非小细胞肺癌TGF-β1、TRFⅡ及Smad 2的表达及其临床病理学意义

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子受体Ⅱ(TRFⅡ)及Smad蛋白2(Smad 2)在非小细胞肺癌中的表达特征与临床病理学因素的关系。方法 应用免疫组织化学技术分析56例非小细胞肺癌手术切除标本中TGF-β1、TRFⅡ及Smad 2的分布特征，并分析不同临床病理学因素下的表达特征。结果 非小细胞肺癌TGF-β1、TRFⅡ及Smad 2的表达与肺癌的TNM分期、组织类型、淋巴管侵袭、淋巴结转移、肿瘤区微血管数量、肿瘤区微血管类型、肿瘤间质反应、神经纤维周围间隙侵袭有关，而与年龄、性别、肿瘤最大直径、淋巴组织反应、远处转移等无关。结论 非小细胞肺癌TGF-β1、TRFⅡ及Smad 2的表达与临床病理学因素的分析对于判断其局部毕物学行为、复发及预后具有重要意义。     

TGF-β1、TGF-βR1、Smad4在乳腺癌发生、发展中的作用及其相互关系

目的:探讨TGF-β1、TGF-βR1及Smad4三者在乳腺癌中的表达与其发生、发展、转移等生物学行为以及预后的关系,为乳腺癌发病和治疗机制提供理论和实验依据。方法:提取30例乳腺癌临床标本(经液氮、研磨等处理)和MCF-7、T47D、SKBR-3三种乳腺癌细胞(取指数增长期细胞)总RNA,反转录cDNA第一链,克隆TGF-βR1、Smad4基因片段,测定质粒浓度,制备标准样品,并作出标准曲线,探针法荧光定量PCR(FQ-PCR)检测TGF-βR1和Smad4基因mRNA表达。结果:FQ-PCR检测发现恶性程度高的SKBR-3细胞,其TGF-βR1和Smad4的基因拷贝数明显低于恶性程度低的MCF-7细胞(P均<0.01),T47细胞两种基因拷贝数介于两者之间。结论:随着乳腺癌细胞病理类型恶性程度增加,TGF-βR1和Smad4 mRNA表达逐步下降,表明TGF-β1和Smad4可能具有类似乳腺癌抑癌基因的作用。     

实验性血吸虫病肝纤维化中TGF-β1、Smad3的表达变化

目的 :研究TGF - β1、Smad3蛋白在血吸虫病肝纤维化家兔肝组织中的表达及意义。 方法 :日本血吸虫尾蚴腹贴法制备家兔肝纤维化模型 (n =32 ) ,按诱导时间将动物随机分为 4、8、12周及正常对照共 4组 ,采用逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)检测肝组织中转化生长因子TGF - β1mRNA表达水平 ,免疫组织化学法检测Ⅰ型胶原的表达 ,同时应用Westernblot检测Smad3蛋白的表达。结果 :肝纤维化形成过程中TGF - β1mRNA表达进行性增强 ,且伴有肝组织Ⅰ型胶原含量的明显增高 ,两者呈正相关 (r =0 .6 2 9,P <0 .0 1)。与正常对照组相比 ,各期肝纤维化家兔肝组织中Smad3蛋白表达增加 ,与TGF - β1mRNA表达趋势基本一致。该Smad蛋白上调与肝纤维化程度呈明显正相关 (r =0 .5 2 7,P <0 .0 1)。结论 :TGF - β1/Smad信号通路参与了血吸虫病肝纤维化进程 ,Smad3的上调在肝纤维化发生、发展中起重要的介导作用。     

肠型胃癌中TGF-β及细胞周期蛋白A过表达的临床意义

目的探讨TGF-β1、TGF-β2、细胞周期蛋白A(Cyclin A)在肠型胃癌及癌旁组织中表达的意义.方法采用免疫组化法检测TGF-β1、TGF-β2、Cyclin A的表达.结果胃癌组织中TGF-β1、TGF-β2、Cyclin A阳性率分别为59.5%(25/42)、73.6%(31/42)及85.7%(36/42),显著高于癌旁组织;有区域淋巴结转移、侵及浆膜或组织分化程度高者TGF-β1、TGF-β2阳性表达率显著增高(P＜0.05).结论胃癌组织TGF-β1、TGF-β2、Cyclin A过表达可能在肿瘤分化程度、浸润、转移及预后中起重要作用.     

转化生长因子β1和Smad4蛋白在肝癌组织中的表达及其意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad4蛋白在肝癌组织中的表达及其意义。方法选取2008年3月—2011年4月入住我院并接受治疗的肝癌患者54例,采用原位杂交显色法(IHCABC法)分析TGF-β1和Smad4蛋白在肝癌组织中表达和半定量情况。结果肝癌组织中Smad4蛋白高表达率(38.9%)低于癌旁组织(46.3%),差异有统计学意义(χ2=16.59,P=0.01)。肝癌组织中TGF-β1和Smad4蛋白高表达率在男女间差异无统计学意义(P>0.05);以45岁为界,肝癌组织中TGF-β1和Smad4蛋白高表达率在不同年龄间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);在不同病理分期间比较,差异亦均有统计学意义(P<0.05),且随着病理分期增加,TGF-β1和Smad4蛋白高表达率升高。结论肝癌组织中Smad4蛋白高表达率低于癌旁组织,TGF-β1和Smad4蛋白高表达与患者性别无关,而与病理分期和年龄增长(≥45岁)有关。     

胃癌组织中CyclinD1与P27蛋白表达及其意义

目的 探讨细胞周期蛋白(CyclinD1)、细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(P27)在胃癌组织表达及其意义.方法 应用组织微阵列技术结合免疫组织化学方法(PV-9000法)检测CyclinD1、P27在正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达.结果 正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中CyclinD1的表达率分别为17.6%、32.7%、65.5%,P27的表达率分别为61.9%、23.9%、13.3%,三组间CyclinD1、P27的表达率比较差异有显著性(H=54.35、46.92,P＜0.01).CyclinD1、P27在肿瘤中的表达呈负相关(r=-0.209,P＜0.05).CyclinD1过表达和P27表达下降与胃癌浸润程度和淋巴结转移有关(X2=4.86～9.04,P＜0.05).结论 CyclinD1过表达和P27表达下降在胃癌的发展过程中起重要作用,对早期预测癌细胞的转移潜能、判断胃癌预后有重要的临床意义.     

胃癌组织中幽门螺旋杆菌感染与SOX2、CyclinD1蛋白表达的相关性研究

目的探讨胃癌组织中幽门螺旋杆菌(HP)感染与SOX2、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达的相关性。方法收集2014年1月—2015年1月河北北方学院附属第一医院经胃镜和病理检查明确诊断的胃癌标本50例,根据是否感染HP分为HP阳性组(36例),HP阴性组(14例)。采用~(13)C呼气试验和吉姆萨染色(Giemsa)法检测幽门螺旋杆菌感染,采用免疫组织化学法标记SOX2、CyclinD1,检测其在胃黏膜组织中的蛋白表达情况。比较胃癌组织SOX2、CyclinD1蛋白表达与胃癌临床病理特征之间的关系及与HP感染的相关性。结果 SOX2蛋白的表达水平与胃癌患者的性别、年龄和肿瘤大小无关(P>0.05),与临床分期、浸润深度和分化程度有关(P<0.05);CyclinD1蛋白的表达水平与胃癌患者的性别、年龄和肿瘤大小无关(P>0.05),与临床分期、浸润深度和分化程度有关(P<0.05)。SOX2阳性颗粒定位于细胞核,呈棕黄色颗粒。SOX2蛋白在HP阳性组胃癌组织中阳性表达率为5.6%,在HP阴性组阳性表达率为35.7%,2组比较差异有统计学意义(x~2=5.316,P<0.01)。CyclinD1主要定位于胃癌细胞的细胞核,呈棕黄色颗粒。HP阳性组胃癌组织中CyclinDl蛋白阳性表达率为66.7%,HP阴性组表达率为28.5%,2组比较差异具有统计学意义(X~2=2.119,P<0.05)。胃癌组织中HP感染与SOX2蛋白表达呈负相关(r=-0.81l,P<0.01),与CyclinD1蛋白表达呈正相关(r=0.274,P<0.05)。结论 HP感染可能诱发胃癌,SOX2、CyclinD1蛋白可能参与胃癌的发生、发展过程。     

TGF-β1对胰腺癌细胞生长的影响及TGF-β1、Smad4和p21waf1在胰腺癌组织中的表达

目的观察TGF-β1通路中TGF-β1、Smad4及p21wafl的表达关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制.方法 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察TGF-β1对人胰腺癌细胞系JF-305增殖作用的影响;通过免疫组化技术检测45份人石蜡包埋胰腺癌组织以及20份胰腺良性病变中TGF-β1、Smad4和p211wal蛋白表达.结果 TGF-β1早期抑制胰腺癌细胞系JF-305增殖,作用与剂量成正比.45份胰腺癌组织中TGF-β1、Smad4和p21waf1阳性率分别为66.67%(30/45)、60%(27/45)和37.78%(17/45),与良性对照组阳性率相比差异显著,TGF-β1与肿瘤转移相关(P＜0.05),Smad4与肿瘤分化程度相关(P＜0.05).结论外源TGF-β1早期可以显著抑制胰腺癌细胞系JF-305的生长;胰腺癌组织中Smad4表达降低,其下游基因p21wal基因表达随之降低,二者有相关性,但TGF-β1表达增高.     

TGF-β1及其信号蛋白Smad2,3在大鼠心肌细胞肥大中的作用

目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)及其信号蛋白Smad2，3在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法 培养新生大鼠心肌细胞，用不同剂量TGF-β1刺激，检测[^3H]-Leu掺入量，RT—PCR检测信号蛋白Smad2，3mRNA的表达。结果 不同剂量的TGF-β1均能明显增加心肌细胞[^3H]-Leu掺入量，TGF-β1增加肥大心肌细胞Smad2，3mRNA的表达。结论 TGF-β1能诱导大鼠心肌细胞肥大，信号蛋白Smad2，3在其中发挥了重要作用。     

结肠癌组织中TGFβ1及其Ⅱ型受体和Smad4蛋白的表达

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)通路中TGF-β1及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)和Sm ad4的关系,及其在结肠癌中的可能作用机制。方法用EnV ision免疫组化法检测38例石蜡包埋人结肠癌标本中TGF-β1、TβRⅡ和Sm ad4蛋白的表达情况。结果TGF-β1阳性率为52.6%(20/38),65.8%的TβRⅡ和63.2%的Sm ad4表达下降。Sm ad4的表达与肿瘤分化程度及Dukes分期相关(P<0.05)。TGF-β1与TβRⅡ之间有相关关系(P<0.05)。结论TGF-β1与TβRⅡ对结肠癌的发生可能有协同作用。Sm ad4是TGF-β信号通路中的关键因子,但Sm ad4上游可能还存在其他信号通路,调控其表达。     

结肠癌组织中TGFβ1及其Ⅱ型受体和Smad4蛋白的表达

目的 探讨转化生长因子-β(TGF-β)通路中TGF-β1及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)和Smad4的关系,及其在结肠癌中的可能作用机制.方法 用EnVision免疫组化法检测38例石蜡包埋人结肠癌标本中TGF-β1、TβRⅡ和Smad4蛋白的表达情况.结果 TGF-β1阳性率为52.6%(20/38),65.8%的TβRⅡ和63.2%的Smad4表达下降.Smad4的表达与肿瘤分化程度及Dukes分期相关(P<0.05).TGF-β1与TβRⅡ之间有相关关系(P<0.05).结论 TGF-β1与TβRⅡ对结肠癌的发生可能有协同作用.Smad4是TGF-β信号通路中的关键因子,但Smad4上游可能还存在其他信号通路,调控其表达.     

大肠癌组织中TGF-α、TGF-β1的表达及其意义

目的 :探讨转化生长因子α(TGF α)和转化生长因子 β1(TGF β1)在大肠癌组织中表达的相关意义。方法 :应用免疫组织S P法对大肠癌细胞进行检测。结果 :TGF α、TGF β1在大肠癌中的阳性表达率分别为6 2 .90 %和 6 9.35 % ,明显高于二者在大肠腺瘤、正常粘膜中的表达 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,癌旁粘膜中的表达高于正常粘膜 (P <0 .0 5 ) ;TGF α在高、中分化腺癌中的表达低于低分化腺癌 (P <0 .0 5 ) ;DukesA +B期中二者的表达低于DukesC +D期 (P <0 .0 5 ) ;二者在大肠癌中的表达有相关性 (P <0 .0 5 ,Pearson列联系数 =0 .4 1)。结论 :大肠癌TGF α、TGF β1过度表达与大肠癌发生、发展、Dukes分期、癌组织浸润、转移范围有关 ;TGF α与腺癌分化程度有关 ;少部分大肠癌旁粘膜已偏离正常细胞生长状态 ,具有肿瘤细胞生长代谢的某些特征。     

肠型胃癌中TGF-β及细胞周期蛋白A过表达的临床意义

目的：探讨TGF－β1、TGF－β2、细胞周期蛋白A（CyclinA)在肠型胃癌及癌旁组织中表达的意义。方法：采用免疫组化法检测TGF－β1、TGF－β2、CyclinA的表达，结果：胃癌组织中TGF－β1、TGF－β2、CyclinA阳性率分别为59．5％（25／42）、73．6％（31／42）及85．7％（36／42），显著高于癌旁组织；有区域淋巴结转移，侵及浆膜或组织分化程度高者TGF－β1、TGF－β2阳性表达率显著增高（P＜0．05）。结论：胃癌组织TGF－β1、TGF－β2、CyclinA过表达可能在肿瘤分化程度、浸润、转移及预后中起重要作用。     

Smad4蛋白在胃癌组织中表达的研究

目的 了解Smad4蛋白在胃癌组织中的表达情况及其意义。方法 应用免疫组织化学方法,对10例正常胃粘膜组织和61例胃癌组织（高中分化 腺癌22例,低分化腺癌29例,粘液腺瘤3例,印戒细胞癌7例）中的Smad4的表达进行检测。结果 在正常胃粘膜组织,Smad4蛋白主要存在于腺体体底部细胞胞浆中。在胃癌组织,Smad4表达于胞浆及少量细胞核中,它在低分化胃癌组织中的表达明显减少（与正常胃粘膜和高分化腺癌相比,P＜0．01,P＜0．05）,而且分化越差的胃癌组织,其表达减少。提示在胃癌发生、发展中起了重要作用。结论 Smad4在低分化胃癌组织中表达明显减少,可能在胃癌的发生发展过程中起了一定作用。     

柚皮素对支气管上皮细胞中Smad介导的TGF-β1通路的影响

目的:观察柚皮素对支气管上皮细胞中Smad介导的转化生长因子β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)通路的影响,并研究其可能的机制?方法:培养HBE细胞,分为对照组?TGF-β1组和柚皮素干预组?柚皮素干预组分别与25?50 和100 μmol/L的柚皮素共孵育2 h后,与TGF-β1组一起加入TGF-β1?2 h后用real-time PCR方法检测各组细胞纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1) mRNA表达?另外在加入TGF-β1后30 min时,提取对照组?TGF-β1组和柚皮素高剂量组细胞总蛋白,用Western blot方法检测Smad2水平及磷酸化的Smad2水平,同时用免疫荧光法检测Smad2的核转位?结果:TGF-β1组的PAI-1 mRNA水平较对照组明显增高,随着给予柚皮素剂量的增大,PAI-1 mRNA水平明显降低?TGF-β1组经TGF-β1刺激30 min后,磷酸化的Smad2明显增加,经柚皮素干预后则随着柚皮素剂量的增加,Smad2磷酸化明显受抑制?各组的总Smad2水平无明显变化?免疫荧光实验显示TGF-β1组的细胞核内Smad2明显增多,而柚皮素干预组(100μmol/L)的细胞核内Smad2含量明显减少?结论:柚皮素可能通过抑制Smad2磷酸化及减少核内Smad2含量来影响TGF-β1在支气管上皮细胞中的生物功能?     

贝那普利对糖尿病大鼠胰腺组织中TGF-β1和Smad3表达的影响

目的 研究贝那普利对糖尿病大鼠胰腺组织中TGF-β<,1>和Smad3表达和RAS系统的影响。方法 以健康成年Wistar大鼠为实验对象,随机分为正常组、糖尿病未干预组和糖尿病贝那普利干预组3组。正常组以普通饲料喂养,糖尿病未干预组和糖尿病贝那普利干预组以高脂高糖饲料喂养。6周后腹腔注射链脲佐菌素诱导成糖尿病大鼠。于给药8周后处死。检测各组大鼠的血糖、胰岛素、体重。采用免疫组织化学方法检测胰腺组织中TGF-β<,1>及Smad3蛋白的表达,并用彩色病理图像分析系统进行定量分析。采用放射免疫的方法检测胰腺组织中的血管紧张素Ⅱ的含量。结果 与正常组相比,糖尿病未干预组血糖增加胰岛素分泌减少、体重减,轻。TGF-β<,1>及Smad3蛋白的表达明显增加。胰腺组织中的血管紧张素Ⅱ含量增加。贝那普利治疗后除体重无变化外上述指标均明显改善(P<0.05)。结论 胰腺局部RAS系统和TGF-β<,1>/Smad通路在糖尿病时是激活的,贝那普利治疗后可改善胰腺纤维化并可改善胰岛功能。     

Smad7基因转染拮抗TGF-β1对培养肾小管细胞的影响

目的 探讨Smad7基因转染对TGF-β1诱导的小管细胞生长阻滞，细胞凋亡和FN分泌的影响。方法 采用Tfx-50脂质体将小鼠Smad7转染入原代培养的。肾小管细胞，用MTT法观测小管细胞的增殖、流式细胞仪观测其细胞周期的变化；ELISA法测定小管细胞FN的分泌。结果 培养基添加TGF-β1(10ng/ml)48h后，小管细胞增殖能力明显下降，停滞于G1期的细胞数增多，细胞分泌的FN量也明显增高，相反，Smad7基因转染后可明显拮抗TGF-β1对小管细胞的上述作用。结论 Smad7基因转染可明显拮抗TGF-β1对小管细胞的影响，此结果为今后体内Smad7基因治疗研究奠定了基础。     

慢性乙型肝炎患者肝组织中Smad2的表达

目的 研究Smad2在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达,为肝纤维化的发生和发展机制提供进一步的实验依据。方法 用免疫组化法检测慢性乙型肝炎患者肝活检组织中Smad2的表达及其变化规律。结果 Smad2阳性着色定位于细胞质,肝血窦窦壁细胞、星状细胞、变性肝细胞均可见Smad2蛋白表达。随着肝损伤、肝脏病理改变的进展,Smad2的表达逐渐增强。结论 慢性乙型肝炎患者肝组织升高的Smad2主要由非实质细胞产生。Smad2的表达与肝组织炎症和纤维化程度成正比。