亚砷酸联合顺铂对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的抑制作用及对DAPK的影响

目的:研究亚砷酸(As2O3)联合顺铂(DDP)对人鼻咽癌CNE-2Z裸鼠移植瘤的生长抑制作用及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)的影响。方法:建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、As2O3组、DDP组和As2O3加DDP组,比较各组的抑瘤作用;并对标本分别进行光镜、原位末端标记(TUNEL)检测,采用实时荧光定量PCR法与免疫组织化学方法检测DAPK的表达。结果:As2O3和As2O3加DDP均能显著抑制人鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长,诱导肿瘤细胞凋亡,并能上调DAPK的表达。结论:As2O3可抑制人鼻咽癌CNE-2Z裸鼠移植瘤的生长,该作用与诱导人鼻咽癌CNE-2Z裸鼠移植瘤细胞凋亡、上调DAPK的表达相关。As2O3与DDP联用可起协同作用。     

增殖细胞核抗原在鼻咽癌中表达的定量研究

为了增加鼻咽癌的诊断和预后判定指标，应用抗增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体，采用免疫组化染色ＬＡＳ－ＳＰ法及图象分析技术，对８２例鼻咽鳞状细胞癌和２５例鼻咽粘膜炎症组织标本进行了定量研究，并对鼻咽癌患者５年生存率与ＰＣＮＡ表达情况进行了相关性分析。结果：①根据ＰＣＮＡ阳性细胞计算的鼻咽癌细胞增殖指数与鼻咽癌的病理分级呈明显的正相关，与患者５年生存率呈明显负相关。②图像处理检测的ＰＣＮＡ表达量与     

喉癌组织中增殖细胞核抗原的表达及意义

喉癌组织中增殖细胞核抗原的表达及意义季文樾，关超，费声重增殖细胞核抗原（ＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇＣｅｌｌＮｕ－ｃｌｅａｒＡｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）是近年新兴的原位检测增殖细胞活检的免疫化学探针。我们用抗ＰＣＮＡ的单抗和免疫组化技术，对喉鳞癌作了研究...     

增殖细胞核抗原在鼻咽癌中表达的定量研究

为了增加鼻咽癌的诊断和预后判定指标，应用抗增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｅｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）单克隆抗体，采用免疫组化染色ＬＡＳ－ＳＰ法及图象分析技术，对８２例鼻咽鳞状细胞癌和２５例鼻咽粘膜炎症组织标本进行了定量研究，并对鼻咽癌患者５年生存率与ＰＣＮＡ表达情况进行了相关性分析。结果：①根据ＰＣＮＡ阳性细胞计算的鼻咽癌细胞增殖指数与鼻咽癌的病理分级呈明显的正相关，与患者５年生存率呈明显负相关。②图像处理检测的ＰＣＮＡ表达量与鼻咽癌的病理分级也呈明显的正相关，与５年生存率呈负相关，但泡状核细胞癌虽属低分化鳞癌却不符合上述规律。结论：ＰＣＮＡ能很好地反映鼻咽癌的增殖活性，在临床病理上具有应用前景，可作为对鼻咽癌预后判定及指导临床治疗的指标     

增殖细胞核抗原及Bcl-2蛋白在鼻咽癌中的表达

目的:探讨鼻咽癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2表达情况及与主要临床指标间的关系。方法:以免疫组化检测鼻咽活检组织中PCNA、Bcl-2蛋白表达,并比较与分析两者和鼻咽癌临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中Bcl-2阳性率为9.5％,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(83.1％)(P<0.01)。PCNA、Bcl-2在鼻咽癌中的表达呈明显负相关(r_s=-0.41,P<0.01)。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,鼻咽癌伴颈淋巴结转移组中PI之Ⅰ级所占比例,较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义。结论:PCNA PI可反映鼻咽癌的增殖状况,可能与预后相关,Bcl-2蛋白可作为鼻咽癌较好的肿瘤标记物,在鼻咽癌的发生上可能起重要作用。     

增殖细胞核抗原和p53基因在鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的:通过免疫组织化学方法检测鼻咽癌(NPC)患者增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因表达,分析其与主要临床指标间的关系。方法:免疫组织化学检测鼻咽活检组织中PCNA、p53蛋白表达,并比较与分析两者和NPC临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中p53阳性率为9.5%,明显低于NPC组织中的阳性率(76.3%)(P<0.01)。NPC伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.9%)明显高于无颈淋巴结转移组(57.7%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为93.3%、80.0%和100.0%)均明显高于临床Ⅰ期(40.0%)(均P<0.01),且表达强度有增加的趋势。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,NPC伴颈淋巴结转移组中PCNAPI之Ⅰ级所占比例较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义,NPC组织中PCNA表达与p53表达显著相关(P<0.01)。结论:p53蛋白可作为NPC较好的肿瘤标记物,p53阳性的NPC患者较易发生颈淋巴结转移,随着NPC病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,PCNAPI可反映NPC的增殖状况,可能与预后相关。     

增殖细胞核抗原（PCNA）,DNA含量及细胞核形态参数测定在鼻咽…

应用增殖细胞核抗原单克隆抗体ＰＣ１０免疫组化法，ＤＮＡ含量及细胞核形态图像分析法，对５８例鼻咽癌进行检测。结果显示，三种方法的检测结果具有较好的一致性，其中肿瘤细胞的ＤＮＡ指数和ＤＮＡ倍体分布最具有价值。结果表明，检测肿瘤细胞增殖活性对于判断鼻咽癌恶性变及估计患者的预后具有重要意义。     

下咽癌细胞增殖细胞核抗原及其基因的表达研究

目的 :通过对下咽癌细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)及其基因的检测 ,以探讨其对下咽癌生物学特性、临床行为及预后的影响。方法 :用免疫组织化学染色SABC法检测 4 8例下咽癌手术标本和同期 1 5例癌旁正常组织标本PCNA的表达 ,计算其增殖指数 ;同时用寡核苷酸探针原位杂交技术检测PCNA的mRNA ,以检验免疫组化与原位杂交结果的一致性。结果 :下咽癌组PCNA增殖指数为 (71 .4 8± 1 1 .1 4 ) % ,对照组为 (2 1 .1 3±1 2 .0 7) % ,其差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;PCNA增殖指数与癌的临床分期、组织分化程度及预后相关 ,而与是否有颈淋巴结转移和肿瘤发生部位无明显关系 ,且免疫组化和原位杂交两种检测结果相一致 (符合率为 85 .7% )。结论 :检测下咽癌PCNA的表达可能对判断肿瘤恶性程度及预后有一定的参考价值     

喉鳞癌中增殖细胞核抗原和p53蛋白表达的临床意义及其相互关系

本文以ＬＳＡＢ免疫组化方法，用单克隆抗体ＰＣ１０和ＤＯ－１对３０例喉鳞癌及１０例对照组（声带息肉）的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与ｐ５３蛋白表达进行研究，探讨其生物学意义。结果发现：１）喉鳞癌组织ＰＣＮＡ阳性表达率为１００％（ＰＣＮＡ－ＬＩｓ１６％～９２％），强阳性率为３６７％（１１／３０），对照组６例阴性，４例弱阳性表达（ＰＣＮＡ－ＬＩｓ＜１０％），试验组阳性表达率及表达程度明显高于对照组（Ｐ＜００５）。２）ｐ５３蛋白在喉鳞癌中阳性表达率为６６７％，对照组全部阴性，有显著差异（Ｐ＜００５）。３）在喉鳞癌组织中，ＰＣＮＡ和ｐ５３蛋白表达与临床分型、Ｔ分期及病理分化程度无显著关系（Ｐ＞００５），与淋巴转移及术后生存率关系密切（Ｐ＜００５）。４）ＰＣＮＡ与ｐ５３蛋白表达正相关。提示：１）喉鳞癌的增殖活性显著增强，ｐ５３基因突变与喉鳞癌的发生和发展有关。２）检测ＰＣＮＡ和ｐ５３蛋白有助于喉鳞癌的早期诊断和鉴别诊断，帮助治疗决策及判断预后。３）ｐ５３对ＰＣＮＡ有调节作用，为研究肿瘤的发生机理和寻找防治对策提供了新的理论依据。     

亚砷酸联合LY294002对人鼻咽癌CNE细胞的抑制作用

目的　探讨亚砷酸（As2O3）联合PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对人鼻咽癌细胞株CNE（简称CNE细胞）的抑制作用。方法　应用MTT法检测CNE细 胞对As2O3和LY294002的敏感性,Western blot方法检测p-PTEN、p-AktSer473、p-AktThr308、p-PDK1等信号分子的表达水平。结果　As2O3与LY294002均可显著抑制CNE细胞的生长,而且该作用呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性。As2O3与LY294002的联合应用对CNE细胞生长的抑制作用具有协同效应。LY294002（10 μmol/L）处理4 h即可使CNE细胞内p-AktSer473、p-AktThr308、p-PDK1蛋白表达下调,p-PTEN蛋白表达上调。As2O3（4 μmol/L）单独作用12 h后,CNE细胞内蛋白p-AktSer473表达下调,p-AktThr308、p-PDK1、p-PTEN蛋白变化不明显。LY294002（10 μmol/L）与As2O3（4 μmol/L）联合处理12 h,CNE细胞内p-AktSer473、p-AktThr308、p-PDK1等信号分子的下调水平与p-PTEN蛋白的上调强度显著强于LY294002或As2O3的单独作用。结论　As2O3联合LY294002对CNE细胞具有协同杀伤作用。     

HSP70、Ki-67、nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中表达

目的探讨鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达的临床价值。方法采用免疫组织化学二步法，检测50例鼻咽癌患者鼻咽部或颈淋巴结组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达水平。结果50例鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1阳性表达率分别为36．0％（18／50）、98．0％（49／50）和50．0％（25／50）；HSP70和nm23-H1蛋自在Ⅱ—Ⅲ期和Ⅳa期中阳性表达率均有显著性差异（P=0．016，P=0．037）：Binarylogistic回归模型分析HSP70、nm23-H1表达是鼻咽癌局部复发或远处转移的相关因素（P=0．022，P=0．038）：Cox多因素回归模型分析HSP70表达是影响患者生存期的独立因素（P=-0．001）：nm23-H1与HSP70表达呈负相关（P=0．003）；Ki-67表达与鼻咽癌局部复发或远处转移及生存期均无相关性。结论检测鼻咽癌组织中HSP70和nm23-H1表达对指导治疗及评价预后有重要的临床意义。     

三氧化二砷对鼻咽癌细胞周期和细胞骨架微丝的影响

目的 研究三氧化二砷（As2O3）对鼻咽癌细胞周期和细胞骨架微丝的影响并探讨其作用机制.方法 采用流式细胞仪（flow cytometry,FCM）、激光扫描共聚焦显微镜（Iaser scanning confocal microscopy,LSCM）和荧光标记技术,检测人鼻咽癌细胞株（nasopharyngeal carcinoma cell line,CNE1）经As2O3诱导后细胞周期和细胞骨架微丝的变化.结果 FCM显示,经浓度为2 μ mol/L、4 μ mol/L As2O3处理后,G1期的细胞显著增加（P＜0.001）;经8 μ mol/L As2O3处理后,出现明显的细胞凋亡峰（P＜0.001）,S和G2/M期细胞显著增加（P＜0.001）.经4 μ mol/L、8 μmol/L As2O3处理后,细胞内纤维型-肌动蛋白（F-actin）含量明显减低（P＜0.001）.LSCM图像观察到,经4 μ mol/L As2O3处理后,标记F-actin的绿色荧光显著减弱;经8 μ mol/LAs2O3处理后,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征.结论 As2O3引起的细胞周期的改变对CNE1细胞的分化和凋亡起重要作用;As2O3诱导的细胞骨架微丝的改变与细胞周期的改变密切相关.     

晚期喉癌切缘组织流式细胞仪参数及PCNA表达的研究

目的:探索细胞增殖活性在晚期喉癌组织周围的变化规律,确定合理的晚期喉癌安全切缘。方法:用流式细胞仪及免疫组化检测晚期喉癌患者喉癌组织(A组)、癌旁0.5cm(B组)、1.0cm(C组)、2.0cm(D组)处组织细胞的DNA异质性、DNA含量、增殖指数及PCNA表达。结果:异倍体率:喉癌组织、0.5cm、1.0cm、2.0cm处组织分别为70.4％、14.8％、0、0。A与B组和B与C组间均有显著性差异;DI值:A、B、C对组分别为1.61±0.52、1.08±0.38、1.03±0.31、1.02±0.13,A与B组和B与C组间均有显著性差异;PI值(％)分别为26.06±6.73、12.27±3.78、11.37±2.86、11.01±1.92从组与B组间有显著性差异,但B组与C组、C组与D组间均无显著性差异;SPF值(％)分别为22.38±6.15、11.17±3.92、10.81±3.37、10.55±3.06,免疫组化PCNA指数(％)分别为67.8±12.25、12.76±4.36、11.33±3.25、10.89±3.13。结论:从晚期喉癌组织向周围正常组织移动过程中,肿瘤细胞的增殖指标、DNA含量逐渐趋向正常,于癌周0.5cm处接近正常,于1.0cm处基本正常;晚期喉癌旁0.5cm可作为手术的基本安全切缘,1.0cm可作为理想安全切缘。     

喉癌磁共振成像信号强度0与增殖细胞核抗原表达相关性

目的探讨喉癌组织磁共振成像(magneticresonanceimaging,MRI)相对信号强度与其增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)表达的关系。方法20例喉癌患者,术前行磁共振SE序列平扫以及增强SE序列T1WⅠ扫描、动态增强T1WⅠ扫描。术后应用ABC免疫组化法对喉癌标本的PCNA含量进行半定量测量。结果MRI相对信号强度增加值:增殖细胞核抗原标记指数>50%组为0.28±0.20;增殖细胞核抗原标记指数大于5%,小于或等于50%组为0.66±0.22,两组比较P<0.05两组信号强度达峰值的时间分别为5.58±2.54和8.38±3.66秒,二者比较P=0.058。结论MRI信号强度在一定程度上可以反映肿瘤细胞的恶性度,对判断肿瘤生物学特征及推测预后有一定参考意义。     

癌胚抗原和增殖细胞核抗原与中耳胆脂瘤上皮

目的 观察癌胚抗原、增殖细胞核抗原在中耳胆脂瘤上皮中的表达情况,分析其在胆脂瘤上皮增殖演变过程中的作用.方法 应用免疫组化SP染色方法和计算机图像分析系统,检测癌胚抗原、增殖细胞核抗原在32例胆脂瘤上皮和14例胆脂瘤患者外耳道皮肤中的表达情况,并做比较.结果 增殖细胞核抗原在胆脂瘤上皮各层细胞均存在较强表达,主要定位在胞核,染色由基底层向表皮层逐渐减弱,外耳道皮肤表达较弱,主要集中在基底层及基底上层;癌胚抗原主要在胆脂瘤上皮的颗粒细胞层及表皮层表达,少数在外耳道皮肤的基底层表达.各组间胆脂瘤上皮各指标阳性细胞率和光密度值均高于外耳道皮肤,和外耳道皮肤间的比较有高度差异性.皮下结缔组织伴随着大量的淋巴细胞和浆细胞,中性粒细胞和巨噬细胞,与胆脂瘤上皮中的阳性率呈一致趋势.同一患者胆脂瘤上皮中癌胚抗原、增殖细胞核抗原高表达,利用SPSS10.0软件包进行统计学分析,存在正相关关系（P＜0.01）.结论 癌胚抗原、增殖细胞核抗原在胆脂瘤上皮的表达从不同方面反映了胆脂瘤上皮的过度增生和角化,二者之间可能有协同作用,共同促进胆脂瘤上皮细胞增殖与分化;上皮下炎症反应可能是角化细胞过度增殖的一个原因,为胆脂瘤发病机制提供新的理论依据,便于指导临床.     

EGCG联合放疗治疗鼻咽癌裸鼠移植瘤模型

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗的增敏效应及survivin和VEGF的表达及意义.方法 体外培养低分化鼻咽癌CNE-2细胞,接种于20只雄性裸鼠皮下,待肿瘤结节约4～6 mm时,随机分为生理盐水组、EGCG组(30 mg/kg)...     

新型重组人肿瘤坏死因子抗荷鼻咽癌裸鼠的实验研究

目的寻找理想的鼻咽癌生物治疗及联合治疗的新方法。方法利用国内建株的鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ－２）制造了裸鼠鼻咽癌模型，用新型重组人肿瘤坏死因子（ＮｒｈＴＮＦ－α），通过不同的用药途径（局部、全身）和模式（单独、联合）观察治疗荷鼻咽癌裸鼠的疗效。并在光镜和透射电镜下观察ＮｒｈＴＮＦ－α作用后肿瘤组织细胞组织病理学及超微结构，探讨其作用机理。结果和结论①荷鼻咽癌裸鼠经ＮｒｈＴＮＦ－α治疗后可出现肿瘤出血、坏死，肿瘤缩小、消失、生存期延长。②ＮｒｈＴＮＦ－α局部使用的抗瘤效果优于全身用药。③ＮｒｈＴＮＦ－α与Ｃａｂ联合使用具有协同作用，增强抗瘤效果。④组织病理学及超微结构观察发现ＮｒｈＴＮＦ－α首先引起细胞质内线粒体、内质网肿胀、整个细胞空泡样变性，逐步导致核浓缩，崩解，最终导致细胞死亡。该研究为临床上鼻咽癌生物治疗及联合治疗提供实验基础。     

COX-2、PCNA及p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的：研究COX-2、PCNA及p53的基因产物在鼻咽癌组织中的表达及与其生物学行为和生存率之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌及30例正常鼻咽组织中COX-2、PCNA 及p53的蛋白表达水平。结果:（1） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 及p53阳性表达率分别为90％、75％和68％ ,明显高于正常鼻咽组织;（2） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA及p53的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.05);（3） COX-2、PCNA及p53的表达密切相关;（4） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 阳性表达和生存率呈负相关,是鼻咽癌复发的显著预后因素。结论:鼻咽癌组织中COX-2、PCNA表达水平明显上调,与鼻咽癌的发生发展及预后不良有关,免疫组化检测COX-2、PCNA表达可用以判断鼻咽癌患者的预后。