PUMA通过线粒体途径诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的:研究p53上调凋亡调控因子(PUMA)对骨肉瘤细胞凋亡的影响及机制。方法:在骨肉瘤细胞F5M2中转染PUMA过表达载体,同时转染对照阴性载体,以qRT-PCR和Western blot法测定转染后细胞中PUMA表达情况,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,用JC-1法检测细胞线粒体膜电位,以Western blot法测定线粒体和胞浆中细胞色素C（Cyt C）蛋白表达情况,同时检测细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水 解酶3（Cleaved Caspase-3）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平。结果:转染PUMA过表达载体后的F5M2细胞中PUMA mRNA和蛋白水平升高,而转染对照阴性载体对F5M2细胞中PUMA mRNA和蛋白水平没有影响。过表达PUMA后的F5M2细胞凋亡率升高,细胞线粒体膜电位下降,线粒体中Cyt C蛋白水平降低,胞浆中Cyt C蛋白水平升高,同时细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平也升高,与未做转染的F5M2细胞比,差异有统计学意义（P<0.05）。转染对照阴性载体后的细胞凋亡率、线粒体膜电位、线粒体和胞浆中Cyt C蛋白水平、Cleaved Caspase-3蛋白水平、Cleaved Caspase-9蛋白水平与未做转染的F5M2细胞相比没有明显变化（P>0.05）。结论:PUMA通过促进线粒体中Cyt C释放,降低线粒体膜电位,激活Caspase-3诱导骨肉瘤细胞凋亡。     

PDCD4促进吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究程序性细胞死亡因子4（programmed cell death 4,PDCD4）在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用。方法:用吉西他滨处理胰腺癌细胞PANC-1,荧光定量PCR和Western blot分别检测胰腺癌细胞中PDCD4的表达变化。PANC-1细胞感染PDCD4-pGC-Fu-GFP重组慢病毒和对照pGC-Fu-GFP重组慢病毒,荧光定量PCR和Western blot检测过表达效果。用吉西他滨处理过表达PDCD4的PANC-1细胞,MTT测定细胞增殖,克隆形成实验测定细胞克隆能力,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测细胞中剪切的Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、剪切的Caspase-9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平和胞浆、线粒体中细胞色素C（Cytochrome C）蛋白水平。结果:吉西他滨处理后的PANC-1细胞中PDCD4 mRNA和蛋白水平均明显升高。吉西他滨处理和过表达PDCD4的PANC-1细胞增殖、克隆形成能力明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平升高,胞浆中Cytochrome C蛋白水平也升高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平降低。吉西他滨处理过表达PDCD4的PANC-1细胞增殖能力、克隆形成能力降低更多,细胞凋亡率更高,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平也更高,胞浆中Cytochrome C蛋白水平更高,线粒体中Cytochrome C蛋白水平更低。结论:吉西他滨通过上调PDCD4表达水平激活线粒体途径诱导胰腺癌细胞凋亡。     

siRNA沉默Rac1表达促进增生期血管瘤内皮细胞内质网应激和抑制细胞增殖的作用与机制研究

目的:研究慢病毒介导Rac1沉默对增生期血管瘤内皮细胞内质网应激及Caspase-12活化水平的影响。方法:用Rac1 siRNA慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体感染人增生期血管瘤内皮细胞,用Realtime PCR和Western blot检测细胞中Rac1表达变化。MTT法测定细胞增殖能力,PI单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western blot检测细胞中周期蛋白p21、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和凋亡蛋白活化的Caspase-3（C-Caspase-3）表达水平,同时检测细胞中内质网应激相关蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化的Caspase-12（C-Caspase-12）表达水平。结果:Rac1 siRNA慢病毒载体感染后的血管瘤内皮细胞中Rac1表达水平明显降低,阴性对照慢病毒对细胞中Rac1表达水平没有影响。沉默Rac1后的增生期血管瘤内皮细胞增殖能力下降,细胞G0/G1比例升高,p21蛋白水平升高,Cyclin D1蛋白水平下降,凋亡率升高,C-Caspase-3蛋白水平升高,CHOP、C-Caspase-12蛋白水平也升高,与没有感染慢病毒的细胞比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。阴性对照慢病毒感染对血管瘤内皮细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞中p21、Cyclin D1、C-Caspase-3、CHOP、C-Caspase-12蛋白水平没有影响。结论:慢病毒介导Rac1沉默诱导增生期血管瘤内皮细胞凋亡,阻滞细胞周期,诱导内质网应激发生,诱导Caspase-12活化。     

矢车菊-3-O-葡萄糖苷增强肝癌HepG2细胞的抗肿瘤活性及其机制探讨

目的:探讨矢车菊-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-glucoside, C3G)增强人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:采用MTT法研究C3G对HepG2细胞抑制率的影响;利用激光共聚焦观察Hoechst 33342染色后细胞形态;流式细胞分析仪分别测定C3G对HepG2细胞凋亡、周期和线粒体膜电位的影响;Western blot法测定C3G对HepG2细胞凋亡相关蛋白表达量的影响。结果:当C3G浓度在12.5～100.0μmol/L范围内,随C3G浓度增加HepG2细胞的抑制率显著增加,呈浓度依赖性,同时在24、48、72 h对HepG2细胞抑制率的IC₅₀分别为97.16、40.35、39.83μmol/L。C3G能显著增加HepG2细胞凋亡率和细胞核的荧光强度,并将细胞周期阻滞在G₂/M期,同时线粒体膜电位显著降低。C3G可上调Bax、Cytochrome c、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平。结论:C3G可通过激活线粒体介导的凋亡通路和周期阻滞来实现抗肿瘤作用。     

没食子酸诱导ROS积蓄介导黑色素瘤B16-F10细胞内源性凋亡及周期阻滞北大核心

目的:探究没食子酸诱导活性氧(reactive oxygen species,ROS)积蓄介导黑色素瘤B16-F10细胞凋亡及周期阻滞的作用机制。方法:以梯度浓度的没食子酸作用于黑色素瘤B16-F10细胞,采用MTT法检测没食子酸对细胞生长的影响,平板克隆技术检测细胞克隆形成率,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,ROS Assay Kit检测B16-F10细胞内ROS水平,线粒体膜电位检测试剂盒检测细胞膜电位的变化,Hoechst 33258荧光染色法进行细胞形态学检测,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期阻滞水平,Western blot检测细胞内相关蛋白水平的变化。结果:结果显示,没食子酸明显抑制B16-F10细胞的生长,且具有浓度依赖性。没食子酸作用后,B16-F10细胞增殖、迁移及侵袭能力明显下降,细胞内ROS水平明显升高,线粒体膜电位明显下降;细胞数减少,细胞凋亡率增加,G_(0)/G_(1)期细胞数明显增多;细胞内凋亡相关蛋白Bax、Cytochrome C、Caspase-9以及Caspase-3表达量增加,而Bcl-2表达量减少;周期相关蛋白Chk2、p53、p21表达量明显增加,CyclinE1、CDK2表达量减少。结论:没食子酸作用于黑色素瘤B16-F10细胞后,通过诱导ROS积蓄,引起B16-F10细胞内源性凋亡及周期阻滞。     

RNA干扰RhoBTB1表达促进结肠癌HT29细胞增殖、抑制其凋亡的相关研究

目的:探究RNA干扰RhoBTB1基因表达对结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用Lipofectamine 2000将siRNA RhoBTB1或siRNA NC转入HT29细胞中，实验分为Control组、转染对照组和siRNA Rho组，噻唑蓝（MTT）和流式细胞术分别检测细胞的的活力和凋亡率，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中RhoBTB1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量。结果:与对照组相比，HT29细胞转染siRNA RhoBTB1后，细胞中RhoBTB1蛋白的表达量显著低于对照组（P<0.05），细胞活力显著升高（P<0.05），凋亡率显著降低（P<0.05），Cleaved Caspase-3、Bax蛋白水平明显降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著增加（P<0.05）。结论:RNA干扰RhoBTB1表达促进结肠癌HT29细胞增殖，抑制其凋亡，可能通过调节线粒体凋亡通路相关蛋白的表达量发挥作用。     

MiR-374a通过PTEN/AKT信号通路调节乳腺癌细胞的增殖和凋亡

摘 要：［目的］ 探讨miR-374a在乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用，并进一步探讨其机制。［方法］ 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测人乳腺癌细胞MCF-7及正常人乳腺细胞Hs 578Bst的miR-374a及PTEN mRNA转录水平，Western blot法测定MCF-7、Hs 578Bst组细胞及对照、 miR-374a抑制剂组细胞的PTEN、p-AKT蛋白表达变化，用CCK-8法及Tunel法分别观察对照组和miR-374a抑制剂组细胞的增殖和凋亡，并用Western blot法检测两组细胞的凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达。［结果］ 与人正常乳腺Hs 578Bst细胞相比，乳腺癌MCF-7细胞的miR-374a表达水平显著性增高（P<0.001），PTEN mRNA及蛋白的表达水平显著性降低（P<0.001），而p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.001）。miR-374a抑制剂可抑制乳腺癌细胞的增殖（P<0.001），并促进其凋亡的发生（P<0.001），降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平（P<0.001）的同时活化凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9（P<0.001）。miR-374a 通过靶点PTEN影响AKT通路，miR-374a组细胞PTEN mRNA表达水平显著性降低（P<0.001），而miR-374a抑制剂处理后，PTEN蛋白水平显著性升高（P<0.001），p-AKT表达降低（P<0.001）。［结论］ miR-374a在乳腺癌细胞高表达，并通过调节PTEN/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖，促进凋亡的发生。miR-374a/PTEN/AKT信号通路有望成为乳腺癌的新治疗靶点。     

常春藤皂苷元影响内质网相关途径阻滞骨肉瘤细胞周期的实验研究

目的:研究常春藤皂苷元对骨肉瘤细胞周期的影响及机制。方法:用0、5、10、20、40 μg/ml的常春藤皂苷元处理骨肉瘤细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况,细胞克隆实验测定细胞克隆形成能力,计算其半数抑制浓度。用半数抑制浓度的常春藤皂苷元处理骨肉瘤细胞,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,荧光探针法测定细胞内Ca2+浓度。用Western blot法检测细胞中结合免疫球蛋白（BIP）、内质网氧化还原酶1-Lα（Erol-Lα）、蛋白质二硫键异构酶（PDI）、剪切型Caspase-12（Cleaved Caspase-12）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）蛋白水平。结果:5、10、20、40 μg/ml的常春藤皂苷元均可以抑制骨肉瘤细胞的增殖和克隆形成能力,与0 μg/ml常春藤皂苷元作用组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。半数抑制浓度的常春藤皂苷元处理后的骨肉瘤细胞G1期比例升高,细胞凋亡率也升高,细胞内Ca2+浓度升高,细胞中BIP、Erol-Lα、PDI、Cleaved Caspase-12蛋白水平升高,Cyclin D1蛋白水平降低,与0 μg/ml常春藤皂苷元作用组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:常春藤皂苷元通过影响内质网相关途径将骨肉瘤细胞周期阻滞在G1期,诱导细胞凋亡发生。     

下调Akt1表达对胆管癌HUCCA-1细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察Akt1干扰后胆管癌HUCCA-1细胞增殖、细胞周期及凋亡变化,及其与下游蛋白的相关性.方法:构建干扰质粒siAkt1转染胆管癌HUCCA-1细胞,Western印迹法及qRT-PCR法检测转染效率及Akt1下调后凋亡相关基因表达.MTT法检测细胞增殖,PI法检测细胞周期,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:MTT显示,与MOCK组和siRNA control组对比,siAkt1转染后HUCCA-1细胞增殖能力减弱,在72h及96h差异均具有显著性(P＜0.05);转染siAkt1细胞停留在G1期比例增高,G2及S期比例减少(P＜0.05);转染后早期凋亡及晚期凋亡率均升高(P ＜0.05;P ＜0.01).在siAkt1转染后,凋亡相关基因p85mRNA及p-Akt1(磷酸化的Akt1)mRNA表达水平降低(P＜0.05),Cleaved Caspase-9 mRNA及Cleaved Caspase-8mRNA表达升高(P＜0.05).凋亡相关基因p85及p-Akt1蛋白表达降低(P＜0.05),Cleaved Caspase-9及Cleaved Caspase-8蛋白表达水平升高(p＜0.05).结论:对胆管癌HUCCA-1细胞中Akt1表达进行下调导致细胞增殖能力下降,促进细胞进入G1期,凋亡率升高,机制与其下游Cleaved Caspase基因表达具有相关性.     

生理范围直流电场对肺癌细胞凋亡及细胞周期影响的观察

目的:研究生理范围直流电场对人肺腺癌细胞系A549细胞的凋亡及细胞周期的影响。方法:按A549肺癌细胞是否暴露于1.5 V/cm直流电场及暴露时间分为A,B,C 3组,A组为未暴露电场的对照组,B组暴露于电场12 h,C组暴露于电场24 h。Hochest33258荧光染色及流式细胞仪检测各组细胞凋亡值及凋亡比率。流式细胞仪检测各组细胞周期,Western blot检测各组细胞中ERK、AKT及两者矿磷酸化水平pERK、pAKT的量,同时检测各组细胞中细胞周期蛋白Cyclin D1与Cyclin E,细胞周期抑制蛋白p21与p27的表达量。结果:荧光染色结果显示A、B、C 3组凋亡细胞比率分别为0.89%、1.15%及0.98%,差异无统计学意义,P>0.05。流式细胞结果显示A、B、C 3组凋亡细胞比率分别为1.06%、1.18%及0.92%,差异无统计学意义,P>0.05;与A组细胞相比,B、C 2组细胞周期S期和G2期的比例升高明显B组两者和升高9.72%,C组升高20.08%。Western blot检测提示电场促进ERK与AKT蛋白磷酸化水平,同时促进细胞周期蛋白Cyclin D1与CyclinE的表达,抑制了细胞周期抑制蛋白p21与p27的表达。结论:肺癌A549细胞暴露于1.5 V/cm大小的体外直流电场后,凋亡比率无变化,细胞周期明显改变,且细胞增生更为活跃,此变化可能是由于电场激活了ERK与AKT信号通路,从而影响细胞周期相关蛋白有关。     

TPX2 shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响

目的:研究Xklp2靶蛋白（TPX2）shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法:乳腺癌细胞MCF-7感染靶向TPX2基因shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒,设置为TPX2 shRNA组、shRNA-NC组,把不做慢病毒感染的细胞设为对照组（Control组）。Real time PCR和Western blot测定沉默效果,MTT测定细胞增殖活性,克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式细胞术测定细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、活化型Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、活化型Caspase-9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平。结果:TPX2 shRNA组TPX2 mRNA和蛋白水平均低于shRNA-NC组和Control组（P<0.05）。TPX2 shRNA组细胞增殖活性和细胞克隆形成能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移能力降低,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平升高,与shRNA-NC组和Control组比,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:下调TPX2明显抑制乳腺癌细胞生长、侵袭和迁移能力,并诱导乳腺癌细胞凋亡。     

下调fascin抑制卵巢癌细胞从G0/G1期向S期转变的实验研究

目的:研究下调聚束蛋白（fascin）对卵巢癌细胞周期、增殖和凋亡的影响。方法:卵巢癌细胞SKOV3感染阴性对照慢病毒载体、shRNA fascin 1慢病毒载体、shRNA fascin 2慢病毒载体,用Real-time PCR和Western blot检测干扰效果。MTT检测增殖活性,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、细胞周期依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,Cdk4)、活化型Caspase-9（Cleaved Caspase-9）和p21蛋白水平。结果:shRNA fascin 1慢病毒载体、shRNA fascin 2慢病毒载体感染后的SKOV3细胞中fascin mRNA和蛋白表达水平均降低,并且shRNA fascin 1慢病毒载体感染后细胞中fascin mRNA和蛋白表达水平下降更多。下调fascin后的卵巢癌细胞增殖能力降低,细胞克隆形成能力也降低,细胞G0/G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中活化型Caspase-3、活化型Caspase-9蛋白水平升高,p21蛋白水平也升高,Cdk4蛋白水平降低,与感染阴性对照慢病毒载体和未经感染的细胞比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:下调fascin可降低卵巢癌细胞增殖能力、抑制卵巢癌细胞从G0/G1期向S期转变并诱导卵巢癌细胞凋亡。     

shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt/β-catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性的实验研究

目的:研究shRNA靶向沉默E盒结合锌指蛋白2（zinc finger E-box binding homeobox,ZEB2）表达对肺癌细胞增殖活性的影响。方法:用shRNA-ZEB2慢病毒和shRNA阴性对照慢病毒感染肺癌细胞,Real time PCR和Western blot检测沉默效果。MTT检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中激活型Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、β-连环蛋白（β-catenin）、C-myc蛋白水平。用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂处理沉默ZEB2的肺癌细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中激活型Caspase-3、β-catenin、C-myc蛋白水平。结果:shRNA-ZEB2慢病毒可以明显沉默肺癌细胞中ZEB2的表达和转录,shRNA阴性对照慢病毒对肺癌细胞中ZEB2的表达没有影响。沉默ZEB2后的肺癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中激活型Caspase-3蛋白水平升高,β-catenin、C-myc蛋白水平降低。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂下调沉默ZEB2的肺癌细胞株中Wnt/β-catenin信号通路的激活水平,同时可以降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,促进细胞中激活型Caspase-3的表达。结论:shRNA靶向沉默ZEB2表达通过Wnt/β-catenin信号通路降低肺癌细胞增殖活性。     

粉防己碱对人甲状腺癌细胞B-CPAP生长和凋亡的影响

目的:探讨中药粉防己碱(tetrandrine,Tet)对人甲状腺癌细胞B-CPAP生长和凋亡的影响及其作用机制.方法:以0、5、10、20 μg/ml Tet培养细胞24、48、72 h后,MTT法测定细胞活力并计算抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法测定Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、VEGF-C、MMP和Survivin蛋白的表达情况.结果:Tet呈时间和剂量依赖性地抑制B-CPAP细胞的生长(P＜0.05);流式细胞术检测显示Tet干预后,凋亡细胞比例显著增高,且呈剂量和时间依赖性;Western blot检测结果显示Bax、Cleaved、Caspase-3蛋白表达增强,Bcl-2、VEGF-C、MMP、Survivin蛋白表达降低.结论:Tet可能通过激活线粒体凋亡通路促进B-CPAP细胞凋亡,抑制其生长.     

大黄酸通过抑制STAT3基因的表达调控骨肉瘤细胞的增殖和凋亡

目的:探讨大黄酸对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及潜在的作用机制。方法:以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,利用CCK-8实验检测大黄酸对MG-63细胞增殖的影响,并计算大黄酸作用48 h的半数抑制浓度（IC50）,采用该浓度进行后续的实验。转染STAT3 siRNA至MG-63细胞,qRT-PCR和Western blot检测分别在mRNA和蛋白水平上检测转染效果,采用CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术验证大黄酸和STAT3 siRNA及其联合作用对MG-63细胞存活率、克隆形成、凋亡能力的影响,Western blot检测各组MG-63细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3的表达情况。结果:大黄酸能够呈浓度依赖性的抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,干预48 h的IC50为46.05 μmol/L。大黄酸或STAT3 siRNA均能降低MG-63细胞中STAT3的表达,抑制MG-63细胞存活率,阻碍细胞克隆形成能力,促进细胞凋亡,上调细胞中Bax和Cleaved Caspase-3的表达,下调Bcl-2的表达;且二者联合效果更显著。结论:大黄酸通过抑制STAT3基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖并促进细胞凋亡。     

硫氧还蛋白相互作用蛋白通过抑制自噬途径促进结肠腺癌细胞的凋亡

目的:探究过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白（thioredoxin interacting protein,TXNIP）对结肠腺癌细胞凋亡的影响及其机制。方法:收集我院30例结肠腺癌患者的结肠腺癌组织及癌旁组织,实时荧光定量PCR检测组织中TXNIP mRNA表达,免疫组织化学染色检测组织中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与凋亡标志蛋白Cleaved Caspase-3表达;将人结肠腺癌 LoVo细胞随机分为对照组、阴性空载体组（LV-GFP）和 TXNIP 过表达组（LV-GFP-TXNIP）,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,收集转染72 h后的LoVo细胞,通过流式细胞术检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞自噬情况,免疫荧光染色检测细胞中LC3表达,Western blot 检测细胞中自噬相关蛋白与凋亡相关蛋白表达变化。结果:与癌旁组织比较,结肠腺癌组织中TXNIP mRNA相对表达量显著降低（P＜0.01）,LC3-Ⅱ阳性表达率显著升高（P＜0.05）,Cleaved Caspase-3阳性表达率显著降低（P＜0.05）;慢病毒转染72 h后转染效率较高（P＜0.05）;与对照组比较,LV-GFP-TXNIP组LoVo细胞的凋亡率显著增加（P＜0.05）,细胞质较为致密,自噬体数目明显减少,LC3荧光染色减弱,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著下降（P＜0.05）,而LC3-I、p62蛋白表达显著增加（P＜0.05）,同时,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达显著下降（P＜0.05）。结论:在结肠腺癌细胞中过表达TXNIP可通过抑制自噬来促进细胞凋亡。