三氧化二砷体外诱导口腔鳞癌细胞凋亡的研究

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对口腔鳞癌细胞的体外生物学作用及机制。方法 采用形态学、MTT、克隆形成试验、DNA梯度降解试验、原位末端标记及流式细胞仪等方法，对As2O3在Tca8113细胞系中的作用进行体外研究。结果 As2O3对Tca8113细胞产生明显的生长抑制作用，MTT显示生长抑制率为76.3%。DNA梯度降解试验、原位末端标记、流式细胞仪显示As2O3诱导了Tca8113细胞凋亡。流式细胞仪显示As2O3的Tca8113细胞凋亡与细胞周期阻滞有关。结论 As2O3对口腔鳞癌细胞具有显著的体外生长抑制及凋亡诱导作用。     

异土木香内酯对人舌鳞癌Tca8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响

目的 研究异土木香内酯对舌鳞癌细胞Tca8113的增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 用CCK-8法检测异土木香内酯作用于舌鳞癌Tca8113细胞的半数抑制浓度(IC50),EDU实验方法检测异土木香内酯抑制Tca8113细胞增值能力.检测土木香内酯对Tca8113细胞凋亡影响实验.Western Blot检测异土木香内...     

姜黄素对人口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制及诱导凋亡作用。方法分别应用6．25、12．50、25．00、50．00μmol／L的姜黄素作用Tca8113及Tb细胞24h,采用MTT法检测姜黄素对口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制作用,形态学观察及流式细胞仪测定细胞凋亡。结果6．25～50．00μmol／L姜黄素能显著抑制口腔鳞癌细胞Tca8113和Tb细胞的增殖（F＝793．94、391．08,q＝6．00～62．68,P〈0．05）。流式细胞仪检测显示口腔鳞癌细胞凋亡率随姜黄素浓度升高而增加。倒置显微镜下可观察到部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变。结论姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb的增殖具有显著的抑制作用,并可诱导细胞凋亡。     

大黄素抑制人口腔鳞癌细胞Tca8113增殖及细胞周期进程的实验研究

目的探讨大黄素对人口腔鳞癌细胞体外生长增殖及细胞周期改变的影响。方法采用2.5、5.0、10、20、40、60和80 μmol/L
大黄素分别干预体外培养的口腔鳞癌细胞Tca8113,作用24、48和72 h后,并设含0.1%二甲基亚砜的培养液作为对照组,通过
MTT检测不同浓度大黄素干预对于口腔鳞癌细胞Tca8113的增殖作用;以FCM检测不同浓度大黄素干预对于口腔鳞癌细胞周
期的影响;结合Western blotting 方法分析大黄素干预后对口腔鳞癌细胞周期相关蛋白CDK2、Cyclin E和P21 表达水平的变
化。结果大黄素能够在72 h内明显抑制Tca8113细胞生长以及增殖行为。MTT结果显示,随作用时间从24、48到72 h,大黄素
对于Tca8113细胞的抑制效应呈明显的时间—浓度依赖关系;由细胞周期检测结果显示,大黄素作用使口腔鳞癌Tca8113细胞
周期表现为G0~G1期细胞时相阻滞;蛋白免疫印迹则表明经大黄素干预口腔鳞癌Tca8113 细胞的细胞周期相关蛋白CDK2、
Cyclin E和P21表达水平明显降低,与空白对照组相比较,具有显著的统计学差异（P<0.05）。结论大黄素能够明确抑制人口腔鳞
癌细胞Tca8113的生长增殖以及影响其细胞分裂周期,这可能与抑制细胞周期调控信号通路中分子的活化与转导有关。
     

Iressa与顺铂联合抑制舌鳞癌细胞增殖的实验研究

【目的】探讨EGFR靶向治疗药物Iressa与顺铂联用对舌鳞癌细胞增殖的抑制作用。【方法】采用MTT的方法检测Iressa与顺铂联用对舌鳞癌细胞系Tscca和Tca8113抑制作用的效率。【结果】Iressa抑制Tscca和Tca8113细胞增殖的IC50值分别为18.03 μmol/L和29.98 μmol/L（P=0.002）;Iressa与顺铂联用加强了对舌鳞癌细胞系Tscca、Tca8113的增殖抑制,而且当Iressa提前24h或48h使用时,这种协同作用更加明显。【结论】Iressa可抑制舌鳞癌细胞系Tscca和Tca8113的增殖,与顺铂联用可协同抑制Tscca和Tca8113的增殖,这种抑制作用具有浓度和顺序依赖性。     

VP-16对Tca8113的作用及维拉帕米增效作用的研究

目的在实验室条件下观察VP-16对舌癌细胞株Tca8113的生长抑制作用及维拉帕米是否能增强VP-16对肿瘤细胞的抗癌活性。方法采用MTT法研究VP-16对Tca8113的细胞毒性作用,并尝试加入维拉帕米,评价其对VP-16的影响作用。结果VP-16可显著抑制舌癌细胞株Tca8113的生长,维拉帕米本身对Tca8113细胞的生长抑制作用较小,5 mg/L维拉帕米预作用1 h可明显提高VP-16的作用效果。结论VP-16对舌癌细胞株Tca8113有良好的生长抑制作用。维拉帕米对VP-16有化疗增敏作用。     

舌鳞癌细胞对Iressa的敏感性及其表皮生长因子受体突变

目的研究中国人舌鳞癌细胞系对表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂Iressa的敏感性及其EGFR突变,初步探讨Iressa在头颈鳞癌治疗中的价值。方法以中国人舌鳞癌细胞系Tscca和Tca8113为研究对象,采用MTT法检测Iressa对其增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;对Tscca和Tca8113进行EGFR外显子18～21测序。结果 Iressa对Tscca、Tca8113均有显著的增殖抑制作用,呈剂量依赖性。细胞周期分析显示,较低浓度Iressa(18.2μmol/L和36.4μmol/L)可使Tscca和Tca8113细胞G0/G1期比例增高;流式细胞仪分析显示高浓度Iressa可诱导Tscca和Tca8113细胞凋亡。测序发现Tscca和Tca8113的EGFR外显子20存在同一静止突变,即2361G-A,Q787Q。结论 Iressa可抑制Tscca和Tca8113的增殖,呈剂量依赖性;较低浓度时诱导细胞周期G0/G1期比例增高,高浓度时诱导凋亡,其抑制作用与EGFR突变未见相关性。     

Iressa与顺铂联合抑制舌鳞癌细胞增殖的实验研究

 【目的】探讨EGFR靶向治疗药物Iressa与顺铂联用对舌鳞癌细胞增殖的抑制作用。【方法】采用MTT的方法检测Iressa与顺铂联用对舌鳞癌细胞系Tscca和Tca8113抑制作用的效率。【结果】Iressa抑制Tscca和Tca8113细胞增殖的IC50值分别为18.03 μmol/L和29.98 μmol/L(P=0.002);Iressa与顺铂联用加强了对舌鳞癌细胞系Tscca、Tca8113的增殖抑制,而且当Iressa提前24h或48h使用时,这种协同作用更加明显。【结论】Iressa可抑制舌鳞癌细胞系Tscca和Tca8113的增殖,与顺铂联用可协同抑制Tscca和Tca8113的增殖,这种抑制作用具有浓度和顺序依赖性。     

无血清培养法分选舌癌侧群细胞及其特性的鉴定

目的探索人舌鳞癌细胞株Tca8113中侧群细胞的分选方法。方法利用流式细胞仪分选传统含血清培养方法获得的人舌鳞癌细胞系Tca8113中的侧群细胞(SP),并与无血清培养方法分离出的侧群细胞(TSC-SP)进行形态学比较和平板形成克隆实验及成瘤实验的比较,富集并验证肿瘤干细胞相关亚群。结果人舌癌细胞系Tca8113中SP细胞的含量为0.2%,而Tca8113细胞系的细胞在无血清培养基中能够成活,3~5 d后增殖并形成悬浮的肿瘤干细胞球,并随着培养时间的延长而肿瘤干细胞球体积增大和更加致密;而应用无血清悬浮法培养的Tca8113细胞系中TSC-SP细胞的含量为0.4%;SP与TSC-SP细胞在平板形成克隆实验的形成率均为100%;接种16 d后,104、105数量级的TSC-SP和SP接种裸鼠背部均出现瘤体。结论人舌鳞癌细胞系Tca8113中含极少量的SP细胞,利用无血清培养基可以达到富集肿瘤干细胞亚群的目的。     

雌二醇对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的　观察雌二醇 (estradiol,E2 )对培养的人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞系细胞增殖的影响 .方法　将 E2 作用于体外培养的人舌鳞癌细胞 ,采用四唑盐 (MTT)比色试验及 3H- Td R掺入试验 ,测定 MTT反应 A4 90 nm值和 3H- Td R掺入量 ,并用流式细胞仪测定细胞周期 .结果　不同浓度的 E2(10 - 8～ 10 - 6 mol· L- 1 )可明显增加人舌鳞状细胞癌 Tca8113细胞的增殖 ,MTT 的 A4 90 nm值变化率分别为 (10 7.5±2 .6 ) % ,(113.1± 3.1) %和 (12 0 .0± 3.7) % (P<0 .0 1) ,cpm值的变化率分别为 (10 8.2± 4 .0 ) % ,(116 .7± 4 .2 ) %和(12 4 .8± 3.2 ) % (P<0 .0 1) ,并存在着剂量效应 .10 - 6mol· L- 1的 β- E2 能使人舌鳞癌细胞进入 S期和 G2期的细胞比例从 16 .3%和 7.2 %上升到 2 1.1%和 16 .6 % ,而使处于 G1期的细胞比例从 76 .5 %下降到 6 2 .3% (P<0 .0 1) ,从而细胞的 DNA合成增加 ,促进其增殖 .E2 对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的促增殖作用可被 Tamoxifen阻断 .结论　 E2在体外能明显促进培养的人舌鳞癌细胞的增殖     

氯丁二烯对小鼠机体免疫监视功能的影响

本文通过S_(180)细胞攻击试验以及脾脏K细胞和NK细胞活力的测定,观察了氯丁二烯染毒小鼠机体免疫监视功能的改变。结果表明,吸入氯丁二烯(90、250mg/m~(?))可明显增强小鼠对S_(180)细胞攻击的敏感性;以氯丁二烯给小鼠皮下注射染毒14天,虽未见脾脏K细胞ADCC效应的显著性降低,但细胞毒指数有随染毒剂量增加而下降的趋势;以90,250,400mg/m~3的氯丁二烯给小鼠吸入染毒14天,可导致脾脏NK细胞活力的明显降低,并认为这可能是氯丁二烯促进S_(180)细胞生长及其致癌作用的机理之一。     

正常大隐静脉管壁近远端组织学差异观察

①目的　观察正常大隐静脉近远端管壁组织学结构特征,分析其原因及意义。②方法　应用普通光学显微镜、Verhoff铁苏木精染色、透射电子显微镜对正常静脉的近远端管壁组织结构进行了观察。③结果　近端内膜厚度(51.66±26.48)nm,含平滑肌细胞少;远端内膜皱褶增多、加深加大,厚度(180.00±33.32)nm,含平滑肌细胞多;近端内皮细胞扁平、连接紧密,远端内皮细胞则部分变圆,分布稀疏;平滑肌细胞近端以纵行分布为主而远端以环行为主;近端多见瓣膜而远端少见;透射电镜下远、近端内皮细胞形态有明显差异。④结论　正常静脉近远端管壁组织结构存在着明显的差异。     

不同条件对胎鼠海马神经干细胞增殖分化的影响

目的:探讨不同条件对胎鼠海马神经干细胞的增殖与分化的影响.方法:从胎鼠海马获取神经干细胞;新生鼠坐骨神经获取雪旺细胞.培养成功后对细胞进行鉴定.将提取的神经干细胞放在不同的培养条件下:雪旺细胞与神经干细胞共培养、DMEM/F12 bFGF EGF及DMEM/F12进行比较,观察其增殖和分化的情况.结果:含雪旺细胞的共培养组神经干细胞生长分化得最好,bFGF EGF组次之,DMEM/F12组生长的最差;共培养组细胞团之间建立了良好的突触联系,尤其是远距离的细胞间更为明显.此现象在bFGF EGF组及DMEM/F12组则没有出现,且该两组生长速度也较共培养组差.结论:雪旺细胞能更好的促进神经干细胞的生长、增殖和分化,它为神经干细胞提供了与活体内相似的环境 .     

用改进的悬浮式微电极测定十种动物心肌细胞动作电位正常值

作者使用改进的悬浮式微电极,测定了十种动物在位心室肌细胞动作电位。本技术已成功地记录了下列在位组织:蛙静脉窦细胞和心室肌细胞;龟、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、鳝、犬、猪和蟾蜍等的心室肌细胞动作电位,进一步对心外膜下细胞动作电位,单极心外膜心电图,体表心电图,Vmax和心肌收缩力等指标,进行了同步记录。所得结果与文献报道相一致。使用改进的悬浮式微电极增加了稳定记录的时间。作者还报告了单个细胞内较长时间稳定记录动作电位的方法。     

平阳霉素对Hela细胞生长分化影响的研究

在平阳霉素作用下,体外培养的Hcla细胞的增殖受到抑制,细胞体积增大,形态不规则,核浆比值下降,同时出现许多细胞损伤性变化。核分裂数较对照组增多,且主要处于核分裂前期。巴氏染色观察未见细胞浆有角化现象。     

脐血造血干细胞体外培养及其特性研究

应用造血祖细胞体外培养和流式细胞术(FCM),观察了脐血中粒-单系祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(BFU-E)的数量和特性,并对其细胞增殖周期和骨髓及成人外周血做了比较.结果表明,脐血中含丰富的CFU-GM和BFU-E,其数量低于成人骨髓而大大超过外周血水平;脐血红系祖细胞对促红细胞生成素(EPO)和爆式促进活性(BPA)表现出更高的敏感性,而粒系祖细胞对集落刺激因子(CSF)的敏感性和骨髓比较似无明显差别;脐血S期、G_2+M期及S+G_2M期细胞数均明显低于骨髓,虽略高于外周血各期细胞数,但差别无显著性意义.提示脐血造血干细胞体外培养可以得活性较高的祖细胞.     

增加精氨酸摄入量对灼伤病人淋巴细胞功能的影响

本实验观察了增加精氨酸摄入量对灼伤病人外周血淋巴细胞转化功能、血浆氨基酸谱及T淋巴细胞亚群的影响。结果表明,灼伤病人增加精氨酸摄入量后,其外周血淋巴细胞对植物血凝素(PHA)刺激的反应性,CD_4~+阳性细胞的比例,CD_4~+/CD_8~+细胞的比例均较对照组有明显提高。提示增加精氨酸摄入量具有改善灼伤后机体免疫功能的作用,为临床治疗提供了实验依据。     

GDNF干预对化疗致精原干细胞耗竭小鼠生精细胞恢复效果的研究

目的：研究外源胶质细胞源性神经营养因子（ glialcell line - derived neurotrphic factor, GDNF）对化疗致不育小鼠生精细胞的恢复效果,明确GDNF促进在体精原干细胞再生的效果。方法：4周龄雄性C57小鼠腹腔注射白消安（30mg／kg）,注射后4周按601．Lg／kg体重剂量腹腔注射GDNF进行干预,每天一次连续注射7d。在干预后第4周收集睾丸,检测睾丸重量、通过HE染色检测生精小管中生殖细胞恢复情况;通过RT—PCR检测GDNF和SCF基因表达评价GDNF注射对小鼠精原干细胞微环境的影响。结果：在GDNF干预后第4周,睾丸重量明显得到恢复,生精小管中上皮细胞数量明显得到恢复,精原干细胞微环境中再生因子GDNF和分化因子SCF表达水平稳定。结论：GDNF干预可以促进化疗致精原干细胞耗竭小鼠睾丸中生精细胞数量明显恢复,且维持了精原干细胞微环境中再生分化调控的平衡关系。     

细胞学诊断鼻咽癌141例分析

对141例鼻咽癌涂片细胞学检查进行分析,阳性诊断率为93.6％,假阴性为6.4％。涂片中巨大裸核癌细胞的出现是定性诊断鼻咽癌以及分型的依据。强调准确地取材,正确掌握癌与非癌细胞的鉴别要点,仔细阅片,密切结合临床和其它检查手段,是减少漏诊的保证。     

血小板活化因子对离体培养的大鼠卵巢黄体细胞孕酮分泌的影响

目的:观察血小板活化因子(PAF)对离体培养的大鼠卵巢黄体细胞孕酮分泌的影响,初步探讨其可能的作用机制.方法:原代细胞培养和放免技术.结果:PAF、hCG、Forscolin、PMA组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),PAF与hCG、Forscolin、PMA交互作用均有显著性(P<0.01).结论:PAF能明显促进离体培养的大鼠卵巢黄体细胞孕酮的分泌,并且受hCG及PKA、PKC信号转导通路的调节.