金钗石斛多糖通过下调CYP2E1表达改善非酒精性脂肪肝病大鼠症状

目的 建立非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠模型,观察金钗石斛多糖对肝细胞色素P4502E1蛋白及mRNA表达的影响。方法 选用SPF级,雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、多烯磷脂酰胆碱组、金钗石斛多糖低、中和高剂量组6组,每组10只。高脂高糖饮食构建非酒精性脂肪肝病大鼠模型,给予相应治疗6周后,观察大鼠一般情况,提取肝脏检测肝脏病理学、肝组织CYP2E1蛋白和mRNA表达,收集血液检测天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活力。 结果 模型组出现一定的脂肪样变性,部分肝细胞有炎性因子浸润;与模型组相比,各治疗组均有改善。与正常组相比,模型组肝指数、AST、ALT、TG、TC、CYP2E1蛋白及mRNA明显升高,CAT和SOD明显降低（各P＜0.05）;与模型组相比,金钗石斛多糖三个剂量组和多烯磷脂酰胆碱组AST、ALT、TG、TC、CYP2E1蛋白及mRNA均明显降低（P＜0.05）,CAT和SOD明显升高（P＜0.05）,且金钗石斛多糖高剂量组TG和TC明显低于多烯磷脂酰胆碱组（P＜0.05）,金钗石斛多糖三个剂量组CYP2E1蛋白及mRNA明显低于多烯磷脂酰胆碱组（P＜0.05）。结论 金钗石斛多糖可明显降低NAFLD大鼠肝脏中CYP2E1蛋白及mRNA表达,进而改善肝功能和血脂水平,提高CAT和SOD活力,最终有效缓解NAFLD大鼠症状。     

急性白血病患者WT1基因的表达及其意义

目的探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）WT1（Wilms＇tumor）基因的表达及其在AL患者微小残留病（MRD）的临床意义。方法采用半定量逆转聚合酶反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者BMMNC WT1的表达水平，分析WT1表达与疗效关系，并与对照组检测结果进行比较。结果WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两者比较，无显著性差异（P〉0．05）；完全缓解组（CR）及对照组WT1的表达均阴性，对初治时WT1阳性患者进行半定量分析：有效组WT1表达水平低于复发难治组（P〈0．05）；高表达组CR率显著低于低表达组（P〈0.05），两组复发率比较，无显著性差异（P〉0.05）。结论初治AL患者治疗前高水平表达CR率低、CR时间短、易复发；AL患者CR时WT1转阴，复发时再次升高，动态检测WT1的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测MRD、防治复发提供实验依据。     

地黄多糖对过表达Notch1（NICD）大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化及增殖的影响

目的：探讨地黄多糖对过表达Notch1（NICD）大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导分化及增殖的影响。方法以P3～P5代大鼠B MS C s为研究对象,将细胞随机分为正常对照组、空载体组和转染组。脂质体法转染Notch1（NICD）过表达真核载体,转染后以地黄多糖（0．2 mg／mL）进行诱导分化,转染和诱导后行细胞一般状态观察,采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测Notch1（NICD）蛋白、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达,CCK-8检测细胞存活率。结果转染后转染组细胞似神经胶质样细胞形态改变,诱导后各组细胞似神经元样细胞形态结构,转染组显著。转染组Notch1和GFAP蛋白表达阳性率显著高于正常对照组和空载体组（P＜0．05）,而NSE在3组间差异无统计学意义（P＞0．05）;诱导后转染组NSE阳性率高于正常对照组和空载体组（P＜0．05）。转染后与诱导后比较,转染组Notch1表达阳性率降低（P＜0．05）,且正常对照组与空载体组亦降低（P＜0．05）;转染组NSE表达阳性率明显升高（P＜0．01）,且正常对照组与空载体组明显升高（P＜0．01）;转染组GFAP表达阳性率明显降低（P＜0．01）。CCK-8检测显示,地黄多糖诱导后,随时间延长各组细胞存活率略呈下降趋势。结论转染高表达Notch1（NICD）大鼠BMSCs具有向神经胶质样细胞分化倾向,地黄多糖显著抑制Notch1蛋白的表达,诱导BMSCs向神经元样细胞分化。     

转谷氨酰胺酶2对乳腺癌耐药性的影响

目的：探讨人乳腺癌耐药机制和转谷氨酰胺酶2（TG2）表达水平对化疗效果的影响。方法以TGM2慢病毒干扰载体（TGM2－RNAi －LV）构建转染细胞,设立3个组：RNAi 组,转染沉默 TGM2重组慢病毒颗粒;NC 组,转染阴性对照病毒颗粒;Con 组,仅在培养基中培养。 Western blot 检测 MCF －7／ADR 细胞 TG2、Bcl －2和 E －cadherin 蛋白表达。3组 MCF －7／ADR 细胞加阿霉素处理,相应细胞分组为 RNAi ＋Dox 组、NC ＋Dox 组和Dox 组。 TUNEL 法检测阿霉素诱导肿瘤细胞凋亡,MTT 法检测阿霉素对乳腺癌细胞作用的半数抑制浓度（IC50）。结果RNAi 组与 NC 组和 Con 组比较,TG2和 Bcl －2表达水平明显下降,E －cadherin 表达升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）。 RNAi ＋Dox 组细胞的凋亡率为（31．37±1．30）％,与 NC ＋Dox 组和 Dox 组等比较差异有统计学意义（P ＜0．05）。 RNAi ＋Dox 组的 IC50为（20．41±0．87）μmol／L,而 NC ＋Dox 组和 Dox 组的 IC50分别为（40．68±1．23）μmol／L 和（41．97±1．29）μmol／L,RNAi ＋Dox 组的 IC50明显低于 NC ＋Dox 组和 Dox 组（P ＜0．05）。结论RNA 干扰 TGM2表达,增强人乳腺癌细胞对阿霉素化疗的敏感性,下调 TG2表达水平可能是预防乳腺癌患者耐药的一种新的方法。     

汽化吸入全氟化碳对急性肺损伤小猪小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的通过对肺灌洗造成小猪肺损伤模型行全氟化碳（PFC）汽化吸入,了解其对肺损伤小猪小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响。方法将健康小猪18只随机分为3组,VMV组（PFC汽化吸入）,CMV组（常规机械通气）和假手术组。取各组小肠,TUNEL法检测细胞凋亡指数,免疫组织化学法及半定量RT-PCR法测定凋亡基因BAX,bcl-2。结果小肠的阳性细胞主要分布在小肠绒毛,CMV组细胞凋亡率为70．6％±3．4％,VMV组为22．9％±2．3％,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。VMV组小肠BAX蛋白表达低于CMV组（P〈0．05）,VMV组小肠bcl-2蛋白表达高于CMV组（P〈0．05）。BAX mRNA、bcl-2 mRNA结果与其蛋白表达结果一致（P〈0．05）。假手术组细胞凋亡数极少,BAX、bcl-2表达均很低。结论汽化吸入PFC可减少急性肺损伤小猪小肠黏膜上皮细胞凋亡,其作用机制可能与抑制BAX基因的蛋白表达及升高bcl-2基因表达有关。     

RT-PCR检测WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义(摘要)

目的：研究WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义．方法：运用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）的方法，检测WT1基因在50例白血病患者及8例正常人、3例血液系统非恶性肿瘤患者中的表达．分析WT1基因在白血病患者中的表达规律及其与白血病转归、预后等的关系．结果：RT～PCR检测WT1基因的灵敏性为10^-4．急性非淋巴细胞白血病（ANLL）22例，17例WT1表达阳性（77．3％）；急性淋巴细胞性白血病（ALL）11例，6例WT1表达阳性（54．5％）；急性混合细胞性白血病（AMLL）1例WT1表达阳性；提示FAB分型中各型急性白血病均可呈阳性表达．慢性粒细胞白血病（CML）15例，其中慢性期8例WT1表达均为阴性。     

PRAME与WT1基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）PRAME（preferentially expressed antigen of melanoma）与WT1（Wilms’tumor）基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者PRAMEmRNA和WT1 mRNA的表达水平，并将两者检测结果进行比较。结果PRAME阳性表达率：ANLL为41．9％，ALL为38．5％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；而完全缓解组（complete remission，CR）及对照组PRAME和WT1的表达均阴性；有效组PRAME和WT1的表达水平显著低于无效组（P〈0．01）；对1例PRAME阳性和10例PRAME、WT1均阳性的患者进行随访，7例经化疗后PRAME表达水平不降，4例复发患者PRAME再次升高均早于临床复发，其中2例WT1的波动与PRAME同步，2例临床复发时才升高。结论与WT1基因一样，PRAME基因是急性白血病的一个重要标记基因，动态检测PRAME的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测微小残留病灶、防治复发有一定的意义。     

金钗石斛多糖对2型糖尿病大鼠心肌组织中RIP蛋白表达影响

目的 :探讨分析金钗石斛多糖对2型糖尿病大鼠心功能、炎症因子以及心脏组织中RIP3的表达特点,以为金叉石斛多糖的开发和2型糖尿病心肌损伤的治疗提供参考。方法 :60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、金钗石斛多糖低、中和高剂量干预组以及阳性药物贝那普利治疗组,每组10只,除正常组外,其余5组给予高脂高糖饮食6个月构建2型糖尿病大鼠模型,模型建立成功后,正常组和模型组给予1 m L·kg~(-1)·d~(-1)生理盐水灌胃,金钗石斛多糖3个干预组分别给予金钗石斛多糖100、200、400 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗,贝那普利治疗组则给予贝那普利1 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃治疗,治疗8周后处死大鼠,HE染色检测肝脏病理学,试剂盒检测心功能和炎性因子,实时定量RT-PCR和Western blot检测RIP3 m RNA和蛋白的表达水平。结果 :正常组大鼠毛色光滑,活泼好动,模型组毛色发黄,同时精神萎靡,金钗石斛多糖3个干预组以及贝那普利治疗组相较于模型组有一定好转;HE染色可见正常组心肌细胞排列整齐,而模型组心肌细胞明显肥大,同时肌纤维排列紊乱和断裂;金钗石斛多糖干预后,其心肌细胞排列明显好转,特别是高剂量组更为明显;与正常组相比,模型组血糖、CK、CK-MB、LDH、IL-1α、IL-1β、IL-6和TNF-α和胰岛素抵抗指数明显升高(P0.05),胰岛素含量明显降低(P0.05),金钗石斛多糖3个干预组和贝那普利治疗组相较于模型组血糖、CK、CK-MB、LDH、IL-1α、IL-1β、IL-6和TNF-α和胰岛素抵抗指数均明显降低(P0.05),胰岛素含量则明显升高(P0.05),而贝那普利治疗组变化趋势基本介于金钗石斛多糖低剂量组和中剂量组之间;与正常组相比,模型组RIP3表达明显升高(P0.05),而金钗石斛多糖和贝那普利均可以降低其RIP3表达(P0.05)。结论 :金钗石斛多糖可改善2型糖尿病心肌损伤大鼠心功能和炎症反应,此外对心肌细胞凋亡也有一定的改善作用;这可能与金钗石斛多糖可调节糖尿病大鼠心肌组织中RIP3表达有关。     

急性白血病患者骨髓细胞RUNX3、TIMP3蛋白检测的意义

目的探讨骨髓细胞RUNX3、TIMP3蛋白检测在急性白血病（AcuteLeukemia,AL）患者预后评价的意义。方法采用甲基化特异性PCR法检测50例AL患者骨髓单个核细胞及20例健康供血者外周血单个核细胞中’FIMP3、RUNX3甲基化状态,随后采用Westernblotting检测TIMP3、RUNX3表达情况,并分析TIMP3、RUNX3表达与AL预后的关系。结果50例AL患者RUNX3甲基化阳性率为38％;甲基化组RUNX3蛋白表达量低于未甲基化组及健康对照组（P〈0．05）;AL患者与健康对照组TIMP3甲基化均为阴性;甲基化组完全缓解率低于未甲基化组（P〈0．05）．．结论RUNX3启动子区域甲基化可降低该蛋白的表达率,其与AL发病及不良预后密切相关,町作为A1．辅助诊断及预后判断的可靠指标;TI]VIP3表达与AL发病无相关性。     

白血病患者WT1基因的表达及临床意义

目的：检测白血病患者WT1基因的表达水平，并探讨其与临床的关系。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，检测58例初治急性白血病（AL）、20例慢性粒细胞白血病（CM）和10例非血液病患者WT1基因的表达。结果：10例非血液病患者WT1基因的表达均呈阴性。58例AL患者44例检测有WT1基因的表达，阳性率为75．9％，其中急性髓性白血病（AML）阳性率为86．4％，急性淋巴细胞白血病（ALL）为42．9％，两者差异有显著性（P＜0．01）；AML治疗前WT1的表达水平与完全缓解（CR）率无相关（P＞0．05），但倾向于WT1基因低表达者有更高的CT率（低表达组CR率为75．0％，高表达组率为34．8％）。CML慢性期WT1的表达水平极低，随临床分期进展水平增高，高表达者预示急变。结论：AL和CML急变期患者WT1基因过度表达，初治AML治疗前WT1的表达水平与疗效无相关，但低表达组CR为75％，高表达组CR为34．8％。     

醇沉金蝉花粗多糖对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及可能机制

目的:研究醇沉金蝉花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响及可能机制.方法:采用水提醇沉法提取金蝉花多糖,Sevage法脱蛋白处理,获得50％和80％的醇沉金蝉花多糖(CP50、CP80).将人宫颈癌Hela细胞分为对照组(DMEM培养基)、CP50和CP80处理组(浓度为25、50、100、200、400、800、16...     

抑癌基因Mxi1在白血病细胞中表达的研究

目的分析抑癌基因Mxil在白血病发病中的作用。方法利用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测初治急性白血病(AL)患者26例骨髓单个核细胞,经治疗达完全缓解的AL(AL-CR)患者23例、健康对照者30名外周血单个核细胞和2种髓系白血病细胞株(KG1、K562)Mxil基因表达情况。结果所有标本中均可检测到Mxi1基因的表达,Mxi1 mRNA在初治AL患者的表达水平平均为0.531±0.205,在K562和KG1细胞株中的表达水平平均为0.613±0.223和0.628±0.239,均明显低于健康对照组的0.923±0.187,差异有统计学意义(P<0.05);而AL-CR患者的表达水平为0.812±0.243,明显高于初治AL患者(P<0.05),接近健康对照组(P>0.05)。结论白血病患者细胞中Mxi1基因表达水平下降,提示其可能与白血病的发病有关。     

髓样细胞触发受体2在酪氨酸激酶结合蛋白基因敲除小鼠不同脑区的表达

目的比较髓样细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cell 2,TREM2)在不同月龄酪氨酸激酶结合蛋白(tyrosine kinase binding protein,TYROBP)基因敲除小鼠和野生型小鼠不同脑区的表达差异,探讨TREM2、TYROBP与早发型阿尔茨海默病(early onset Alzheimer's disease,EOAD)的关系。方法健康TYROBP基因敲除的小鼠根据基因测序结果分成3组:纯合型(TYROBP-/-)组、杂合型(TYROBP-/+)组和野生型(wild type,WT)组,3组小鼠分别在2、4、6月龄各选10只,运用Western blot和RT-qPCR技术检测TREM2在前额叶、海马中的表达情况。结果(1)在前额叶中:Western blot和RT-qPCR共同显示,与各月龄WT组[2月龄:(0.993±0.048),(1.654±0.033);4月龄:(0.503±0.019),(2.169±0.023);6月龄:(0.600±0.036),(1.468±0.057)]相比,TREM2蛋白和mRNA在2月龄TYROBP-/+组[(0.746±0.062),(1.137±0.067)]和TYROBP-/-组[(0.661±0.028),(0.644±0.012)]的表达均降低,而在4月龄和6月龄TYROBP-/+组[4月龄:(1.140±0.006),(5.483±0.088);6月龄:(0.827±0.043),(3.020±0.082)]和TYROBP-/-组[4月龄:(1.071±0.010),(3.012±0.150);6月龄:(0.627±0.026),(1.633±0.027)]的表达均升高,差异具有统计学意义(F=12.946,134.445;725.318,289.202;12.172,202.791;均P<0.05),且4月龄小鼠升高更明显。(2)在海马中:Western blot显示,与各月龄WT组[2月龄:(1.268±0.036);4月龄:(0.813±0.010);6月龄:(0.312±0.021)]相比,TREM2蛋白在2月龄TYROBP-/+组[(0.804±0.034)]和TYROBP-/-组[(0.534±0.020)]的表达降低,而在4月龄和6月龄TYROBP-/+组[(0.932±0.011);(0.769±0.031)]和TYROBP-/-组[(0.910±0.014);(0.609±0.018)]的表达均升高,差异具有统计学意义(F=142.807,27.884,94.067;均P<0.05),且4月龄小鼠升高更明显。结论TREM2在2月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达降低,在4月龄和6月龄TYROBP基因敲除小鼠脑组织中表达升高,推测TREM2/TYROBP信号通路参与EOAD的病理过程并且在EOAD的不同病理阶段发挥着不同的作用。     

冬凌草甲素抗T细胞急性淋巴细胞白血病效应的实验研究

目的 探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病效应及其机制。方法 以T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株CEM为研究对象,应用改良MTT法测定不同浓度及不同时间冬凌草甲素对CEM细胞增殖和生存率的影响,计算72 h的半数抑制浓度（IC50）;显微镜下观察5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素处理24 h后CEM细胞的形态学变化;流式细胞术检测0.5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后CEM细胞的凋亡百分率;应用Western blot法检测7.5 μmol/L冬凌草甲素作用后细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白水平,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 ①冬凌草甲素呈浓度及时间依赖性抑制CEM细胞增殖,作用72 h的IC50值为（7.37±1.99）μmol/L ;② 5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后CEM细胞边界不清晰,部分细胞崩解,且浓度越高,细胞形态改变越明显;③ 0、5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后,细胞凋亡百分率分别为（4.8±2.11）%、（19.03±2.54）%、（40.27±3.31）%;（57.23±6.69）%;④冬凌草甲素明显抑制CEM细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白的活化;下调CEM细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论 冬凌草甲素可能通过抑制mTOR/P70(4EBP1)、RAF/ERK、STAT5信号蛋白的活化,以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗白血病作用。     

HDAC1基因小干扰RNA对人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞放射敏感性影响

目的探讨小干扰RNA(siRNA)抑制组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)表达对人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞放射治疗敏感性的作用及可能机制。方法体外合成针对HDAC1基因的siRNA,脂质体法转染人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞,应用蛋白印迹法检测细胞HDAC1蛋白和乙酰化组蛋白H4的表达,应用实时定量聚合酶链反应方法检测HDAC1基因、核因子-κB(NF-κB)基因和p53蛋白调控的凋亡调控因子(PUMA)基因mRNA表达。应用6 MV直线加速器,以0、2、4、6、8 Gy不同剂量X线照射细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及克隆形成实验检测细胞放射敏感性。结果人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞经转染HDAC1基因siRNA后,正常对照组、阴性对照组和siRNA干扰组HDAC1基因mRNA表达分别为10.21±0.42、9.48±0.41和4.92±0.41;蛋白表达分别为0.81±0.14、0.79±0.16和0.42±0.18,与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞HDAC1基因mRNA和蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组、阴性对照组和siRNA干扰组乙酰化组蛋白H4表达分别为0.76±0.21、0.75±0.20和0.30±0.19,与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组乙酰化组蛋白H4表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组、阴性对照组和siRNA干扰组细胞NF-κB基因mRNA表达分别为6.24±0.52、6.31±0.61和4.22±0.56,PUMA基因mRNA表达分别为3.84±0.26、3.69±0.29和5.42±0.31,与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞NF-κB基因mRNA降低,PUMA基因mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。经X线照射后,正常对照组、阴性对照组和siRNA干扰组凋亡率分别为(16.25±2.64)%、(15.41±2.97)%和(29.62±3.11)%,存活分数(SF2)值分别为0.576±0.149、0.564±0.142和0.226±0.151,与正常对照组和阴性对照组比较,siRNA干扰组细胞凋亡率增加,SF2值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HDAC1基因siRNA能够增强人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞对放射线损伤的敏感性。抑制人宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞HDAC1基因表达,增加乙酰化组蛋白H4表达,下调NF-κB基因表达和上调PUMA基因表达可能是其作用机制。     

没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌细胞凋亡

目的 探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人肝癌细胞株凋亡的作用和机制.方法 以不同浓度EGCG处理人肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721细胞24 h和48 h.四甲基偶氮唑蓝比色法和锥虫蓝染色细胞计数评价细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡和环氧合酶-2(COX-2)、Bcl-2蛋白;比色法测定天冬氨酸蛋白酶-9和caspase-3活性;RT-PCR检测COX-2和Bcl-2家族mRNA的表达.结果 EGCG(50、100、200、400μg/ml)处理48 h后,HepG2细胞活性下降至93.8%±2.8%,62.3%±5.4%,33.9%±2.5%和17.6%±3.2%,与对照组(100.0%±2.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞活性下降至49.6%±3.5%,30.3%±3.8%,17.7%±2.2%和13.0%±2.5%,与对照组(100.0%±0.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);100 μg/ml EGCG处理细胞24、48、72和96 h后,HepG2活细胞计数(×104)分别是8.0±1.5,22.0±3.1,37.0±5.4和61.0±8.7,与对照组(15.0±2.5,45.0±5.3,86.0±11.0和210.0±23.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721活细胞计数(×104)分别是7.0±2.2,13.0±2.5,20.0±3.7和31.0±4.0,与对照组(14.0±2.2,40.0±4.3,75.0±8.8和182.0±28.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05).EGGG(50、100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞凋亡率分别是8.7%±0.4%,18.1%±1.1%和22.1%±1.8%;SMMC-7721细胞凋亡率分别是5.9%±0.3%,7.8%±0.6%和12.2%±0.8%,与对照组(3.3%±0.3%)和(3.7%±0.4%)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);EGCG(100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞caspase-9活性为1.8±0.4和2.5±0.4;caspase-3活性为2.0±0.4和2.8±0.5,两者与对照组(1.0±0.1和1.0±0.2)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞caspase-9活性为1.7±0.4和2.5±0.4,caspase-3活性为1.9±0.4和2.6±0.3,均显著高于对照组(1.0±0.1和1.0±0.2,P＜0.05).EGCG(200μg/ml)下调COX-2和Bcl-2的表达,而对Bcl-2家族其他成员表达无明显影响.结论 EGCG可能通过下调COX-2和Bcl-2的表达,激活caspase-9和caspase-3诱导肝癌细胞凋亡.     

石斛治疗实验性大鼠萎缩性胃炎的医学研究

目的探讨石斛治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)的疗效及其机制。方法用氨水、乙醇和去氧胆酸钠灌胃法,制成大鼠CAG模型。造模后治疗组以石斛治疗5周,观察血胃泌素(GAS)、生长抑素(SS)和胃黏膜前列腺素E2(PGE2)的变化情况,并与模型组和对照组比较。结果石斛治疗组治疗前SS、GAS和PGE2分别为7.95±2.14 ng/L,216.13±77.21 ng/L,1435.10±200.53 pg/mp,均较对照组低(P<0.01),治疗后分别为9.58±1.01 ng/L,328.53±84.74 ng/L,1715.66±125.49 pg/mp;治疗后除SS外,各观察指标水平均较治疗前高(P<0.01),与对照组比较差异不大(P>0.05)。结论石斛可使GAS和PGE2增多,对CAG有良好的治疗作用。     

左卡尼汀对多西他赛在NCI-H520细胞中抗肿瘤作用影响的研究

目的:探究左卡尼汀对多西他赛抑制肺癌细胞NCI-H520增殖的影响,并初步探索其机制。方法:实验将NCI-H520细胞分为阴性对照组,左卡尼汀组,多西他赛组以及联合用药组。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,蛋白质免疫印迹法检测目标蛋白P21,P53,BAX和BCL-2的表达情况。结果:与不同单药组（左卡尼汀组和多西他赛组）相比,联合用药组对细胞增殖的抑制作用均增强,细胞增殖率分别由（95.5±3.97）%和（65.73±2.22）%下降到（54.4±1.67）%,P＜0.01,镜下细胞密度下降。联合用药使G1/G0期细胞分别由（67.21±6.0）%和（11.52±0.89）%下降到（3.98±0.42）%,P＜0.05。G2/M期细胞分别由（11.84±5.05）%和（54.91±2.38）%上升到（64.56±0.9）%,P＜0.05。周期相关蛋白P21,P53的表达量增加,且差异均具有统计学意义。所有实验组之间的细胞凋亡率和凋亡相关蛋白BAX,BCL-2的表达量没有明显差异。结论:24 h时,联合用药组中,左卡尼汀可能通过上调P21,P53的蛋白表达来增强细胞的G2/M期阻滞,进而增强多西他赛对NCI-H520细胞增殖的抑制作用。     

整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的 研究正常晚期妊娠以及子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘组织中αvβ3基因和蛋白表达的差异,探讨αvβ3与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化及Western blot方法检测25例PE患者(其中轻度PE组10例,重度PE组15例)和20例正常足月孕妇(对照组)胎盘组织中αvβ3蛋白表达水平.采用RT-P...     

二烯丙基二硫对人胃癌细胞RORα蛋白表达的影响

目的研究二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(R ORα)蛋白表达变化情况。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα蛋白水平的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果DADS处理24 h后,细胞形态学发生明显改变;R ORα蛋白在人胃癌MKN28、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组相比表达明显上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,RORα蛋白表达在MGC803、MKN28细胞中的(0.97±0.01)、(0.91±0.01)较对照组的(0.44±0.02)、(0.72±0.01)显著上调(P<0.01或P<0.05);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、MKN28细胞8、12和24 h后,RORα蛋白表达分别为(0.71±0.03)和(0.79±0.01)、(0.87±0.01)和(0.88±0.02)以及(1.31±0.01)和(0.96±0.02)较未处理组的(0.32±0.01)和(0.68±0.02)明显上调,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调R ORα蛋白表达有关。