法 收集2006—2013年武汉市江岸区发病统计资料,运用年度变化百分比（APC）对恶性肿瘤发病率和平均发病年龄进行时间序列回归和相关分析。结果 武汉市江岸区男女肿瘤的发病顺位明显不同;其中男性甲状腺恶性肿瘤发病率呈上升趋势,APC为34.58% （P<0.001）;女性甲状腺恶性肿瘤和宫颈癌发病率均呈上升趋势,APC分别为35.93%（P<0.001）和8.65%（P=0.004）;且男性甲状腺恶性肿瘤平均发病年龄提前9.75岁,女性乳腺癌平均发病年龄延后2.29岁。结论 武汉市江岸区2006—2013年甲状腺恶性肿瘤的发病顺位提前,甲状腺恶性肿瘤、宫颈癌发病率均呈上升趋势,且男性甲状腺恶性肿瘤的发病年龄提前,因此甲状腺恶性肿瘤和宫颈癌应成为未来武汉市江岸区恶性肿瘤防制工作的重点。     

造血干细胞移植治疗NK细胞肿瘤

NK细胞肿瘤发病率很低,通常对化疗不敏感,除了孤立的鼻腔NK细胞淋巴瘤外其余的预后均较差。现没有确切的治疗方法,造血干细胞移植(HSCT)是目前比较有前途的一种手段。现就HSCT治疗NK细胞肿瘤的优点作一分析,并比较使用或不使用HSCT治疗患者的临床结果。     

侧群细胞与肺癌肿瘤干细胞

侧群(side population,SP)细胞是一小群能够将染料Hoechst 33342排出从而在流式细胞图上呈现Hoechst 33342低染的细胞,研究者已在多种肿瘤组织和细胞系中检测出了SP细胞并验证这些SP细胞具有强干细胞活性。现有试验结果证实多种肺癌组织和肺癌肿瘤细胞系中也存在具有类干细胞特性的SP细胞,这些SP细胞的鉴别与分离对于肺癌肿瘤干细胞的研究有何意义?本文将整合现有研究资料就这一问题进行阶段性综述。     

侧群细胞与肿瘤干细胞研究进展

目的:总结国内外采用侧群细胞分析法(side populations analysis)研究肿瘤干细胞的现状。方法:应用检索PubMed数据库检索系统,以“侧群细胞“和“肿瘤干细胞“等为关键词,检索1996-01-2008-12侧群细胞法研究肿瘤干细胞的文献。资料选择:选择所有侧群细胞法研究肿瘤干细胞的文献。纳入标准:1)侧群细胞法分离肿瘤干细胞;2)侧群细胞法鉴定肿瘤干细胞。根据纳入标准,精选80篇文献,最后纳入分析36篇文献。结果:采用SP法可以有效的分离和富集大部分类型的肿瘤干细胞,但是某些肿瘤SP细胞不具有肿瘤干细胞特性,此外,SP法还存在细胞毒性的问题。结论:采用SP分析法研究肿瘤干细胞存在许多问题,但是当无法确认到某种类型的肿瘤干细胞的表面标志时,它仍然是分离和富集肿瘤干细胞的有效方法之一。     

肿瘤转移与肿瘤干细胞研究

转移是恶性肿瘤的基本属性之一,也是临床治疗中一个棘手的问题,因而探索肿瘤转移的细胞学和分子生物学基础并寻找新颖的诊治靶标,是当前普遍关注的一个研究热点.肿瘤干细胞是恶性肿瘤的起始细胞,但最近的研究揭示,此类癌细胞也与肿瘤转移密切相关.本文简要综述了这一领域的最新研究进展.     

肿瘤干细胞研究现状

复发和转移是限制肿瘤临床治疗疗效的瓶颈。近些年,产生和发展了肿瘤干细胞理论,试图解释这种现象。本文就肿瘤干细胞研究的理论基础、现状及前景做一综述。     

肿瘤干细胞研究新进展

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病。肿瘤的转移与复发是治疗所面临的两大难题,但其机制还不清楚。肿瘤干细胞理论对此提出新的解释,其认为肿瘤中存在一小群具有自我更新和不定潜能的肿瘤细胞,可能是肿瘤转移和复发的根源。目前为止,研究人员已经在白血病、多发性骨髓瘤、乳腺癌、中枢神经系统肿瘤、肺癌分离并鉴定出了肿瘤干细胞,在胃癌和肝癌中也发现了肿瘤干细胞存在的证据。肿瘤干细胞学说的提出与证实使人类对肿瘤的转移、复发有了新的认识,必将对肿瘤转移、复发的治疗及预防产生重大影响。     

MB-WCX联合MALDI-TOF MS建立结直肠癌血清诊断模型

 目的 运用弱阳离子磁珠（magnetic beads based weak cation exchange, MB-WCX）联合基质辅助激光解吸离子飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）建立结直肠癌血清蛋白组学诊断模型。方法 收集我院正常对照（健康体检者）、结直肠癌术前及术后患者血清标本各72例,弱阳离子磁珠分离血清多肽,MALDI-TOF MS建立正常对照、结直肠癌术前及术后患者血清蛋白表达谱,ClinProt Tools 2.0软件分析差异表达峰并建立诊断模型,液相色谱-电喷雾离子化质谱（liquid chromatography-eletronic spray ionization mass/mass, LC-ESIMS/MS）鉴定差异表达蛋白。结果 对比分析正常对照、结直肠癌术前及术后血清蛋白图谱,共发现80个差异表达峰,12个峰差异具有统计学意义（均P<0.01）,与对照组相比,其中9个差异峰在结直肠癌术前的血清蛋白图谱中显示升高,术后显示降低,3个峰在结肠癌术前的血清蛋白图谱中显示降低,术后显示升高。遗传算法（genetic algorithm, GA）模型诊断结直肠癌的敏感度和特异性分别为99.31%和96.49%。GA模型中m/z: 2663.36、m/z: 4793.17和m/z: 5343.48的差异表达峰经鉴定分别为纤维蛋白原α前体亚型1（isoform 1 of Fibrinogen alpha chain precursor, FGA）、组蛋白赖氨酸甲基转移酶SETD7（histone-lysine N-methyltransferase SETD7, SETD7）和黏蛋白5AC（Mucin-5AC precursor, MUC5AC）。结论 血清蛋白质谱模型能够准确区分正常对照与结直肠癌患者,但尚需更进一步研究证实。     

TYMP基因多态性对结直肠癌患者R0切除术后辅助化疗疗效的影响

目的 探讨胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase, TYMP）基因变异是否对R0术后结直肠癌患者接受辅助化疗疗效有影响。方法 纳入198例术后接受辅助化疗的结直肠癌患者。收集患者外周血及术后癌组织标本分别用来进行TYMP基因5633C>T位点基因分型及TYMP基因表达测定。通过不同的分析方法分析该位点和其他变量的关系。Real-time PCR分析该位点不同基因型患者的TYMP mRNA表达水平。结果 TYMP基因5633C>T位点在CRC患者中的基因型分布频率为CC型126例（63.64%）,CT型61例（30.81%）,TT型11例（5.55%）,最小等位基因频率为0.21,三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡（P=0.323）。不同基因型患者基线资料均衡,预后分析上将CT/TT基因型合并。单变量生存分析结果显示：野生型的CC型患者OS较差,显著低于携带突变基因的CT型和TT型患者,差异有统计学意义（P=0.009）。多变量Cox模型校正之后发现CC基因型对OS有独立的影响（P=0.015）。另外,进一步在87例癌组织标本的mRNA表达分析中发现,突变的CT或TT型患者相对于野生型的CC型患者,癌组织中TYMP mRNA表达明显较高,差异有统计学意义（P=0.019）。结论 TYMP基因5633C>T位点可能通过影响TYMPmRNA的表达从而影响接受含卡培他滨辅助化疗方案的CRC患者的预后。     

结肠癌干细胞与临床病理因素及survivin、Ki67表达的相关分析

 目的
探讨肿瘤干细胞标志物CD133在结直肠癌组织中的表达,及其与临床病理因素、survivin和Ki67的关系。方法应用免疫
组织化学方法检测60例手术切除的结直肠癌和30例癌旁组织及12例正常组织中CD133的表达、癌组织中survivin和
Ki67的表达,对各指标之间的相关关系及其与性别、年龄、肿瘤的部位和大小、病理分级、侵袭深度、淋巴结转移、
pTNM分期之间的关系进行分析。结果结直肠癌组织中CD133阳性表达率为50％(30/60),显著高于癌旁及正常组织
(P<0.01);CD133的表达与淋巴结转移和pTNM分期密切相关(P<0.01),与病理分级存在相关性(P<0.05),与其他临床病理
因素均无关;survivin的表达仅与肿瘤的病理分级相关(P<0.05),Ki67与各项临床病理参数均无相关性;CD133与
survivin、Ki67的表达呈正相关(P<0.05、P<0.01);survivin与Ki67的表达呈正相关(P<0.01)。结论结直肠癌组织中
存在CD133+肿瘤细胞,肿瘤干细胞在结直肠癌的发生、发展中起重要作用,检测肿瘤干细胞标志物CD133的表达可作为
一种判断肿瘤的恶性程度和预后的重要指标。     

人结直肠肿瘤干细胞的分离培养与生物学特性

目的 从人结直肠肿瘤细胞中分离培养结直肠肿瘤干细胞(Colon cancer stem cells)并研究其生物学特性。方法 采用有限稀释法筛选分离具有连续克隆能力的单细胞,通过MTT比色法对其体外增殖能力进行鉴定,流式细胞仪分析细胞表面标记CD133、CD166、CD24、CD47、CD200、CD90、CD44、EPCAM的表达情况;PCR检测Oct4、Sox2、Nanog、C-myc等相关基因的表达,实时荧光定量PCR检测其表达量。结果 三例能够形成肿瘤球的原代培养细胞CD166阳性细胞所占比例分别为61.9%、52.4%、47.8%,CD47阳性细胞所占比例分别为99.8%、97.2%、99.9%;不能形成肿瘤球的原代培养细胞中CD166阳性细胞为10.8%,CD47阳性细胞为0.1%;CD133、EPCAM、CD24、CD200四个表面标记在两种细胞中的表达均低于0.5%,CD44、CD90在两种细胞中的表达均高于95%;与原代细胞相比,克隆细胞具有较强的体外增殖能力并且高表达Oct4(P<0.05)、C-myc (P<0.01)及Sox2基因,不表达Nanog基因。结论 人结直肠肿瘤中存在具有自我更新和增殖潜能的结直肠肿瘤干细胞,在体外可将其分离、培养和纯化。     

干细胞、癌症与癌症干细胞

干细胞被认为是一种未分化的细胞,具有永远增殖和自我更新能力.大量研究证明,癌症中存在对化疗更具抵抗性的癌症干细胞.识别癌症干细胞和普通癌症细胞之间的差异,可以发展更有效的癌症分类、诊断和治疗方法.     

抑制糖酵解途径治疗结直肠癌的研究进展

近年来,我国结直肠癌发病率及死亡率逐年上升,寻找早期预防、诊断和治疗的有效途径是目前结直肠癌基础及临床的研究热点。机体正常细胞主要由葡萄糖氧化供能,而结直肠癌细胞的糖酵解途径显著增强并以此作为主要供能途径。本文就糖酵解关键酶、信号转导通路和转录因子在结直肠癌糖酵解途径中的研究进展及治疗策略作一综述。     

NDUFA4过表达对人结直肠癌细胞体外生长的影响

 目的 探讨过表达NDUFA4对人结直肠癌细胞体外生长的影响及其机制。方法 将p-NDUFA4重组质粒（p-NDUFA4组）和p-Cont对照质粒（p-Cont组）体外分别转染人结直肠癌HCT116细胞；采用Real-time PCR和Western blot检测细胞中NDUFA的表达；CCK-8法和克隆形成实验分别检测HCT116细胞增殖活性和克隆形成能力；实时荧光定量PCR法检测HCT116细胞中CDK2、CDK3、CDK4、CDK6的mRNA水平；Western blot法检测细胞中蛋白总AKT、ERK1/2以及磷酸化AKT（p-AKT）、ERK1/2（p-ERK1/2）的表达水平。结果 与p-Cont对照组相比，p-NDUFA4组中NDUFA4的表达水平显著升高（均P<0.01）；细胞增殖和克隆形成能力明显增强（均P<0.05）；CDK2、CDK3等的mRNA水平显著上调（均P<0.05）；p-NDUFA4组中p-AKT和p-ERK1/2蛋白的表达水平明显上调（均P<0.05）。结论 过表达NDUFA4能明显促进人结直肠癌细胞的体外生长，其机制可能与AKT和ERK信号通路的变化相关。     

Notch信号通路在肿瘤干细胞中的研究进展

肿瘤干细胞是一类具有自我更新分化能力,在移植动物宿主中具有致瘤性且对放化疗抵抗的细胞小亚群,是肿瘤复发转移的主要原因。Notch信号通路在进化中高度保守,具有调控细胞增殖、分化和凋亡的功能,且在维持肿瘤干细胞的干细胞特性方面发挥重要作用,在干细胞中与多个信号通路存在交互作用。通过抑制Notch信号通路靶向作用肿瘤干细胞的治疗策略已进入临床试验阶段,具有广阔的发展前景。全文就Notch信号通路在肿瘤干细胞中的作用及其与Wnt、TGF-β、Her-2信号通路的交互作用进行阐述与分析。     

青海省西宁市居民2009—2014年大肠癌发病率及其趋势分析

 目的 分析青海省西宁市居民2009—2014年大肠癌发病情况并预测其发展趋势,为当地大肠癌防治策略提供参考。方法 以2009—2014年青海省西宁市常住户籍居民为研究对象,按1982年中国标准人口和1985年世界标准人口计算大肠癌标化发病率（age-standardized rate, ASR）,采用泊松近似法比较年龄、性别率值间的差异,应用Join-point线性回归分析率值的变化百分比（percent changes, PC）和年均变化百分比（annual percent change, APC）并进行趋势分析。结果 西宁市2009—2014年大肠癌新发1 486例,男性850例、女性为636例;合计粗发病率为11.28/10万人年,其中男性粗发病率为12.67/10万人年,女性粗发病率为9.84/10万人年。男性中国标化发病率（8.34/10万人年）高于女性（6.10/10万人年）,标化发病比例为1.37:1。男性大肠癌中国标化发病率上升趋势明显（APC=14.06, Z=3.98, P=0.016）,女性大肠癌中国标化发病率上升趋势明显（APC=14.01, Z=3.60, P=0.022）合计中国标化发病率上升趋势明显（APC=14.15, Z=6.28, P=0.003）。居民大肠癌发病率从40岁开始随年龄增加而升高,且上升趋势明显（APC=8.30, Z=22.82, P<0.001）。结论 西宁市大肠癌发病率近年来显著上升,提高大肠癌早诊早治力度,推进大肠癌筛查工作势在必行。     

烟酰胺磷酸核糖基转移酶在结肠癌中的表达、功能及生物信息学分析

目的 探讨NAMPT在结肠癌组织中的表达并利用生物信息学分析其理化性质、蛋白结构、互作蛋白、细胞定位及对其功能进行预测分析。方法 利用TCGA数据库及即时聚合酶链锁反应（qPCR）技术验证NAMPT在结肠癌组织中的表达;利用siRNA敲除SW480细胞中NAMPT表达后测定细胞增殖能力;利用生物信息学ProtParam、Jpred4.0、Genecards、String等软件对NAMPT理化性质及功能进行预测分析。结果 在结肠癌组织中,NAMPT mRNA水平表达明显高于相应的癌旁组织;沉默SW480细胞中NAMPT后细胞增殖能力减弱;生物信息学提示NAMPT由491个氨基酸组成,为不稳定酸性亲水性蛋白质;二级结构预测发现其有14个α螺旋,17个β折叠;三级结构全球性模型质量估测（GMQE）评分0.97;预测结果显示NAMPT并无功能结构域,其仅有一个保守结构域。蛋白定位发现其在细胞外、细胞核以及胞质中均有大量表达,其参与的生物学活动主要包括参与NAD+生物合成、昼夜节律、应激、代谢反应及衰老等。结论 在结肠癌患者组织中NAMPT高表达,可参与多种生物学过程,并可通过不同途径调节肿瘤生物学行为。