电针对佐剂性关节炎大鼠脾细胞IL—1和IL—2活性的影响

目的 为了探讨电针（EA）对炎症痛镇痛的外周机制,观察EA对佐剂性关节炎（AA）大鼠脾细胞中细胞因子白细胞介素1（IL－1）和白细胞介素2（IL－2）活性的影响。方法 用福氏完全佐剂造成佐剂性关节炎,电针刺激悬钟和昆仑穴,用H^3-TdR掺入法和MTT显色法分别检测IL－1和IL－2的活性。结果 EA对AA大鼠镇痛的同时,能够提高细胞因子IL－1和IL－2的活性。结论 EA对炎症痛镇痛的外周机制与其提高细胞因子IL－1和IL－2的活性有关。     

促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6在神经病理性疼痛中的研究进展

细胞因子可分为促炎性细胞因子和抗炎性细胞因子2种类型。其中,促炎因子是一类由机体的免疫和非免疫细胞合成和分泌的小分子多肽类物质,它们调节多种细胞生理功能,并在创伤、疼痛、感染等应激过程中起重要作用。促炎性细胞因子包括白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF)等。越来越多证据表明,神经损伤后,促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6在脊髓和背根神经节中被诱导,并且可以导致神经痛敏反应。近年来,随着神经病理性疼痛机制研究的日趋深入和神经炎症研究领域的不断扩展,细胞因子及调控细胞因子的分子在神经病理性疼痛作用机制的阐明,有望为镇痛药物的开发提供新的作用靶点。该文就近年来研究较多的促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6在神经病理性疼痛的研究进行综述。     

新癀片抗炎作用机制研究

[目的]研究新癀片的抗炎作用及其机制。[方法]采用炎症模型大鼠角叉菜胶脚肿实验,测定造模前及造模后1、2 h踝关节肿胀度并测定血清中环氧合酶-2(COX-2)、组胺(HIS)、前列腺素E2(PGE2)、核因子(NF-κB)等指标、测定醋酸致小鼠腹膜炎模型血清中细胞因子白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)等。[结果]新癀片能显著抑制大鼠角叉菜胶性脚肿,有显著的抗炎作用,其抗炎作用与抑制COX-2活性、减少血清IL-1α、IL-1β、组胺含量,增加血清IL-6含量相关。[结论]新癀片的抗炎作用机制可能与其抑制COX-2和NF-κB,降低PGE2含量,减少血清IL-1β、组胺含量,抑制细胞因子及炎症介质有关。     

复方马钱子凝胶剂对大鼠痛阈值及血清IL-6表达水平的影响

目的探讨复方马钱子凝胶的镇痛抗炎作用及机理。方法采用甲醛注射大鼠足跖引起的炎症疼痛模型,应用酶联免疫反应（ELISA）方法检测,不同时间大鼠足跖疼痛阈值,各组大鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）的表达水平。结果复方马钱子凝胶可抑制血清中IL-6表达,明显提高甲醛致痛大鼠的痛阈值。结论复方马钱子凝胶具有抑制IL-6和减轻疼痛的作用,在治疗软组织炎症疼痛损伤方面具有良好的抗炎、镇痛作用。     

复方马钱子对大鼠血清TNF-α,IL-6水平及痛阈的影响

目的:与复方马钱子凝胶1.25,2.5,5.0 g.kg-1探讨复方马钱子对大鼠的镇痛抗炎作用及机制。方法:造模前给予复方马钱子凝胶(含生药1.25,2.5,5.0 g.kg-1)分3次敷,连续3 d。甲醛sc大鼠右后足跖部,建立炎症疼痛模型,继续用药应用酶联免疫反应(ELISA)方法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,并检测不同时间点大鼠足跖疼痛阈。结果:各治疗组大鼠血清中IL-6水平均显著低于基质对照组,随剂量增大对TNF-α,IL-6的抑制越明显(P<0.05);随治疗剂量增大,对甲醛致痛大鼠的痛阈明显提高(P<0.05)。结论:复方马钱子可抑制血清中TNF-α,IL-6含量,提高甲醛致痛大鼠的痛阈,具有镇痛和抗炎作用。     

电针镇痛时炎症痛大鼠PAG部位Ⅰ型白细胞介素-1受体mRNA表达的变化

目的：本实验观察炎症痛和针刺镇痛时，大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)部位Ⅰ型白细胞介素-1受体基因(IL-1RI mRNA)表达的变化。方法：实验分正常组、炎症痛组、假电针组、电针组。正常对照组大鼠脚掌注射生理盐水，炎症痛各组大鼠脚掌注射2％角叉菜胶(100μL)造成炎症痛模型。在角叉菜胶注射3hr后大鼠处于一种稳定的痛敏状态。电针组大鼠于造模前电针将致炎侧“足三里”和“昆仑”穴30min，假电针组大鼠给予同样处理但不通电。实验采用原位杂交技术，观察脚掌注射角叉菜胶3hr后大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)部位IL-1RI mRNA表达的变化及针刺对其的影响。结果：致炎后3hr大鼠痛阈显著降低，大鼠PAG部位的IL-1RI mRNA表达显著增加，假电针组大鼠该部位的IL-1RI mRNA表达与炎症痛组相比无显著变化，而电针组大鼠该部位的IL-1RI mRNA阳性细胞数与假电针组相比显著减少。结论：炎症痛可引起大鼠PAG部位的IL-1RI mRNA表达增加，而电针镇痛则抑制炎症痛引起的大鼠PAG部位IL-1RI mRNA表达。     

细胞因子IL-1、IL-6在胶原2佐剂型关节炎大鼠肺组织中的表达

目的观察白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)在胶原2佐剂型关节炎(CIA)大鼠肺组织中的表达,探讨类风湿关节炎(RA)继发性肺损害的相关生物学因素。方法将16只大鼠随机分为生理组、CIA模型组各8只,向CIA模型组动物尾根部皮内注射Ⅱ型胶原(CⅡ)和不完全弗氏佐剂(IFA)混合乳化液0.2 mL致炎,制造类风湿关节炎CIA动物模型,致炎4周后,动物取材,计算肺系数,用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测大鼠肺组织匀浆液细胞因子IL-1、IL-6含量,用电镜观察各组大鼠肺组织形态学变化。应用SPSS17.0统计软件分析检测结果。结果 CIA模型组大鼠肺系数显著升高,肺组织匀浆液中细胞因子IL-1、IL-6含量水平明显升高,与生理组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论提示细胞因子IL-1、IL-6可能参与了RA发病,同时与RA继发肺损害密切相关。     

炎症局部注射β-EP和LEK抗血清对电针镇痛效果的影响

目的 :为了进一步探讨 β-内啡肽 ( β- EP)和亮脑啡肽 ( L EK)在电针 ( EA)对炎症痛镇痛中的作用机制 ,观察了佐剂性关节炎 ( AA)大鼠炎症局部注射 β- EP和 LEK抗血清对电针镇痛效果的影响。方法 :动物用 Freund's完全佐剂造模后分为对照组、EA组、β- EP抗血清组和 L EK抗血清组 4组 ,除对照组外 ,其余 3组给予 EA治疗 ,实验第 7d处理和治疗前 1 5 min在各组动物炎症局部分别注射生理盐水 (对照组和 EA组 )和 β- EP抗血清及 L EK抗血清 0 .1 ml,处理和治疗后以辐射热灯照射炎症局部引起动物热痛缩腿反应的潜伏期来判定痛阈。结果 :EA组的痛阈明显高于对照组 ( P<0 .0 1 ) ,β- EP抗血清组和 LEK血甭组的痛阈均低于 EA组 ( P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ) ,β- EP抗血清组的痛阈低于LEK抗血清组 ( P<0 .0 5 )。结论 :炎症局部的 β- EP在 EA对炎症痛的外周镇痛机制中起重要作用     

复方南星止痛膏抗炎作用研究

目的:研究复方南星止痛膏的抗炎作用。方法:采用大鼠慢性肉芽肿模型、甲醛致大鼠急性炎症模型,评价复方南星止痛膏的抗炎作用,通过观察炎症组织中细胞因子白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNFα-)、前列腺素E2(PGE2)等的变化探讨其作用机理。结果:复方南星止痛膏可以抑制大鼠慢性肉芽肿的形成,降低急性炎症大鼠足肿胀,降低炎症组织中IL-1、TNFα-、PGE2水平。结论:复方南星止痛膏具有抗炎作用,其作用机理与减少炎症组织中IL-1、TNFα-、PGE2的含量有关。     

电针对佐剂性关节炎大鼠炎症局部δ阿片受体mRNA表达的影响

目的:从阿片受体角度观察电针(EA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠产生镇痛的外周机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、EA组和单针组。于实验第1天在模型组、EA组大鼠右后足垫部向踝关节方向注入弗氏(Freund s)完全佐剂0.1 mL造模。以“悬钟”“昆仑”为EA穴位,刺激参数为2~4 V,20~100 Hz,每天1次,每次20 min,连续6 d。以原位杂交等为检测方法,在EA治疗后观测大鼠痛阈、炎症局部δ阿片受体(DOR)mRNA的表达。结果:①EA可明显提高炎症痛大鼠的痛阈,EA组与模型组比较有显著性差异(P<0.01),而与正常组无显著性差异(P>0.05);②EA组炎症局部DOR mRNA的表达明显高于模型组(P<0.01)。结论:EA对AA大鼠有明显镇痛效应,且镇痛效应的产生与大鼠炎症局部的DOR mRNA表达增强有关。     

督脉腧穴电针对佐剂性关节炎大鼠IL-2影响的实验观察

目的 :观察督脉腧穴电针对大鼠炎症和免疫功能的影响。方法 :制作大鼠佐剂性关节炎模型 ,观察电针“大椎”、“命门”对关节炎症局部 ,下丘脑、脾脏、肾上腺、血清白细胞介素 2 (IL 2 )的影响。结果 :电针组大鼠的局部炎症肿胀明显好转 ,且IL 2在下丘脑、脾脏、血清中的含量或活性均有改变 ,其中在下丘脑表现为降低 ,在脾脏、血清中表现为升高 (P <0 .0 1 )。结论 :电针“大椎”或“命门”能在神经、免疫、内分泌各不同水平影响IL 2的含量 ,以发挥其抗炎免疫的调节作用。同时也说明针刺督脉腧穴可以通过IL 2等共同介质对神经内分泌免疫网络进行免疫调节。     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织GDNF阳性细胞免疫反应性的影响

目的：探讨电针对佐剂性关节炎大鼠的镇痛作用机制。方法：将SD大鼠48只随机分为空白对照组（n=8）、炎症组（n=10）、穴位电针组（n=10）、非穴位电针组（n=10）及对侧穴位电针组（n=10）。采用完全弗氏佐剂制备关节炎模型。对穴位、非穴位及对侧穴位电针组大鼠隔天针刺,穴位为“环跳”“阳陵泉”;非穴位为两穴旁开5mm处。观察背屈踝关节疼痛试验评分、足部肿胀程度,以及关节炎大鼠踝关节周围皮肤及皮下组织胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）阳性细胞免疫反应性。结果：炎症组大鼠注射足出现了明显的痛觉过敏和局部肿胀,同时外周局部组织GDNF表达增加。电针患侧、对侧穴位可以显著缓解疼痛,加速炎症足肿胀的恢复,并显著降低炎症侧踩关节真皮层及皮下浅层组织GDNF阳性细胞的平均光密度和阳性面积百分比;而非穴位电针对照组没有显著疗效。结论：电针可以调控佐剂性关节炎大鼠炎性痛病灶局部皮肤组织GDNF的表达,从而发挥消炎镇痛的作用。穴位与非穴位之间存在作用的差异。     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。     

Effects of electroacupuncture of unilateral and bilateral "zusanli" (ST 36) on serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 levels in rats with chronic inflammatory pain

OBJECTIVE: To observe the effect of electroacupuncture (EA) on serum tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), IL-1 and IL-4 levels in rats with chronic inflammatory pain, so as to investigate its underlying mechanism in relieving pain. Methods Forty-eight SD rats were randomized into control, model, EA-unilateral ST 36, and EA-bilateral ST 36 groups, with 12 rats in each. Chronic inflammatory pain model was established by intradermal injection of Freund's complete adjuvant (0.1 mL) into the right paw. EA (2 Hz/100 Hz, 1-2-3 mA) was applied to the unilateral "Zusanli" (ST 36) and bilateral "Zusanli" (ST 36) for 30 min, once every 3 days and continuously for 4 weeks. Serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Results Compared with the control group, serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents of the model group increased significantly (P < 0.01), while in comparison with the model group, the levels of the 3 indexes were decreased considerably in both unilateral and bilateral ST 36 groups (P < 0.01). No significant differences were found between the unilateral ST 36 and bilateral ST 36 groups in serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 contents (P > 0.05). CONCLUSION: EA can effectively lower serum TNF-alpha, IL-1 and IL-4 levels in inflammatory pain rats, which may contribute to its effect in relieving inflammatory pain.     

褪黑素和电针对创伤大鼠淋巴细胞转化功能、IL-2活性及ACTH水平的影响

目的 :观察褪黑素和电针对创伤大鼠脾脏淋巴细胞转化功能、ConA诱导的IL 2活性及脾淋巴细胞、血浆、下丘脑及垂体ACTH含量的影响。方法 :MTT法检测淋巴细胞转化功能、IL 2活性 ,放射免疫分析法检测各组织ACTH的含量。结果 :腹腔注射褪黑素能有效逆转手术创伤大鼠的淋巴细胞转化功能 ,低水平IL 2诱生活性得到恢复 ,同时创伤后升高的脾淋巴细胞、血浆、下丘脑ACTH水平下降 ,而垂体内降低的ACTH水平回升。电针刺激“足三里”、“阑尾”穴也能明显改善创伤应激诱导的免疫抑制 ,并降低脾淋巴细胞、血浆、下丘脑ACTH含量 ,增加垂体ACTH含量。褪黑素与电针合用可进一步调节被抑制的免疫功能 ,且与单独褪黑素或电针相比有显著差异。结论 :褪黑素和 /或电针能恢复创伤大鼠降低的淋巴细胞转化功能、IL 2诱生活性 ,并调节机体ACTH水平     

电针对局灶性脑缺血/再灌注大鼠IL-1Ra mRNA表达的调节

目的 :观察电针 (EA)对局灶性脑缺血 /再灌注大鼠IL 1RamRNA表达的调节作用。方法 :采用线栓法制备SD大鼠局灶性大脑中动脉阻塞缺血 /再灌注 (MCAo)模型 ,并应用RT PCR的方法进行观察。结果 :MCAo大鼠缺血侧大脑皮层在再灌注后 1 2hr和 2 4hrIL 1RamRNA表达增加 ;在缺血侧纹状体缺血再灌注后 1 2hrIL 1RamRNA表达明显增加 ,但再灌注后 2 4hr表达明显降低 ,电针可使IL 1RamRNA的表达明显增加。结论 :EA可使内源性IL 1RamRNA表达增加 ,从而使IL 1Ra表达增加 ,对脑缺血起保护作用 ,这也可能是EA抗脑缺血损伤的机制之一。     

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤CB2受体阳性细胞免疫反应性的影响

目的:研究电针缓解炎性痛的机制是否与其对病灶局部内源性大麻素2型受体(CB2受体)阳性细胞免疫反应性的影响有关。方法:采用健康成年雌性SD大鼠共48只,随机分为:空白对照组(n=12)、模型组(n=12)、穴位电针组(n=12)和非穴位电针对照组(n=12)。除空白对照组外其它各组大鼠于左后肢外踝关节皮下注射完全弗式佐剂(CFA,Sigma公司产品)50μL制备单发局限性佐剂性关节炎模型。对其进行行为学观察,研究电针患侧“环跳”穴、“阳陵泉”穴对背屈、跖屈踝关节疼痛试验评分的影响,并结合免疫组化技术,观察电针对佐剂性关节炎大鼠致炎后第6天和第16天病灶局部皮肤CB2受体阳性细胞免疫反应性的影响。结果:①电针佐剂性关节炎模型大鼠致炎足同侧穴位,可产生明显镇痛作用,且电针效果在致炎后第3-5天最为显著,穴位电针组背屈、跖屈踝关节疼痛试验评分在致炎第3天和5天均较模型组和非穴位电针对照组显著降低(P<0.05)。②免疫组化结果显示,致炎后第6天穴位电针组大鼠炎性痛病灶局部皮肤组织CB2受体阳性细胞的数量显著高于空白对照组、模型组和非穴位电针组(P<0.05);致炎后第16天穴位电针组该值与空白对照组、模型组和非穴位电针组间统计学差异不明显(P>0.05)。结论:电针腧穴可使炎症病灶局部皮肤组织CB2受体免疫反应阳性细胞的数量显著上调,从而调控炎性痛病灶局部组织中致炎致痛物质与镇痛物质之间的平衡,解除局部病灶神经免疫微环路的激活状态,通过外周途径缓解疼痛。     

穴位神经阻滞对肥大细胞功能和手针及电针镇痛的不同影响与机制研究

目的:探讨阻滞穴位神经后针刺对于佐剂型关节炎(AA)大鼠镇痛效应和穴区肥大细胞脱颗粒的影响,并进一步了解手针和电针镇痛效应的外周机制差异。方法:以佐剂型关节炎大鼠为炎性反应痛模型,以"足三里"为治疗穴位,采用利多卡因穴位注射预处理。将80只大鼠随机分为正常组(C)、模型组(M)、利多卡因预处理组(NL)、电针组(EA)、利多卡因预处理电针组(L+EA)、犊鼻穴注射利多卡因足三里电针组(DL+ZEA)、下巨虚穴注射利多卡因足三里电针组(XL+ZEA)、手针组(MA)、利多卡因预处理手针组(L+MA)及犊鼻穴注射利多卡因足三里手针组(DL+ZMA)。以大鼠缩爪反射潜伏期及肥大细胞脱颗粒率为观察指标。结果:EA及MA组痛阈都高于M组(P<0.05,P<0.01),两组肥大细胞脱颗粒率都明显高于M组(P<0.01);NL组痛阈和肥大细胞脱颗粒率与M组比较差异均无统计学意义(P>0.05);L+EA组和DL+ZEA组的痛阈明显低于C组及EA组(P<0.01),而与M组及NL组的差异都无统计学意义(P>0.05);XL+ZEA组痛阈明显高于M组和NL组(P<0.01),而与EA组的差异无统计学意义(P>0.05);手针情况类似。L+EA、D/XL+ZEA组与EA组的肥大细胞脱颗粒率差异无统计学意义(P>0.05),手针情况类似。结论:阻滞针刺穴位或同神经干近心端穴位神经对针刺的镇痛效应有明显的抑制作用,神经阻滞对针刺引起的穴区肥大细胞脱颗粒无明显影响。     

电针对大鼠足背炎性痛病灶局部P物质、IL-1β免疫反应性的影响

目的 :研究电针治疗福尔马林所致炎性痛的神经免疫机制。方法 :采用福尔马林试验 ,在大鼠一侧足背皮下注射 5%福尔马林 50 μL制备局部炎性痛病灶 ,应用痛行为学及免疫组织化学方法 ,观察电针胆经“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为 1～ 3V ,4～ 1 6Hz,3 0min)对大鼠痛行为反应、炎症反应及足背炎性痛病灶局部组织P物质、IL 1 β免疫反应性的影响。结果 :①电针能显著抑制福尔马林导致的大鼠缩腿、舔爪等自发痛行为反应 (P <0 0 1 ) ;②电针能减轻福尔马林导致的局部炎症反应并显著翻转炎性痛病灶局部表皮、真皮及皮下组织P物质阳性神经纤维和IL 1 β阳性细胞免疫反应性增强现象 (P <0 0 1 )。结论 :SP与IL 1 β参与了福尔马林所致的炎性痛反应过程 ,电针可能通过抑制炎性痛病灶局部感觉神经末梢合成和释放SP及减少免疫细胞向病灶局部游走、合成并释放IL 1 β从而发挥消炎镇痛作用。