慢性乙型肝炎患者外周血CD8+/CD28+淋巴细胞及其亚型的研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD8+/CD28+淋巴细胞及其亚型与其临床状态和HBV复制的关系.方法 采用流式细胞技术多色荧光分析法,检测研究对象的外周血CD8+淋巴细胞、CD45RO、CD45RA以及CD28的表达及HBV病毒载量.结果 ①慢性HBV携带组CD8+淋巴细胞CD28的表达率(10.64±5.09%)明显低于慢性乙肝组和正常对照组;而CD45RA和CD45RO的表达差异无统计学意义;②慢性乙肝组CD8+/CD45RO+/CD28+的表达(10.99±7.33%)明显高于正常对照组,而慢性乙肝组和慢性HBV携带组CD8+/CD45RA+/CD28+表达率均明显低于正常对照组;③HBeAg阴性慢性乙肝CD8+/CD45RO+/CD28+表达率明显高于阳性组,而CD8+/CD45RA+/CD28+表达率两组无差别.结论 慢性HBV携带者处于病毒携带状态可能与CD8细胞上协同分子CD28的表达低下有关;CD8+/CD45RO+/CD28+亚型淋巴细胞数的升高与慢性乙肝的病情进展及血清HBeAg转换有关.     

类风湿关节炎患者外周血和滑液中CD4~+CD25~+调节性T细胞的水平变化

了解具有抑制功能的CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在类风湿关节炎(RA)中的水平变化。分离32例RA患者及35例正常对照者外周血和15例RA关节滑液中的单个核细胞,用荧光抗体标记细胞膜表面CD4、CD25分子和细胞内Foxp3转录因子,进行流式细胞分析,同时用RT-PCR方法测定单个核细胞中Foxp3 mRNA水平。实验发现RA外周血中CD4+CD25hT细胞比例(1.90±1.68)与健康人(1.81±1.79)无明显差异,而RA关节滑液中CD4+CD25+和CD4+CD25hT细胞含量却明显增高(14.98±12.52,8.94±9.67,P<0.01)。RA患者外周血单个核细胞中Foxp3+/CD4+T细胞比值(2.35±2.06)较正常人(7.25±3.98)明显降低(P<0.01),RA外周血中Foxp3 mRNA含量较正常人Treg减少,而RA关节液中Foxp3 mRNA含量较RA外周血更为低下(P<0.01)。RA患者存在CD4+CD25+Treg的异常改变,其外周血和关节液中具有抑制作用的Treg含量明显降低提示RA患者Treg数量减少及抑制功能下降可能是RA自身免疫反应亢强不能控制的原因之一。RA关节液中CD4+CD25hT细胞增高考虑与RA炎症反应造成T细胞过度活化有关。     

CHOP方案治疗前后外周T细胞淋巴瘤患者外周血CD45RA~+ T和CD45RO~+ T的变化特点

目的:探讨CHOP方案对外周T细胞淋巴瘤(PTCL)患者外周血中初始和记忆T细胞水平的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测20例PTCL患者CHOP方案化疗前后外周血中CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+和CD8+CD45RO+T细胞的比例,分析疗效与T细胞亚群的关系。结果:PTCL患者化疗前外周血中CD4+T细胞、CD4+CD45RO+细胞的比例明显降低,CD4+CD45RA+、CD8+、CD8+CD45RO+和CD8+CD45RA+T细胞的比例均明显升高(P<0.05),而化疗后PTCL患者CD4+、CD4+CD45RO+细胞的比例较治疗前升高,CD4+CD45RA+、CD8+、CD8+CD45RO+和CD8+CD45RA+T细胞比例则较治疗前稍下降(P<0.05)。治疗前后化疗有效组的CD4+CD45RA+均明显高于化疗无效组(P<0.05)。结论:CHOP治疗对PTCL患者胸腺输出功能有一定的影响,伴有较高胸腺输出功能者对化疗效果更好。     

类风湿关节炎CD4+CD28-T细胞与淋巴细胞凋亡的相关性研究

目的: 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4⁺CD28^-T细胞比例与淋巴细胞凋亡异常的相关性。方法: 采用流式细胞术三色分析法检测50例患者和50例健康志愿者的外周血淋巴细胞中CD4⁺CD28^-T细胞比例;通过加入PHA孵育检测RA病人外周淋巴细胞和正常对照的淋巴细胞对激活诱导细胞死亡(AICD)易感性差异;分析CD4⁺CD28^-T细胞比例与外周血淋巴细胞凋亡率的相关性。结果: RA组CD4⁺CD28^-T细胞比例的均数明显高于健康对照组(7.79%±3.52% vs 1.89%±1.78%,P<0.05)。RA组病人外周血淋巴细胞的AICD凋亡率低于健康对照组(11.38%±5.73% vs 19.46%±6.32%,P<0.05)。Spearman相关分析结果显示CD4⁺CD28^-T细胞比例与外周血淋巴细胞AICD凋亡率负相关(r=-0.433,P<0.01)。结论: RA患者外周血中CD4⁺CD28^-T细胞比例增多,活化淋巴细胞生存期延长,这可能参与RA的发病机制。     

结直肠癌患者与健康受试者外周血CD45RA+/CD45RO+淋巴细胞表型分析

目的 分析结直肠癌患者与健康受试者外周血CD45RA+/CD45RO+系列T淋巴细胞表达的差异.方法 运用流式细胞术(FCM)检测2010年1月至2013年12月解放军总医院收治的109例结直肠癌患者(试验组)与64例健康受试者(对照组)外周血CD45RA+、CD45RO+、CD4+ CD45RA+、CD4+ CD45RO+T淋巴细胞亚群表达情况,统计分析试验组和对照组性别和年龄的分布是否存在差异,然后进一步分析CD45 RA等T淋巴细胞亚群与结直肠癌临床分期的关系.结果Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期结直肠癌患者外周血CD45 RA+细胞百分率[三者分别为(56.23±7.75)％、(58.86±7.66)％和(59.02±9.71)％]明显高于对照组[(48.94±12.66)％],差异具有统计学意义(F=11.128,P＜0.001);Ⅲ期和Ⅳ期患者的CD45RO+细胞百分率[分别为(47.19±8.30)％和(45.41±10.45)％]则明显低于对照组[(53.43±11.75)％],差异具有统计学意义(F=5.817,P=0.00083);Ⅲ期和Ⅳ期患者CD45RA+/CD45RO+的比值(分别为1.32 ±0.46和1.43±0.63)明显高于对照组(1.00±0.47),差异具有统计学意义(F=6.986,P=0.000185);Ⅰ+Ⅱ期患者CD4+ CD45 RO+细胞百分率[(31.37±6.39)％]明显高于对照组[(27.49±7.19)％],差异具有统计学意义(F=2.368,P=0.009);Ⅳ期患者CD4+ CD45RA+/CD4+ CD45RO+的比值(0.66±0.39)明显高于Ⅰ+Ⅱ期的患者(0.49±0.23),差异具有统计学意义(F=1.812,P=0.029);各组之间CD4+ CD45RA+细胞百分率无明显统计学差异(F=0.637,P=0.592).结论 随着临床分期的增加,结直肠癌患者外周血CD45RA+细胞逐渐增加而CD45RO+细胞逐渐减少,反映出结直肠癌患者随着肿瘤的进展其免疫功能逐渐抑制、逐渐降低的动态过程;CD4+ CD45RA+细胞和CD4+ CD45RO+细胞在反映结直肠癌患者机体免疫功能方面不如CD45RA+细胞和CD45RO+细胞敏感.     

类风湿性关节炎患者外周血CD3~+CD8~+效应记忆T细胞和滤泡辅助性T细胞ICOS、 PD-1表达上调且与病情相关

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)和可诱导共刺激分子(ICOS)的表达,并确定其与疾病活动度之间的关系。方法募集RA患者30例、健康对照26例。流式细胞术检测外周血CD3~+CD8~+的效应记忆T细胞(Tem)和滤泡辅助性T(Tfh)细胞比例,而后检测淋巴细胞亚群中PD-1和ICOS阳性的细胞比例;通过Spearman相关性分析评估其与28个关节疾病活动度评分(DAS28)之间的相关性。结果与健康对照组相比, RA组患者外周血Tem和Tfh细胞绝对数增高, Tem和Tfh细胞的ICOS与PD-1表达增加; RA组患者外周血CD3~+CD8~+ Tem和Tfh细胞ICOS和PD-1表达水平与DAS28之间呈正相关。结论外周血CD3~+CD8~+ Tem和Tfh细胞PD-1和ICOS可能参与RA的发生发展,并可能作为RA活动度的评价指标。     

重症肌无力患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义

研究CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞在重症肌无力 (MG )发病中的作用。本文采用三色流式细胞术对 2 9例MG患者和 2 3例健康对照者外周血中CD4 + CD2 5 + T细胞 (CD3+ CD4 + CD2 5 + )的百分率进行测定。结果显示病情未能很好控制的MG患者外周血CD4 + CD2 5 + T细胞比率略低于健康对照组 (分别为 3 79%± 1 4 0 %、 4 5 3%± 0 96 % ,P =0 12 ) ,病情稳定或缓解的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 5 %± 1 96 % )显著高于健康对照组 (P =0 0 0 0 1) ;胸腺切除的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 4 %± 2 39% )显著高于非胸腺切除的MG患者 (5 88%± 2 89% ,P =0 0 38)和健康对照组 (4 5 3%± 0 96 % ,P =0 0 0 3)。提示MG患者外周血中存在异常比例的CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,可能参与疾病的发生与发展。     

慢性乙型肝炎病毒感染者CD8~+T细胞Toll样受体2表达增强

目的测定未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者CD8~+T细胞中Toll样受体2(TLR2)的水平,探索TLR2在慢性HBV感染者CD8~+T细胞中的表达的情况。方法采用实时荧光定量PCR检测40例样本的血清HBV载量,分为高病毒载量组(HBV DNA1×104拷贝/m L)、低病毒载量组(HBV DNA1×104拷贝/m L),19例志愿者作为健康对照组;分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测CD8~+T淋巴细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达,并分析TLR2表达情况及与它们之间的相关性。结果低病毒载量组与高病毒载量组CD8~+T细胞TLR2的表达较健康对照组高,低病毒载量组CD8~+T细胞TLR2表达高于高病毒载量组;相关性分析结果显示CD8~+T细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、PD-1表达缺乏相关性。结论 HBV感染者CD8~+T淋巴细胞TLR2的表达增强。     

类风湿性关节炎活动期外周血CT4+T细胞的表型变化

目的观察类风湿性关节炎(RA)活动期外周血CT4+T淋巴细胞的表型变化,探讨其免疫病理机制。方法采用ELISA和双标记免疫荧光法检测50例活动期RA患者和50例健康成人外周血CD4+T细胞表面CD154、CD69的表达以及血清、血浆可溶性CD154(sCD154)的含量。结果活动期RA患者的外周血CD4+T细胞CD154(16.8%±7.9%)和CD69(14.1%±8.2%)的表达水平均显著高于健康人,其血清sCD154(18.56±6.32,ng/ml)和血浆sCD154(8.41±3.51,ng/ml)含量亦分别高于健康人血清sCD154(9.56±4.71,ng/ml)和血浆sCD154(2.98±1.13,ng/ml)。结论CD4+T细胞表达的CD154、CD69以及血浆sCD154含量与RA的活动相关,可以作为RA的辅助诊断、疗效评价和预后判断的有价值的实验室参数。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4~+CD25~+Treg与CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群的相关研究

目的:探讨慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量和CD4+CD8+T淋巴细胞亚群分布,两者之间相关性及与HBV的相关性。方法:采用流式细胞术检测50例慢性乙型肝炎患者和20例健康对照者外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达及CD3/CD4/CD8 T淋巴细胞亚群,荧光定量PCR法检测HBV DNA含量。结果:慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25highTreg明显高于健康对照组(P0.01),且随HBV DNA载量增加,患者外周血中CD4+CD25highTreg细胞的水平逐渐升高。慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞也相应增高,且与CD4+CD25highTreg细胞的变化成正相关(r=0.890,P0.001)。与健康对照组比较,患者组CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值均降低,而CD3+T细胞和CD8+T细胞百分率差异无显著性(P0.05)。CD4+CD25highTreg细胞与HBV DNA取对数后成正相关(r=0.782,P0.001),与谷丙转氨酶(ALT)成正相关(r=0.432,P0.005);与CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平及CD4+/CD8+比值均无相关性(P0.05)。CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及CD4+/CD8+比值与HBV DNA载量之间亦无相关性(P0.05)。结论:慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞增高,且与HBV的复制水平及ALT增高具有一致性,而T细胞亚群是否可作为监测CHB患者免疫状态的指标需进一步探讨。     

CD45RA／CD45RO临床研究进展

目的：探讨CD45RA／CD45RO的研究现状从而有效的指导临床工作。方法：查阅近年来国内外CD45RA／CIM5RO的相关文献，对其最新研究进行总结。结果：作为跨膜酪氨酸磷酸蛋白酶，CIM5RA／CD45RO在哺乳动物淋巴细胞信号传导、增殖和活化中有重要作用，是区分初始和记忆T细胞的重要标志。结论：CD45RA／CD45RO的检测在人类自身免疫疾病和病毒感染性疾病的诊断方面有重要意义。     

CD55、CD59、CD34对AA-PNH早期诊断研究应用

目的：探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障．阵发性血红蛋白尿综合征(AA-PNH)的早期诊断中的价值，寻找AA-PNH早期诊断敏感指标，进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的。方法：应用流式细胞仪测定AA-PNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变化关系，并与PNH、AA等疾病组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原相互变化关系，经过统计学处理，找出相关性。结果：结果表明AA—PNH、PNH CD55、CD59、CD34抗原较AA及其他疾病组及正常对照组明显减低，并与溶血试验中溶血程度呈正相关，且早于其他溶血指标。结论：CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH、AA-PNH综合征早期诊断最敏感指标，并与预后转归密切相关。     

B cells in the aged: CD27, CD5, and CD40 expression

Ageing is characterized by numerous changes in lymphocyte subpopulations. In the present paper we have focused on B cells carrying the surface markers CD27, CD5 and CD40. CD27 is considered a marker of primed (memory) cells and its engagement promotes the differentiation of memory B cells into plasma cells. CD5 is expressed on B1 cells, which are considered to be responsible for T cell-independent antibody production other than autoantibodies. The CD40 molecule binds CD40L (CD154) and is necessary for T-dependent antibody responses. Here we show that the absolute number of CD5+ and CD40+ B cells is decreased in the elderly, while CD27+ B lymphocytes only marginally decrease in centenarians. However, there is a decrease of the percentage of CD5+ B cells, an increase of CD27+ B cells, while CD40 does not change significantly. These data, together with the increased number of NK cells during aging, suggest different regulation of antibody production in the elderly which might be another example of immune remodeling with aging, based on interactions between human B and NK cells.     

A CD44 monoclonal antibody differentially regulates CD11a/CD18 binding to intercellular adhesion molecules CD54, CD102 and CD50

We have made a monoclonal anti-CD44 antibody which is able to activate the leukocyte integrin CD11a/CD18. Activated T cells strongly aggregated, and the aggregation was shown to be intercellular adhesion molecule (ICAM)-1 (CD54) and ICAM-2 (CD102) dependent. Using purified ICAM coated on plastic, only binding to ICAM-1 was increased by the CD44 antibody, whereas activation by phorbol ester increased binding to both ICAM-1 and ICAM-3. The binding to ICAM-2 was not affected by either treatment. These findings show that the CD11a/CD18 integrin can be activated in a ligand-specific manner by engagement of CD44.     

CD70 represents the human ligand for CD27

The recently identified CD27 ligand (L) Is a type II transmembranemolecule with significant structural homology to tumor necrosisfactor (TNF)-, TNF-ß, lymphotoxin ß, CO40L,and CD30L. Using a CD27L specific mAb we examined the tissuedistribution of the molecule, and found Its expression to berestricted to B cells in occasional germinal centers, stromalcells in the thymic medulla, and scattered T cells in tonsils,skin and gut. As the limited expression of CD27L closely resembledthe reported distribution of the activation antigen CD70, wetested whether CD70 represents the human CD27L. CD70 mAb werefound to react with CD27L-expressing transfected mouse fibroblasts.Moreover a number of CD70 mAb could specifically interfere withthe cellular binding of CD27L mAb. Thus, CD70 Is Identical tothe human CD27L.     

The role of CD40 and CD154/CD40L in dendritic cells

In this review, we focus on the function of CD40–CD40L (CD154) interactions in the regulation of dendritic cell (DC)–T cell and DC–B cell crosstalk. In addition, we examine differences and similarities between the CD40 signaling pathway in DCs and other innate immune cell receptors, and how these pathways integrate DC functions. As research into DC vaccines and immunotherapies progresses, further understanding of CD40 and DC function will advance the applicability of DCs in immunotherapy for human diseases.     

Soluble CD40 ligand induces expression of CD25 and CD23 in resting human tonsillar B lymphocytes

In this report, we describe the dose-dependent increase in both CD25 and CD23 levels on resting human B cells in response to CD40 ligation, as mediated by soluble CD40 ligand (sCD40L) or anti-CD40 antibody. In combination with interleukin (IL)-4, sCD40L had limited additive effects on CD25 expression, but significantly enhanced CD23 expression on tonsillar B cells. Interferon-γ (IFN-γ) exerted no inhibitory effect upon increases in CD25 or CD23 driven by CD40 ligation with sCD40L or anti-CD40 antibody. These data suggest that the induction of CD25 and CD23 genes by IL-4 is mediated, at least in part, by an IFN-γ-sensitive component, whereas gene activation driven via CD40 ligation involves signaling pathways which are not sensitive to IFN-γ.     

CD4~+CD25~+CD127~(low)识别人外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg 细胞的最佳标记物.方法:以 52 名健康人和 47 名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞,并以经典指标CD4+CD25high 和 CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+ Treg 细胞的可行性及其优势.结果:健康人和肿瘤患者外周血 CD4+CD25high、CD4+ CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CDl27+lowT 细胞占CD4+T 细胞百分比分别为(1.769±O.682)%和(2.958±1.392)%;(2.905±1.772)%和(5.128±2.227)%以及(5.396±1.306)%和(7.175±2.565)%.三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05).用两种不同标记法高纯度分选CD4+ CD25high 和 CD4+CD25+CD127lowT 细胞群后,FoxP3 阳性率分别为90.9%和92.7%.结论:CD4+CD25+CD127low 三标记法可以帮助识别 CD4+CD25+Treg 和部分激活的 CD4+T 细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg 细胞更理想的指标.     

隐匿型肾小球肾炎外周血CD44、CD54、CD62P的表达及意义

目的:探讨隐匿型肾小球肾炎外周血粘附分子CD44、CD54、CD62P的表达与疾病的关系。方法:采用流式细胞全血免疫荧光直标术对25例隐匿型肾小球肾炎患者外周血进行CD44、CD54、CD62P标记后,上流式细胞仪检测。结果:隐匿型肾小球肾炎患者外周血CD44、CD54、CD62P的表达显著高于正常对照(P<0.01),而且肉眼血尿组CD44、CD54、CD62P的表达显著高于尿检异常组(P<0.01)。结论:黏附分子CD44、CD54、CD62P可能介导和参与了隐匿型肾小球肾炎的发生及发展过程,外周血粘附分子CD44、CD54、CD62P的检测可为临床隐匿型肾小球肾炎的诊断和治疗提供分子依据。     

浆细胞CD45和CD31的表达与多发性骨髓瘤细胞分化程度的关系

目的: 了解反映多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的免疫标记在骨髓不同阶段浆细胞中的表达情况,为临床调整治疗策略和判断疾病病程及预后提供依据。方法: 用流式细胞术检测MM患者及对照组浆细胞表面相关分化抗原的表达情况,分析其在良、恶性浆细胞表达的差异,及其与原始浆细胞比例的相关性。结果: MM患者浆细胞CD45和CD31表达率低于对照组浆细胞; MM细胞 CD45和CD31的表达率与原始浆细胞比例呈负相关;CD45表达与CD31表达呈现正相关。结论: 浆细胞CD45和CD31的表达率与MM细胞的分化程度呈正相关,其表达可能与MM的疾病进展有一定关系。