大肠杆菌合成的HBcAg转化为HBeAg的研究及其应用

乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志之一,同时又是乙型肝炎诊断上的一种重要的生物制剂。HBV感染之后,血清中最早出现的是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBeAg。后者的出现表明HBV仍在活跃地复制,此时传染性最强。HBeAg一般在HBsAg消失之前消失,如果持续阳性达8到10周以上说明已转变成慢性肝病。HBeAg相应抗体抗-HBe的出现表明病毒复制已停止,传染力低,也是HBV感染将过的征兆。因此对     

大肠杆菌合成的HBcAg转化为HBeAg的研究及其应用(摘要)

乙型肝炎e抗原(HBeAg)是乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学标志之一,同时又是乙型肝炎诊断上的一种重要的生物制剂。HBV感染之后,血清中最早出现的是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBeAg。后者的出现表明HBV仍在活跃地复制,此时传染性最强。HBeAg一般在HBsAg消失之前消失,如果持续阳性达8到10周以上,说明已转变成慢性肝病。HBeAg相应抗体抗-HBe的出现表明病毒复制已停止,传染力低,也是HBV感染将过的征兆。因此对于HBsAg阳性患者,为了了解HBV感染的状况及将来可能的发展,同时检查HBeAg和抗-HBe具有重要的意义。日前用于临床诊断的HBeAg主要是从病人血浆中提取的,由于材料缺乏,远远不能满足实际需要。     

多聚人血清白蛋白受体的检测及临床意义

多聚人血清白蛋白(PHSA—R)出现于人受乙型肝炎病毒(HBV)感染后的血清中,它与HBV复制指标HBeAg之间密切相关,它的出现提示HBV在复制,传染性强,病情在活动。为了探讨它与HBeAg之关系,及阐明其临床意义,我科对105例肝病患者血清中PHSA—R进行了检测。105例中所受HBV感染者98例(包括3例肝硬化)及7例非乙型肝炎病毒感染者,现将结果小结于下。 临床资料 一、一般资料:105例患者均系我科1987年元月～9月住院患者;年龄分布于5～55岁之间,     

前S1抗原在乙型肝炎诊断中的作用

目的：分析乙型肝炎病毒前S1抗原（PreS1）与乙型肝炎病毒（HBV）复制的关系。方法：采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法对364例乙型肝炎不同标志物的患者血清进行PreS1测定并与用荧光定量聚合酶链反应对HBV—DNA进行含量测定，然后做对比分析。结果：364例乙型肝炎患者中，167例HBsAg、HBeAg、抗HBc^＋阳性组中PreS1叶。144例（86．2％），HBVDNA阳性147例（88．0％），这组患者病毒高度复制，PreS1和HBVDNA两者间差异无显著意义，P〉0．05。122例HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组中PreS1^＋38例（31．1%），HBVDNA阳性43例（35．2％），表明HBeAg阴性患者仍有病毒复制，两者间差异无显著意义，P〉0．05。65例HBsAg和抗HBc阳民生组中PreS1^＋17例（26．2％），HBVDNA^＋20例（30．7％），表明病人仍有病毒在复制。10例HBsAg、HBeAg阳性组中PreS1^＋7例（70．0％），HBVDNA＋9例（90．0％），表明病人病毒在复制。结论：乙肝病毒前S1抗原是乙肝病毒在体内复制和传染的可靠指标，特别是在反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制的诊断中有重要意义。     

病毒性乙型肝炎与PHSAR相关性探讨

采用ELISA法对1344例临床血清标本进行乙肝病毒(HBV)标志物和多聚人血清白蛋白受体(PHSAR)检测,在HBV标志物阳性者314例中,PHSAR阳性107例占34.1％,在HBsAg、HBeAg、抗-HBc三者同时阳性的81例中,PHSAR阳性54例占66.67％;在HBsAg、抗-HBe、抗-HBc同时阳性的125例中,PHSAR阳性15例占12.0％;在HBsAg、抗-HBc阳性的67例中,PHSAR阳性25例占37.3％;而在HBsAg阴性1030例标本中PHSAR均为阴性,提示PHSAR可作为HBV感染急性期及病毒复制的标志之一,其存在表明HBV在体内复制活跃,传染性较强。     

乙肝病毒前S1抗原与乙肝病毒血清标志物联合检测的临床意义

目的探讨乙肝病毒前S1抗原（PreS1-Ag）与乙肝病毒血清标志物（HBV-M）联合检测在临床应用中的意义。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定328例乙型肝炎患者血清中PreS1-Ag和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）5项HBV血清标志物。结果 PreS1-Ag在HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组和HBsAg（＋）、HBeAg（＋）组的阳性率显著升高,分别为87.3%和80.0%;在HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组和HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组及HBsAg（＋）组的PreS1-Ag阳性率分别为47.5%、63.9%和25.0%;PreS1-Ag在HBeAg（＋）组的阳性率为86.2%,明显高于在HBeAg（-）组的52.1%（χ2=21.33,P〈0.01）;328例乙型肝炎患者中,PreS1-Ag阳性率为61.9%,HBeAg阳性率为28.7%（χ2=73.098,P〈0.01）。结论 PreS1-Ag能较好地反映HBV的复制情况,且对HBV感染的早期诊断和判断治疗效果具有重要的临床意义。     

乙型肝炎患者唾液中HBV-DNA的检测

近年来,从乙型肝炎患者唾液中检出HBsAg的报道已引起了人们对通过唾液传播乙型肝炎的关注。我们应用斑点杂交试验(又称~(32)PHBV-DNA探针)检测了46例乙型肝炎患者唾液中乙型肝炎发病(HBV—DNA),并与血清中HBV—DNA、HBsAg、HBeAg、抗HBe进行了对比观察。以7例非乙型肝炎患者作为对照,以探讨唾液传播乙型肝炎的流行病学意义。现报告结果如下:     

1.1倍长乙型肝炎病毒基因组在Huh7细胞中的高效复制和表达

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)1.1倍基因组长度的重组载体,研究其在人肝癌细胞系Huh7中的复制与表达。方法以慢性乙型肝炎患者C基因型HBV DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增出HBV基因组的两条DNA片段,酶切后与载体连接成含HBV1.1倍基因组长度的重组载体。经PCR、酶切及测序鉴定后,将重组载体经FuGENEHD转染入Huh7细胞,用ELISA检测转染细胞培养上清液的HBsAg和HBeAg表达,用荧光定量PCR和Southern杂交检测HBV DNA的复制水平及复制中间体。结果经鉴定证实成功构建1.1倍基因组长度C基因型HBV重组载体,体外转染Huh7细胞48h后,培养上清液中检出HBsAg和HBeAg表达;转染72h后,荧光定量PCR检出较高的HBV DNA复制水平(107～109拷贝/ml);Southern杂交检出病毒复制中间体。结论构建的1.1倍长重组载体可以介导高水平的HBV病毒复制和基因表达,为进一步体外瞬时转染HBV表型耐药分析奠定基础。     

昆明地区HBV感染的免疫学调查

目的 调查昆明地区HBV感染血清模式的分布特征,探求其免疫相关机制.方法 调查2000-2006年昆明地区的98 462例血清"两对半"检测结果,并选取其中涵盖了全部HBV感染模式的426份血清,以荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量,同时检测血清ALT及AST活性.以50份HBV血清标志全部阴性血清为对照.结果 共发现12种HBV感染血清模式,其中4种模式:"HBeAAg( )","HBeAg( )、抗-Hbe( )、抗-HBc( )","HBeAg( )、抗-HBc( )","HBsAg( )、HBeAg( )、抗-Hbe( )、抗-HBc( )"模式检出率均较低(P＜0.05),属于少见模式;在其余8种模式中,"HBeAg( )"模式检出率低于另外7种模式(P＜0.05),在12种模式中,"大三阳"模式、"HBsAg( )、抗-HBc( )"模式及4种少见模式HBV-DNA阳性率、复制水平及血清ALT和AST活性异常增高率均较高(P＜0.05);"抗-HBs( )、抗-Hbe( )、抗-HBc( )"模式及"抗-Hbe( )、抗-HBc( )"模式的HBV-DNA阳性率分别为6.0%(3/50)、8.0%(4/50),HBV-DNA平均含量为1.074×103copies/ml,同时伴有2.0%(1/50)及6.0%(3/50)的血清ALT或AST异常升高,显著高于对照组(P＜0.05).结论 昆明地区HBV感染血清模式丰富,以7种模式较常见;近年来随着少见模式的出现,临床应加强对HBV复制及肝功能指标的观察以监测病情的活动性,一些被认为仅是既往感染而非"乙肝"标志的血清模式也可能出现HBV复制和肝功能异常,应引起临床重视.     

乙型肝炎病毒核心启动子区核苷酸G1613A和C1653T变异的临床意义

目的 评价HBV G1613A和C1653T变异对乙型肝炎患者疾病进展、病毒体外复制力及核心启动子(CP)转录活性的影响.方法 共纳入258例研究对象,包括65例急性乙型肝炎(AHB)患者,120例慢性乙型肝炎(CHB)患者和73例慢加急性肝衰竭(ACLF)患者.从患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增HBV DNA全长基因组,统计G1613A、C1653T和G1613A+C1653T变异的发生率.构建相应载体进行体外功能实验,观察病毒质粒转染HepG2细胞后对病毒复制力及其CP转录活性的影响.结果 258例患者中共检出B、C、D三种基因型,其检出率分别是22.2％、76.2％和1.6％.G1613A、C1653T及G1613A+C1653T变异发生率随疾病程度加重依次升高.AHB、CHB和ACLF患者上述3种变异的检出率分别为13.70％、31.80％和45.20％(P＜0.01),2.30％、16.30％和27.40％(P＜0.01),2.29％、12.07％和23.29％(P＜0.05).与野生株相比,G1613A变异株复制力升高6％,HBsAg降低15％,HBeAg表达呈阴性,CP转录活性降低16.2％;C1653T变异株复制力升高10％,HBsAg升高55％,HBeAg与野生株接近,CP转录活性升高17.1％;G1613A+C1653T变异株复制力升高7％,HBsAg升高66％,HBeAg升高227％,但对CP转录活性没有影响.结论 G1613A、C1653T在CP区的变异可增加HBV复制力,影响CP转录活性和HBV抗原的表达,G1613A+C1653T联合变异可能对这些功能产生协同作用,推测这三种变异与乙肝重症化发生机制相关.     

乙型肝炎病毒adw亚型基因组在大肠杆菌中的克隆

乙型肝炎是严重危害人类健康的一种疾病,其感染率相当高,尤其在亚洲及非洲地区某些国家更高。患者中有相当数量成了慢性患者,致使劳动力丧失,部分导致肝硬变、肝坏死和肝癌。乙型肝炎的病原是乙型肝炎病毒(HBV),存在于感染者的血浆或肝细胞中,在感染者的血浆中为42nm球状的Dane颗粒结构,HBV感染的免疫学标志有表面抗原(HBsAg)、“e”抗原(HBeAg)及其相应的抗体和抗核心抗原(HBcAg)的抗体。     

肝组织HBsAg、HBcAg与组织病理变化的关系

肝组织 HBV 抗原的检测可作为乙型肝炎临床诊断,HBV 感染与复制的可靠依据。本文观察了经病理确诊的30例乙型肝炎患者肝组织 HBsAg HBcAg 的形态与分布,探讨其与肝组织病理变化的相互关系。现报道如下:     

大肠杆菌合成的乙肝病毒核心抗原转化为e抗原的探索

在一些乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的乙肝患者血清中出现e抗原(HBeAg)与血清中存在有大量Dane颗粒、高活力DNA聚合酶有关,说明乙肝病毒(HBV)的复制活跃,传染性强。凡血清中无HBeAg或有抗-HBe的人,一般来讲循环病毒较少,即其传染性较弱,所以检查HBeAg和抗-HBe在临床上具有重要的意义。科学家们对HBeAg的重视不仅在于它在临床和流行病学上的意义,同时也对它的结构与功能的关系感到兴趣。至今为止,HBeAg基因在HBV DNA序列上的位置尚未确定,HBeAg与核心抗原(HBcAg)结构间     

中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立

目的 构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型.方法 将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒rAAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞HuH7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBsAg、HBeAg)在肝癌细胞中的表达.筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6～8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,rAAV8-1.3HBV-D,ayw血清型).动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBsAg、HBeAg的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBsAg和HBcAg的表达.结果 重组病毒rAAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞HuH7,72h后细胞上清中可检测到HBsAg和HBeAg的表达.小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBeAg表达水平较稳定,但血清HBsAg表达存在波动.两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBsAg和HBcAg蛋白.结论 利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型.     

乙型肝炎相关性肝细胞肝癌HBV血清标志物特征探讨

目的探讨乙型肝炎相关性肝细胞肝癌（HCC）乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物特征。方法选择2009年6月~2013年6月临床确诊的有明确HBV感染史的HCC患者312例,分析患者HBV DNA载量,定量检测HBV标志物（包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）并分析其组合方式。结果①312例HCC患者中,HBV DNA阳性299例（299/312,95.83%）。HBeAg阳性者41例（41/312,13.14%）,其HBV DNA载量为（5.79±2.53）Log10copies/ml;HBeAg阴性者271例（271/312,86.86%）,其HBV DNA载量为（4.59±1.66）Log10copies/ml（P〈0.01）。②HBV标志物存在6种组合方式,6.09%患者HBsAg阴性,86.86%患者HBeAg阴性。结论 HBV DNA多为低至中等水平,HBV DNA阳性者中高病毒载量者仅为少数;HBeAg阴性者远多于HBeAg阳性者;HBsAg滴度较低,少数患者HBsAg阴性。     

乙型病毒性肝炎抗原抗体系统的临床意义

自从HBsAg发现以来,人们对HBV的研究有了很大进展。到目前为止,已先后证明与HBV相关的有5个抗原抗体系统,即:①乙型肝炎表面抗原—抗体系统(HBsAg/抗—HBs);②乙型肝炎核心抗原—抗体系统(HBeAg/抗—HBc):③乙型肝炎e抗原—抗体系统(HBhAg/抗—HBe);④乙型肝炎Dane颗粒抗原—抗体系统和⑤乙型肝炎δ抗原—抗体系统(δ/抗—δ)。现就其临床意义,根据大多数资料较一致的看法,概述如下:     

利妥昔单抗联合CHOP化疗对HBsAg阴性/抗-HBc阳性弥漫大B细胞淋巴瘤患者乙型肝炎病毒再激活的影响

目的 探讨利妥昔单抗联合CHOP化疗(R-CHOP)对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性/乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者乙型肝炎病毒(HBV)再激活的影响。方法 回顾分析2010-2018年北京大学第三医院血液内科收治的187例HBsAg阴性/抗-HBc阳性DLBCL患者的临床资料，所有患者均接受R-CHOP化疗方案，且未接受预防性抗病毒治疗。根据是否发生HBV再激活分为HBV未激活组(n=174)与HBV激活组(n=13)。分析两组患者的临床特点、免疫化疗对HBV再激活的影响及预后情况。结果 HBV激活组患者年龄明显高于HBV未激活组[71(66,80)岁vs. 65(54,75)岁]，差异有统计学意义(P<0.05),13例(13/13,100.0%)患者HBV DNA由基线不可测转为可测，2例患者HBsAg或乙型肝炎e抗原(HBeAg)转为阳性的时间先于可测及HBV DNA的时间。13例HBV再激活患者中，2例出现HBV再激活相关肝炎，未发生HBV再激活相关暴发性肝炎；7例(7/13,53.8%)HBsAg由阴性转为阳性，其中3例(...     

某部干部乙型肝炎病毒感染情况调查

目的：了解某部干部的乙型肝炎病毒感染情况，为防治乙型肝炎提供依据。方法：采静脉血3ml，分离血清后均用ELISA法检测HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc。结果：HBsAg阳性116例(5．1％)，抗-HBs阳性708例(31．29／6)，HBeAg阳性47例(2．1％)，抗-HBe阳性132例(5．8％)，抗-HBc阳性136例(6．0％)，HBV感染标志阳性299例(13．2%)。HBsAg阳性116例中，合并HBeAg和抗-HBc阳性(“大三阳”)58例(50．0％)；合并抗-HBe和抗-HBc阳性(“小三阳”)30例(25．9%)；合并抗-HBc阳性19例(16．4％)；合并HBeAg阳性4例(3．5％)；HBsAg单项阳性5例(4．3％)。结论：HBV血清学5项(“两对半”)中，除HBeAg阳性率女性显著高于男性外，HBsAg、抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性率男性均显著高于女性，“两对半”阳性率有随年龄增长而上升的趋势，其中抗-HBs和抗-HBs上升趋势更为明显。     

部队人群中HBV感染因素的分析

病毒性肝炎(尤其是乙型肝炎)是部队人群的常见传染病之一,查明乙型肝炎病毒(HBV)在人群中的感染状况,分析影响HBV感染的有关因素十分必要.1983年12月,我们对海军某航校进行了病毒性肝炎感染状况的流行病学调查研究,并试用单因素分析及逐步logistic回归进行多因素分析,均得到类似的结果,即影响HBV感染率在人群中分布的因素为籍贯、年龄、本人转氨酶(ALT)异常史及家庭内肝病病人接触史.经过一年半的随访观察,对部队人群HBV新感染率影响最明显的因素是集体生活小单位的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率.经曲线拟合HBsAg阳性率(x)对HBV新感染率(y)的拟合公式为?R~2(相关指数)=0.7973.     

血清HBsAg阴性和HBsAg阳性慢性活动性肝炎患者肝内HBV DNA的研究

用原位杂交法和ABG法对慢性活动性肝炎患者(以下称CAH)血清HBsAg阴性34例和阳性30例对比进行了肝内HBV DNA、HBcAg和HBsAg的检测。上述检出率在34例HBsAg阴性CAH者中分别为23.5％,23.5％和32.4％,30例HBsAg阳性者中分别为63.3％、56.7％和83.3％。结果表明,在我国,血清HBsAg阴性、HBV相关抗体阳性或阴性的CAH中,仍有少部分人肝内存在HBV DNA和HBV抗原表达,并与肝病发病机理有关。血清HBsAg阳性的CAH者中,无论血清HBeAg阳性,或抗HBe阳性、或HBeAg阴性,均有较高比例的肝内HBV DNA和HBV抗原检出。肝内HBcAg与肝内HBV DNA关系密切,可作为反映HBV活跃复制指标;肝内HBsAg则不然。