姜黄素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及 凋亡的影响

 目的探讨姜黄素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及凋亡的影响及其相关的分子机制。方法体外培养的 CNE-2Z细胞经不同剂量姜黄素处理后,用MTT法观察对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期和凋亡 率的改变,Western blot检测姜黄素处理后相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化。结果姜黄素对CNE-2Z细 胞的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用,阻断细胞于S期和G2/M期。姜黄素处理后CNE-2Z细胞凋亡抑 制基因Bcl-2蛋白表达减少,同时促凋亡基因Bax蛋白表达增加。 结论姜黄素可抑制CNE-2Z细胞增殖并促进 其凋亡。     

MLN4924对紫杉醇耐药的前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究MLN4924对紫杉醇耐药的前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响,从而为紫杉醇耐药前列腺癌的临床治疗提供新的理论依据。方法:不同浓度的MLN4924作用紫杉醇耐药的前列腺癌细胞PC3-TxR和DU145-TxR 48和72小时后,采用MTS检测细胞活力。Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、CDT1、p27以及EMT标志物水平。结果:MLN4924能够显著抑制PC3-TxR和DU145-TxR细胞的增殖,并且具有时间和浓度的依懒性。Western blot结果显示MLN4924作用后显著增加细胞内凋亡相关蛋白Caspase-3、CDT1和p27的表达。结论:MLN4924能够显著抑制紫杉醇耐药的前列腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡,其相关机制为MLN4924可通过上调p27蛋白表达促进紫杉醇耐药的前列腺癌细胞凋亡。     

槲皮素对人小细胞肺癌H446细胞增殖和凋亡的影响

目的： 观察槲皮素(Quercetin) 对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。 方法： MTT法检测20、40、80、160、200 μmol/L槲皮素对H446细胞增殖的抑制作用,共聚焦显微镜观察100、200 μmol/L槲皮素处理48 h对H446细胞增殖的影响,流式细胞术检测槲皮素对H446细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blotting检测槲皮素对H446细胞内P53、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。 结果： 槲皮素对H446细胞的增殖抑制具有显著的剂量和时间依赖性（P<0.05）,在12、24、48及72 h四个时间点,槲皮素作用于H446细胞的IC50值分别为（172.2±2.6）、（102.4±5.3）、（68.6±2.7）及（48.8 ±1.9）μmol/L。槲皮素处理后,随着H446细胞密度的降低,细胞核部分皱缩并裂解为凋亡小体,其对H446细胞的促凋亡作用呈现出显著的剂量依赖性,40 μmol/L组H446细胞的凋亡率即显著高于对照组[（8.3±0.4）% vs（4.0±05）%;P<0.01],当药物浓度达到200 μmol/L时凋亡率达到最高。槲皮素能将H446细胞周期特异性地阻滞于G2/M期。与对照组相比,200 μmol/L 槲皮素处理组P53\[（4.98±0.91）vs（0.68±0.26）,P<0.01]和Bax蛋白[（4.26±0.23）vs （0.89±0.29）,P<0.01]表达显著升高,Bcl-2蛋白表达[（0.36±0.06）vs（8.23±1.65）,P<0.01]显著下降。 结论： 槲皮素能够抑制H446细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与调控Bax、p53和Bcl-2等细胞凋亡相关蛋白有关。     

西咪替丁对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

摘要：目的研究西咪替丁对其增殖及凋亡的影响并探讨其可能的机制。方法分别以不同浓度的西咪替丁处理A549细胞48 h后,采用MTT法测细胞存活率,流式细胞术测细胞凋亡率,Western blot测Bcl-2和Bax蛋白表达水平情况,观察西咪替丁对A549细胞增殖和凋亡的影响。结果经西咪替丁干预48 h后,A549细胞的增殖受到明显抑制,凋亡增加,且该抑制呈药物浓度依赖性增加。Western blot检测显示随着西咪替丁浓度增加,Bcl-2蛋白的表达减少,而Bax蛋白的表达增加。结论西咪替丁预处理能抑制A549细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与其下调细胞Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达有关。     

SPOCK2基因表达上调对前列腺癌细胞增殖的影响

目的:探讨SPOCK2基因表达上调对前列腺癌细胞增殖的影响。方法:通过Real-time PCR及Western Blot检测前列腺癌组织及细胞中SPOCK2基因的表达。进一步通过基因重组技术上调前列腺癌细胞系DU145及LNCaP中SPOCK2基因表达,通过CCK8检测细胞增殖情况变化,通过流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果:前列腺癌组织中SPOCK2表达显著低于正常对照组（P<0.05）,应用基因重组片段有效上调SPOCK2基因表达后,转染组细胞增殖率均显著低于阴性对照组及空白对照组,差异有显著统计学意义（P<0.05）。转染组G0/G1期细胞百分比显著高于阴性对照组及空白对照组,差异有显著统计学意义（P<0.05）。转染组S期显著低于阴性对照组及空白对照组,差异有显著统计学意义（P<0.05）。DU145细胞转染组凋亡率显著高于阴性对照组及空白对照组,差异有显著统计学意义（P<0.05）。结论:SPOCK2上调可以抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞停滞于G0/G1期,表明该基因可能通过影响细胞增殖,作为抑癌基因在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用。     

蝎毒多肽提取物诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的实验研究

目的探讨蝎毒多肽提取物（PESV）诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的作用及机制。方法用PEsV（40μg／mL）处理DU-145细胞，采用Gimeea染色法观察凋亡细胞形态变化；采用免疫组化S-P法检测核增殖抗原Ki-67及凋亡相关基因bax和bcl-2的表达，并用病理图像分析软件进行半定量分析；TUNEL法检测凋亡细胞，并计算前列腺癌细胞增殖指数（proliferating index，PI）和凋亡指数（apoptosis index，AI）。结果PESV在体外对DU-145细胞有中度增殖抑制效应；在PESV作用下，DU-145细胞出现显著的细胞凋亡征象，凋亡指数明显增高，增殖指数降低．AI／PI明显增高（P〈0．05）。PESV处理DU-145细胞可明显提高凋亡相关基因bax表达水平，降低凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平，使Bel-2／Bax比值明显减小（P〈0．05）。结论PESV（40μg／mL）可以诱导细胞凋亡，而且至少是通过促进Bax、抑制Bel-2基因表达的机制诱导细胞凋亡。     

BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨BAY 11-7082对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法:选择PC-3细胞分别加入不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L)的Bay 11-7082培养2h(实验1组与实验2组),同时选择空白对照组,检测三组细胞增殖、凋亡与细胞周期变化情况.结果:实验1组与实验2组的细胞存活率分别为(65.14±13.26)%和(55.81±14.55)%,明显低于空白对照组(85.45±12.33)%(P<0.05).空白对照组、实验1组与实验2组的细胞凋亡率分别为(0.56±0.11)%、(10.12±2.37)%和(17.23±2.46)%,对比差异都有统计学意义(P<0.05).实验组的G 0/G1期细胞数目较对照组明显增加(P<0.05),同时实验组的S、G 2/M期细胞数目较对照组明显减少(P<0.05),实验1组与实验2组之间对比差异也有统计学意义(P<0.05).结论:BAY 11-7082能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡,其部分机制可能是通过调节细胞周期实现的.     

前列腺癌中锌指蛋白ZIC2表达及对细胞增殖和凋亡的影响

背景与目的：锌指蛋白ZIC2在肿瘤中的表达及作用呈组织特异性，其异常表达与肿瘤的预后紧密相关。但ZIC2在前列腺癌中的表达与作用未见相应研究。该研究拟检测前列腺癌组织及细胞中ZIC2蛋白表达情况，明确ZIC2异常与临床病理参数间的关系与及对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用免疫组织化学SP法检测31例经穿刺活检诊断的前列腺癌标本及同期35例经尿道前列腺电切（transurethral resection of the prostate，TURP）获取的良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）组织中ZIC2的表达，分析其异常表达与临床病理参数间的关系；应用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）干扰ZIC2基因并转染前列腺癌DU145细胞，采用蛋白质印迹法（Western blot）检测蛋白水平。采用四甲基偶氮唑盐（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测细胞增殖，采用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡变化。结果：前列腺癌组织及BPH中ZIC2总阳性表达率分别为 90.32%（28/31）及20.00%（7/35），两者间差异有统计学意义（χ²=32.639，P=0.000）。ZIC2阳性表达率与前列腺癌 Gleason评分相关（χ²=9.753，P=0.003），与前列腺特异性抗原（prostate-specific antigen，PSA）、浸润深度无相关性（P均＞0.05）。前列腺癌细胞中ZIC2表达明显升高，受干扰后蛋白显著降低；MTT法检测结果显示，ZIC2低表达后细胞生长明显减慢；流式细胞术检测结果显示，ZIC2降低后能有效抑制癌细胞增殖并增加凋亡。结论：ZIC2在前列腺癌中高表达，属癌基因，与Gleason评分密切相关；其表达降低后能有效抑制前列腺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

宝藿苷-I联合5-FU对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究宝霍苷-I与5-FU联合应用对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。方法：实验设联合用药组（12.5mg/L宝霍苷-I＋12.5mg/L5-FU）、阴性对照组（0.1%DMSO）、25mg/L宝藿苷-I组和12.5mg/L5-FU组,共4组,每组均设3个复孔,每孔100μl（含Eca-109细胞数为1×10~4个）。作用24、48、72h时,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法分别检测各组Eca-109细胞的增殖;并在作用48h后,用流式细胞术检测Eca-109细胞凋亡率;用Western blot技术检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：宝霍苷-I、5-FU单用及其联合应用在24、48和72h时均可明显抑制Eca-109细胞的增殖,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）,联合应用的抑制作用显著优于单独应用（P〈0.05）。宝霍苷-I、5-FU单独及其联合作用48h后,均可诱导Eca-109细胞凋亡,均可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,与对照组相比差异均有统计学意义（P均〈0.05）,且联合用药组较单独用药组作用明显（P〈0.05）。结论：宝霍苷-I与5-FU联合应用对Eca-109细胞的增殖抑制和凋亡诱导有协同作用,可能与下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达有关。     

汉防己甲素对前列腺癌PC3细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用

目的 研究汉防己甲素(Tetrandrine,TET)对人前列腺癌细胞PC3增殖与凋亡的影响及可能的作用机制。方法 用不同浓度TET（0、1、2、4、6、8、10 μg/ml）处理PC3细胞,锥虫蓝拒染法和MTT法检测TET对PC3细胞生长的影响,流式细胞仪检测TET对PC3细胞凋亡的诱导作用,Western blot法检测TET对细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP表达的影响。结果 2 μg/ml TET作用24 h对PC3细胞生长的抑制率为（20.96±1.72）%,随着药物浓度的增加,抑制作用加强,10 μg/ml TET作用24 h对PC3细胞生长的抑制率达（89.23±4.12）%。TET能诱导PC3细胞凋亡,并能明显诱导凋亡相关基因Caspase-3的剪切活化及其底物PARP的剪切失活。结论 TET能明显抑制PC3细胞生长,诱导细胞凋亡,该作用与TET诱导细胞Caspase-3剪切激活及PARP剪切失活有关。     

靶向Bcl-xL基因siRNA在前列腺癌细胞增殖和凋亡中的作用

目的研究Bcl-xL基因特异性RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞株体外增殖能力和凋亡的影响。方法构建靶向Bcl-xL的小干扰RNA(siRNA)表达载体,转染PC-3细胞后,采用半定量RT-PCR和Western blot法检测转染前后Bcl-xL mRNA及蛋白表达水平的改变;采用噻唑兰(MTT)法检测细胞生长增殖情况;TUNEL试剂盒测定细胞的凋亡情况。结果靶向Bcl-xL的序列特异性的siRNA可以有效地抑制PC-3细胞Bcl-xL基因的表达。转染靶向Bcl-xL的siRNA表达质粒可以显著抑制PC-3细胞的增殖（P<0.001）,诱导细胞凋亡（P<0.001）。结论Bcl-xL基因特异性RNA干扰可以显著抑制前列腺癌PC-3细胞的体外增殖并诱导细胞凋亡。     

低氧对前列腺癌PC3细胞上皮间质转化的影响

 目的 探讨低氧对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响。方法 分别在常氧（常氧组）和低氧（低氧组）条件下培养PC3细胞24 h,细胞增殖MTT实验检测低氧对前列腺癌PC3细胞增殖力的影响,Transwell侵袭实验评估低氧对前列腺癌PC3细胞侵袭力的影响,Western blot检测HIF-1α、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平。另外,在常氧条件下用siRNA抑制HIF-1α表达（干扰组）,用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平变化。结果 与常氧组比较,低氧组前列腺癌PC3细胞的增殖力和侵袭力增加,HIF-1α表达水平增加（P=0.0004）,HIF-1α向核内转位;N-cadherin（P<0.0001）和Vimentin（P<0.0001）的表达水平显著增加,E-cadherin的表达水平显著下降（P<0.0001）。同时,干扰组跟常氧组比较,抑制HIF-1α表达使N-cadherin（P=0.0002）和Vimentin（P=0.0002）的表达水平显著下降,而使E-cadherin的表达水平显著增加（P<0.0001）。结论 低氧可能通过调节HIF-1α表达促进前列腺癌PC3细胞的上皮间质转化。     

长链非编码RNA-MALAT1对前列腺癌细胞增殖及凋亡的影响

 目的 探讨长链非编码RNA-MALAT1对激素依赖性前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 以激素依赖性前列腺癌细胞PC3和LNCaP为研究对象，对细胞进行MALAT1过表达及干扰处理，并通过MTT、流式细胞仪、基质胶和平板克隆等方法检测MALAT1过表达或干扰对细胞生物学行为的影响。Western blot检测MALAT1对与细胞周期及凋亡相关蛋白Cyclin D1、Bcl-2、Bax及p-ERK1/2表达的影响。结果 与对照组比较，MALAT1组细胞的增殖能力明显增强（P<0.01），克隆形成能力、血管生成能力增强，G₀/G₁期细胞数量增多，凋亡率降低；si-MALAT1组细胞增殖能力明显低于对照组（P<0.01），克隆形成能力、血管生成能力减弱，G₀/G₁期细胞数量减少，凋亡率升高。结论 MALAT1对前列腺癌的发生发展有促进作用，抑制MALAT1表达可能对前列腺癌的治疗具有重要意义。     

SCD1抑制剂对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响及其机制

目的 检测硬脂酰辅酶A去饱和酶1（stearoyl-CoA desaturase 1, SCD1）在乳腺癌组织中的表达,分析抑制SCD1的活性对乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法 采用免疫组织化学法检测乳腺癌及癌旁正常组织中SCD1蛋白的表达。应用MTS法测定SCD1抑制剂MF-438对MCF-7细胞增殖的抑制率。应用Hoechst33342染色荧光显微镜观察细胞形态并计算凋亡指数,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率。蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果 乳腺癌组织中SCD1阳性表达率显著高于正常乳腺组织（P<0.05）,并且三阴性乳腺癌中的SCD1表达水平低于其他亚型（P<0.05）。MF-438在0.1~100 μmol/L浓度范围内,对MCF-7细胞显示出显著的剂量依赖性的增殖抑制作用,并在低血清条件下更为敏感。MCF-7细胞在5 μmol/L MF-438作用48 h后,表现出典型的细胞凋亡特征性变化,细胞凋亡指数及细胞凋亡率显著高于对照组（P<0.05）;同时,MF-438下调MCF-7细胞抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,并上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论 抑制SCD1能抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡,对SCD1的深入研究将有望为乳腺癌的分子靶向治疗提供一个新的靶标。     

黄芪甲苷对人结肠癌SW480细胞系增殖和凋亡的影响

目的 探讨黄芪甲苷对人结直肠癌SW480细胞系增殖和凋亡的影响。方法 药物细胞毒性实验检测黄芪甲苷对SW480细胞存活率的影响，测得IC50为168 μmol/L；以不同浓度黄芪甲苷处理SW480细胞。细胞计数试剂盒检测细胞增殖倍数；蛋白质印迹法检测细胞中Ki67、PCNA、bcl-2、Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达水平；Hoechst染色法检测细胞凋亡情况。结果 黄芪甲苷浓度大于20 μmol/L时，细胞存活率明显降低。与对照组相比，黄芪甲苷加药组细胞增殖倍数明显降低，黄芪甲苷低剂量组Ki67的表达量没有显著变化，黄芪甲苷中、高剂量组细胞中Ki67和PCNA的表达量显著降低；黄芪甲苷干预后，凋亡细胞比率显著升高，bcl-2的表达水平显著降低，而bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达量显著上升；且随着黄芪甲苷浓度的增加，效果越明显。结论 黄芪甲苷能抑制人结肠癌SW480细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

Antitumoral and Antioxidant Potential of Egyptian Propolis Against the PC3 Prostate Cancer Cell Line

It has been shown previously that nutritional supplements rich in polyphenolic compounds play a significant role in prostate cancer chemoprevention. Propolis is a natural, resinous hive product that has several pharmacological activities including antimicrobial, antioxidant, anti-inflammatory, and antitumoral activities. The aim of this study was to compare the cytotoxic, antioxidant and antitumoral activities of an ethanolic extract of Egyptian propolis (EEP) in vitro with an established chemotherapeutic drug such as doxorubicin (DOX), and the effects of their combination against the PC3 human prostate cancer cell line. Cellular viability and IC50 levels with EEP, DOX and their (v/v) combination were detected by sulphorhodamine-B (SRB) assay after incubation of PC3 cells for 72h with different doses (0, 0.01, 0.1, 1, 10 and 100μg/ml). Two selected doses of IC50 and IC25 were applied to cells for 24h for antitumor evaluation assay of treatment compounds. EEP and its (v/v) combination with DOX showed significant antitumor potential besides high antioxidant properties of superoxide dismutase (SOD), total antioxidant capacity (TAC), catalase (CAT), nitric oxide (NO) and reduced glutathione (GSH) levels when compared with the control untreated cells. DNA fragmentation assay and semi quantitative RT-PCR analyses for p53 and Bax genes showed that EEP activated cellular apoptosis and increased the mRNA expression levels more than other treatment. In conclusion, EEP alone or in combination with DOX at both doses used here showed greater antioxidant, antiproliferative and apoptotic effects against the PC3 cell lines as compared to treatment with DOX alone. Therefore, EEP could be considered as a promising candidate for prostate cancer chemotherapy.     

双氢青蒿素诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡

目的研究双氢青蒿素（DHA）诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡作用,并观察其形态学变化。方法采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠种植瘤模型,20只模型鼠随机分为对照组、溶剂组、DHA大剂量组及小剂量组,经13天干预后,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤组织形态学表现;TUNEL法及Hoechst 33258荧光染色检测凋亡。结果DHA大小剂量组抑瘤率分别为69.221%和63.186%;肿瘤组织内凋亡细胞明显增多;肿瘤细胞凋亡率及凋亡细胞数密度均明显升高（P＜0.05）。结论DHA具有较强的抗肿瘤作用,其作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

芦荟苷对食管癌细胞系KESY70增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨芦荟苷对食管癌细胞系KESY70增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 用不同浓度的芦荟苷处理食管癌细胞系KESY70。食管癌KESY70细胞随机分为5组：未处理组（KESY70）、对照组（DMSO）和芦荟苷（10、40、80 μmol/L）组。CCK-8检测细胞活力和增殖能力。流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,蛋白印记法分析PCNA、Cleaved caspase-3和MMP-9的表达。结果 与DMSO组相比,40、80和120 μmol/L芦荟苷处理组细胞活力明显减弱（P<0.01）。40和80μmol/L的芦荟苷处理3 d后,芦荟苷组细胞增殖能力明显降低（P<0.05）,芦荟苷组的细胞凋亡率明显高于DMSO组（P<0.05）,侵袭能力受到明显抑制（P<0.05）,PCNA、MMP-9蛋白的表达明显下降（P<0.05）,Cleaved caspase-3表达明显升高（P<0.05）。结论 芦荟苷可抑制食管癌细胞系KESY70的增殖和侵袭,促进细胞凋亡。