雷公藤甲素对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖和凋亡的影响

为了研究雷公藤甲素对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖和凋亡效应，用不同浓度的雷公藤甲素作用于Jurkat细胞，用CCK法检测细胞存活率，选取使细胞增殖抑制率为50％的雷公藤甲素作用于细胞，然后在应用Hoechst33258染色、DNA电泳、Pl以及PI／Annexin V染色后用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果表明：雷公藤甲素抑制Jurkat细胞的生长增殖，半数细胞抑制剂量为4μg/L。4μg/L雷公藤甲素作用于Jurkat细胞12小时后，出现明显的细胞凋亡特征（Hoechest33258染色显示细胞核呈亮蓝色；DNA断裂产生DNA ladder，细胞凋亡的亚二倍体峰出现，细胞磷脂酰丝氨酸发生转位），细胞凋亡比率明显增加，24小时后细胞凋亡进一步增加。结论：雷公藤甲素对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞有明显的抗增殖和促凋亡作用，这为临床应用雷公藤甲素治疗白血病提供了实验依据。     

薏苡仁诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡及其机制

本研究探讨薏苡仁油对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖和凋亡效应及其作用机制。分别用0．4．0．8,1．6mg／ml的薏苡仁油作用Jurkat细胞24小时,用CCK法检测细胞增殖,应用Hoechst33258染色、PI及PI／AnnexinV染色后流式细胞仪来检测细胞凋亡,然后采用JC-1染色分析线粒体膜电位。结果表明：0．8和1．6mg／ml的薏苡仁油能显著抑制Jurkat细胞增殖;随着薏苡仁油浓度的增加,凋亡细胞数目增多,线粒体膜电位降低。结论：薏苡仁油对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞有明显的抗增殖和促凋亡作用,而且此效应与线粒体膜电位降低有关,本研究结果为临床应用薏苡仁油治疗白血病提供了实验依据。     

盐霉素增强长春新碱诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡研究

目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、caspase-3和caspase-8表达水平。结果:VCR、Sal单独及联合处理Jurkat细胞株均显示出明显的增殖抑制作用,两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P0.05),具有协同作用。联合用药组BCL-2蛋白水平较VCR和Sal单独处理组明显减少,而caspase-3和caspase-8水平明显增高;VCR和Sal联合用药组细胞凋亡率较VCR和Sal单独处理组明显提高(P0.05)。结论:长春新碱联合盐霉素作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖及诱导凋亡的作用。     

急性髓细胞性白血病细胞培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖和凋亡的影响

为了研究不同的急性髓细胞性白血病（AML）细胞株培养上清对CD4^＋和CD8^＋T细胞增殖以及凋亡的影响,探讨AML的免疫抑制的形成机制,将3种AML细胞株（HL-60、NB4和U937）培养上清和普通培养液按不同比例混合,用于培养CFSE染色的淋巴细胞.抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激3天后,标记7AAD和相应荧光抗体.利用流式细胞术检测不同T细胞亚群CFSE荧光强度和7AAD表达率的变化,分析其增殖和凋亡变化情况.结果表明：3种AML细胞株中有2种（HL-60和NB4）培养上清可显著抑制CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的增殖,并随浓度增加而增强.同样,HL-60和NB4细胞株培养上清亦可抑制刺激后的CD4^＋T细胞的凋亡,但对刺激后的CD8^＋T细胞的凋亡并无明显影响.相反,HL-60和NB4细胞株培养上清可显著增加增殖的CD8^＋T细胞的凋亡.结论：AML细胞株培养上清液对CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞增殖的抑制以及对增殖的CD8^＋T细胞凋亡的诱导作用,可能是AML患者免疫功能缺陷的机制之一.     

丙戊酸钠对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖及凋亡的影响

本研究探讨丙戊酸钠(valproic acid sodium,VPA)对Jurkat细胞增殖的抑制作用及对凋亡的影响。选择不同浓度的VPA处理Jurkat细胞,采用CCK-8法检测并绘制增殖抑制曲线,Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,半定量RT-PCR检测抑凋亡基因BCL-2及促凋亡基因Bak1的变化。结果表明,VPA对Jurkat细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性,与对照组相比,随药物浓度增高,细胞凋亡率增加;VPA能够使抑凋亡基因BCL-2表达减低,但对促凋亡基因Bak1的表达无明显影响。结论:VPA可促进Jurkat细胞凋亡,可能与其抑制BCL-2表达有关。     

辛伐他汀对急性单核细胞白血病SHI-1细胞增殖和凋亡的影响

本研究探讨辛伐他汀(simvastatin,SIM)对急性单核细胞白血病SHI-1细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。用MTT法检测不同浓度SIM作用不同时间对SHI-1细胞生长的抑制作用;实验分为阴性对照及辛伐他汀处理组(终浓度分别为5、10、20μmol/L),处理48小时后,用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布;半定量RT-PCR法检测caspase-3、BCL-2mRNA的表达;Western blot法检测caspase-3、BCL-2蛋白表达。结果表明,辛伐他汀对SHI-1细胞的生长有明显抑制作用,且呈时间与剂量依赖性。与对照组相比,辛伐他汀处理SHI-1细胞48小时后,各浓度组S期细胞百分比明显增多,5μmol/L辛伐他汀处理SHI-1细胞能明显阻滞细胞周期进程,但不能诱导细胞凋亡。细胞中BCL-2mRNA表达随辛伐他汀浓度增加而下降,caspase-3mRNA表达随辛伐他汀浓度增加而增高(p<0.05)。SHI-1细胞中BCL-2蛋白表达随辛伐他汀浓度升高而降低,caspase-3蛋白表达随辛伐他汀浓度升高而增加(p<0.05)。结论 :辛伐他汀能抑制SHI-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其下调BCL-2和上调caspase-3表达有关。     

辛伐他汀和丙戊酸钠对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 实验以人K562细胞株为研究对象,观察辛伐他汀及丙戊酸钠对K562细胞的增殖和凋亡的影响.方法 实验分3组,辛伐他汀组,丙戊酸钠组,辛伐他汀+丙戊酸钠组,以等客积的RPMI1640培养液为空白对照组.经瑞士-姬姆萨(Wright-Giemsa)染色,光镜下观察经辛伐他汀和丙戊酸钠处理后细胞的形态改变.MTT法检测细胞增殖抑制率.用AnnexinV-FITC/PI双重标记,经流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化.结果 与对照组比较,10、20、40μmol/L辛伐他汀作用K562细胞48小时后凋亡半分别为(17.36±1.91)%、(23.26±2.35)%、(34.15±2.54)%;72小时后凋亡率分别为(31.43±2.15)%、(49.42±1.05)%、(56.57±3.06)%.1、2、4 mmol/L丙戊酸钠作用48小时后细胞凋亡率分别为(14.30±1.39)%、(22.90±2.35)%、(39.79±2.65)%;72小时后凋亡率分别为(22.79±2.31)%、(34.67±2.78)%、(49.51±2.37)%.细胞凋亡率随浓度和时问的增加而升高.结论 辛伐他汀和丙戊酸钠均可对K562细胞发挥增殖抑制和诱导凋亡作用,两者联合应用有一定增效作用.     

地西他滨对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的:探索地西他滨对急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖和凋亡的影响,并分析它对细胞增殖的调控作用.方法:体外培养AML细胞系THP?1和U937,根据预实验结果,地西他滨1μmol/L分别作用于AML细胞系THP?1和U937,于药物作用后24 h,48 h,72 h及96 ...     

胆固醇合成抑制剂辛伐他汀对K562细胞增殖和凋亡的作用

目的 探讨慢性髓细胞白血病（CML）细胞抗凋亡机制和诱导CML细胞凋亡的有效方法。方法 采用CML细胞株K562体外培养、用^3H-TdR掺入法及DNA末端标记法观察胆固醇合成限速酶3－羟－3－甲基戊二酰辅酶A（HMG－CoA)还原酶抑制剂辛伐他汀对K562细胞增殖及凋亡的作用,以及该制剂联合化疗药物对K562细胞凋亡的影响。结果 辛伐他汀明显抑制562细胞增殖并诱导其凋亡,并能增强K562细胞对化疗药物的敏感性。加入HMG－CoA下游产物甲羟戊酸可完全逆转这种作用。结论 辛伐他汀通过抑制甲羟戊酸代谢途径抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,表明HMG－CoA还原酶抑制剂作为治疗CML的药物具有潜在的应用价值。     

淋巴细胞缺乏状态对白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞体内抗白血病效应的影响

目的探讨淋巴细胞缺乏状态对白血病特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体内增殖和抗白血病作用的影响。方法采用6 Gy照射C57BL/6小鼠诱导淋巴细胞缺乏状态,分别经尾静脉注射EGFP+C57BL/6小鼠脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL,随后皮下接种1×106FBL3白血病细胞。用流式细胞仪分析小鼠外周血EGFP+细胞及T淋巴细胞亚群比例,同时观察脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL对随后接种的FBL3白血病细胞的杀伤作用。结果在淋巴细胞缺乏状态下输入的脾T淋巴细胞和白血病特异性CTL均可得到有效扩增(第18天输注脾T淋巴细胞组和输注CTL组外周血中EGFP+细胞比例分别为28.81%和42.24%),但脾T淋巴细胞对随后接种的白血病细胞生长无抑制作用,而白血病特异性CTL在淋巴细胞缺乏受体小鼠体内扩增速度更快,扩增的倍数更高,并具有显著增强的抗白血病作用。结论诱导受体淋巴细胞缺乏可显著增强外源性CTL输注的疗效。     

miR-155反义寡核苷酸对乳腺癌HS578T细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨微小RNA 155(microRNA-155,miR-155)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计合成全硫代磷酸化修饰的miR-155 ASO,通过LipofectamineTM2000(Invitrogen)转染于乳腺癌HS578T细胞.CCK-8法检测乳腺癌细胞转染后的增殖情况,流式细胞仪分析转染率并检测细胞凋亡情况.结果:流式细胞仪检测转染率达70.5%.CCK-8试验结果显示转染miR～155 ASO后.HS578T细胞存活数明显低于空白组和脂质体组.流式细胞仪检测显示转染miR-155ASO后,HS578T细胞凋亡数明显增加.结论:miR-155 ASO可抑制乳腺癌HS578T细胞增殖,并促进其凋亡.提示miR-155可能成为乳腺癌治疗的靶基因.     

腺病毒介导p27基因转染对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察p27基因对人宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响.方法 将已构建成功的腺病毒载体Ad-p27转染至宫颈癌细胞系HeLa细胞,Western blotting法检测病毒转染后p27蛋白在不同时间点表达;噻唑兰(MTT)法检测其对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测其对肿瘤细胞凋亡的影响.结果 HeLa细胞成功转染进Ad-p27;在各观察的时间点内,与对照组比较,同一时间点的细胞中p27蛋白水平均显著增加(P<0.01),细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率则显著增加(P<0.01).结论 p27基因抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,腺病毒构建p27基因有望成为宫颈癌治疗的一个新方法.     

Notch1与急性T淋巴细胞白血病

Notch在多个物种中均有表达,其家族成员的结构具有高度保守性,Notch信号通路更是在众多病理生理过程中发挥关键作用.Notch家族成员Notch1不仅全程参与正常T细胞的发育,同时也与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的发生密切相关.通过对Notch1及其通路的研究,使我们对T-ALL的发病机制有了更深入的了解,从而为T-ALL的诊治提供了新靶点.本文就Notch1促T-ALL发生的机制及其在T-ALL诊疗中的作用进行综述.     

miR-181a-5p介导虎杖苷体外诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的机制研究

【目的】探讨虎杖苷体外干预对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响。【方法】以不同浓度(0、2、4、6、8、16μmol/L)的虎杖苷处理乳腺癌MDA-MB-231细胞,MTT方法检测细胞增殖变化。乳腺癌MDA-MB-231细胞分成对照组(常规培养)、虎杖苷组(6μmol/L虎杖苷处理)、虎杖苷+Anti-NC组(转染inhibitor control,6μmol/L虎杖苷处理)、虎杖苷+Anti-miR-181a-5组(转染miR-181a-5 inhibitor,6μmol/L虎杖苷处理)。流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡情况,Western blot检测MDA-MB-231细胞Bax和c-caspase-3、caspase-3蛋白表达水平,Realtime PCR方法测定MDA-MB-231细胞miR-181a-5p表达水平。【结果】与对照组比较,2、4、6、8、16μmol/L的虎杖苷处理后的细胞吸光值显著降低(均P<0.05)。与虎杖苷+Anti-NC组比较,虎杖苷+Anti-miR-181a-5组乳腺癌细胞中miR-181a-5p水平降低,吸光值升高,细胞凋亡率降低,细胞中Bax、c-caspase-3、caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。与对照组比较,虎杖苷组乳腺癌细胞凋亡率升高,细胞中凋亡蛋白Bax、c-caspase-3、caspase-3水平升高,miR-181a-5p表达水平升高(P<0.05)。【结论】虎杖苷通过上调miR-181a-5p抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

KRAS对T-ALL细胞株增殖及凋亡的影响

目的：探讨RAS蛋白家族在维持T-ALL细胞株体外生长中的功能。方法：纯化T-ALL细胞株DNA,利用PCR法扩增3个RAS基因（KRAS、NRAS、HRAS）的编码区。经T-A克隆后,Sanger法对KRAS、NRAS、HRAS基因编码区测序。将siRNA克隆到pSEH-361载体,在HEK-293T细胞中与pAMPHO和pVSVG一起包装成逆转录病毒,随后感染T-ALL细胞。qRT-PCR和Western blot检测基因表达情况。利用Annexin V-PE/7-AAD染色T-ALL细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况。利用Hoechst 33258染色T-ALL细胞,流式细胞术检测细胞周期分布情况。经抗体染色,荧光显微镜观察cleaved-Caspase 3蛋白的表达。结果：在T-ALL细胞株中,除Loucy和P12-ICH细胞KRAS基因发生c. 6187G> A(p. KRASG12D)突变,其余RAS基因均未发现错义突变。除PEER细胞（IC50=47.916μmol/L）外,泛RAS抑制剂Compound 3144对其它T-ALL细胞均有一定杀伤作用。同样,除PEER...     

Notch1与急性T淋巴细胞白血病

Notch在多个物种中均有表达,其家族成员的结构具有高度保守性,Notch信号通路更是在众多病理生理过程中发挥关键作用.Notch家族成员Notch1不仅全程参与正常T细胞的发育,同时也与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的发生密切相关.通过对Notch1及其通路的研究,使我们对T-ALL的发病机制有了更深入的了解,从而为T-ALL的诊治提供了新靶点.本文就Notch1促T-ALL发生的机制及其在T-ALL诊疗中的作用进行综述.     

氯化甲基汞和甲氨蝶呤对Jurkat细胞凋亡的影响

目的通过体外细胞实验研究氯化甲基汞(Methyl mercury chloride,MMC)和甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)对人T淋巴细胞白血病细胞(Jurkat)凋亡的影响。方法 Jurkat细胞经1.25、2.5、5、10、20μmol.L-1 MMC和MTX作用24h。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度MMC和MTX对Jurktat细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术应用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测不同浓度MMC和MTX对Jurktat细胞凋亡的影响。结果 MMC和MTX作用Jurkat细胞24h,均能够抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡;且与药物浓度正相关。10μmol.L-1 MMC的细胞凋亡率为(54.65±3.15)%,与对照组(0.15±0.03)%以及MTX组(26.32±2.64)%相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MMC和MTX均能够抑制Jurkat细胞增殖,诱导其凋亡;但前者作用更为明显。     

WT1反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解ＷＴ１反义寡核苷酸对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 应用ＷＴ１基因的反义寡核苷酸（ＷＴ１ＡＳＯ）处理Ｋ５６２、Ｕ９３７、ＨＬ－６０细胞系,白血病患以及正常人骨髓细胞,然后以台盼蓝拒染法、细胞集落法及流式细胞仪检测法确定白血病细胞的增殖和凋亡。结果 ＷＴ１ ＡＳＯ能够抑制ＷＴ１表达阳性的Ｋ５６２细胞生长,对ＷＴ１表达阴性的Ｕ９３７细胞则无抑制作用;ＷＴ１ ＡＳＯ对８例急性髓系白血病患     

miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-catenin信号通路激活。miR-219a-5p靶向负调控SMC4的表达,转染SMC4野生型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染SMC4突变型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性差异不显著。且过表达miR-219a-5p,SMC4表达水平显著降低;抑制miR-219a-5p表达,SMC4表达水平显著升高。过表达SMC4能逆转miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin及SMC4信号通路有关,将为皮肤鳞状细胞癌的预防和治疗提供新靶点。