CDO1通过PI3K/AKT信号通路调控胃癌细胞增殖及细胞周期

目的:探讨半胱氨酸双加氧酶1(CDO1)对胃癌细胞增殖、细胞周期的调控机制。方法:用脂质体法将si-NC组（转染si-NC）、si-CDO1组（转染si-CDO1）、pcDNA组（转染pcDNA）、pcDNA-CDO1组（转染pcDNA-CDO1）、pcDNA-CDO1+DMSO组（转染pcDNA-CDO1并用DMSO处理）、pcDNA-CDO1+IGF-1组（转染pcDNA-CDO1并用IGF-1处理）转染至AKG细胞。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）、免疫印迹（Western blot）、细胞计数试剂盒（CCK-8）、流式细胞术检测细胞CDO1、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达、细胞增殖、细胞周期。结果:与人胃黏膜上皮细胞GES-1相比,胃腺癌细胞AKG中CDO1的表达明显降低（P<0.05）;与si-NC组相比,si-CDO1组AKG细胞的增殖明显上调,细胞发生明显的S期、G2/M期阻滞,过表达CDO1则具有相反的作用。重要的是,敲减CDO1可上调PI3K/AKT信号通路关键基因PI3K、p-Akt的表达,而过表达CDO1具有相反的作用。激活PI3K/AKT信号通路后,过表达CDO1对胃癌细胞的增殖、细胞周期的调控作用可被部分逆转。结论:CDO1可抑制胃癌细胞的增殖,调控细胞周期,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路的活性有关,将为胃癌的治疗提供参考。     

PI3K/AKT信号通路与前列腺癌关系的研究进展

近年来针对前列腺癌靶向治疗的研究作为新的热点受到越来越多的关注,主要集中在非AR途径的通路及靶点的探索,其中较为成熟且具有明显研究价值的途径之一是磷脂酰肌3-羟激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路.研究表明,该信号通路的异常活化与疾病的发展和转归有显著相关性,在机体细胞的生长、增殖、凋亡以及炎症反...     

PI3K/AKT/mTOR信号通路介导乳腺癌内分泌治疗耐药的研究进展

内分泌治疗在激素受体阳性乳腺癌患者中的地位越来越受到重视,可以明显改善患者预后.内分泌治疗耐药严重制约着其临床应用,但耐药机制仍不明确,目前认为多信号通路激活参与耐药形成,其中PI3K/AKT/mTOR信号通路在耐药机制中发挥重要作用.临床试验提示,在内分泌治疗的基础上阻断信号通路可以逆转耐药,研究结果令人鼓舞.本文对PI3K/AKT/mTOR信号通路在内分泌耐药机制中的作用进行综述.     

PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂在淋巴瘤中的研究进展*

磷脂酰肌醇-3 激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3K）- 蛋白激酶B（protein kinaseB ,PKB ,又称AKT ）- 雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of  rapamycin,mTOR）信号通路与细胞的生长、增殖、分化、凋亡、代谢等密切相关,在多种实体肿瘤中已发现该信号通路的异常。近年来,以抑制该通路特定位点的靶向治疗已成为抗肿瘤的研究热点。许多该位点新型抑制剂也已进入淋巴瘤的临床试验中,本文就该通路在淋巴瘤中的活化状态及各个分子靶点抑制剂的研究进展做一综述。     

溶血磷脂酸通过调控PI3K/AKT信号通路对骨肉瘤细胞黏附和迁移的作用

摘 要：［目的］ 研究溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）在骨肉瘤细胞黏附和迁移中的作用及其相关分子机制。［方法］通过黏附和划痕实验观察细胞黏附和迁移能力;q-PCR和Western blot检测骨肉瘤细胞系(Mg-63,SaOS-2,HOS-8603)中溶血磷脂酸受体（lysophosphatidic acid receptor,LPAR）的表达,分析LPAR的表达与肿瘤细胞迁移侵袭之间的关系;黏附和划痕实验检测LPA处理后对骨肉瘤细胞黏附和迁移的影响;Western Blot检测LPA对骨肉瘤细胞黏附和迁移相关信号通路蛋白的影响。［结果］ 细胞黏附和迁移能力检测结果显示Mg-63细胞的黏附和迁移能力最强,SaOS-2细胞黏附和迁移能力最弱。细胞中LPAR检测结果显示Mg-63、SaOS-2、HOS-8603三株细胞中LPAR1、LPAR2、LPAR3均有不同程度的表达,其中Mg-63细胞中LPAR1、LPAR2、LPAR3表达均为最高。LPA处理SaOS-2细胞后,其黏附和迁移能力均明显下降;Western Blot结果显示LPA处理后,SaOS-2细胞中PI3K、p-AKT、CD44表达均明显上调。［结论］ LPA可能主要通过PI3K/AKT通路促进骨肉瘤细胞黏附和迁移。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂治疗结直肠癌的研究进展

PI3K/AKT/mTOR通路的异常活化在结直肠癌的发生发展中起到重要作用,以此通路为靶点的药物已成为结直肠癌治疗的研究热点,临床前和临床试验研究证明,针对PI3K/AKT/mTOR通路的多种抑制剂具有抗肿瘤活性。越来越多的临床数据显示,PTEN缺乏或PIK3CA基因突变对PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂敏感,KRAS突变则预示着耐药;寻找针对这一通路抑制剂敏感的优势人群也成为结直肠癌的研究热点;此外,PI3K/AKT/mTOR通路也会影响常规治疗的疗效,因此PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂联合细胞毒治疗方案在结直肠癌中可能起到协同作用。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路及相关表观遗传调控机制在结直肠癌中的研究进展

随着对推动结直肠癌发展的相关分子变化和基因组标志物认识的持续加深,分子靶向治疗逐渐进入了大众的视野。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路是参与多种复杂细胞进程的重要信号通路之一。它的异常激活可调节许多癌症中的细胞自噬、上皮间质转化、细胞凋亡、化学抗性及肿瘤细胞和组织转移。目前该通路是抗结直肠癌治疗的一个有吸引力的靶点。此外,新的证据表明,表观遗传调控机制可以直接或间接参与调节PI3K/AKT/mTOR信号通路。这篇综述重点关注了这一途径在结直肠癌发展、预后和转移中的作用,尤其是表观遗传改变,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA的影响,为下一步结直肠癌的精准治疗提供临床思路。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路介导索拉非尼治疗原发性肝癌耐药机制的研究进展

索拉非尼（sorafenib）作为原发性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）靶向治疗的一线药物已广泛应用于临床,然而部分HCC患者对索拉非尼治疗耐药导致临床疗效欠佳,联合其他靶向药物的临床实验仍未取得突破,故深入研究索拉非尼耐药机制,逆转索拉非尼耐药对于改善肝癌治疗的预后具有重要意义。最新研究发现,PI3K/AKT/mTOR信号通路在索拉非尼耐药机制中起重要作用,本文将从PI3K/AKT/mTOR信号通路促进肿瘤血管生成、参与细胞自噬、抑制肿瘤细胞凋亡并促进其增殖、与RAS/RAF/ERK/MEK信号通路交联及其促进上皮-间质转化等几个方面,概述其在索拉非尼治疗原发性肝癌时产生耐药的机制,为进一步开发治疗原发性肝癌的新型药物提供研究方向。     

LY294002抑制PI3K/AKT信号通路对胃腺癌SGC-7901细胞的影响

目的：观察应用PI3K抑制剂2- （4-吗啉基） -8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4酮 （LY294002） 对胃腺癌细胞株SGC-7901中磷脂酰肌酸3-激酶 （PI3K） /丝氨酸苏氨酸激酶 （AKT） 信号通路的变化以及由此产生的细胞生长、 侵袭及凋亡等方面的影响。方法： 应用LY294002作用于胃腺癌细胞株SGC-7901, 通过Western blot检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质P-AKT、 基质金属蛋白酶-2 （MMP-2）、 基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）、 B细胞淋巴瘤/白血病-2 （Bcl-2）、 细胞周期素 （CyclinD1） 的表达情况。噻唑蓝比色法 （MTT） 和流式细胞法及Transwell等实验评价胃腺癌细胞增殖、 侵袭、 凋亡等变化。结果： 与空白对照组和DMSO组相比,LY294002组能有效抑制P-AKT、 MMP-2、 MMP-9、 Bcl-2及CyclinD1蛋白的表达。LY294002组自第2天起生存率明显下降 （P<0.05）。Transwell穿过细胞数结果分别为空白对照组 （81.0±2.65）、 DMSO组 （81.3±1.52）、 LY294002组 （44.6±2.52）, 3组相比较差异具有统计学意义 （F=255.1, P=0.000）。LY294002组细胞周期被阻滞在G0/G1期, S期减（P<0.05）, 早期凋亡的细胞数明显增多（F=149.66, P=0.000）。结论： LY294002是一种对PI3K/AKT信号传导通路具有抑制作用的抑制剂, 靶向PI3K的LY294002可以有效抑制胃腺癌SGC-7901细胞的PI3K/AKT信号通路中相关蛋白质的表达, 在体外显著抑制细胞的增殖、 侵袭, 并促进细胞的凋亡, 因此为临床肿瘤防治提供了新思路, 针对信号传导通路的靶向治疗有望成为肿瘤治疗的新途径。     

EBV-BZLF1通过激活PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞生长

  目的   明确EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）BZLF1基因（EBV-BZLF1）对EB病毒阴性胃癌细胞生物学行为的影响及可能的分子机制。   方法   运用过表达BZLF1的慢病毒感染胃癌细胞系AGS和HGC27,分别采用CCK8、细胞凋亡检测、细胞迁移和侵袭实验及Western blot法检测细胞的增殖能力、细胞凋亡与迁移侵袭能力及细胞信号通路变化情况。将过表达BZLF1的胃癌细胞HGC27注射于非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷（NOD/SCID）小鼠背部皮下构建移植瘤模型,观察BZLF1对肿瘤生长的影响。   结果   过表达BZLF1的慢病毒感染组AGS-BZLF1与HGC27-BZLF1相比亲本细胞,细胞中BZLF1蛋白表达明显上调;体外细胞增殖与小鼠体内成瘤能力均显著增强（P < 0.05）;细胞凋亡受到BZLF1蛋白的抑制,其中AGS-BZLF1和HGC27-BZLF1凋亡率为（2.40± 0.14）%和（3.90±0.14）%,显著低于AGS和HGC细胞的（5.75±0.35）%和（9.70±0.42）%（P < 0.05）;但细胞迁移和侵袭能力无明显改变。深入分子机制研究发现,BZLF1表达上调后,PI3K/AKT信号通路明显激活,表现为pAKT和pS6蛋白表达上调。使用BEZ235抑制剂阻断PI3K/AKT信号通路后,HGC27-BZLF1和AGS-BZLF1细胞的生长均受到抑制。   结论   EBV-BZLF1可通过激活PI3K/ AKT信号通路促进胃癌细胞生长,靶向PI3K/AKT通路抑制剂或可成为EBV阳性胃癌的治疗选择。      

PI3K/AKT/mTOR信号通路在Burkitt淋巴瘤中的研究进展

 Burkitt淋巴瘤是一种高度侵袭性的非霍奇金淋巴瘤，是人类生长最快的肿瘤。根据流行病学及miRNA不同，分为地方型、散发型与免疫缺陷相关型。该病主要发生在儿童及青少年，少数发生于成年人。经短期、强效化疗后疗效显著，但成年、晚期、耐药的患者预后较差。PI3K/AKT/mTOR信号通路在细胞的生长、分化、代谢、生存以及增殖等方面发挥重要作用，研究发现，该信号通路在Burkitt淋巴瘤中呈激活状态，且针对该通路的抑制剂对Burkitt淋巴瘤细胞有抑制作用。通过对该信号通路与PTEN、c-Myc、自噬在Burkitt淋巴瘤中作用及相互关系的研究，了解其发病机制，设计该通路抑制剂与其他相关通路抑制剂或与单克隆抗体的联合用药，为晚期、耐药的患者寻找精准、高效、低毒的靶向治疗方案。     

人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白的表达及其与胶质瘤发生发展的相关性

目的探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白的表达及其与胶质瘤发生发展的相关性。方法选取脑胶质瘤患者84例,依据病理分级将这些患者分为低恶性组(Ⅰ~Ⅱ级,n=42)和高恶性组(Ⅲ~Ⅳ级,n=42)。将这些患者作为脑胶质瘤组,另选取同期采集的20例正常脑组织作为正常对照组。对胶质瘤不同病理分级与正常脑组织中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达、人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性进行统计分析。结果脑胶质瘤组PI3K、AKT阳性率均显著高于正常对照组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于正常对照组(P<0.05);脑胶质瘤组中高恶性组PI3K、AKT阳性率均显著高于低恶性组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于低恶性组(P<0.05);高恶性组、低恶性组PI3K、AKT阳性率均显著高于正常对照组(P<0.05),PTEN阳性率显著低于正常对照组(P<0.05)。84例人脑胶质瘤组织中,66例PI3K、AKT蛋白共同阳性表达,2例共同阴性表达。人脑胶质瘤中PI3K、AKT与PTEN蛋白表达均呈负相关关系(P<0.05),而PI3K与AKT呈显著的正相关关系(P<0.05)。结论人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路蛋白在脑胶质瘤中的表达提升,与胶质瘤病理分级呈显著的正相关关系。     

LY294002 Induces G0/G1 Cell Cycle Arrest and Apoptosis of Cancer Stem-like Cells from Human Osteosarcoma Via Downregulation of PI3K Activity

Osteosarcoma, the most common primary mesenchymal malignant tumor, usually has bad prognosis inman, with cancer stem-like cells (CSCs) considered to play a critical role in tumorigenesis and drug-resistance.It is known that phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) is involved in regulation of tumor cell fates, such asproliferation, cell cycling, survival and apoptosis. Whether and how PI3K and inhibitors might cooperate inhuman osteosarcoma CSCs is still unknown. We therefore evaluated the effects of LY294002, a PI3K inhibitor,on the cell cycle and apoptosis of osteosarcoma CSCs in vitro. LY294002 prevented phosphorylation of proteinkinase B (PKB/Akt) by inhibition of PI3K phosphorylation activity, thereby inducing G0/G1 cell cycle arrest andapoptosis in osteosarcoma CSCs. Further studies also demonstrated that apoptosis induction by LY294002 isaccompanied by activation of caspase-9, caspase-3 and PARP, which are involved in the mitochondrial apoptosispathway. Therefore, our results indicate PI3K inhibitors may represent a potential strategy for managing humanosteosarcoma via affecting CSCs.     

TRPM7通过PI3K/AKT/ERK信号途径影响脑胶质瘤细胞增殖、上皮-间质转化

目的 探讨沉默M型顺时受体电位通道7(melastatin transient receptor potential channel 7,TRPM7)对脑胶质瘤细胞增殖、上皮-间质转化的影响及其作用机制.方法 采用qRT-PCR和Western blot检测TRPM7在人正常星形胶质HA1800细胞株以及脑胶质瘤细胞株...     

PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

背景与目的：PI3K/AKT信号通路可能在人脑恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。本研究探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法：采用免疫组化Envision二步法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白在42例不同级别脑胶质瘤、10例正常脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,用统计学方法分析人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性及其三者与胶质瘤不同分级之间的关系。结果：PI3K在人脑胶质瘤组织的阳性表达率是80.95%,而正常脑组织中表达率为20.00%,两者间差异有统计学意义（P〈0.05）;PI3K蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是66.67%、95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）。胶质瘤组织与正常脑组织中AKT蛋白阳性率分别是85.71%与30.00%,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;AKT蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是76.19%与95.24%,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）;胶质瘤组织与正常脑组织中PTEN蛋白阳性率分别是45.24%、100%,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;PTEN蛋白在低级别胶质瘤中的阳性率52.38%,而高级别胶质瘤表达率为38.10%,两者之间差异有显著性（P〈0.05）;PTEN与PI3K、AKT蛋白在脑胶质瘤中的表达分别呈负相关（P〈0.01）;PI3K与AKT蛋白的阳性表达呈正相关（P〈0.01）。结论：（1）在人脑胶质瘤组织中PI3K、AKT蛋白表达明显增高,且PI3K、AKT蛋白阳性表达与胶质瘤恶性程度正相关,说明了PI3K/AKT信号通路在胶质瘤的恶性转化中发挥着重要作用。（2）胶质瘤组织中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于其在正常脑组织中的表达,与胶质瘤的恶性程度负相关,提示了PTEN蛋白的表达下降或缺失导致其抑癌功能减弱甚至丧失,其与胶质瘤的发生发展密切相关。（3）在人脑胶质瘤组织中,PTEN与PI3K、AKT蛋白表达呈负相关,揭示了在胶质瘤的发生发展中PTEN与PI3K、AKT的作用可能互相拮抗,PTEN蛋白的表达下降或缺失与PI3K、AKT的过度表达可能共同促进了胶质瘤的恶性进展。     

Aquaporin-3 positively regulates matrix metalloproteinases via PI3K/AKT signal pathway in human gastric carcinoma SGC7901 cells

Background

matrix metalloproteinases (MMPs) are produced by tumor cells, so they may be associated with tumor progression including invasion, migration, angiogenesis and metastasis. Aquaporin-3 (AQP3) also plays a critical role in gastric cancer cell migration and proliferation.

Methods

In this study, AQP3 was silenced or over-expressed in SGC7901 cells.

Results

We found a significant decrease in MT1-MMP, MMP-2, and MMP-9 expression after AQP3 knockdown, and a significant increase in MT1-MMP, MMP-2, and MMP-9 expression after AQP3 over-expression in SGC7901 cells. We also found that AQP3 silence led to a significant decrease of phosphorylation of ser⁴⁷³ in AKT in SGC7901 cells.

Conclusion

Our findings showed that AQP3 might positively regulate MMPs proteins expression through PI3K/AKT signal pathway in human gastric carcinoma SGC7901 cells.     

胃癌细胞SGC7901凋亡的PI3K/Akt通路介导作用及雷帕霉素的作用机制分析

目的：分析雷帕霉素对胃癌细胞中PI3K/Akt蛋白表达的影响作用,以为临床治疗提供参考。方法将生长状态良好的胃癌细胞SGC7901随机分为4组：对照组,雷帕霉素低剂量组、中剂量、高剂量组（n=8）。采用DAPI染色法分析各组细胞的凋亡情况;采用免疫印迹法和Real-time PCR检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达。结果雷帕霉素低、中、高剂量组均可抑制细胞的增殖,差异具有统计学意义（P﹤0.05）;雷帕霉素下调了胃癌细胞中PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达,且与对照组比较,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论雷帕霉素主要通过抑制PI3K、AKT及mTOR的过表达发挥肿瘤抑制作用。     

LPA经PI3K/Akt信号转导通路抑制顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡

 目的 研究PI3K/AKT信号转导通路对LPA保护顺铂诱导的卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用的影响。 方法 MTT法检测LPA和LY294002对DDP作用后的SKOV3细胞增殖活性的影响;Hoechst33258荧光染色 观察凋亡细胞;FCM分析细胞凋 亡率;凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA“梯状”条带;Western blot检测LPA、LY294002对磷酸 化Akt蛋白表达的影响。 结果 LPA+LY294002+DDP组对SKOV3细胞增殖的抑制作用、凋亡小体的产生及细胞凋亡率高于 LPA+DDP组(P<0.05),而与 LY294002+DDP组差异无统计学意义, DNA片段凝胶电泳示LPA作用后不产生明显的凋亡片段, LPA和LY294002同时作用可出现DNA断裂梯形条带。Western blot结果示LPA作用后磷酸化Akt 蛋白表达升高,而LY294002作用后,磷酸化Akt蛋白表达明显下降。 结论 LPA通过激活PI3K/Akt信号转导通路抑制顺铂诱导的卵巢癌细胞的凋亡。