染料木素磺酸钠对慢性肝损伤的保护及T淋巴细胞亚群的调节作用

目的：观察染料木素磺酸钠（genistein sodium sulfonate,GSS）对小鼠慢性肝损伤的保护作用及其对外周血T淋巴细胞亚群的调节作用.方法：取健康雄性昆明种小鼠48只,随机分成5组,分别为正常组、模型组、0.1 mg/kg GSS组、0.3 mg/kg GSS组、阳性药物对照组（2.5 mg/kg联苯双酯）.采用腹腔注射10% CCl4,体积为0.1 mL/10 g,持续6周,制备小鼠慢性肝损伤动物模型.各组分别灌胃给予不同剂量的GSS、阳性药物或生理盐水,连续6周.测定小鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）活性,并计算AST/ALT比值;HE染色,观察肝组织形态;流式细胞术检测CD4＋及CD8＋ T淋巴细胞亚型,并计算CD4＋/CD8＋ T淋巴细胞比值.结果：（1）模型组小鼠肝组织可见大量肝细胞呈气球样变、脂肪变性、胞质凝聚、或肝细胞变性坏死;GSS实验组肝组织未见明显的脂肪变性或炎性病灶.（2）模型组小鼠血清AST及ALT含量升高,GSS实验组小鼠血清AST、ALT含量明显低于模型组.（3）模型组小鼠CD3＋细胞比例升高,CD8＋ T细胞比例降低,CD4和CD8双阴性T淋巴细胞比例升高,CD4＋/CD8＋ T淋巴细胞比值升高;GSS治疗后,CD3＋细胞比例降低,CD8＋ T 淋巴细胞比例升高,CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值降低,CD4和CD8双阴性T淋巴细胞比例降低.结论：GSS对CCl4诱导小鼠慢性肝损伤有保护作用,其机制可能通过调节T淋巴细胞亚群,影响免疫功能实现的.     

染料木素磺酸钠对慢性脑缺血大鼠皮层神经元凋亡及Notch1信号的影响

目的:观察染料木素磺酸钠(Genisteinsodium sulfonate,GSS)是否可通过调节Notch1信号减少慢性脑缺血大鼠皮层神经元的凋亡.方法:采用改良型双侧颈总动脉结扎法(2-VO)制备慢性脑缺血大鼠模型,运用尼氏染色方法观察大鼠皮层神经元损伤情况,并以Real time-PCR和Western Blo...     

IL-1β对HepG2细胞核受体RXRα蛋白表达的影响

目的研究白细胞介素1β（interleukin 1 beta,IL-1β）诱导人肝癌细胞HepG2维甲酸X受体α（retinoid Xreceptor alpha,RXRα）蛋白核-胞浆转移现象及其基因水平变化。方法 IL-1β处理HepG2细胞,收集不同时间点RXRα总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白及mRNA;同时用蛋白酶体抑制剂,MG132预处理HepG2细胞后IL-1β诱导细胞,收集细胞蛋白及mRNA,应用Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,real-time PCR）检测RXRα总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白及mRNA水平的变化。结果总胞核RXRα蛋白表达量降低（P〈0.05）,胞浆RXRα蛋白表达量增高（P〈0.05）,RXRαmRNA水平在6、12 h升高（P〈0.05）。MG132可以抑制IL-1β对细胞核、胞浆RXRα蛋白表达水平的变化。结论 IL-1β可以诱导HepG2细胞RXRα核-胞浆转移,RXRα核-胞浆转移可能与泛素-蛋白酶体降解途径相关。     

生存素在胃癌细胞中的表达及IL-1β对其表达的影响

目的探讨生存素在人正常胃黏膜细胞株及胃癌细胞株中的表达和白细胞介素（IL）-1β对胃黏膜细胞生存素表达的影响。方法用RT-PCR和Westernblot法检测人正常胃黏膜细胞株（GES-1）及3株胃癌细胞（AGS、SGC-7901、BCG-823）和经IL-1β处理后的GES-1、AGS细胞中生存素的表达。结果 3株胃癌细胞均有生存素表达,正常胃黏膜细胞无生存素表达。IL-1β不刺激正常胃黏膜细胞生存素的表达,可剂量依赖性增加胃癌细胞生存素的表达。结论胃癌细胞均有生存素表达,正常胃黏膜细胞不表达生存素;IL-1β对胃癌细胞生存素的表达有正向作用,表明IL-1β在胃癌的发展过程中有一定作用。     

慢性心力衰竭大鼠心房血管紧张素Ⅱ 1型受体和尼古丁α7 受体的表达

\[摘要\]目的观察血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R)和尼古丁α7 受体(α7nAChR)在心力衰竭大鼠心房的表达。方法将雄性SD大鼠随机分成4组,行腹主动脉缩窄术,制备心衰模型。采用蛋白质印迹法,比较缩窄4、8、12和16周后对照组和缩窄组大鼠心房AT1R和α7nAChR的表达变化情况。结果与同时间点对照组相比,心房AT1R和α7nAChR的表达在缩窄后4、8、12和16周差异均无统计学意义。结论在腹主动脉缩窄致大鼠心衰模型中,心房AT1R和α7nAChR可能并不参与心衰早期发生、发展的病理过程。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型小鼠血清IL-1β和TNF-α的影响

目的探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁小鼠行为学及血清白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。方法 60只雄性昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、百事乐胶囊高、中、低剂量组和氟西汀组。除正常组外,其他组给予21 d慢性不可预见性应激造模。每天造模前各组小鼠分别予以相应药物灌胃治疗,模型组以等量蒸馏水灌胃。测定小鼠体质量,通过敞箱实验和悬尾不动实验检测小鼠行为学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清IL-1β和TNF-α的含量。结果模型组小鼠发生明显的行为学改变,水平和垂直活动明显减少,悬尾不动时间明显延长;百事乐胶囊高、中、低剂量组能显著增加小鼠体质量(P<0.05),改善小鼠的行为学指标(P<0.01),百事乐胶囊高、中剂量能降低血清IL-1β和TNF-α水平,与模型组比差异有统计学意义(P<0.05);与氟西汀组相比,百事乐胶囊高、中、低剂量组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论百事乐胶囊能显著改善慢性应激抑郁小鼠的行为学变化,其作用可能与下调慢性应激所致的血清IL-1β和TNF-α水平有关。     

染料木素对尿毒症大鼠残余肾组织α-平滑肌肌动蛋白沉积的影响

目的 观察染料木素对尿毒症大鼠残余肾组织α-平滑肌肌动蛋白沉积的影响并探讨其机制.方法 5/6肾切除术建立尿毒症大鼠模型,将模型鼠分为染料木素组(G)和对照组(C),假手术组(S)作为正常对照.术后各组正常饮食,G组同时给予染料木素15 mg/(kg·d)灌胃,C组予等量生理盐水灌胃.检测实验各组术前和术后第4、8周尿蛋白、生化等指标.第8周观察肾组织病理变化情况.免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白沉积情况.应用RT-PCR法、Western Blot法分别检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA转录、蛋白质表达情况.结果 染料木素组与对照组相比,尿蛋白排泄量减少,血清尿素氮、肌酐水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.01).肾小球内α-平滑肌肌动蛋白沉积明显减少,肾小球硬化明显减轻.TGF-β1 mRNA、蛋白质表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05).结论 染料木素可以降低尿毒症大鼠残肾组织α-平滑肌肌动蛋白的沉积,对肾脏有保护作用,机制可能与抑制TGF-β1的表达有关.     

细胞因子IL-1α、IL-β、IL-17在类风湿性关节炎时的水平分析

目的 了解类风湿性关节炎(RA)患者血清中IL-1α、IL-β、IL-17水平的变化.方法 用ELISA法测定RA患者50例,并进行统计学处理.结果 RA患者IL-1α、IL-β、IL-17血清中的水平均明显高于正常人(P＜0.01).结论 类风湿性关节炎(RA)患者,病情的发展与IL-1α、IL-β、IL-17有密切关系.     

四氯化碳致肝纤维化大鼠肝组织中IL-1β及IL-1βR的表达

目的研究四氯化碳(CC l4)所致肝纤维化大鼠肝组织中白介素-1β(IL-1β)及白介素-1β受体(IL-1βR)的表达,探讨肝纤维化的发病机理。方法CC l4所致2、4、6、8周肝纤维化模型及对照组大鼠肝苏木素-伊红染色、免疫组织化学反应,观察肝组织病理变化和IL-1β及IL-1βR的表达。结果对照组大鼠肝组织中IL-1β及IL-1βR无明显表达;2周模型组病理变化以炎症及肝细胞变性为主,肝组织细胞IL-1β及IL-1βR表达较对照组明显增强(P<0.01);4周模型组间质成分增生明显,坏死肝细胞中IL-1β及IL-1βR无明显表达,与2周模型组相比IL-1β及IL-1βR表达减少(P<0.01);6周模型组肝细胞大量坏死,中央静脉及汇管区纤维隔形成,与4周模型组相比IL-1β及IL-1βR阳性细胞明显减少(P<0.01);8周模型组肝组织形成完整的假小叶,肝组织细胞IL-1β及IL-1βR表达程度与6周模型组相似。结论肝纤维化发生、发展的不同阶段,损伤因子均能刺激肝组织细胞表达IL-1β及IL-1βR。     

染料木素促乳癌细胞增生和IGF-1R mRNA表达机制

目的研究染料木素促人乳癌（MCF-7）细胞增生及IGF-1R mRNA表达机制。方法MCF-7细胞常规培养后,用ICI182,780或JB-1与染料木素共同培养,以阻断雌激素受体（ER）或IGF-1R。MTT法观察细胞生长情况,RT-PCR技术观察IGF-1R基因表达情况。结果染料木素对MCF-7细胞具有增生效应,与对照组相比差异有统计学意义（F=14.627,q=3.76,P〈0.05）,此效应可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断（q=3.89、4.25,P〈0.05）;染料木素可增加IGF-1R基因表达（F=21.695,q=4.94,P〈0.01）,此效应也能够被ICI182,780或JB-1完全阻断（q=5.03、5.89,P〈0.01）。结论染料木素可以促进MCF-7细胞的增生和IGF-1R mRNA的表达,此作用可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断。     

染料木素促乳癌细胞增生和IGF-1R mRNA 表达机制

目的 研究染料木素促人乳癌(MCF-7)细胞增生及IGF-1R mRNA 表达机制.方法 MCF-7细胞常规培养后,用ICI182,780或JB-1与染料木素共同培养,以阻断雌激素受体(ER)或IGF-1R.MTT法观察细胞生长情况,RT-PCR技术观察IGF-1R基因表达情况.结果 染料木素对MCF-7细胞具有增生效应,与对照组相比差异有统计学意义(F=14.627,q=3.76,P＜0.05),此效应可以被ER拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断(q=3.89、4.25,P＜0.05);染料木素可增加IGF-1R基因表达(F=21.695,q=4.94,P＜0.01),此效应也能够被ICI182,780或JB-1完全阻断(q=5.03、5.89,P＜0.01).结论 染料木素可以促进MCF-7细胞的增生和IGF-1R mRNA的表达,此作用可以被ER 拮抗剂ICI182,780或IGF-1R拮抗剂JB-1完全阻断.     

肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β在慢性乙型肝炎和原发性肝癌患者血清及肝组织中的表达

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)在慢性乙型肝炎(CHB)和原发性肝癌(PHC)患者血清及肝组织中的表达水平。方法应用酶联免疫吸附测定法检测45例CHB患者(CHB组)、45例PHC患者(PHC组)及45例健康人(对照组)血清中TNF-α、IL-1β水平,采用免疫组织化学方法检测CHB和PHC患者肝组织中TNF-α、IL-1β蛋白的表达,并对3组结果进行比较。结果 CHB组患者血清TNF-α和IL-1β水平高于对照组(P=0.000),PHC组患者血清TNF-α和IL-1β水平显著高于CHB组(P=0.000)。PHC组织中TNF-α和IL-1β蛋白阳性表达显著高于CHB组织(P=0.000)。结论 TNF-α和IL-1β是重要的促炎性细胞因子,在CHB和PHC患者的肝损伤过程中发挥重要作用,可作为临床生物治疗的靶点。     

土鳖四逆散对肝纤维化大鼠TGF-β1和α-SMA表达及肝损伤的影响

目的:研究土鳖四逆散对肝纤维化大鼠TGF-β1(转化生长因子)和α-SMA(平滑肌肌动蛋白)的表达及肝损伤的影响.方法:建立大鼠肝纤维化模型,随机分组治疗:土鳖四逆散组、秋水仙碱组、模型组、空白组.每组10只,各组以药物分别处理8周后处死大鼠取材.结果:土鳖四逆散组TGF-β1和α-SMA的表达极少,秋水仙碱组的表达稍强,而模型组TGF-β1和α-SMA的表达极强.土鳖四逆散组与模型组相比差异极显著.肝组织病理显示,土鳖四逆散组的肝小叶结构改变不大,模型组肝内纤维结缔组织增生,假小叶形成;土鳖四逆散组血清转氨酶轻度升高,而秋水仙碱组与模型组血清转氨酶水平明显升高,三者比较有极显著性差异.结论:土鳖四逆散具有抗肝纤维化及护肝作用,其机理与降低纤维化肝内的TGF-β1和α-SMA的表达有关.     

IL-1β和TNF-α对培养的气道上皮细胞E钙粘着蛋白表达的影响

应用酶消化法体外培养猪气道上皮细胞 (AEC) ,加入一定浓度梯度的白细胞介素 - 1β (IL - 1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α) ,应用免疫细胞化学染色和原位杂交方法观测 AEC中 E钙粘着蛋白 (ECD)表达的变化。结果发现 :正常 AEC中 ECD表达于相邻上皮细胞间的胞膜上 ,其 m RNA也有一定含量。一定浓度梯度的 IL - 1β和 TNF-α作用 2 4h后 ,胞膜上 ECD表达减弱 ,而胞浆内 ECD表达在低浓度时升高 ,高浓度时降低 (P<0 .0 1) ,同时 ECD m RNA含量在低浓度时增多 ,而在高浓度时维持正常水平 (P>0 .0 5 )。结果提示 ,IL - 1β和 TNF-α在翻译或翻译后水平使膜上 ECD表达下调 ,参与了 AEC的损伤修复反应     

蛇床子素对小鼠胚胎长骨雌激素受体α、β蛋白表达的影响

【目的】研究蛇床子素对小鼠胚胎长骨雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）和骨雌激素受体β（estrogen receptorβ,ERβ）蛋白表达的影响,探讨其作用于骨组织的调控机制。【方法】取16 d胎龄雌性小鼠前肢尺骨,置BGJb培养基中孵育,经不同浓度蛇床子素（1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7mol/L）和雌酚酮（1×10^-6mol/L）作用48 h后,采用免疫组织化学染色方法观察ERα、ERβ在小鼠尺骨骺板静止区、增殖区和肥大区中的定位和表达情况,并通过图像分析系统测定骺板各区免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。【结果】与对照组相比较,各浓度蛇床子素和雌酚酮组均能显著上调软骨骺板静止区、增殖区和肥大区ERα、ERβ蛋白的表达水平（P〈0.01）。在1×10^-7-1×10^-5mol/L区间内,随着蛇床子素浓度的升高,各区ERα、ERβ蛋白的表达水平显著升高（P〈0.01）。除1×10^-5mol/L组外,其它各浓度蛇床子素对ERα、ERβ蛋白的调控作用明显弱于雌酚酮组（P〈0.05）,1×10^-5mol/L蛇床子素组作用与雌酚酮组无统计学差异。【结论】蛇床子素对骨组织的作用可能与其上调长骨骺板中ERα及ERβ表达有关。     

苓桂术甘汤对慢性心衰模型大鼠心肌组织TNF-α及血清NF-κB和IL-1β的影响

目的 观察苓桂术甘汤对慢性心力衰竭模型大鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白及mRNA表达、血清核因子-κB（NF-κB）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平的影响,探讨苓桂术甘汤防治慢性心衰的作用机制。方法 采用冠状动脉结扎法制备慢性心衰大鼠模型,造模4周后将模型大鼠随机分为模型组,卡托普利（4.375 mg/kg）阳性对照组,苓桂术甘汤低、中、高剂量（生药2.1、4.2、8.4 g/kg）组,另设假手术组,每天给药1次,连续给药4周。Western blotting、RT-PCR法分别检测各组大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA的表达,ELISA法检测血清中NF-κB、IL-1β水平。结果 与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA表达增强,血清NF-κB、IL-1β水平显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,苓桂术甘汤及卡托普利均能显著抑制模型大鼠心肌组织TNF-α蛋白及mRNA表达、降低模型大鼠血清NF-κB、IL-1β水平（P＜0.05、0.01）。结论 苓桂术甘汤干预慢性心衰的机制与其调节细胞因子网络有关。     

首发精神分裂症IL-1β,IL-6,TNF-α的血清蛋白水平及PBMC mRNA表达

目的:观察精神分裂症及其不同亚型中IL-1β,IL-6,TNF-α的动态变化情况,探讨免疫机制与精神病理的关系.方法:应用ELISA和RT-PCR方法,同时检测83例精神分裂症患者治疗前后和65例健康对照者IL-1 β,TNF-α,IL-6血清蛋白水平和PBMC mRNA表达.结果:①精神分裂症组治疗前、后与对照组血清IL-1β,IL-6,TNF-α水平相比均增高,差异有统计学意义(P＜0.05).精神分裂症组治疗后血清IL-1β水平与治疗前相比下降,差异有统计学意义(P＜0.05).②精神分裂症组治疗前阴性亚型患者TNF-α水平高于阳性亚型(P＜0.05),治疗后两型IL-1β水平和阴性亚型患者TNF-α水平较治疗前下降(P＜0.05);治疗前家族型患者IL-6水平高于散发型(P＜0.05),治疗后两型IL-1β水平和家族型患者TNF-α水平较治疗前下降(P＜0.05).③治疗前TNF-α水平与阴性症状评分呈正相关(r=0.412,P＜0.05);IL-1β治疗前后的差值与PANSS量表降分率呈正相关(r=0.388,P＜0.05).④精神分裂症组治疗前、后PBMC中IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达与对照组相比增高,差异有统计学意义(P＜0.05);精神分裂症组治疗后PBMC中IL-1β mRNA表达与治疗前相比明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:①精神分裂症患者存在免疫激活,IL-1β水平的变化可作为病情缓解的一个灵敏指标.②遗传背景可能影响了精神分裂症患者血清IL-6水平及其介导的免疫功能;TNF-α水平的变化可能与阴性症状的改善密切相关.③精神分裂症患者PBMC细胞因子mRNA表达上调,其可能是细胞因子的主要来源之一.     

PCNA、IL-6和IL-1β在肿瘤组织中的表达

目的:探讨接种肿瘤细胞株所导致的肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、白细胞 介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的表达情况及其与临床病理参数之间的关系。方法： 应用免疫组织化学的方法检测PCNA 、IL-1β和IL-6在结肠癌细胞、肝癌细胞接种后的小 鼠肿瘤组织中的表达，确定PCNA、IL-1β和IL-6在结肠癌和肝癌组织中的表达与肿瘤淋巴结 转 移之间的关系；探讨PCNA、IL-1β和IL-6与肿瘤重量和体积的相关性。结果：PCNA在小鼠 结肠癌和肝癌组织中有较高水平的表达，IL-1β、IL-6在肿瘤间质的血管中有明显表达，PC NA、IL-1β的表达与肿瘤的重量和淋巴结转移密切相关（P<0.05）。结论：IL-1β 、IL-6和PCNA在肿瘤组织中的表达具有一致性。     

血液透析滤过对慢性肾衰患者LPS、IL-1β、TNFα的影响

目的 :研究血液透析滤过 (HDF)对外周血细菌内毒素 (LPS)、白细胞介素 - 1β(IL - 1β)、肿瘤坏死因子(TNFα)的清除作用。方法 :14例慢性肾功能衰竭 (CRF)患者 ,随机选择 7例HDF和血液透析 (HD)交替 ,另 7例设为对照组 ,只予HD。酶联免疫法检测首次治疗前、后及治疗三个月后血LPS、IL - 1β、TNFα浓度。 结果 :(HDF HD)组首次治疗后血清LPS、IL - 1β较治疗前有所下降 ,治疗后与HD组比较LPS、IL - 1β水平下降 ,治疗前、后及组间比较均有显著差异。治疗三个月后 (HD HDF)组血清LPS、IL - 1β、TNFα浓度较HD组降低 ,P <0 .0 5。结论 :HDF可部分清除LPS、IL - 1β ,且可使CRF病人血清TNFα水平下降。     

染料木素磺酸钠对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究染料木素磺酸钠（GSS）对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：应用大鼠离体心肌缺血再灌注损伤模型,在灌流液中加入高、中、低剂量的染料木素磺酸钠。测定大鼠心率、左心室收缩压、心肌舒张/收缩速度及心肌组织乳酸脱氢酶（LDH）和心肌肌酸激酶（CK）活性的变化。结果：给药组与模型组相比,缺血再灌后染料木素磺酸钠组心率减慢、左心室收缩压升高、心肌舒张/收缩功能明显改善;心肌LDH及CK的活性更高（P〈0.01或P〈0.001）。结论：染料木素磺酸钠对离体心脏缺血再灌注损伤起保护作用。