用胶体金标记法观察P195蛋白与人红细胞特异性结合区域

寻找恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白Ｐ１９５中的红细胞结合位点，为设计疫革阻断裂殖子红细胞提供实验依据：方法在大肠杆菌中分８段表达Ｐ１９５蛋白，用镍亲和层析柱分离这些蛋白。各段蛋白经复性后用胶体金标记、。标记后的蛋白与人红细胞共孵育，经固定，切片后在电镜下观察。     

血型糖蛋白A在恶性疟原虫入侵红细胞中的受体作用

人红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)与恶性疟原虫入侵红细胞关系密切。本实验在体外培养条件下,观察了GPA及其抗体,α1-酸性糖蛋白、鸡卵类粘蛋白及麦胚凝集素等对恶性疟原虫入侵红细胞的影响。结果表明:GPA与恶性疟原虫裂殖子之间的结合具有高度特异性和亲和力,有饱和趋势,结合后产生特定的生物效应。首次从配体—受体相互作用的特点,证实了GPA是恶性疟原虫裂殖子识别和结合的受体。     

人血型糖蛋白A及糖类对恶性疟原虫裂殖子入侵人红细胞的影响

人红细胞膜上血型糖蛋白A可能是恶性疟的受体。 实验采用体外培养方法,观察血型糖蛋白A,糖类,凝集素对恶性疟原虫FCC-1/HN株入侵人红细胞的影响。结果: 1.自人红细胞膜制得的血型糖蛋白A纯品在50及100μg/ml时抑制入侵分别为91%和100%;制得的卵类粘蛋白纯品在100μg/ml时抑制入侵为40%。     

用McAb对约氏疟原虫抗原的分析——Ⅰ.约氏疟红内期与人疟具有共同抗原

用粗提的约氏疟裂殖子免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0瘤细胞融合,获得13株分泌抗约氏疟红内期McAb的杂交瘤。它们分别属于小鼠IgG_1,IgG_(2a),IgG_(2b)及IgG_3亚类。根据免疫荧光观察,13株McAb可分为4类:①与红内期各发育阶段原虫均能起荧光反应;②针对晚期滋养体及裂殖体;③抗裂殖体及裂殖子;④单纯抗裂殖子。有5株McAb与人疟原虫发生阳性荧光反应,其中4株只与恶性疟交叉,另一株(McAb)则不仅与恶性     

人血型糖蛋白A衍生物对恶性疟原虫裂殖子识别及入侵红细胞的效应

用电泳纯人血型糖蛋白A(GPA)制得下列衍生物:(1)用胰蛋白酶酶解GPA分离得GPA糖肽;(2)制备GPA和GPA糖肽两种抗体;(3)制备去糖GPA(dGPA);(4)用人红细胞膜全脂分别重组成含GPA及dGPA的两种脂质体。用上述制品对FCC-1/HN株恶性疟原虫裂殖子实验,发现:(1)GPA脂质体可与裂殖子结合,而dGPA脂质体呈阴性反应。(2)GPA,GPA糖肽,GPA抗体,GPA糖肽抗体及GPA脂质体均有阻止恶性疟原虫裂殖子入侵人红细胞的效应。     

恶性疟原虫保护性抗原的鉴定和纯化

用~(125)Ⅰ—乳过氧化物酶法标记恶件疟原虫裂殖体(子),TritonX—100提取疟原虫表面标记抗原。抗恶性疟单克隆抗体9_4D_1与上述恶性症原虫膜抗原提取物作免疫沉淀分析,并用单克隆抗体9_4D_1制备免疫吸附剂,通过亲和层析自恶性疟原虫提取物中分离纯化相应的靶抗原。结果表明,免疫沉淀的靶抗原分子量为55kd,48kd和25kd的多肽,与亲和层析纯化出的靶抗原基本一致.     

~(125)I人血型糖蛋白A的制备

血型糖蛋白A(Glycophorin A简称GPA)是人红细胞膜上的重要唾液酸糖蛋白,由131个氨基酸残基和16个寡糖单位组成,分子量3.1万,它具有受体作用和MN血型抗原活性,并与恶性疟原虫裂殖子入侵红细胞有密切的关系。     

恶性疟复发伴 溶血尿毒综合征1例

恶性疟高发于非洲热带地区,目前国内少见且为散发病例[1].其为由恶性疟原虫感染所致的传染病,常以畏寒、发热、头痛为首发症状,并发症多,若不及时治疗,可危及生命[2].红细胞内期,疟原虫裂殖子破坏红细胞,裂殖子和疟原虫的代谢产物、残余和变性的血红蛋白以及红细胞碎片等一并进入血流;其中相当一部分可被多形核白细胞及单核吞噬细胞系统的细胞吞食,刺激这些细胞产生内源性热原质,与疟原虫代谢产物共同作用于下丘脑的体温调节中枢引起发热[3].     

恶性疟原虫的体外培养与温度对其存活影响的观察

自从1912年Bass等首次报道体外培养恶性疟原虫P.falciparum(P.f)以来,不少学者先后作了种种努力,都只能取得生活周期二、三代的增殖,经60多年不断的实验,至1976年Trager等的研究获得重大突破,P.f体外连续培养获得成功,被认为是疟原虫研究史上的一个里程碑。它的成功为研究疟原虫提供了重要来源,推动了对P.f的生理、生化研究、裂殖子侵入红细胞的过程及疟原虫亚显微结构的观察、微量法体外筛选抗疟药及抗药性体外微量测定技术的应用,并掀起了制备疟原虫疫苗的研究高潮。我们参照Trager的蜡烛缸法进行P.f体外培养感染率达12.74％,并以常温以下温度进行培养,取得P.f在体外存活的最低温度和最长时限的数据。现将实验结果小结如下。     

恶性疟原虫单克隆抗体保护性机制的实验研究

用体外抑制试验、调理试验和细胞毒试验等方法,对抗恶性疟原虫红内期McAb之功能特性进行了研究。17株McAb中有7株对同步化培养的恶性疟原虫的体外增殖具有明显的抑制作用;抑制强度取决于剂量和作用时间。在McAb—IgG浓度为0.6mg/ml时,上述7株McAb的抑制活性均在94％以上。在6株McAb中,有4株能促进巨噬细胞吞噬疟原虫而发挥调理作用。在7株McAb中,有4株能加强腹腔细胞杀伤和杀死疟原虫而表现出细胞毒活性。结果提示,恶性疟原虫McAb似有“多功能”、“双功能”和”单功能”之分,用“多功能性McAb”纯化的疟疾抗原,在制备疟疾亚单位疫苗方面可能更有意义。     

Central venous concentrations of immunoreactive prostaglandins E, F, and 6-keto-prostaglandin F1 in eclampsia

Concentrations of prostaglandins E, F, and 6-keto-prostaglandin F1 alpha were estimated in central venous blood and amniotic fluid in 21 women with eclampsia and 16 healthy pregnant controls. Central venous blood concentrations of 6-keto-prostaglandin F1 alpha and prostaglandin E were significantly lower in patients than controls before delivery and remained reduced for at least 48 hours after delivery. Low concentrations of prostaglandins E and 6-keto-prostaglandin F1 alpha are probably directly related to the pathogenesis of eclampsia.     

C57-ras转基因小鼠模型杂交1代CB6F1的生长发育特性

目的 测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性参数, 为该模型的商业化供应提供基础数据。方法 将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c 小鼠交配, 获得杂交1 代(CB6F1 c-Ha-ras^+/-)并测定平均产仔数、离乳率、阳性鼠生长发育情况、转基因阳性率等参数。结果 在生长发育方面, 雌鼠平均每窝产子数为8只, 离乳率为90%, 雄雌性别比符合预期。CB6F1的平均出生重为(1.73±0.05)g, 10周龄时阳性鼠平均体重雌性(24.38±1.74)g, 雄性(29.42±1.72)g。雄性鼠体重明显高于雌性, 差异存在极显著性(P<0.01);基因型检测阳性率为46.9%, 符合遗传规律。结论 转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性正常, 可实现规模化商业供应。     

使用5F和6F造影导管经桡动脉径路行冠状动脉造影的对比研究(摘要)

目的 :随着冠心病介入诊疗技术的普遍开展 ,介入器材的进步 ,各种规格造影导管的使用应予研究。本文旨在探讨常规使用较小直径造影导管经桡动脉径路施行诊断性冠状动脉造影的可行性、安全性及优越性。方法 :选择 2 0 0 0年 12月到 2 0 0 2年 10月我院择期冠状动脉造影患者 14 0例 ,其中男性 12 0例 ,女性 2 0例 ,平均年龄 5 6.2±10 .3岁 (2 4-83岁 )。入选患者术前均行Allen′s试验 ,阳性者 (<10sec)入选。在桡动脉穿刺成功后 ,按其造影时首先选用 6F桡动脉鞘管和 6FJudkins造影导管抑或首先选用 5F或 6F桡动脉鞘管和 5F桡动脉径路专用的供左、右冠状动脉插管的 5F共用型造影导管 (日本Terumo公司生产BrachialType)分为 6FJudkins型导管组—A组 (3 0例 )和 5F共用型导管组—B组 (110例 )。对比观察两组手术成功率、冠状动脉造影X光透视时间、手术操作时间、血管并发症的发生率和使用的导管数。结果 :1、A组 3 0例中 ,2 7例 (其中 1例改为肱动脉径路 ) (90 .0 % )经桡动脉径路行左、右冠状动脉造影成功 ,3例 (10 .0 % )经桡动脉径路仅完成部分操作 (左或右冠状动脉造影 ) ,后改为股动脉径路补充完成全部造影操作。B组 110例中 ,10 6例 (其中 5例改为肱动脉径路 ) (96.4% )经桡动脉径路行左、右冠状动脉     

F6透析器致首次使用综合征2例报道

近年 ,随着透析器种类的增加 ,透析膜的多样化 ,临床出现首次使用综合征的发生率也增加。为进一步提高对本综合征的认识 ,现将在我院血液透析中心诊断为首次使用综合征的 2例患者报告如下。1　一般资料此 2例患者中男 1例 ,年龄 5 1岁 ,原发病为严重感染所致急性肾功能衰竭 ,女 1例 ,年龄 5 2岁 ,原发病为慢性肾小球肾炎 ,为维持性血液透析患者。均采用碳酸盐透析 ,血流量为 2 0 0～ 2 5 0ｍｌ/ｍｉｎ ,透析液流量为 5 0 0ｍｌ/ｍｉｎ ,透析器采用德国公司生产的Ｆ6透析器 ,聚砜膜 ,透析面积 1.2ｍ× 1.2ｍ ,超滤系数为 5 .5 ,灭菌方法为环…     

不同周龄C57-ras转基因小鼠模型杂交1代CB6F1小鼠的脏器及血液学参数测定

目的 测定4周龄和8周龄不同性别CB6F1小鼠的脏器及血液生理生化指标正常值, 并比较周龄、性别对各项指标的影响。方法 分别取20只雌雄各半的4周龄和8周龄的CB6F1小鼠, 活体称重, 解剖称取主要脏器重量,采血测定血液生理指标和血清生化指标。结果 4周龄和8周龄CB6F1在体重、心、肝、脾、右卵巢、左睾丸、右睾丸、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、淋巴细胞(LYM)、总蛋白(TP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、磷(P)、甘油三酯(TG)这22项指标上差异存在显著性(P<0.01), 在左肾、右肾、右肾上腺、胸腺、左卵巢、红细胞分布宽度(RDW)、单核细胞百分比(MON%)、尿素(BUN)这8项指标上差异有统计学意义(P<0.05)。从性别上比较, 4周龄CB6F1在体重、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、LYM、ALT、ALP、葡萄糖(GLU)、P、总胆固醇(CHO)这14项指标上都有雌雄间的显著差异(P<0.01), 在右肾上腺、WBC、PCT、平均血小板体积(MPV)、总蛋白(TP)、BUN这6项指标上存在雌雄间的统计学差异(P<0.05);8周龄CB6F1在体重、心、肝、肺、左肾、右肾、MCV、PCT、LYM、淋巴细胞百分比(LYM%)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、ALT、GLU、P、CHO这15项指标上都有雌雄间的显著差异(P<0.01), 在WBC、RBC、MPV、中性粒细胞(NEUT)、TP这5项指标上存在雌雄间的统计学差异(P<0.05)。结论 本文测定了不同周龄不同性别CB6F1小鼠的脏器及血液生理生化指标, 为其建立正常检测指标和应用提供参考。     

抗人尿道高分化鳞癌单抗E6及F9在上皮性肿瘤组织的表达及其意义

目的　探讨E6,F9在鳞癌和腺癌中的表达及其临床意义。方法　利用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白 -过氧化物酶 (SP)法检测 3例正常人组织 ,4 8例肿瘤患者组织 ,其中包括乳腺、胃、结肠、肺腺癌、阴茎、口腔、原癌、宫颈鳞癌各 6例。结果　正常组织呈阴性染色。肿瘤组织呈现细胞膜和细胞浆阳性着色 ,E6阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 88% (16 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为 89% (4 3/ 4 8) ,F9阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 83% (15 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为87% (4 2 / 4 8)。结论　单抗E6,F9具有比较强的特异性 ,其高效表达可用来判定鳞癌和腺癌的生物学行为 ,并为鳞癌和腺癌的预后提供依据。     

miR-185通过调控E2F6抑制肺鳞癌细胞增殖和侵袭

目的 探讨微小RNA-185(microRNA-185,miR-185)对肺鳞癌细胞增殖和侵袭能力的作用及其可能的作用机制.方法 人肺鳞癌细胞系(NCI-H520、NCI-H226)以及正常肺上皮细胞(BEAS-2B)为实验用细胞;qRT-PCR检测miR-185表达量;miR-NC(对照)和miR-185 mimics(miR-185类似物)利用Turbofect进行转染;Western blot检测E2F6的蛋白表达量;双荧光素酶报告基因检测miR-185与E2F6的靶向调控关系;MTT检测细胞的增殖能力;细胞侵袭试剂盒检测细胞的侵袭能力;构建pcDNA.3.1-E2F6重组载体,并转染肺鳞癌细胞过表达E2F6.结果 miR-185表达量在肺鳞癌细胞中显著降低(P＜0.01).miR-185靶向抑制E2F6基因(P＜0.05).转染miR-185 mimics显著上调miR-185的细胞含量(P＜0.01)并抑制E2F6蛋白表达(P＜0.01),肺鳞癌细胞增殖能力(P＜0.05或P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05)亦显著受抑.转染pcDNA.3.1-E2F6到miR-185含量升高的细胞,E2F6蛋白表达量显著升高(P＜0.01)且细胞增殖(P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05)上升.结论 miR-185可以通过靶向E2F6抑制肺鳞癌细胞增殖和侵袭.