P120 ctn/E-cad 在口腔鳞癌细胞迁移和侵袭中的功能

目的：分析P120-连环蛋白（P120-catenin,P120ctn）和E-钙粘蛋白（E-cadherin,E-cad）在口腔鳞癌（oral squamous-cell cancer,OSCC）细胞迁移和侵袭中的功能。方法：采用实时荧光定量PCR、Western blot检测HN4（人舌癌原发灶细胞）和HN12（人舌癌转移淋巴结细胞）中P120ctn、E-cad的mRNA和蛋白表达,通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移试验等方法检测HOK（人口腔黏膜角化上皮细胞）、HN4和HN12细胞的迁移和侵袭能力。结果：HN4细胞中P120ctn和E-cad的mRNA和蛋白表达水平明显高于HN12,低于HOK细胞,差异均有统计学意义（P＜0．05）。HN4细胞的侵袭和转移能力显著高于HOK细胞,低于HN12细胞,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：在OSCC细胞中P120 ctn与E-cad的表达下调,可能抑制了OSCC细胞的侵袭和转移。     

P120ctn基因沉默及过表达对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:利用舌癌原发灶和转移淋巴结细胞系HN4和HN12,通过沉默和过表达P120连环蛋白(P120-catenin,P120^ctn)基因,观察P120ctn的表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin, E-cad)表达和口腔鳞癌迁移和侵袭能力的影响。方法:采用质粒pGFP-V-RS-P120ctn shRNA转染P120ctn高表达的HN4细胞,使HN4中P120ctn的表达显著降低,采用质粒pCMV6-AC-GFP- P120^ctn转染HN12,使HN12过表达P120^ctn,进行P120^ctn和E-cad mRNA和蛋白水平的检测,并通过Transwell细胞迁移及侵袭试验检测转染前后肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:用质粒转染HN4细胞后发现,随着P120ctn表达的显著降低,E-cad的mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞迁移和侵袭能力显著提高。反之,HN12细胞被转染后发现,过表达P120^ctn的HN12细胞E-cad的蛋白表达水平也显著提高,细胞迁移和侵袭能力显著降低(P＜0.05)。 结论:在OSCC细胞系中P120ctn的表达与E-cad相关,可能参与了细胞粘附的调控,进而在口腔鳞癌细胞的迁移和侵袭过程中发挥作用。     

P120-连环蛋白介导钙黏蛋白转换促进口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的实验研究

目的 探索P120-连环蛋白（P120^ctn）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞钙黏蛋白转换中的作用及其对肿瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法 采用质粒pGFP-V-RS-P120^ctn shRNA转染OSCC细胞株TSCCA,采用实时荧光定量聚合酶链反应、Western blot检测细胞中P120^ctn、E-钙黏蛋白（E-cad）和N-钙黏蛋白（N-cad）的mRNA和蛋白表达的变化,通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移实验检测转染前后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 质粒pGFP-V-RS-P120^ctn shRNA转染TSCCA细胞后,P120^ctn表达明显降低,E-cad的mRNA和蛋白表达水平也明显降低,而N-cad的mRNA和蛋白表达水平明显提高,细胞迁移和侵袭能力也明显提高,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 在OSCC中P120^ctn可能通过介导钙黏蛋白转换来调节肿瘤的浸润和转移过程。     

血管细胞黏附分子-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的研究血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达与定位及其临床意义。方法应用分子原位杂交和免疫组化方法对48例OSCC组织和10例正常口腔黏膜组织中VCAM-1 mRNA和VCAM-1蛋白质的表达和定位进行检测,比较VCAM-1在不同口腔组织中的表达率及其与临床指标的关系。结果VCAM-1蛋白定位于肿瘤细胞胞浆和胞膜,VCAM-1 mRNA定位于肿瘤细胞胞浆。VCAM-1 mRNA和VCAM-1蛋白在OSCC中的表达率均显著高于正常口腔黏膜组织（P＜0.01）,VCAM-1 mRNA表达与VCAM-1蛋白表达呈正相关（P＜0.01）;OSCC中淋巴结转移者VCAM-1蛋白的表达显著高于无淋巴结转移者（P＜0.01）。结论OSCC中VCAM-1基因的高表达可能与肿瘤的浸润和转移有关。     

口腔鳞癌中E-钙粘蛋白和基质金属蛋白酶-1的表达与患者预后的关系

［摘要］ 目的 探讨E-钙粘蛋白（E-cadherin）和基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinases-1,MMP-1）在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关性。方法 采用免疫组化法检测141例人口腔鳞状细胞癌组织中E-cadherin和MMP-1的表达情况。结果 与正常口腔黏膜组织相比,口腔鳞状细胞癌中E-cadherin的表达呈下降趋势,而MMP-1表达呈上升趋势（E-cadherin：543.34±103.52,260.44±67.93;MMP-1：145.64±31.53,789.96±103.42;分别是正常组织和肿瘤组织;P< 0.05）。E-cadherin和MMP-1在口腔癌中的表达与淋巴结转移有关,而与肿瘤大小和复发无关。E-cadherin和MMP-1在肿瘤组织中的表达呈负相关（r=-0.379）。结论 E-adherin表达的降低及MMP-1表达的增加与人口腔鳞状细胞癌不利的临床预后和存活率的降低密切相关。     

抑制蛋白激酶C对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:利用舌癌细胞系HN4,探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、P120-连环蛋白(P120-catenin,P120ctn)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在口腔鳞癌中的相互关系及其在肿瘤细胞侵袭和转移中的作用机制.方法:采用质粒pGFP-V-RS-P120ctn shRNA转染HN4,使HN4中P120ctn的表达显著降低,再使用星孢菌素(staurosporine,STS)抑制PKC的表达,进行PKC、P120ctn和E-cad mRNA和蛋白水平的检测;通过Transwell细胞侵袭及细胞迁移试验等方法,检测PKC被抑制前、后肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化.采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析.结果:当PKC被STS抑制时,HN4/shP120ctn细胞中P120ctn的表达显著升高,E-cad的表达也随之升高,肿瘤细胞的迁移和侵袭能力显著降低(P均＜0.05).结论:PKC可能参与了P120ctn和E-cad表达的调节,与细胞黏附的调控有关,进而在HN4细胞的迁移和侵袭过程中发挥作用.     

survivin在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与 bcl-2,P53,bax表达之间的关系

目的初步探讨口腔鳞状细胞癌中凋亡抑制蛋白survivin的表达和临床意义,以及survivin的表达与bcl-2,P53,bax表达之间的关系。方法采用免疫组化二步法,DAB染色。27例口腔鳞癌和1例乳腺癌阳性对照病例手术前均未进行放疗、化疗或生物治疗。结果27例口腔鳞癌组织中survivin阳性表达率为88.89%(24/27),11例正常组织中survivin没有表达。在口腔鳞癌不同的临床病理分级survivin的表达有差异(P<0.05),其表达随着临床病理分级的增加而增加。Survivin在有淋巴结转移者阳性表达率(100%)高于无淋巴结转移者(82.35%),但统计学比较无差异(P>0.05)。口腔鳞癌中survivin的表达在不同的年龄组和性别间无差异(P>0.05),而在不同部位的鳞癌中表达有差异(P<0.05)。口腔鳞癌中survivin的表达和bcl-2,突变型P53的表达成正相关,(P<0.05),而与bax的表达成负相关,(P<0.05)。结论①Survivin可作为口腔鳞癌诊断的一项重要指标;②Survivin可作为口腔鳞癌基因治疗和免疫治疗的靶分子;③在口腔鳞癌基因治疗方面可以考虑协同抑制突变型P53和bcl-2的表达,或者提高bax的表达来提高疗效。     

Wnt1在口腔鳞癌中的表达及其与淋巴结转移关系的研究

目的 :研究Wnt信号传导通路中Wnt1蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平,初步探讨Wnt1在OSCC淋巴结转移中的作用。方法:采用免疫组织化学方法,检测60例OSCC中Wnt1的表达情况;采用Western blot法检测5对OSCC临床标本和配对癌周组织中Wnt1的表达;通过实时定量PCR法和Western blot法分别检测高、低转移潜能的HN-12和HN-4口腔鳞癌细胞系中Wnt1基因和蛋白的表达水平;采用生长曲线、划痕实验和Transwell法,分别检测重组蛋白Wnt1对2种细胞的生长情况、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:24例淋巴结转移的OSCC中高表达Wnt1,16例未有淋巴结转移的OSCC中低表达Wnt1,Wnt1的表达在两组之间差异有统计学意义(P<0.01);高转移细胞系HN-12较低转移细胞系HN-4在m RNA水平和蛋白水平上Wnt1表达显著增高;重组蛋白Wnt1,能够提高肿瘤细胞的生长、迁移和侵袭能力。结论:Wnt信号通路中的关键分子Wnt1在OSCC中有表达,且与淋巴结转移相关,为进一步探讨Wnt信号通路影响肿瘤转移的分子机制奠定基础。     

P27蛋白表达异常与口腔鳞状细胞癌的相关研究

目前的研究表明,p27基因表现为抑癌基因的特点,P27蛋白的降解增加导致其表达下调,由此引起的细胞周期调控异常与口腔肿瘤发生有关.P27蛋白作为肿瘤的辅助诊断指标,抑制或减少其降解将有可能成为新的肿瘤基因治疗靶点.本文对口腔鳞状细胞癌中P27蛋白的降解及如何抑制其降解的临床应用前景进行综述.     

信号转导蛋白P65与放疗诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系

目的 探讨不同剂量的X射线对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中信号转导蛋白P65表达的影响以及P65与放疗诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系.方法 人舌鳞癌Tca8113细胞复苏后,在37℃,5%CO2的孵箱中培养.共分对照组、2、4、6、8、10 Gy剂量组,待细胞长至对数生长期后,对细胞分别应用上述照射剂量一次性照射....     

P16在口腔白斑和鳞癌组织中的表达及其意义

目的探讨P16在口腔白斑癌变过程中的变化及其意义。方法免疫组化polymer法检测P16蛋白在口腔白斑和鳞癌组织中的表达情况。结果 P16蛋白在10例正常口腔黏膜组织、16例单纯增生性白斑、10例异常增生性白斑及30例口腔鳞癌组织中表达逐步下降,在正常口腔黏膜组织和单纯增生性白斑中表达强于异常增生性白斑组织和鳞癌组织（P〈0.05）,在异常增生性白斑中表达亦强于鳞癌组织（P〈0.05）。结论 P16蛋白表达下降可以作为口腔白斑癌变的指征之一。     

端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌中的表达研究

目的　了解端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌中的表达情况并探讨端粒酶活性在口腔鳞状细胞癌演变过程中的作用。方法　对 37例口腔鳞状细胞癌、2 0例癌前病变 (白斑 )、15例口腔良性肿瘤 (乳头状瘤 )及 12例正常口腔组织 ,采用聚合酶链反应 -酶联免疫吸附法检测其端粒酶活性。结果　口腔鳞状细胞癌中的端粒酶活性阳性率明显高于良性肿瘤组织和正常组织。口腔癌前病变组与鳞状细胞癌组基本一致。结论　端粒酶可稳定染色体末端的端粒结构,端粒酶活化在口腔肿瘤恶变过程中起重要作用;端粒酶可作为判断癌变能力的良好分子生物学标志。     

P53和Mdm2蛋白在人口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达

目的：探讨正常口腔黏膜组织（NOM）、口腔扁平苔藓（OLP）、口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中,抑癌基因P53和癌基因Mdm2的表达情况及关系。方法：采用免疫组化SP法检测12例正常口腔黏膜组织、40例OLP组织、33例OSCC组织中P53、Mdm2基因的表达情况,并分析其相关性。结果：P53蛋白在NOM、OLP及OSCC组织中的阳性表达率呈明显的逐渐升高趋势。Mdm2蛋白在NOM中不表达,在OLP中呈现弱阳性表达,在OSCC不同病理分级中阳性表达率依次增高。各组表达均有统计学意义（P〈0.05）。另外P53蛋白、Mdm2蛋白在OS-CC组织中的表达关系无明显的相关性。结论：P53、Mdm2蛋白的表达与OLP及OSCC的发生、发展密切相关。     

口腔鳞状细胞癌发生发展过程中P21wafl表达的研究

目的 :了解P21wafl表达与口腔鳞状细胞癌发生发展的关系。方法 :利用免疫组化技术 ,进行石蜡切片回顾性研究。结果 :P21wafl蛋白在口腔上皮单纯增生的表达率为75% (12/16) ,显著高于口腔不典型增生 (26.09% ,6/23) (p<0.05)和鳞状细胞癌(28.26%,13/46) (p<0.05) ;P21wafl阳性标本的阳性细胞计数与组织恶性程度成正相关。结论 :P21wafl表达的下调是口腔鳞癌发生发展过程中较早期事件 ,P21wafl表达率结合P21wafl阳性细胞计数在口腔粘膜癌前病变监视方面是一项有用的指标。     

口腔鳞状细胞癌中分化抑制因子-1的表达及其与微血管生成的关系

目的：探讨口腔鳞状细胞癌（Oral squamous cell carcinoma,OSCC）中分化抑制因子-1（inhibitor of differentiation-1,Id-1）的表达及其与临床病理学特征和肿瘤微血管生成的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测65例OSCC中Id-1,CD34表达,并计数微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：Id-1定位于肿瘤细胞胞质,65例OSCC中有49例Id-1呈（75.38﹪）阳性表达,其与OSCC分化程度,淋巴结转移和TNM分期密切相关（P〈0.01）,而与患者性别及肿瘤发生部位无关;Id-1的表达与MVD值显著相关（P〈0.01）。结论：Id-1的高表达可能在OSCC分化和淋巴结转移过程中起重要作用,并与肿瘤微血管生成有关。     

E-cadherin和Vimentin在OSCC上皮-间质转化中的作用及表达

目的:探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)上皮-间质转化中的作用及表达。方法:选取76例口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者和40例健康者作为对照组,利用RT-PCR检测OSCC和正常口腔黏膜组织中TGF-β1、E-cadherin和Vimentin表达。结果:OSCC患者组织中TGF-β1 mRNA和Vimentin mRNA相对表达量均高于对照组,而E-cadherin mRNA相对表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β1、E-cadherin和Vimentin在OSCC组织中表达均与分化程度有关,分化程度越高,TGF-β1 mRNA和Vimentin mRNA相对表达量越高,而E-cadherin mRNA相对表达量则越低;Pearson相关分析显示,OSCC中TGF-β1 mRNA相对表达量与E-cadherin mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.322,P=0.004),而与Vimentin mRNA相对表达量呈正相关(r=0.661,P=0.000)。结论:TGF-β1和Vimentin 在OSCC组织中表达增强,而E-cadherin则表达降低,提示EMT过程在OSCC发生及进展过程中发挥重要作用。     

粘着斑激酶和纤维连接蛋白在口腔颌面部鳞癌中的表达

目的:检测口腔颌面部鳞癌中的粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达,探讨FAK和FN在口腔颌面部鳞癌中表达的相关性。方法:口腔颌面部鳞癌石蜡标本90例,用FAK单克隆抗体、FN多克隆抗体作Envision免疫细胞组织化学二步法,完成病理切片,做半定量病理分析。结果:FAK、间质FN的表达强度在口腔颌面部鳞癌中高于癌旁组织,在低分化组高于高分化组,而细胞FN和基底膜FN的表达与FAK、间质FN相反;FAK与间质FN的表达成正相关,而与细胞FN、基底膜FN成负相关性。结论:在不同分化程度的口腔颌面部鳞癌中,FAK在肿瘤细胞粘附过程中整合素与FN的结合中起着重要的中介和催化作用;FAK、间质FN、细胞FN、基底膜FN的表达变化可以作为口腔颌面部鳞癌较有价值的病理诊断指标。