RORα激动剂SR1078抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的作用

摘 要：［目的］ 观察RORα激动剂SR1078对人胃癌MGC803细胞增殖、迁移与侵袭的影响。［方法］ 实验分为10μmol/L SR1078处理MGC803细胞组与MGC803细胞组。Western blot 与免疫荧光检测RORα表达,MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。［结果］ Western blot检测显示,10μmol/L SR1078处理组较对照组RORα蛋白明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光显示,SR1078处理MGC803细胞RORα表达增强。MTT检测显示,10μmol/L SR1078作用MGC803细胞24h、48h、72h、96h后,增殖抑制率分别为37.2%、46.9%、52.7%、68.6%,SR1078可呈时间依赖性抑制MGC803细胞增殖 (P<0.05)。划痕实验显示,10μmol/L SR1078处理组迁移距离(5.74±0.078μm)明显低于对照组 (9.37±0.098μm),差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移实验显示,10μmol/L SR1078处理组迁移细胞(80±1.155个)较对照组(103±1.155个)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。侵袭实验显示,10μmol/L SR1078处理组细胞穿膜细胞(19.67±1.764个)较MGC803细胞（40.67±1.202个）明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。［结论］SR1078可通过上调RORα抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭。     

DJ-1 过表达通过PTEN/Akt 通路促进人胃癌MGC803 细胞的增殖、迁移、侵袭与上皮间质转化

目的：探讨DJ-1基因过表达对人胃癌MGC803细胞增殖、迁移、侵袭与上皮间质转化（EMT）的影响及其机制。方法：利用基因转染技术构建DJ-1基因过表达MGC803 细胞,实验分为MGC803、空载体和DJ-1过表达组。采用MTT、平板克隆形成、细胞划痕和Transwell 实验分别检测DJ-1过表达对MGC803 细胞增殖、克隆形成、迁移与侵袭的影响;qPCR和WB法检测DJ-1过表达对各组细胞DJ-1、PTEN、Akt、p-Akt、Snail、vimentin、E-cadherin、MMP-9与TIMP-3表达的影响,相差显微镜下观察MGC803细胞形态学的变化。裸鼠荷瘤实验检测DJ-1过表达对MGC803细胞移植瘤体内生长的影响。结果：成功构建DJ-1基因稳定过表达的MGC803 细胞。与MGC803 组和空载体组比较,DJ-1过表达组细胞的增殖能力与克隆形成数均显著增加（均P<0.05）,细胞迁移距离明显增加、划痕距离明显缩短（均P<0.05）,迁移与侵袭细胞数显著增多（均P<0.05）,DJ-1 mRNA与蛋白表达明显上调、 PTEN mRNA与蛋白表达下调（均P<0.05）,Akt 总蛋白各组比较无明显差异（均P>0.05）,p-Akt 蛋白表达明显上调（P<0.05）, Snail、vimentin 与MMP-9表达上调、E-cadherin 与TIMP-3表达下调（均P<0.05）。相差显微镜下见长梭形细胞数目增多,圆形与椭圆形细胞减少,异型性更为明显。荷瘤裸鼠体内实验结果表明,与MGC803 组相比较,DJ-1过表达组MGC803 细胞移植瘤生长速度明显加快、移植瘤质量显著增加（均P<0.05）。结论：DJ-1过表达可通过PTEN/Akt 通路在体内外抑制MGC803 细胞的增殖、迁移、侵袭与EMT。     

NOL8对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

背景与目的：口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是头颈部鳞状细胞癌中最普遍的亚型,其发病机制尚不清楚。核仁蛋白8(nucleolar protein 8,NOL8)作为RNA结合蛋白（RNA-binding protein,RBP）,在多种肿瘤的发生、发展中发挥关键作用,但其在OSCC中的作用尚不清楚,本研究旨在探讨NOL8在OSCC中的表达水平,并研究其对OSCC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响。方法：利用基因表达谱交互分析2(gene expression profiling interactive analysis 2,GEPIA2)、肿瘤免疫评估资源（tumor immune estimation resource,TIMER）、阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析（the University of Alabama at Birmingham cancer data analysis portal,UALCAN）及RNA相互作用数据库（the...     

索拉非尼对Hela细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:本实验研究索拉非尼对Hela细胞相关活性的影响,为该药物的临床应用提供理论依据.方法:我们通过MTT实验和Edu增殖实验研究索拉非尼对Hela细胞增殖能力的影响,分别通过划痕实验以及Transwell小室侵袭实验研究索拉非尼作用后Hela细胞迁移能力和侵袭能力的变化.结果:在MTT实验中5、10和20 μmol/L索拉非尼刺激48小时后Hela细胞的OD值均显著小于对照组(P<0.05).10 μmol/L药物刺激后Hela细胞的Edu阳性数量和比例均显著小于对照组(P<0.05).在细胞划痕实验中,药物组细胞的迁移能力显著减弱,空白划痕两侧的距离显著大于对照组(P<0.05).在Transwell小室侵袭实验中,药物组单个视野内的细胞数量显著少于对照组(P<0.01).结论:索拉非尼可以抑制Hela细胞增殖、迁移和侵袭能力,是一种对抗宫颈癌细胞活性的潜在药物.     

干扰LASP1基因表达对胃癌细胞BGC823增殖、迁移及侵袭能力的影响

背景与目的：LASP1是一种新的肌动蛋白结合蛋白,参与细胞骨架的重组调控及细胞迁移,在多种恶性肿瘤中高表达,并与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。但目前LASP1在胃癌发生、发展中的作用少见报道。该研究旨在探讨LASP1在胃癌增殖和侵袭中的作用及分子机制。方法：利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白［质］印迹法(Western blot)检测LASP1在不同胃癌细胞系中的表达,应用RNA干扰技术抑制BGC823细胞中LASP1的表达,采用RTFQ-PCR和Western blot检测转染后LASP1的表达,应用体外增殖、迁移和侵袭实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力,通过F-actin聚合实验检测细胞的F-actin的聚合能力,采用Western blot检测转染前后BGC823细胞中Akt的磷酸化情况。结果：LASP1在胃癌BGC823细胞中高表达。RNA干扰技术沉默LASP1基因后,干扰组与对照组相比,LASP1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。细胞增殖实验显示,干扰组细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验发现,与对照组相比,干扰组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05);在干扰组细胞内的F-actin聚合量比对照组减少(P<0.05);在干扰组细胞内Akt磷酸化受到抑制。结论：LASP1的表达降低可以抑制胃癌BGC823细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,LASP1通过调节F-actin的聚合和Akt磷酸化从而影响胃癌细胞的侵袭、转移。     

人源FOXG1基因真核表达载体的构建、表达及其对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:构建人源FOXG1真核表达载体,瞬时转染HeLa细胞实现FOXG1过表达,观察FOXG1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,为后续研究人源FOXG1基因在肿瘤中的作用机制奠定理论基础。方法:利用One Step Cloning法构建重组质粒pEGFP-C1-FOXG1,并通过酶切、测序对重组质粒进行鉴定;采用脂质体介导的转染法将pEGFP-C1-FOXG1瞬时转染至HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测HeLa细胞中EGFP-FOXG1融合蛋白的表达;进一步,分别通过CCK8、伤口愈合和Transwell实验检测FOXG1对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:酶切鉴定和测序表明重组质粒pEGFP-C1-FOXG1构建成功;瞬时转染HeLa细胞24小时后,能够在荧光显微镜观察到绿色荧光,48小时后转染效率达到90%;Western blot显示EGFP-FOXG1融合蛋白正确表达;CCK8实验表明过表达FOXG1能够促进HeLa细胞的增殖;伤口愈合和Transwell实验表明FOXG1过表达可以促进HeLa细胞的迁移和侵袭。结论:成功构建了pEGFP-C1-FOXG1重组质粒,并在HeLa细胞中正确表达;功能实验表明FOXG1能够促进HeLa细胞增殖、迁移和侵袭。     

Claudin-1蛋白在胃癌组织和细胞中的表达及促进其表达后对癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:研究紧密连接跨膜蛋白(Claudin-1)在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生物学行为及裸鼠皮下成瘤能力的影响.方法:收集50例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织,采用RT-qPCR和免疫组化检测Claudin-1的表达;RT-qPCR和Western Blot检测Claudin-1在人胃癌细胞株MKN45、SGC790...     

DIAPH3对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制

背景与目的：胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,但其发病机制尚不清楚。Diaphanous相关成蛋白3（diaphanous-related formin 3,DIAPH3）对多种肿瘤的发生、发展具有重要作用,但其在胃癌中的作用未见报道。探讨DIAPH3在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法：利用基因表达谱分析（gene expression profiling interactive analysis,GEPIA）数据库在线分析DIAPH3在胃癌组织中的表达;收集2020年1月—2020年12月年新乡医学院第四临床学院病理科保存的62例胃癌患者的石蜡包埋组织及配对癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色方法检测胃癌组织中DIAPH3的表达,并进行临床病理学相关性分析;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测敲低或过表达DIAPH3后对DIAPH3、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）及N-钙黏蛋白（N-cadherin）蛋白质水平的变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测敲低或过表达DIAPH3后对DIAPH3转录水平表达的影响。利用细胞计数试剂盒-8（cellcounting kit-8,CCK-8）实验检测细胞增殖;利用划痕愈合实验检测细胞迁移;利用transwell小室实验检测细胞侵袭。结果：GEPIA数据库在线分析显示,与胃癌癌旁组织相比,DIAPH3 mRNA在胃癌组织中表达升高（P ＜ 0.05）;胃癌组织中DIAPH3的阳性表达率为70.97%（44/62）,高于胃癌癌旁组织16.13%（10/62）,差异有统计学意义（P ＜ 0.01）;与高中分化组比较,低分化组DIAPH3表达升高（P ＜ 0.05）;与无淋巴结转移组相比,有淋巴结转移组DIAPH3表达升高（P ＜ 0.05）。干扰DIAPH3组细胞增殖活力、细胞迁移率和细胞侵袭数均低于阴性对照组（P ＜ 0.05）;过表达DIAPH3组细胞增殖活力、细胞迁移率和细胞侵袭数均高于过表达对照组（P ＜ 0.05）。过表达DIAPH3后干扰cyclin D1,胃癌细胞株的增殖活力低于过表达DIAPH3组,高于过表达对照组（P ＜ 0.05）。过表达DIAPH3后干扰vimentin,胃癌细胞株的细胞迁移率和细胞侵袭数低于过表达DIAPH3组,高于过表达对照组（P ＜ 0.05）。与干扰对照组相比,干扰DIAPH3组E-cadherin蛋白质表达增加,DIAPH3、cyclin D1、vimentin和N-cadherin蛋白质表达降低（P ＜ 0.05）;与过表达对照组相比,过表达DIAPH3组中E-cadherin蛋白质表达降低,DIAPH3、cyclin D1、vimentin和N-cadherin蛋白质表达增加（P ＜ 0.05）。在敲低或过表达DIAPH3胃癌细胞株中,DIAPH3在mRNA水平均显著降低或升高（P ＜ 0.05）。结论：DIAPH3可促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用与上调cyclin D1、促进上皮-间充质转化有关。     

RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响

[目的]研究RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。[方法]①采用Western blot法和免疫荧光法检测RIN1在MKN28细胞中表达;②采用Burd-U标记检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞增殖能力变化;③采用Transwell法、细胞划痕法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞侵袭和迁移能力变化;④采用AV/PI染色法、Hoechst染色法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞凋亡情况。[结果]①RIN1在MKN28细胞中呈高表达,表达量是空载对照组的3.22倍,且主要分布在细胞质中;②Burd-U染色结果显示,RIN1高表达MKN28细胞的阳性率显著性升高,与空载对照组相比为75.6%±5.4%vs 25.6%±1.1%（P〈0.01）;③RIN1高表达MKN28细胞的侵袭和迁移能力明显增强,与空载对照组相比分别为122.0±7.0 vs 65.00±2.52（P〈0.01）和54.22%±3.45%vs 38.6%±2.45%（P〈0.01）;④RIN1高表达MKN28细胞株细胞凋亡数显著性减少,与空载对照组相比为21.63%±2.60%vs 8.07%±1.60%（P〈0.01）。[结论]RIN1过表达促进MKN28细胞增殖、侵袭和迁移,抑制MKN28细胞凋亡;RIN1可能是介导胃癌发生的癌基因之一。     

丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响和作用机制

目的 分析丙泊酚对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 将SKOV3细胞分为空白对照组(C组)、脂肪乳对照组(F组),以及按不同丙泊酚浓度(25、50、100μmol/L)干预分为P25组、P50组、P100组.CCK8实验检测不同组SKOV3细胞吸光度(OD)值评估细胞增殖活性;划痕实验、流式细胞术、...     

PPARγ激活剂罗格列酮对人胃癌MGC803细胞周期及其PTEN表达的影响

目的探讨不同浓度的罗格列酮对人胃癌MGC803细胞增殖及其PTEN蛋白表达的影响。方法不同浓度的罗格列酮(12.5、25、50、100μmol/L)分别与MGC803细胞系共同培养48 h后,采用流式细胞仪检测罗格列酮对MGC803细胞周期的影响,免疫细胞化学检测MGC803细胞PTEN蛋白表达。结果罗格列酮使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,呈剂量依赖性,并诱导PTEN表达上调。结论罗格列酮可以通过诱导PTEN表达上调,使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,进而抑制人胃癌MGC803细胞生长,这可能是PPARγ激活剂抗肿瘤的机制之一。     

雪灵芝水提物对人胃癌MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨雪灵芝水溶性提取物(arenaria kansuensis aqueous extract,AKAE)对人胃癌细胞株MGC-803细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养的MGC-803细胞经不同浓度AKAE处理,采用MTT法检测受试细胞增殖水平;应用流式细胞术检测AKAE处理12 h后各组细胞的细胞周期;Western blot检测不同浓度、不同时间AKAE处理组MGC-803细胞中cyclin D1蛋白表达水平;实时定量 PCR检测各组MGC-803细胞中cyclin D1、p16和p21基因的mRNA相对表达量。结果AKAE对体外培养的MGC-803细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用（P<0.05）,IC₅₀为(0.134±0.005)mg/ml;经AKAE处理12 h,0.8 mg/ml组MGC-803细胞的 G₁期细胞比例高于对照组、S期细胞比例低于对照组（P<0.05）;(0.2～0.8) mg/ml浓度的AKAE处理,对MGC-803细胞中cyclin D1的蛋白及mRNA表达具有明显抑制作用（P<0.05）;AKAE促进MGC-803细胞中p16、p21基因mRNA 表达,0.2 mg/ml处理组p16、p21 mRNA相对表达量分别为对照组的3.3倍和18.5倍。结论雪灵芝水提物(AKAE)对MGC-803细胞增殖具有抑制作用,其机制与G₁期阻滞和对G₁期相关因子表达的影响有关。     

PPARγ激活剂罗格列酮抑制人胃癌MGC803细胞增殖机制的研究

目的 探讨PPAR7激活剂罗格列酮抑制人胃癌MGC803细胞增殖的机制。方法 采用MTT法、集落形成实验和流式细胞仪分别观察罗格列酮作用于胃癌MGC803细胞48h对细胞增殖和细胞周期的影响。结果 12．5／μmol／L、25μmol／L、50／μmol／L、100／μmol／L的罗格列酮对人胃癌MGC803细胞生长抑制率分别为10．85％、32．52％、57．47％、78．94％，罗格列酮处理后MGCS03细胞集落形成明显受到抑制，且细胞周期停滞于G1期。结论 罗格列酮对人胃癌MGCS03细胞的增殖抑制作用与诱导细胞周期G1期停滞有关。     

内皮抑素30肽对SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响

目的研究经RGD修饰的人内皮抑素（endostatin）N-端的30肽对胃癌SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响。方法人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。用WST-1试剂检测30肽对SGC-7901细胞增殖的影响;细胞划痕实验和迁移实验观察30肽对细胞运动迁移的影响;明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP-2、MMP-9表达和分泌的影响。结果30肽能够有效抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移,同时还抑制了MMP-2和MMP-9的活性。结论30肽可能是通过下调MMP-2和MMP-9的活性而抑制SGC-7901细胞的转移,其在胃癌的临床治疗上具有潜在的应用前景。     

miR-205对胃癌细胞侵袭迁移的调控作用及其潜在机制

目的 探讨miR-205对胃癌HGC27细胞侵袭、迁移的作用及其机制。方法 实时荧光定量PCR法测定4种不同胃癌细胞（AGS、MKN74、HGC27、SGC7901）中miR-205的表达情况。体外培养的HGC27细胞通过转染miR-205 mimic上调细胞中miR-205的表达,划痕实验和Transwell实验观察其侵袭和迁移能力;Western blot检测上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）进程及相关信号通路的活性。结果 miR-205在4种胃癌细胞中均呈低表达（均P<0.05）。过表达miR-205后,HGC27细胞的迁移率由（54.7±4.1）%降低至（34.1±4.5）% （P=0.005）;细胞的侵袭率由（52.8±6.3）%降低至（32.2±4.9）%（P=0.001）。此外,过表达miR-205之后,胃癌细胞中上皮细胞标志物E-cadherin、β-catenin蛋白表达显著上升（P=0.002, P=0.003）,而间质细胞标志物N-cadherin、vimentin的蛋白表达显著下降（P=0.005, P=0.004）,Notch和snail的蛋白表达水平也显著降低（P=0.002, P=0.003）。结论 miR-205在胃癌细胞中低表达,且与胃癌细胞的侵袭和迁移密切相关;其分子机制可能与抑制EMT及Notch/snail信号通路有关。     

Beclin1 Overexpression Inhibitis Proliferation,Invasion and Migration of CaSki Cervical Cancer Cells

The influence of the autophagy-related gene Beclin1 on proliferation, invasion and metastasis of the cervicalcancer CaSki cells and its possible mechanism in vitro were here targeted. After the overexpression vectorpcDNA3.1-Beclin1 and RNA interference vector pSUPER-Beclin1 were transfected into CaSki cells in vitro, stableexpression cell lines demonstration Beclin1 expression was upregulated, and VEGF and MMP-9 expression weredecreased, leading to cell arrest in the G0/G1 phase of the cell cycle. MTT assays further revealed proliferationof cells was significantly inhibited in Beclin1-overexpressing transfectant cells, with invasion and metastasisalso being inhibited in Transwell chamber assays. The present results suggest that Beclin1 inhibits invasionand metastasis of cervical cancer CaSki cells in vitro. Mechanisms probably involve Beclin1 inhibition of cellproliferation, and decreased expression of VEGF and MMP-9 proteins.     

miR-711对胃癌MGC-803细胞侵袭转移及上皮间质转化的影响

目的 探讨 miR-711对胃癌MGC-803细胞侵袭转移及上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition, EMT）的影响。方法 通过脂质体瞬时转染法将 miR-711 过表达（miR-711 mimics）、miR-711抑制表达（miR-711 inhibitors）、miRNA 空质粒转染人胃癌细胞株MGC-803。以 miRNA 空质粒转染组作为阴性对照组（NC 组）,以空白转染组作为空白对照组（K组）。转染48 h后在荧光显微镜下观察转染效率,然后采用Transwell 侵袭小室实验检测细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot实验检测上皮蛋白和间质蛋白表达量的变化。结果 Transwell侵袭实验结果显示：与阴性对照组穿膜细胞数（120.00±4.58）及空白对照组穿膜细胞数（119.67±5.13）分别比较,miR-711 mimics组穿膜细胞数（70.67±5.51）明显下降（P均<0.05）;划痕实验显示：划痕48 h,与阴性对照组细胞愈合率（32.52±1.73）%及空白对照组细胞愈合率（32.15±1.55）%分别比较,miR-711mimics组细胞愈合率（7.08±0.73）%明显下降（P均<0.05）;Western blot实验显示：miR-711 mimics组与阴性对照及空白对照组分别比较,上皮标志物（E-cadherin蛋白）相对蛋白表达量增多,差异有统计学意义（P均<0.05）;间质标志物（vimentin蛋白）相对蛋白表达量水平减少,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 过表达miR-711可抑制胃癌MGC-803细胞侵袭迁移及上皮间质转化的发生。     

Sema6D对人骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭及血管形成能力的影响及机制

目的 探讨沉默信号素蛋白6D(Sema6D)对人骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭及促进血管形成能力的影响.方法 检测人骨肉瘤组织及细胞系中Sema6D的表达情况,脂质体法转染靶向siRNA后通过CCK-8、细胞划痕、Transwell、人脐静脉内皮细胞与肿瘤条件培养基共培养实验探究骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和体外促血管形成能...     

敲低DCLK1抑制神经胶质瘤细胞增殖、 迁移与侵袭CSCD

目的探讨双肾上腺皮质激素样激酶 1(DCLK1)对胶质瘤细胞增殖、迁移与侵袭的影响及其机制。方法 RT-qPCR、免疫组织化学染色和Western blot检测胶质瘤组织和细胞(U87和A172)中DCLK1 mRNA和蛋白的表达情况;sh-DCLK1和阴性对照(sh-Con)转染U87和A172细胞;MTT和Transwell法分析敲低DCLK1对神经胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;蛋白印迹法检测敲低DCLK1对神经胶质瘤细胞中TGF-β/Smads信号通路相关蛋白TGF-β1、p-Smad2、p-Smad7表达的影响;将已转染sh-DCLK1或sh-Con的U87细胞注射到BALB/c裸鼠颈部皮下,定期测量瘤体体积,收集瘤体并称重。结果胶质瘤组织和细胞中DCLK1 mRNA和蛋白表达较癌旁正常组织和正常神经胶质细胞均显著升高(P<0.001)。与sh-Con组比,sh-DCLK1组的胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力及细胞中TGF-β1、p-Smad2和p-Smad7表达显著降低(P<0.01;P<0.001);sh-DCLK1组裸鼠体内的瘤体体积和瘤体质量明显降低(P<0.001)。结论敲低DCLK1能抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制TGF-β/Smads信号活性有关。     

piR-9994对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制

目的 探讨piR-9994对胃癌细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 qRT-PCR检测piR-9994在胃癌细胞系（MGC803和AGS）和正常胃上皮细胞（GES-1）中的表达情况;构建过表达和敲低piR-9994的MGC803胃癌细胞株,MTT、克隆形成实验检测piR-9994表达变化对细胞增殖能力的影响,划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。qRT-PCR和Western blot检测细胞增殖和EMT相关基因表达。结果 piR-9994在胃癌细胞MGC803中表达水平显著高于正常人胃黏膜上皮细胞GES-1（P<0.05）。piR-9994过表达促进胃癌细胞增殖、侵袭和转移,敲低则作用相反。piR-9994表达与细胞周期密切相关,特别是S期。piR-9994过表达促进增殖相关基因PCNA、CCND1、Bcl-2表达,抑制凋亡基因c-PARP表达,促进EMT相关基因N-cadherin、MMP7、Twist和Vimentin表达及抑制E-cadherin表达;敲低则作用相反。结论 piR-9994异常表达影响胃癌细胞增殖、侵袭、转移及EMT进程。piR-9994可能是胃癌新的标志物和治疗靶点。