正畸移动后大鼠牙周炎牙整合素β1mRNA变化的实验研究

目的　研究正畸移动后大鼠牙周炎牙与正常牙整合素β1 mRNA表达的变化。方法　选用10周龄雄性成 年SD大鼠96只,随机分为正常牙组、牙周炎牙组,每组48只。分别在加力后0、1、2、3、5、7 d点处死动物,制备标 本,采用原位杂交检测牙周炎牙与正常牙正畸移动后β1 mRNA转录水平的变化。结果　正常牙组和牙周炎组加力 后各时间点的整合素β1 mRNA阳性强度均较加力前有明显增高(P<0·001);在加力各时间点,两组整合素β1 mRNA的表达强度均无显著性差异(P>0·05)。结论　在牙移动中,整合素β1 mRNA牙周组织破骨细胞上有强表 达,提示其与牙移动中牙周组织的稳定和改建有关。     

唑来膦酸对破骨细胞黏附及整合素αv、β3基因表达的影响

目的 研究唑来膦酸（ZOL）对破骨细胞黏附以及整合素α_v和β₃基因表达的影响。方法 体外诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色及牙本质吸收陷窝检测以评价破骨细胞生成情况。将细胞分为对照组及ZOL处理组两组,后者用1×10^-6 mol·L^-1的ZOL处理2 d,用结晶紫染色法检测细胞黏附情况,用实时荧光定量聚合酶链反应、Western blot和免疫荧光化学法检测整合素α^v、β³ mRNA及蛋白表达水平。结果 TRAP染色及牙本质吸收陷窝检测提示有多核破骨细胞生成。ZOL处理组破骨细胞黏附能力较对照组显著降低（P<0.01）。ZOL处理组整合素α_v、β₃mRNA水平分别为0.66±0.05、0.59±0.08,显著低于对照组的1.01±0.01和1.01±0.02（P<0.01）;蛋白表达水平分别为31 934.84±112.91、18 812.79±194.13, 较对照组（52 517.81±211.72、31 441.93±456.87）分别下降了39.19%和40.17%（P<0.01）。免疫荧光化学检测显示,ZOL处理使整合素α_v、β₃荧光强度（9.491±0.748、4.744±0.759）较对照组（15.159±1.143、11.418±1.095）分别降低了37.39% 和58.45%（P<0.01）。结论 ZOL可抑制破骨细胞黏附并下调整合素α_v、β₃表达;ZOL的上述作用可能参与对破骨细胞性骨吸收的抑制。     

机械应力对人牙周膜成纤维细胞整合素β1mRNA表达的调节

目的观察机械力刺激对人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达的影响。方法用Forcel四点弯曲加载装置通过对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别施加不同动态张、压应力（强度为1 000、2 000、4 000 μstrain，加力时间为0、0.5、1、4、8、12 h），采用实时荧光定量PCR法研究机械力对人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达的影响。结果施加动态的张、压应力后，人牙周膜成纤维细胞整合素β1 mRNA表达量下调，这种下调变化与所施加应力的性质、大小和作用持续时间相关。人牙周膜成纤维细胞整合素β1对张、压应力刺激的感应不完全一致，机械力刺激越强，整合素β1表达越明显。结论动态张、压应力刺激在本实验提供的微应力范围内可以促进目的基因mRNA表达改变，不同的机械力对细胞整合素β1效应不同。     

下颌骨骨折愈合过程中整合素β_1mRNA表达的实验研究

目的:探讨下颌骨骨折愈合过程中整合素B1mRNA时空表达的变化。方法:用地高辛标记的整合素B1mRNA 的寡核苷酸探针,采用组织切片原位杂交技术,观察下颌骨骨折愈合过程中整合素B1mRNA的时空表达变化。结果:骨折愈合过程中,整合素B1mRNA在骨组织细胞,特别是成骨细胞中广泛表达;阳性染色出现于细胞浆和细胞核中;骨组织中的整合素B1mRNA在骨折7 d后表达增强,14至30 d最强,60至90 d时基本接近正常。结论:下颌骨骨折的愈合过程中,骨组织细胞中整合素B1mRNA表达增强,提示整合素B1对骨折的愈合过程具有重要作用。     

减阻牵张正畸牙移动过程中牙周组织超微结构变化的研究

目的：研究减阻牵张正畸牙移动过程中牙周组织超微结构的变化，为此方法矫治正畸牙提供理论依据。方法：将6只杂种犬随机分为2周、3周、6周二组，拔除下颌两侧第二前磨牙，随机选择一侧为实验侧，实施减阻牵张措施加快牙齿移动速度，另一侧为空白对照侧，实验侧加力2周、固定保持1周、4周时，制备移动牙标本，进行透射电镜观察。结果：对照侧无明显成骨及破骨迹象；加力2周组张力侧成骨细胞、成纤维细胞的胞浆内高尔基体、内质网等细胞器非常丰富，分泌功能旺盛；压力侧破骨细胞增多，高尔基体发达，线粒体、溶酶体增多，成纤维细胞细胞器发达，间充质细胞、活跃的巨噬细胞增多；随着固定保持时间的延长，实验侧与对照侧超微结构的差异变小。结论：正畸牙压力侧减阻后，在强、高频率加力方式作片用下，牙周组织细胞功能旺盛、改建活跃，无不可逆的细胞变性坏死变化。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响,探讨bFGF在牙周组织再生中的意义。方法体外培养人牙周膜成纤维细胞,分别用质量浓度0.1、1.0、10.0 ng·mL-1的bFGF刺激细胞,培养24、48、72 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA表达的变化。结果bFGF可促进人牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA的合成,在培养24、48、72 h时,1.0 ng·mL-1组整合素β1亚单位表达均明显高于对照组;培养72 h时各实验组整合素β1亚单位表达均明显高于培养24、48 h时。结论bFGF通过提高整合素β1亚单位mRNA的表达,促进牙周膜成纤维细胞的黏附,在牙周组织修复再生中起作用。     

血小板衍生生长因子-BB、转化生长因子-β1联合应用对大鼠正畸牙牙周膜中整合素β3表达的影响

目的 观察大鼠正畸牙局部联合应用血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）和转化生长因子-β1（TGF-β1）后正畸牙牙周膜中整合素 β3表达的变化。方法 按随机数字表法,将 32只大鼠随机均分为4组。建立大鼠上颌第一磨牙近中移动正畸模型,隔日于施力磨牙颊侧牙龈黏膜下分别注射1%PBS、10 ng PDGF-BB、5 ng TGF-β1、10 ng PDGF-BB和5 ng TGF-β1叠加剂量,注射体积均为0.1 mL。加力10 d后处死动物,取左上颌第一磨牙及其牙周组织,用免疫组织化学方法检测牙周组织中整合素 β3的表达,进行阳性表达区域平均光密度值测量,对测量结果行方差分析,服从正态分布,再行组间t检验统计学分析。结果 各实验组压力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达强度均高于对照组（P<0.01）,其中PDGF-BB+TGF-β1组与TGF-β1组或PDGF-BB组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。实验组张力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达强度均高于对照组（P<0.05）,其中PDGF-BB+TGF-β1组整合素β3表达强度较强,与TGF-β1或PDGF-BB组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 局部联合应用外源性PDGF-BB和TGF-β1对大鼠正畸牙牙周组织中整合素β3的上调作用较单独运用PDGF-BB或TGF-β1组强,二者联合应用有协同效应,共同促进了正畸牙周组织改建。     

骨皮质切开加速大鼠正畸牙移动的机制研究

目的:研究骨皮质切开术加速大鼠正畸牙移动的组织学改建机制.方法:选用健康未孕雌性Sprague-Dawley(S-D)大鼠48只,随机分为骨皮质切开手术组和对照组.在手术组大鼠行骨皮质切开术,对照组大鼠行对照手术后,构建正畸牙移动模型.在牙移动0、1、3、7d分别处死2组大鼠各6只.测量牙移动距离并制备组织学切片,行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)免疫组织化学检测.采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:骨皮质切开术可在牙移动第1天及3d后加速正畸牙移动,而牙移动3d时2组大鼠牙移动距离无显著差异.牙移动第3天和第7天,手术组大鼠压力区破骨细胞数目均显著高于对照组(P＜0.05),手术组压力区RANKL的表达也显著高于对照组.结论:骨皮质切开术可加速大鼠正畸牙移动,这可能是由于牙周组织中RANKL高表达介导的破骨增强所致.     

人β防御素3基因转染及金纳米颗粒处理后的牙周膜细胞对大鼠牙周炎形成影响研究

目的    探讨人β防御素3基因转染大鼠牙周膜细胞,并经金纳米颗粒处理后,局部注射对SD大鼠慢性牙周炎形成的影响。方法    丝线结扎法构建SD大鼠慢性牙周炎模型,酶消化法提取大鼠牙周膜细胞并鉴定,用携带人β防御素3基因的腺病毒转染细胞并经金纳米颗粒处理,在慢性牙周炎构建同期局部注射细胞悬液到腭侧牙龈,对照组分别注射生理盐水和空载体腺病毒转染后的细胞悬液。2周后处死大鼠取材。通过Micro-CT和免疫组化染色观察大鼠牙周炎形成情况。结果    单纯结扎组第二磨牙周围牙槽骨明显吸收,牙龈上皮钉突向内增生,棘层增厚,炎细胞浸润,胶原纤维变性、局部断裂。局部注射经转染和金纳米颗粒处理的牙周膜细胞后,结扎区域牙槽骨吸收水平降低,骨密度和骨体积分数增加;牙龈上皮炎症细胞浸润和上皮钉突增生减少,胶原纤维断裂和排列紊乱等病理变化得到改善。结论    人β防御素3基因转染及金纳米颗粒处理后的大鼠牙周膜细胞局部注射后,可减轻SD大鼠的牙周组织炎症,降低牙周组织破坏,从而在牙周炎的形成过程中起到保护作用。     

整合素β1在实验性根尖周炎症组织中表达研究

目的    通过免疫组化法检测正常和实验性根尖周炎进展过程中根尖周组织整合素β1表达的分布情况及规律,探讨其在根尖周组织炎症进展中的作用。方法    取磨牙牙髓暴露不同时间（0、7、14、21、28 d）的大鼠上颌骨行整合素β1免疫组化染色,观察根尖周组织中整合素β1表达部位与表达程度。结果    整合素β1广泛表达于正常大鼠根尖周组织;牙髓暴露7 ~ 21 d,根尖周结缔组织中整合素β1呈阳性至强阳性表达,炎细胞密集区可见深棕色颗粒集聚;牙髓暴露28 d,根尖周结缔组织中整合素β1表达较弱。牙槽骨内的骨细胞、陷窝内血管、成骨细胞、破骨细胞及牙骨质细胞中整合素β1在牙髓暴露0 ~ 14 d 呈强阳性表达,21 d后表达减弱。结论    整合素β1参与根尖周炎症的进展与根尖周肉芽组织形成炎症早期的骨吸收。     

破骨细胞整合素的功能

整合素是一类重要的细胞表面跨膜蛋白,介导细胞粘附,并参与细胞内外的信号传递。近年来研究发现,它在破骨细胞迁移、分化、粘附、信号传导等过程中起到重要作用,本文对其研究现状作一综述。     

GSK-3β对正畸牙齿移动的影响

目的:观察GSK-3β对正畸牙齿移动距离的影响.方法:分别选30 只野生C57小鼠和20 只GSK-3β基因敲除C57小鼠.野生型和基因敲除型各20 只,正畸加力3、5、7、14 d(5 只/组)后处死,取材固定上颌骨扫描Micro CT测量牙齿移动距离,冰冻切片免疫荧光染色观察破骨情况.野生型10 只腹腔注射LiCl(隔天100 ng/ml)加力3 d,7 d处死后扫描MicroCT.结果:与野生型组同期结果相比,GSK-3β基因敲除小鼠牙齿移动距离降低(P<0.05),压力侧破骨细胞减少(P<0.05);基因敲除组与野生型注射LiCl组牙齿移动距离无统计学差异.结论:GSK-3β可以影响破骨细胞形成从而影响正畸牙齿移动.     

局部注射阿仑膦酸钠对大鼠正畸牙移动的影响

目的观察局部注射阿仑膦酸钠对大鼠正畸牙移动及牙周组织的影响。方法32只Wistar大鼠分为对照组和低剂量、中剂量、高剂量三个实验组,使用40g力牵其左侧上颌第一磨牙近中移动,实验中分别将生理盐水、0.02mmol/L、0.1mmol/L、0.5mmol/L的阿仑膦酸钠溶液注射入各组大鼠上颌第一磨牙近中腭侧的粘骨膜下,注射于实验前3d开始,每3天一次,每次50μl。分别在0、1、3、7、14、17、21d时取模法测量大鼠牙移动量。第21天取上颌组织块经固定、脱钙、脱水、包埋后切片,HE染色观察牙周组织变化,TRAP染色观察压力区破骨细胞数、破牙骨质细胞数,比较各组间是否有差异。结果①各实验组大鼠第一磨牙移动距离显著低于对照组,并随药物浓度增高其抑制效果增强。②实验组压力区破骨细胞数和破牙骨质细胞数显著低于对照组。结论局部注射不同浓度阿仑膦酸钠能获得不同的抑制牙齿移动的效果,可应用于临床中作为一种增强支抗的手段。     

不同浓度木通皂苷D对大鼠正畸牙移动的影响

目的:探讨局部注射不同浓度的木通皂苷D对大鼠正畸牙移动的影响。方法:40只6周龄雌性Wistar大鼠,随机分为4组,建立正畸牙移动动物模型。以上颌两中切牙为支抗,牵引上颌第一磨牙向近中移动,镍钛拉簧加力40 g。ASD1组以5 mg/kg的剂量局部注射ASD溶液;ASD2组以10 mg/kg的剂量局部注射ASD溶液;PGE2组以25 μg/kg的剂量局部注射PGE2溶液;空白对照组注射生理盐水。4组动物分别于正畸加力3、7、14、21、28 d后分批处死,测量各期上颌第一磨牙的移动距离,H-E染色观察切片牙周组织及破骨细胞数量的变化,采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:各实验组动物牙移动距离均大于对照组,加力第3天,只有PGE2组与对照组相比有显著差异（P<0.05）。加力第7天,ASD2组和PGE2组与对照组相比均有显著差异（P<0.05）。加力第14、21、28天,ASD1组、ASD2组和PGE2组与对照组相比均具有统计学意义（P<0.05）。各时间段ASD2组和PGE2组之间牙移动距离相比无统计学意义（P>0.05）。组织学观察,压力侧多核破骨细胞数目随时间推移呈上升趋势,第21天达到高峰,随后逐渐减少。结论:局部注射ASD可促进大鼠正畸牙移动,ASD以10 mg/kg的剂量局部注射,其作用与PGE2促进正畸牙移动的效果相似,较5 mg/kg剂量的ASD促进牙移动的效果明显。     

不同浓度1,25-二羟基维生素D3对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞分化因子的影响

目的探讨牙周局部注射不同浓度的1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]对大鼠正畸牙移动压力侧破骨细胞分化因子表达的影响,以及相关的作用机制。方法96只成年健康雄性Wistar大鼠随机等量分为对照组、A组、B组和C组。在大鼠上颌左侧第一磨牙与上颌两切牙之间安放加力装置,每隔3d注射药物10μL;对照组注射生理盐水,A组注射10-10mol/L的1,25-(OH)2D3,B组注射10-8mol/L的1,25-(OH)2D3,C组注射10-6mol/L的1,25-(OH)2D3;分别于加力后第1、3、7、14天处死各组中6只大鼠。制取标本后,HE染色观察正畸牙移动牙周膜压力侧破骨细胞的数目、形态以及活性变化,同时运用免疫组织化学染色,检测正畸牙压力侧破骨细胞分化因子(ODF)的表达。结果4组大鼠正畸牙移动压力侧破骨细胞的变化趋势一致,但是B组大鼠压力侧ODF表达在第7、14天显著提高。结论10-8mol/L的1,25-(OH)2D3能更有效地促进大鼠正畸牙的移动过程中ODF的表达,促进破骨细胞的活化。     

正畸牙移动过程中骨细胞超微结构变化的研究

在正畸牙移动过程中骨细胞体系的作用非常重要,其中成骨细胞和破骨细胞的作用已得到充分的肯定,但关于骨细胞作用的研究尚不多见。本文通过透射电镜观察实验动物正畸牙     

灌服川续断水煎液对大鼠正畸牙移动的影响

目的 研究灌服川续断水煎液对大鼠正畸牙移动的影响。方法 选择48只SPF级Wistar大鼠,随机分2组,每组24只,于上颌一侧第一磨牙与上切牙之间结扎正畸螺旋弹簧,建立大鼠正畸牙齿移动实验模型。实验组每日灌服6g/kg川续断水煎液;对照组每日灌服3ml生理盐水。两组动物于正畸加力7、14、21、28d后分批处死,取上颌磨牙及牙周组织,测量上颌第一磨牙近中移动距离并行统计学分析。结果 正畸加力7d,实验组大鼠第一磨牙近中移动距离与对照组无统计学差异(P>0.05)。正畸加力14、21、28d,实验组大鼠第一磨牙近中移动距离明显大于对照组(P<0.05)。结论 川续断能够加速正畸牙齿的移动速度。     

PDGF-BB与IGF-I联合应用对大鼠正畸牙移动的影响

目的:观察血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)与胰岛素样生长因子-I(IGF-I)联合应用对大鼠正畸牙移动的影响,为正畸临床治疗加快正畸牙移动.缩短正畸治疗时间进行探索.方法:在32只SD雄性大鼠上颌安装施加50 g力正畸装置牵引上颌第一磨牙近中移动,隔日在正畸牙颊侧牙龈黏膜下分别或联合注射200 ng rIfl...     

正畸牙移动中骨吸收机制及其调控的研究进展

破骨细胞在正畸牙移动压力侧骨吸收过程中发挥着重要的作用,针对破骨细胞分化成熟及其发挥功能的调控研究,能为正畸治疗中控制牙齿移动提供新的思路,同时有助于防治正畸治疗中出现的牙根外吸收等。