一氧化氮合酶在低压缺氧时的变化

目的：为了解急性缺氧后大鼠肾组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ） 基因表达的变化,探讨急性缺氧引起肾损害的分子机制。方法：１５ 只雄性Ｗｉｓｔａｒ 大鼠随机分成对照、缺氧后１０ ｍｉｎ 组、缺氧４ ｈ 组。实验组大鼠在低压舱内模拟上升至５０００ ｍ 、停留４５ ｍｉｎ 、出舱后分别在１０ ｍｉｎ 、４ ｈ 处死大鼠取肾,提取总ＲＮＡ,用反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 定量检测大鼠肾组织内ｂＮＯＳｍ ＲＮＡ、ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ、ｉＮＯＳｍ ＲＮＡ 的表达水平。结果：ｂＮＯＳ 在急性缺氧后１０ｍｉｎ 明显下降,４ ｈ 后恢复正常;ｅＮＯＳ 急性缺氧后１０ ｍｉｎ 、４ ｈ 无明显变化;ｉＮＯＳ 急性缺氧后１０ ｍｉｎ 无变化,至４ ｈ则无基因表达。结论：急性缺氧可导致大鼠ｂＮＯＳ、ｉＮＯＳ 表达下调,ＮＯ 可能参与了急性缺氧所致的肾组织及整体的病理生理过程,但有可能是可逆的。     

大鼠油酸肺损伤早期肺组织一氧化氮合成酶活性变化、基因表达及其细胞定位

目的观察油酸肺损伤早期肺组织一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性变化、诱导型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）基因表达变化及其细胞定位。方法３Ｈ－胍氨酸测定法测定ＮＯＳ活性；应用３２Ｐ标记核酸探针狭线杂交技术和地高辛标记核酸探针原位杂交技术检测油酸肺损伤大鼠肺组织。结果正常肺组织ＮＯＳ活性很低且无ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达；急性肺损伤后ｉＮＯＳ活性升高且与ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达相一致；硝基左旋精氨酸（ＬＮＮＡ）可抑制ｉＮＯＳ活性并下调ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达；伤后表达ｉＮＯＳｍＲＮＡ的阳性细胞可能为肺泡巨噬细胞、粒细胞、支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、平滑肌细胞、内皮细胞。结论急性肺损伤后肺组织ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达是一个突然启动的主动合成过程；ＬＮＮＡ抑制ＮＯ产生可能与其下调ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达有关；肺组织表达ｉＮＯＳｍＲＮＡ阳性细胞的多样性可能与ＮＯ损伤肺组织的复杂性有关。     

+GZ重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的探讨＋ＧＺ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达变化。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ，实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测大鼠心肌组织ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ暴露后３０ｍｉｎ和６ｈ大鼠心肌组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ明显升高，ｅＮＯＳｍＲＮＡ明显降低，但２４ｈ时均恢复正常。结论＋ＧＺ暴露可使大鼠心肌组织内ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍＲＮＡ表达发生改变，其在心肌损伤中可能起一定的作用，但这种变化是可逆的。     

＋Gz重复暴露对大鼠脑组织一氧化氮合成酶基因表达的影响

目的为了解＋ＧＺ重复暴露后大鼠脑组织一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）基因表达的变化，探讨＋ＧＺ引起脑损害的分子机制。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组，每组６只。实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用，对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取脑，提取总ＲＮＡ，用建立的反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测方法检测大鼠脑组织内ＮＯＳｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ和６ｈ大鼠脑组织ＮＯＳｍＲＮＡ明显升高，但２４ｈ时恢复正常。结论＋ＧＺ重复暴露可刺激大鼠脑组织ＮＯＳｍＲＮＡ的表达，ＮＯ可能参与了＋ＧＺ所致脑损害的病理过程，但这种损害是可逆的。     

＋Gz重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表 …

目的 探讨＋Ｇｚ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍＲＮＡ表达变化。方法 ２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为对照组＋Ｇｚ重复暴露后３０ｍｉｎ，６ｈ和２４ｈ四组，每组６只，对照组大鼠Ｇ组为＋１Ｇｚ，实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０Ｇｚ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ，６ｈ和２４ｈ处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录     

＋Gz重复暴露对大鼠心肌组织内皮素和一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的　探讨＋ ＧＺ作用后，大鼠心肌组织内内皮素－１（ＥＴ－１）和内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）ｍ ＲＮＡ 表达变化。　方法　 ２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ 大鼠随机分成对照组、＋ ＧＺ重复暴露后３０ ｍ ｉｎ、６ ｈ 和２４ ｈ四组，每组６只。对照组大鼠Ｇ 值为＋ １ ＧＺ， 实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋ １０ ＧＺ／３ ｍ ｉｎ（两次中间间隔３０ ｍ ｉｎ）作用。分别于暴露后３０ ｍ ｉｎ、６ ｈ 和２４ ｈ 处死大鼠取心，提取总ＲＮＡ，用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测大鼠心肌组织ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 表达水平。　结果　＋ ＧＺ暴露后３０ ｍ ｉｎ 和６ ｈ 大鼠心肌组织ＥＴ－１ ｍ ＲＮＡ 明显升高，ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 明显降低，但２４ ｈ 时均恢复正常。　结论　＋ ＧＺ暴露可使大鼠心肌组织内ＥＴ－１和ｅＮＯＳｍ ＲＮＡ 表达发生改变，其在心肌损伤中可能起一定的作用，但这种变化是可逆的     

不同运动负荷对大鼠cNOS和iNOS活性的影响及其机理探讨

方法：４０只ＳＤ大鼠，随机分为对照组、４５ｍｉｎ训练组、９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组和急性力竭组，进行无负重游泳训练８周，每周６次。测定大鼠胸主动脉构建型一氧化氮合酶（ｃＮＯＳ）、诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）及腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ的活性和血液中ＮＯ、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋的变化。结果：９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组胸主动脉ｃＮＯＳ活性显著上升，与之相对应的血浆ＮＯ的水平也显著上升（Ｐ＜０．０５）。急性力竭组胸主动脉ｉＮＯＳ水平显著上升（Ｐ＜０．０５）。１５０ｍｉｎ训练组及力竭运动组腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ与对照组相比显著上升（Ｐ＜０．０５）。血液ＣＤ４＋／ＣＤ８＋的比值在９０ｍｉｎ训练组、１５０ｍｉｎ训练组均显著上升（Ｐ＜０．０５），而在急性力竭组则显著下降。结论：（１）适量的运动训练可引起胸主动脉ｃＮＯＳ活性增强，可能是适量运动改善心血管功能的机制之一。（２）适量的运动训练可以引起腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ活性适度增加，增强机体的非特异性免疫力。而力竭运动引起的腹腔巨噬细胞ｉＮＯＳ的活性的过度增强，则可能与大强度运动引起的细胞免疫抑制有关。     

＋GZ重复暴露对大鼠脑组织神经生长因子和碱性成纤维细胞生长因子基因表达的影响

目的了解＋ＧＺ重复暴露后大鼠脑组织神经生长因子（ＮＧＦ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达的变化,探讨两种生长因子在＋ＧＺ暴露所致脑损伤中的作用和意义。方法２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成对照组、＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ四组,每组６只。对照组大鼠Ｇ值为＋１ＧＺ,实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１０ＧＺ／３ｍｉｎ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取脑,提取总ＲＮＡ,用半定量反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测方法检测＋ＧＺ重复暴露后大鼠脑组织ＮＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达水平。结果＋ＧＺ重复暴露后３０ｍｉｎ和６ｈ,大鼠脑组织ＮＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ明显升高,２４ｈ降至正常。结论＋ＧＺ重复暴露可诱导大鼠脑组织ＮＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ的表达增加,这两种生长因子的表达增加可能对神经细胞具有保护和损伤修复作用,是脑的自身保护机制之一。     

急性脊髓损伤后脊髓组织内皮素-1mRNA表达的实验研究

探讨内皮素－１在急性脊髓损伤中的表达及其作用机制。方法应用３ｇ负荷压迫大鼠胸段脊髓（Ｔ８－９）５ｍｉｎ,造成大鼠胸段脊髓急性中度损伤;借助原位杂交组织化学方法,定位,定量研究大鼠急性脊髓损伤后早期ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达的时间和空间分布特征。结果脊髓压迫伤后３０ｍｉｎＥＴ－１ｍＲＮＡ表达明显增多,４ｈ达最高峰,一直持续至７２ｈ恢复至正常水平。ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达阳性细胞主要是神经细胞,高表达区在脊髓前     

大鼠重型脑伤后一氧化氮/诱生型一氧化氮合酶神经细胞毒性的作用机制

目的 探讨大鼠创伤性脑损伤后一氧化氮／诱生型一氧化氮合酶（ＮＯ／ｉＮＯＳ）神经细胞毒性作用机制。方法 将雄性ＳＤ大鼠１５０只随机分为假手术组、重离伤对照组、左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）治疗组、伤后６ｈ ｉＮＯＳ抑制剂氨基胍（ＡＧ）治疗组、伤后１２ｈ ＡＧ治疗组。采有向位素标记法和免疫组化双酶双标技术,研究大鼠重型脑伤后ｉＮＯＳ活性变化及其细胞定位,观察ｉＮＯＳ抑制剂氨基胍（ＡＧ）及其作用底物Ｌ－Ａｒｇ     

不同+Gz暴露对大鼠下丘脑部位热休克蛋白70 mRNA表达水平的影响

目的:观察不同大小的 Gz暴露对大鼠下丘脑部位HSP 70 mRNA表达水平的影响,探讨 Gz暴露致脑损伤的机理。方法:100只SD大鼠随机分为对照组, 2 Gz暴露组, 6 Gz暴露组, 10 Gz暴露组,各组在G暴露后的5 h、10h1、d、2 d、4 d处死,采用原位分子杂交方法观察大鼠脑下丘脑部位HSP 70 mRNA表达情况,并对实验结果进行统计分析。结果:3个 Gz暴露组,HSP 70 mRNA表达水平表现出相同的变化趋势:在 Gz暴露后5 h,HSP 70 mRNA表达水平开始增加,10 h达峰值,4 d时基本恢复正常,而对照组没有这一变化趋势,不同G值之间的比较表明, 6 Gz组HSP 70 mRNA表达水平最高, 10 Gz组最低。结论: Gz暴露对大鼠下丘脑部位HSP 70 mRNA表达水平有着显著的影响。     

不同+Gz暴露后大鼠脑皮层HSP70 Mrna表达水平的变化

目的：观察不同大小的＋Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70 mRNA表达水平的影响，探讨＋Gz暴露致脑损伤的机制。方法：80只SD大鼠随机分为对照组、＋2Gz暴露组、＋6G2暴露组和＋10Gz暴露组。各组在G暴露后的5h、10h、1d、2d和4d分批处死，采用原位分子杂交方法观察大鼠脑皮层HSP70 mRNA表达情况，并对实验结果进行统计分析。结果：3个＋G2暴露组，HSP70 mRNA表达水平表现出相同的变化趋势：即在＋Gz暴露后5h,HSP70 mRNA表达水平开始增加，10h达峰值，4d时基本恢复正常，而对照组没有这一变化趋势。不同G值之间的比较表明，＋6Gz组HSP70 mRNA总体表达水平最高，且分布较广泛，＋10Gz组最低，且分布较局限，主要位于靠近颅底部的皮层中。结论：＋Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70 mRNA表达水平有着显著的影响。     

不同+Gz暴露后大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平的变化

目的 观察不同大小的 Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平的影响，探讨 Gz暴露致脑损伤的机理。方法 80只SD大鼠随机分为对照组， 2Gz暴露组， 6Gz暴露组， 10Gz暴露组，各组在 Gz暴露后的5h、10h、1d、2d、4d处死，采用原位分子杂交方法观察大鼠脑皮层HSP70mRNA表达情况、并对实验结果进行统计分析。结果 三个 Gz暴露组，HSP70mRNA表达水平表现出相同的变化趋势：在 Gz暴露后5h，HSP70mRNA表达水平开始增加，10h达峰值，4d时基本恢复正常。而对照组没有这一变化趋势．不同 Gz值之间的比较表明， 6Gz组HSP70mRNA表达水平最高，且分布较广泛， 10Gz组最低，且分布较局限，主要位于靠近颅底部的皮层中。结论 Gz暴露对大鼠脑皮层HSP70mRNA表达水平有着显著的影响。     

5km急性低压缺氧对免疫系统影响的实验研究

为探讨急性低压缺氧对免疫系统影响,将昆明种小白鼠分为3组,急性低压缺氧5km30min,60min及地面对照组。实验组在5km分别停留30min,60min后,下降至地面,处死。应用3H－TdR掺入法检测淋巴细胞增殖水平;应用小鼠胸腺细胞增殖法测定IL－1,IL－2活性;应用小鼠骨髓细胞增殖法检测IL－3活性。结果急性低压缺氧5km30min,60min组与地面对照组比较：ConA的增殖反应,IL－1及IL－2活性有差异（P＜0．05）,LPS的增殖反应、IL-3活性无差异（P＞0.05）;急性低压缺氧5km60min组与30min组比较ConA和LPS的增殖反应,IL-1,IL－2,IL－3活性无差异（P＞0．05）。提示5km急性低压缺氧对细胞免疫有抑制作用,对体液免疫无影响。     

+Gz暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达的影响

目的观察不同值的＋Gz暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达水平的影响,探讨＋Gz暴露诱导产生HSP70蛋白的机制。方法100只SD大鼠随机分为对照组、＋2Gz暴露组、＋6Gz暴露组、＋10Gz暴露组,各组在＋Gz暴露后的6h、1d、2d、4d、6d处死,采用免疫组织化学方法观察大鼠海马HSP70蛋白表达情况,并对实验结果进行统计分析。结果3个＋Gz暴露组,HSP70蛋白表达水平表现出相同的变化趋势：在＋Gz暴露后6h,HSP70蛋白表达水平开始增加,1d达峰值,6d时基本恢复正常,而对照组没有这一变化趋势;不同＋Gz值之间的比较表明,＋6Gz组HSP70蛋白表达水平最高,＋10Gz组最低。结论＋Gz暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达有显著影响,＋6Gz暴露时HSP70蛋白表达水平最高。     

+Gz诱导热休克蛋白表达及其对+Gz致脑损伤保护作用的研究

目的：探讨不同 Gz重复暴露后，大鼠不同脑区HSP70表达强度和时程的变化规律，及其与正加速度致脑损伤的相关性。方法：将雄性SD大鼠随机分为对照组、 2Gz、 4Gz、 6Gz和 10Gz暴露组。分别在暴露后6h，10h，1d，2d，4d和6d处死取脑，观察HSP70和HSP70mRNA在鼠脑不同部位的表达以及脑神经元形态学的变化。结果：低G值（ 2Gz）下，HSP70表达强度弱，持续时间短，但范围较广；高G值（ 10Gz）下，表达仅局限在下丘脑部位，呈中等强度反应；中等强度G值（ 4Gz和 6Gz）下，表达范围广，持续时间长。各组表达峰值均在暴露后1d左右，但暴露1次组2d后强度明显减弱，而暴露3-5次组在2d后仍然维持较高水平。不同 Gz暴露后HSP70mRNA的表达在分布上与蛋白表达无明显变化，但其表达高峰提前（10h），持续时间缩短。直接 10Gz/5min暴露后，在皮层、海马、丘脑等部位均可见到变性的神经元。而经过 4Gz/3min3次和5次预暴露再作 10Gz/5min暴露组，变性神经元的数目在顶叶皮层、梨状皮层、海马和丘脑下部等部位明显减少。结论： 4Gz和 6Gz诱导的HSP70表达比 2Gz和 10Gz诱导的HSP70表达强，持续时间也长。 4Gz/5min反复暴露3次和5次，再暴露于 10Gz/5min，其神经元损伤程度明显轻于 10Gz/5min单次暴露。