Rho蛋白与细胞骨架调节的细胞运动

细胞迁移是肿瘤细胞浸润和转移的关键环节,细胞骨架的重组过程是细胞发生移动的基础,受多种信号分子的调节.肿瘤细胞可以表现出多种类型的运动方式,而每种细胞运动方式可由不同的分子机制调节,其中细胞骨架蛋白actin的重组在肿瘤细胞的运动中至关重要.Rho蛋白家族的小GTP酶蛋白在肿瘤细胞中被活化,可以通过调节细胞骨架actin的重组,引起细胞侵袭、转移.其活化方式包括:Rho蛋白及其调节子的活化突变、灭活突变和Rho家族蛋白和作用分子表达水平的改变等,通过自身活化将细胞外的趋化信号传递给细胞内的下游效应分子.导致细胞骨架依赖性的反应,影响细胞的移动功能.因而,对Rho家族的小GTP酶蛋白信号进行有效的抑制可以有效的抑制肿瘤细胞的侵袭和转移过程,是肿瘤治疗的新方法.     

癌基因产物与细胞骨架

癌变原理的研究一直是生物医学界令人瞩目的课题。癌基因的发现使研究癌变原理的工作进入了一个新的阶段。随着癌基因研究工作的日益深化,人们对癌基因产物在细胞癌变过程中扮演的“角色”怀有愈加浓厚的兴趣。对于不同的癌基因产物行为的观察,使癌基因与细胞生物学另一个重要课题——细胞骨架联系了起来。事实上,细胞骨架的某些成份就是癌基因产物的最初靶蛋白之一(1)。本文就有关文献对癌基因产物与细胞骨架的作用作一综合介绍。     

细胞骨架在肿瘤侵袭转移中的研究进展*

肿瘤转移是肿瘤导致死亡最主要的原因之一,细胞骨架与肿瘤的侵袭转移密切相关,但细胞骨架各组分在肿瘤侵袭转移中作用的研究均较独立、分散,且随着细胞骨架相关研究的不断深入,微管在肿瘤转移中的重要性开始凸显,微管关键相互作用蛋白和微丝细胞骨架间的交互作用也越来越受到关注,这可能给转移性肿瘤的治疗带来新的思路。本文就细胞骨架的结构功能、重要信号通路、新进展及相关抗肿瘤药物研究进行综述,并探讨细胞骨架蛋白相互间的联系以及细胞骨架相关的潜在抗肿瘤药物新思路。      

蛋白激酶C对大肠癌HT-29细胞骨架影响的形态学研究

目的：从形态学角度探讨蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）对大肠癌细胞骨架的调节作用。方法：采用考马斯亮蓝法和间接免疫荧光法显示PKC激活剂PMA和抑制剂Staurosporine（SP）对大肠癌HT-29细胞骨架微丝纤维、微管蛋白（tubulin）、黏着斑纽蛋白（vinculin）表达的影响,研究PKC对HT-29细胞骨架调节作用。结果：HT-29细胞骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量丰富,但纤维短,排列紊乱,无分极现象;而PMA处理可使细胞骨架出现分极现象,骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量减少,向两极放射排列,纤维稀疏,并可见向外伸展的板层（lamellae）结构和板状伪足（lamellipodia）;而SP可抑制PMA的作用,使细胞骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量增多、增粗,排列规则,边界完整,形成完整的骨架网络结构。结论：PMA通过激活PKC表达,促进骨架蛋白微丝、微管的解聚和黏着斑的解体,有利于细胞骨架的重组,促进细胞改变形态利于扩散、运动;SP可拮抗PMA作用,通过抑制PKC表达,导致骨架蛋白不能解聚或解体,不利于细胞骨架的重组,影响细胞的移动。推测PKC对细胞侵袭、转移的调节可能部分涉及了其调节细胞骨架的机制。     

蛋白激酶C对大肠癌HT-29细胞骨架影响的形态学研究

目的:从形态学角度探讨蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)对大肠癌细胞骨架的调节作用.方法:采用考马斯亮蓝法和间接免疫荧光法显示PKC激活剂PMA和抑制剂Staurosporine (SP)对大肠癌HT-29细胞骨架微丝纤维、微管蛋白(tubulin)、黏着斑纽蛋白(vinculin)表达的影响,研究PKC对HT-29细胞骨架调节作用.结果:HT-29细胞骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量丰富,但纤维短,排列紊乱,无分极现象;而PMA处理可使细胞骨架出现分极现象,骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量减少,向两极放射排列,纤维稀疏,并可见向外伸展的板层(lamellae)结构和板状伪足(lamellipodia);而SP可抑制PMA的作用,使细胞骨架微丝、微管纤维和黏着斑数量增多、增粗,排列规则,边界完整,形成完整的骨架网络结构.结论:PMA通过激活PKC表达,促进骨架蛋白微丝、微管的解聚和黏着斑的解体,有利于细胞骨架的重组,促进细胞改变形态利于扩散、运动;SP可拮抗PMA作用,通过抑制PKC表达,导致骨架蛋白不能解聚或解体,不利于细胞骨架的重组,影响细胞的移动.推测PKC对细胞侵袭、转移的调节可能部分涉及了其调节细胞骨架的机制.     

MAPK信号通路对细胞骨架调控作用的研究进展

细胞骨架参与调控细胞内很多重要的骨架相关细胞活动，细胞骨架的异常能够导致骨架相关疾病的发生。研究表明，有丝分裂原激活的蛋白激酶 (mitogen activated protein kinases，MAPK)信号通路作为细胞内重要的信号转导途径之一，参与调控细胞骨架的稳定性以及影响骨架相关的细胞活动如减数分裂、细胞迁移、细胞黏附、细胞分化等。最近的医学研究也发现，MAPK通路参与骨架蛋白异常引起的临床疾病。本文就MAPK信号通路对细胞骨架及其相关细胞活动的调节作用的最新研究进展进行综述。     

细胞骨架协同基质金属蛋白酶促进肿瘤侵袭的研究进展

正侵袭和迁移是肿瘤细胞最重要也是最致命的生物学特性。在这一复杂过程中,细胞骨架重塑参与其中,引起细胞形态和功能改变。肿瘤细胞还产生基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP),其主要作用是降解细胞外基质(extra cellular ma-     

力达霉素对人肝癌bel 7402细胞凋亡基因表达和细胞骨架的影响

背景与目的：力达霉素是我所分离的烯二块类抗肿瘤抗生素,因其独特的化学结构和对体内外肿瘤的强烈抑制作用,而倍受关注。除了断裂DNA外,力达霉素对细胞凋亡基因表达和细胞骨架的影响,可能与其高活性有关。本文通过观察力达霉素对人体肝癌bel-7402细胞多指标的影响,进一步阐明其分子机制。方法：用Northern blot印迹法和dot印迹法检测癌基因表达,间接免疫荧光法检测微丝和微管,线粒体特异染料Mitosensor^tm检测细胞凋亡。结果：低浓度的力达霉素（0.1nmol/L)处理人肝癌bel-7402细胞8h,明显促进c-myc、c-fos基因表达,而抑制N-ras表达。10nmol/L力达霉素处理细胞8h后,细胞伸展,微丝排列整齐,向非恶性细胞转变,但对微管没有影响。用线粒体特异凋亡染料Mitosensor^TM检测发现,力达霉素处理8h后的细胞未出现凋亡,说明力达霉素引起肿瘤凋亡首先需要诱导c-myc基因表达。结论：低浓度的力达霉素明显影响人肝癌bel-7402细胞的有关凋亡基因表达和细胞骨架的分布,这些结果有助于解释力达霉素高活性地作用肿瘤细胞的分子机制。     

二氢卟吩e6光动力对结肠癌SW620细胞骨架的影响

目的 观察二氢卟吩e6光动力(Ce6-PDT)对结肠癌SW620细胞骨架的影响,为进一步了解Ce6光动力治疗结肠癌的机制提供参考.方法 人结肠癌SW620细胞经不同浓度Ce6(0、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L)处理,分别采用MTT法检测Ce6-PDT后SW620细胞的存活情况;...     

黏着斑激酶在缺氧促进肝癌细胞细胞骨架重组中的作用研究

Objective: To study focal adhesion kinase (FAK) expression in hypoxic HepG2 cells and the effect of FAK siRNA on cytoskeletal arrangement of HepG2 cells induced by hypoxia. Methods: HepG2 cells were cultured in 21% O2 and 1%O2. Morphological changes were observed after hypoxia treatment. Westem blot was used to measure FAK expression. The siRNA expression vector pshRNA-FAK targeting the mRNA of FAK and vector pGensil-2 (as a control) were constructed, and then transfected into HepG2 cells. Western blot was used to detect FAK. The cytoskeletal arrangement of HepG2 cells trans fected with pshRNA-FAK induced by hypoxia was analyzed by phalloidin. The migratory ability of HepG2 cells transfected with pshRNA-FAK induced by hypoxia was analyzed by cell migration assay. Results: Hypoxia-treated cells displayed a more elongated shape with a large degree of cell detachment. FAK expression increased in hypoxic HepG2 cells. FAK protein level was decreased by 75.64% ± 3.12% (P ＜ 0.01) after the pshRNA-FAK transfection. Hypoxia induced cytoskeletal arrangement of HepG2 cells. However, cytoskeletal arrangement of HepG2 cells transfected with pshRNA-FAK induced by hypoxia was inhibited in 1% O2. As cell migration assay showed, the migrating number of HepG cells transfected with pshRNA-FAK was significantly lower than that of control (P ＜ 0.05). Conclusion: The expression of FAK in hypoxic HCC might have a close relationship to the cytoskeletal arrangement of HepG2 cells induced by hypoxia. Up-regulation of FAK expression may be one of mechanisms of cytoskeletal arrangement and invasion of hepatocellular carcinoma induced by hypoxia.     

细胞骨架相关蛋白4在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨细胞骨架相关蛋白4(cytoskeleton-associated protein 4,CKAP4)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其临床意义。方法 收集237例ccRCC患者的癌组织和癌旁组织,采用免疫组化法检测CKAP4蛋白的表达水平,采用χ²检验比较不同CKAP4蛋白表达水平患者的临床病理特征,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析不同CKAP4表达水平患者总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression-free survival,PFS)的差异,Cox比例风险回归分析影响ccRCC患者术后OS和PFS的因素。结果 ccRCC组织中CKAP4蛋白的高表达率显著高于癌旁组织(54.0%vs 23.6%,χ²=46.050,P<0.001)。Fuhrman分级高、肿瘤浸润深、有淋巴结转移、远处转移以及TNM分期高的ccRCC患者癌组织中CKAP4蛋白高表达(均P<0.05)。CKAP4蛋白高表达...     

肿瘤免疫微环境中的免疫细胞与肺癌关系的研究进展

肺癌居各种肿瘤相关死亡原因之首,肿瘤免疫微环境与肿瘤的发生发展密切相关。免疫治疗为肺癌的治疗开辟了新方向,但大部分患者仍未能对免疫治疗产生很好的应答。深入研究肺癌的免疫微环境,尤其各类免疫细胞的功能及其调控网络,是理解肿瘤免疫调控机制、寻找新的干预靶点从而改善患者预后的关键。本文对肺癌免疫微环境中免疫细胞的分类及其与肿瘤细胞间的交互作用的相关研究进展进行综述。     

中药蒲公英抗肿瘤作用研究进展

中药蒲公英具有清热解毒、消肿散结的功效。全文分析中药蒲公英抑制肿瘤细胞增殖、改善肿瘤细胞微环境以及减轻肿瘤药物副反应等方面的研究进展。     

Th17和Tc17在肿瘤微环境中的研究进展

总结近期国内外关于肿瘤浸润的淋巴细胞（TIL）中CD4+Th17细胞及CD8+Tc17细胞的研究现状。运用检索PubMed检索系统,以Th17细胞、Tc17细胞、肿瘤微环境等为关键词,检索2000年1月-2013年12月的相关文献,共检索到到Th17与肿瘤微环境相关英文文献 71条,Tc17细胞与肿瘤微环境相关3篇。通过国内外大量的动物模型和体内外实验证明了Th17和Tc17有其独特的调节、分化和可塑性等特点,并且通过与肿瘤微环境中其它免疫细胞的相互作用,Th17与Treg的失衡及Tc17与MDSC等相互作用机制,在肿瘤微环境中起着重要作用。Th17/Tc17是独特的T淋巴细胞,对肿瘤发生、发展、乃至预后均密切相关,将为抗肿瘤免疫治疗提供新的有效治疗方案。     

套细胞淋巴瘤免疫微环境与免疫治疗研究进展

套细胞淋巴瘤(mantle cell lymophoma, MCL)是非霍奇金淋巴瘤的一种罕见亚型,难以治愈且复发率高,预后较差。随着对肿瘤免疫微环境认识的逐步深入,微环境在恶性肿瘤中的关键作用引起广泛关注。近年来微环境参与套细胞淋巴瘤发生发展机制引起重视。对套细胞淋巴瘤免疫微环境组成及功能的阐释推动了抗肿瘤免疫治疗领域的探索,并在嵌合抗原受体T细胞疗法、肿瘤疫苗、免疫调节剂治疗中取得重要进展。该文针对套细胞淋巴瘤免疫微环境及免疫治疗进展作一综述。     

冬凌草甲素对胰腺癌细胞骨架蛋白F-actin的影响

背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,DAPI染色法染色后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态学变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,25、50μmol/L冬凌草甲素给药组早期凋亡的百分率显著高于对照组(3.78±0.46,9.51±0.63 vs 0.73±0.06,P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(14.40±1.78,20.53±2.54 vs 4.16±0.31,P<0.05)。细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚状态。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白F-actin解聚。     

高转移人肺癌表型去恶化研究—细胞通讯,细胞骨架和癌基因…

高转移人肺巨细胞癌ＰＧ细胞恶性表型明显。以人胚肺细胞为对照，荧光染料标记示踪法表明，ＰＧ的间隙连接通讯功能缺陷；免疫荧光染色显示微管解聚；荧光鬼笔环肽染色显示微丝网架破坏。分子杂交结果表明，ＰＧ细胞有ｃ－ｍｙｃＤＮＡ扩增和ｃ－Ｈａ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ基因高表达，抑癌基因Ｐ＾５３ｍＲＮＡ水平低于正常。用钙调蛋白拮抗剂ＣＤＺ（１００～２００ｎｍｏｌ／Ｌ）和中药Ｌ２（３～１３ｍｇ／ｍｌ）分别处理ＰＧ，细     

不同转移潜能的人体横纹肌肉瘤细胞系细胞骨架的研究

目的　研究细胞骨架与三种人体不同转移潜能横纹肌肉瘤细胞系的关系。方法　采用直接和间接免疫荧光法 ,用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架F actin、vinculin、tubulin、vimentin及desmin的结构及分布 ,同时测定各种细胞骨架的含量。结果　横纹肌肉瘤细胞微丝和微管骨架均有数量减少及发育不良 ,其完善程度与横纹肌肉瘤的转移潜能呈负相关 (P <0 .0 5 ) ;F 肌动蛋白小体的出现频率与横纹肌肉瘤的转移潜能呈正相关 (P <0 .0 5 ) ;中间丝在横纹肌肉瘤中结构无明显异常 ,荧光强度两两比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　不同程度细胞骨架的异常可能与横纹肌肉瘤的转移潜能不同有关 ,其有可能成为判断横纹肌肉瘤恶性程度及预后的指标之一。     

天花粉蛋白对肺癌A549细胞凋亡及细胞骨架微管结构改变的研究

  目的   探讨天花粉蛋白（Trichosanthin, TCS）对肺癌A549细胞株抑制增殖作用及诱导凋亡效应。   方法   用不同剂量的TCS处理肺癌A549细胞,采用MTT法检测TCS对细胞增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞骨架微管的变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。   结果   TCS使肺癌A549细胞呈凋亡型改变,细胞活性下降,且随着浓度的升高、时间的延长抑制率相应升高。   结论   药理剂量的TCS可抑制肺癌A549细胞的增殖和分化,并通过细胞骨架的变化影响A549细胞的功能。