E-玫瑰花结试验中值得注意的问题

人T淋巴细胞与绵羊红细胞(SKBC)有形成E-玫瑰花结的能力。为了提高E-玫瑰花结形成率,有些学者在实验中用胎牛血清或AB型人血清,或用神经氨酸酶处理红细胞(E_N)、巯基化合物和AET等处理羊红细胞(E_(AET))进行玫瑰花结试验,使T淋巴     

用激光多普勒分光镜测试细胞电泳迁移率以区别T细胞亚群

1973年Wvbran等发现了一种对绵羊红细胞(SRBC)有高度亲和力的T细胞亚群,称其为“活性的”或“早期的”T细胞。它具有在短时间(5分钟)内与SRBC结合形成花环的能力,而全部T细胞花环的形成却需要60分钟以上的时间。1977年West等证明,由于温度以及淋巴细胞与SRBC比例的不同,T细胞对SRBC具有不同的结合能力,因此分为两类:在29℃,并以有限的SRBC与淋巴细胞结合时,形成“高亲和力”的E花环(E-RFC);而在4℃,应     

人胸腺细胞:用不同种属的未致敏及致敏红细胞形成玫瑰花结能力的研究

本文研究了人胸腺细胞与不同种属未致敏及致敏红细胞形成玫瑰花结的能力.方法胸腺来源于117名非恶性肿瘤患儿.取小块胸腺组织,剪碎,放在含10%小牛血清或10%人血浆及双抗(青霉素100u/ml、链霉素50μg/ml)的RPMI1640营养液中,制成胸腺细胞悬液.用胸腺细胞和未致敏的绵羊红细胞(SRBC)离心后,在4℃孵育2～12小时形成标准Es花结(E玫瑰花结),代表总T细胞.T细胞各亚群的确定是:(1)重力     

雌三醇/肌酐(E_3/C)比值的简易测定及其在产前诊断中的应用

我室E_3/C 比值简易测定法,是参考《临床生化检验》妊娠期尿中雌激素总量测定法加以改进建立的。尿中肌酐测定仍采用碱性苦味酸法。经我院妇产科临床应用证明,测定结果有较好的参考价值。一、试剂1.E_3标准液(100μg/ml):精确称取2mgE_3,用20ml 无水去醛乙醇溶解后,放冰箱备用。2.对硝基苯酚氯仿溶液:称取对硝基苯酚(AR)     

移植用黄豆凝集素和羊红细胞分离的组织不相容的双亲骨髓治疗6例免疫缺陷病的经验

本文介绍6例免疫缺陷病(SCID)病人移植用黄豆凝集素(SBA)和羊红细胞(SRBC)处理的HLA半相合的、MLC不相配的双亲骨髓的经验。分离骨髓的主要步骤:(1)用羟乙基淀粉溶液分离红细胞;(2)用SBA凝集和沉降凝集的细胞;(3)用淋巴细胞分层液除去SBA-细胞中的E花结的T细胞;(4)用神经氨酸酶处理的SRBC再次形成E花结,除去SBA-E-细胞组分中残留T细胞。收集SBA未凝集,未形成E花结的骨髓单个核细胞组分(SBA-E-E_(N~-)细胞),用含1%的人血清白蛋白的     

溴化2-氨基乙基异硫脲灭活Kell血型抗原

作者发现,人红细胞经溴化2-氨基乙基异硫脲(2-aminoethylisothiouronium bromide,AET)处理后,Kell血型抗原被特异性灭活,而其它血型抗原不受影响。用5N NaOH调节AET6％水溶液的pH到8.0(临用前配制)。1容积洗涤后的压积红细胞与4容积的上述AET溶液混合,37℃培育20分钟,然后用pH7.0磷酸盐缓冲液洗涤,直到上清液变清(4～6次),冷藏并在24小时内使用。用IgG Kell抗血清作间接抗球蛋白试验,对照研究经AET处理和不经AET处理的红细胞,发现     

前列腺素和阿斯匹林对正常人和多发性硬化患者E-玫瑰花形成的影响

多发性硬化患者(MS)的外周淋巴细胞同感染麻疹病毒的人的上皮细胞(HEp-2)形成的玫瑰花明显多于健康对照者淋巴细胞形成的玫瑰花。相反,MS患者的T淋巴细胞比对照者的淋巴细胞形成的贪婪玫瑰花(>10个SRBC)少。前列腺素E_1(PGE_1)能增加对照者淋巴细胞与感染麻疹病毒的上皮细胞的粘连性。前列腺素合成抑制剂——阿斯匹林,不论在体外加入细胞或给MS患者口服,均能使MS患者的淋巴细胞的粘连性降低到对照细胞正常显示的水平之下。与对照淋巴细胞同感染麻疹病毒的细胞的粘连性增加相反,PGE_1能减低对照淋巴细胞对绵羊红细胞(SRBC)的贪婪性。     

总补体微量单管测定法

1.绵羊溶血素、SRBC 的保存、配制同常法.2.pH7.4绶冲生理盐水贮存液,NaCl 17.0g.Na_2HPO_41.13g、KH_2PO_40.27g 加蒸馏水至100ml3.应用液:取贮存液作1:20稀释.于100ml 应用液中加g/dl 硫酸镁1ml.     

一种灵敏的测定血小板结合的和血浆游离的5-羟色胺的荧光法

5-羟色胺(5-HT)参与某些生理作用或病理改变(如痉挛、体温调节、恐惧及偏头痛时对疼痛刺激的反应,以及伴随有迟延反应的几种特殊疾病)。作者报告一个简单的适宜测定血浆游离的及血小板结合的5-HT的方法。本法基于:(a)用弱阴离子交换树脂选择性的吸附、纯化并使胺浓缩在少量的洗脱液中,(b)然后转移洗脱液至自动分析器中,进行荧光测定。试剂所有试剂均用分析纯级,制备溶液用蒸馏水(电阻5×10~5欧姆)。(1)5-HT贮存液(10μg游离基/ml):称取11.5mg5-HT肌酐硫酸盐,溶于500ml水中,贮于冷暗处可用3周。(2)使用标准液:取贮存液适量用吸附液稀释到100ml,使其浓度达5-500ng/ml。(3)吸附液:每升溶液含0.1MHCl80ml,EDTA-Na_250mg,0.5M磷酸盐缓冲液(pH6.4)6ml,Nacl9g,用10MNaOH调节pH至6.4。     

有丝分裂素对玫瑰花结形成的刺激作用:人体T、B、D及N细胞功能的检测和计数

基于有丝分裂素〔植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陆(PWM)〕刺激淋巴细胞,同时形成玫瑰花结以检出E受体和C_3受体,作者提出了一种同时作淋巴细胞亚群计数和功能测定的简易法。ConA和PWM能活化淋巴细胞C:受体的亲和力,增加酵母多糖-补体颗粒玫瑰花结形成细胞数(B细胞),并可形成既有酵母多糖-补体颗粒又有绵羊红细胞(SRBC)的混合玫瑰花结细胞(D细胞)。PHA能活化E受体,增加T细胞检出数。材料和方法取正常成人20例和患者33例(哮喘10例、湿疹15例和铍尘肺8例)的肝素抗凝血,经     

雌三醇的简易测定法及临床应用

雌三醇(简称E_3)的简易测定法是我室参照天津中心妇产科医院实验室《女性激素的测定方法》和上海国际和平妇幼保健院的《E_3的测定法》的基础上建立起来的,操作简便,经我院妇产科的临床应用,证明检测率高。材料与方法一、试剂 1.E_3标准液:精确称取2 mgE_3标准品,用20ml无水去醛乙醇溶解后,置冰箱备用。 2.去醛无水乙醇:500ml无水乙醇中加入数粒     

用手工操作和日立726自动分析仪—邻苯三酚红-钼酸盐法测定尿蛋白

测定尿蛋白的方法已有很多报道,然而,这些方法的线性范围和重复性不完全令人满意.本文作者对Fujita等应用邻苯三酚红——钼酸盐与蛋白质显色反应的方法进行了改良.本法是根据颜料与蛋白质在pH2.5条件下相结合,光谱吸收峰由460nm改变为600nm.试剂:①PR溶液(1.5mmol/L):邻苯三酚红(PR)60mg溶于100ml甲醇中.⑦钼酸盐溶液(10mmol/L):钼酸钠(2H_2O)0.24g溶于100ml蒸馏水中.③PR—钼酸盐试剂:丁二酸5.9g,草酸钠0.14g,苯甲酸钠0.5g,溶于900ml重蒸馏水中,加PR溶液40ml,钼酸盐溶液4ml,用0.1mol/LHCl调节pH至2.5.最后用蒸馏水稀释至1000ml.操作:手工操作,分别取尿液标本或1g/L白蛋     

病毒性乙型肝炎患者外周血中T_M 和T_G细胞的变化

本文观察各型病毒性乙型肝炎患者72例,正常健康人21例。检测项目包括外周血中的总 E 花环(Et—RFc%)、活性花环(Ea—RFC%)、稳定性 E 花环(Es—RFC%)、T_M 和 T_G 细胞的百分率。实验证实在各型乙肝患者中,五种花环试验均有不同程度的变化。     

授精第3日胚胎的囊胚培养结果及影响因素探讨

目的探讨授精第3日(D3)胚胎继续培养发育成囊胚的能力及其影响因素。方法回顾性分析138个周期共计424个D3胚胎继续培养至第6天的囊胚形成情况。分别按照卵裂球数、胚胎碎片率、年龄、扳机日(HCG日)雌二醇(E_2)水平分为:卵裂球数≤5个组(272个)、卵裂球数≥6个组(152个);胚胎碎片率<10%组(103个)、胚胎碎片率≥10%且≤25%组(321个);年龄<35岁组(298个)、年龄≥35岁组(126个);扳机日E_2≤3000 pg/ml组(182个)、扳机日E_2>3000 pg/ml组(242个)。分析囊胚形成与年龄、卵裂球数量和胚胎碎片率以及扳机日E_2的关系。结果卵裂球数≥6个组的胚胎可利用囊胚形成率高于卵裂球数≤5个组,差异有显著性(P<0.05);胚胎碎片率<10%组胚胎的可利用囊胚形成率高于胚胎碎片率≥10%且≤25%组,差异有显著性(P<0.05);年龄<35岁组的可利用囊胚形成率高于年龄≥35岁(36.51%),但差异无显著性(P>0.05);扳机日E_2>3000pg/ml组的可利用囊胚形成率高于扳机日E2≤3000pg/ml(38.46%),但差异无显著性(P>0.05)。结论胚胎卵裂球数和胚胎碎片率是影响胚胎发育能力的重要因素,能否形成囊胚与卵裂球数及碎片率有关,与年龄和扳机日E_2水平关联不大。     

ELISA底物溶液配制的改进

邻苯二胺(OPD)为ELISA辣根过氧化物酶的常用底物,因其在溶液中不稳定,故试验时需新鲜配制。但每次用量很小,很不方便。为此,我们对底物溶液的配制进行了改进,效果较好。A液: 0.2mol/L Na_2HPO_4,每10ml加3%H_2O_2 0 1ml,放冰箱密闭保存。B液:取OPD 85mg,加无水乙醇1.5ml溶解,然后加入0.1mol/L     

用戊二醛消毒结核病实验室中盛装废弃物容器

<正> 作者采用4株从病人分离出的结核杆菌和1株意外分枝杆菌(NCTC 8573)进行试验。污染菌量为10~8cfu/ml。戊二醛溶液的pH调节至碱性后使用。实验时、将含有戊二醛9ml试管在25℃放置30分钟,加入1ml试验菌悬液、混匀后间隔不同时间用稀释法中和。取0.1ml中和后的样品、加于0.9ml Middlebrook(7H9)肉汤培养基     

心肌梗塞病人T淋巴细胞亚群CD_4/CD_8比值的改变

用抗体致敏红细胞花环试验,检测心肌梗塞病人T 细胞亚群,现报告如下.1 对象急性心肌梗塞病人急性期11例,恢复期10例,均为临床确诊的住院病人.2 试剂抗体致敏红细胞花环试剂(武汉生研所提供,批号920402).3 方法用上海试剂二厂生产的淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,配成3～5×10~6/ml 淋巴细胞悬液,操     

检测链球菌对青霉素的耐药量的一种简易法

以往测定耐药量的两种方法不但耗费时间,而且在常规细菌检验室中不易应用。圆片法常用于细菌的药物敏感试验。作者尝试用圆片法来测定菌株对青霉素的耐药量。试验用的草绿色链球菌分为二组:对青霉素敏感的菌株(最低抑菌浓度<0.8U/ml,最低抑菌浓度/最低杀菌浓度<32)和耐青霉素的菌株(最低抑菌浓度/最低杀菌浓度>32)。将菌种接种于Todd-Henitt肉汤中,37℃培养18小时,然后接种在5%羊血平板上。于10%CO_2中,37℃培养48小时。将培养物刮下并悬浮于磷酸盐溶液中,取0.1ml涂布于血平板上,取一片含有2U青霉素的圆     

用人IgG共价包被贮存的红细胞检测类风湿因子的血凝反应法

在大多数类风湿关节炎患者血清中发现的类风湿因子(RF),是一些能与IgG-Fc起反应的抗体,其中多数属IgM类,而IgG和IgA的RF效价较低。在RF的常规检测中,使用最广的是用IgG包被的微粒(或细胞)的凝集反应,如Rose-Waaler血凝反应和胶乳微粒凝集反应。前者,致敏的RBC贮存时间短,而且试验样品必须加热灭活补体和用未致敏的绵羊红细胞(SRBC)吸收。后者虽方法比较简单,但有易受pH和离子强度的影响、发生自然凝集和特异性不及血凝法等缺点。为了克服这些不足之处,作者研究了一种新方法,即在福尔马林固定的贮存SRBC上用正常人IgG进行共价包被,用以检测RF,从而使试验血清不须加热灭活或用未包被的SRBC吸收,且具有稳定、特异和操作简单等优点,适合血清IgM-RF的常规测定。     

白细胞计数质控液的研制与应用

我科自1986年购进国产DXT—2型血细胞计数器(山东三联电子公司产)以来,采用硅藻土配制的白细胞计数质控液,经过2年多的实践应用,结果可靠、满意,现介绍如下: 1 质控液的制备及标化 1.1 取硅藻土(沈阳产)2g,置于100ml具塞量筒中,用生理盐水溶液混匀,放置1小时,取50ml刻度处溶液20～30ml(将吸管插至50ml刻度处吸取)。再