兔左右心室心外膜下细胞瞬间外向钾电流的异质性

目的:研究兔左心室和右心室心外膜下(epi)细胞复极1期瞬间外向钾电流(Ito1)的异质性。方法:以酶解分离方法获得兔左、右心室epi细胞,应用膜片钳全细胞记录技术定量观察左、右心室epi细胞Ito1的电压依赖性和峰值密度。结果:左、右心室epi细胞的Ito1均呈明显的电压依赖性。在测试电压为0mV和+60mV时,左、右心室epi细胞峰值Ito1密度分别为1.57pA/pF、5.52pA/pF(左心室)和2.44pA/pF和8.99pA/pF(右心室),并且在+10mV至+60mV的测试电压范围内,右心室epi细胞峰值Ito1密度均显著高于左心室epi细胞(P<0.05或P<0.01)。结论:兔右心室epi细胞峰值Ito1密度显著高于左心室epi细胞,这种电异质性分布可能为Brugada综合征等疾病致恶性心律失常的重要离子基础之一。     

普罗帕酮对豚鼠左心室流出道自律细胞与心室肌细胞电生理效应影响

目的:探讨普罗帕酮对心脏左心室流出道自律细胞与心室肌细胞电生理效应的影响。方法:应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术,观察普罗帕酮对豚鼠左心室流出道自律细胞与心室肌细胞动作电位0相幅值(APA),最大除极速率(Vm ax),动作电位时程(APD),50%复极化时间(D50),90%复极化时间(D90)以及左心室流出道自律细胞最大除极速率(Vm ax)与自发电活动频率(HR)。结果:①用0.5μm o l/L的普罗帕酮灌流后与正常对照组相比左心室流出道自律细胞自发电活动频率(HR)显著下降(P<0.01);②用1μm o l/L的普罗帕酮灌流后与正常对照组相比左心室流出道自律细胞动作电位0幅值(APA)下降(P<0.05),动作电位时程(APD)及50%复极化时间(D50)升高(P<0.05),自发电活动频率(HR)显著下降(P<0.01);用1μm o l/L的普罗帕酮灌流对心室肌细胞的电生理效应影响并不明显。③用5μm o l/L的普罗帕酮灌流后左心室流出道自律细胞电生理活动减弱或消失;用5μm o l/L的普罗帕酮灌流后与正常对照组相比对心室肌细胞动作电位0幅值(APA)下降(P<0.05),动作电位时程(APD)及50%复极化时间(D50)升高(P<0.05)。④用10μm o l/L的普罗帕酮灌流后与正常对照组相比对心室肌细胞动作电位0幅值(APA)下降(P<0.05),动作电位时程(APD)明显升高(P<0.01),50%复极化时间(D50)及90%复极化时间(D90)升高(P<0.05)。结论:普罗帕酮能抑制左心室流出道自律细胞与心室肌细胞的动作电位0幅值,延长动作电位时程;使左心室流出道自律细胞自发电活动频率下降。     

间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义

目的:探讨间充质干细胞成血管因子受体表达特征及其意义。方法:采用经典的全骨髓贴壁法培养骨髓源间充质干细胞(MSC),通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞分析其表面标记(CD34、CD90、CD29)等鉴定MSC特征;以P1-P17MSC为实验材料,利用RT-PCR的方法检测PDGFR、VEGFR和NRP1的表达。利用Transwell体外迁移体系初步探索VEGF在MSC迁移中的作用,同时利用MTT法评价VEGF对MSC增值的作用。结果:培养的MSC呈现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;强表达PDGFR-β和NRP1、不表达VEGFR(Flk1和Flt1)和PDGFR-α,VEGF促进了MSC的增殖和迁移。结论:VEGF可能通过PDGFR-NRP1促进了MSC的增值和迁移。     

去大脑僵直动物实验方法的改进

去大脑僵直是生理实验教学中学生自做的实验之一，通过不同脑水平横断后，引起全身肌紧张的改变，以加强学生对肌紧张中枢调节机制的认识。传统的实验方法是在动物的上下丘之间横断脑干，但在暴露该部位时出血量多，动物死亡率高，影响实验效果。针对这一问题，我们对实验...     

卡维地洛对家兔心肌梗死后心室肌跨壁离散度的影响

目的:探讨口服卡维地洛对急性心肌梗死(AMI)后梗死区心室肌细胞的单相动作电位时限(MAPD)和有效不应期(ERP)及跨室壁复极离散度(TDR)和跨室壁不应期离散度(TDERP)变化的影响。方法:40只家兔随机分为单纯梗死组(n=20)和卡维地洛组(n=20)。两组动物开胸后结扎左冠状动脉前降支造成左心室前壁心肌梗死,卡维地洛组于手术当天开始口服卡维地洛(Carvedial,0.33mg/kg·d)。结合单相动作电位记录技术和程控电刺激技术,测定梗死前、梗死后10min、30min、1h、1d,在梗死区同一位点测定心内膜(Endo)、中层(Mid)、心外膜层(Epi)3层心肌MAPD90和ERP,并计算TDR和TDERP。结果:梗死前,卡维地洛组与单纯梗死组比较MAPD90、ERP、TDR、TDERP之间无显著差异。梗死后10min、30min、1h、1d,卡维地洛组3层心肌MAPD90,ERP与单纯梗死组比较均延长,以MAPDmid90延长最为显著,TDR,TDERP与单纯梗死组比较减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卡维地洛可减小梗死后心室肌TDR,TDERP增大程度,减少AMI后发生恶性室性心律失常。     

离子通道阻断剂对家兔左心室流出道的电生理效应

目的:研究左心室流出道自律性及其电生理特性。方法:本实验利用常规的玻璃微电极细胞内记录技术,观察了常规离子通道阻断剂对离体家兔左心室流出道慢反应自律细胞的电生理特性的影响,重点探讨了该部位自律细胞的0期、4期去极离子流。结果:1用1.2mmol/L河豚毒(TTX)使动作电位幅值(APA)、0期最大除极速率(Vmax)与给药前相比明显减小(P<0.05),舒张期除极速率(VDD)和自发放电频率(RPF)均明显减慢(P<0.01);2用0.5μmol/L维拉帕米(VER)灌流后APA、Vmax、最大舒张电位(MDP)绝对值、VDD、RPF均明显下降,复极90%时间(APD90)延长(P<0.05);3用120μmol/L氯化镍(NiCl2)灌流,VDD明显下降,APA、Vmax、RPF也显著降低;4给予2mmol/L4-氨基吡啶(4-AP)后VDD明显增快,MDP绝对值、APA、Vmax显著下降,APD90明显延长(P<0.05);5给予1.5mmol/L氯化铯(CsCl)后VDD及RPF均明显变慢(P<0.05)。结论:1Ca2+流为兔左心室流出道自律细胞0期去极主要离子流,并有少量Na+内流参与;24期自动除极以K+外流衰减为主,另外,ICa-T、ICa-L及If在起搏电流中也起一定作用。     

犬心外膜在体心肌复极异质性的研究

应用先进的Fanz接触MAP记录技术研究犬左室心外膜室间隔、心尖部、侧壁和后基底部的复极异质性。结果表明:(1)各MAPD_(90)间,室间隔比后基底部显著延长;(2)各AT间,室间隔和心尖部较后基底部显著缩短;(3)各RT间无显著差异。提示心外膜复极存在异质性。     

经胸壁起搏心室的动物实验

用涂有绝缘漆的针灸针作起搏电极 ,经胸壁皮肤刺入右心室心外膜下起搏心室。实验表明 ,当针尖达到心外膜下、心室腔不同位置时 ,记录到的体表心电图 QRS波群有明显不同。针尖不位于心外膜下时 ,起搏心室是困难的 ,即使是高起搏电压也不能奏效。作者认为这可能是由于起搏电流在心肌以外短路 ,而未能达到心室肌细胞起搏阈电压的结果 ,从而提示了临床用注射针头经胸壁起搏心室不成功的可能原因。     

H2S对豚鼠左心室流出道自律细胞电活动的影响※

目的:探讨硫化氢(H2S)对豚鼠左心室流出道自律细胞电生理特性的影响.方法:用标准微电极细胞内记录技术,观测硫化氢对左心室流出道自发慢反应电位的影响.观测指标:最大舒张电位(MDP)、动作电位幅度(APA)、0相最大去极速度(Vmax)、4相自动去极速度(VDD)、复极80%和90%时间(APD80and APD90)以及自发放电频率(RPF).结果:①50μmol/LNaHS灌流后,RPF和VDD减慢(P＜0.05).②100μmol/LnaHS与对照组比较,除使RPF和VDD减慢(P＜0.01)外,APA显著减小(P＜0.01).③200μmol/L NaHS与对照组比较,除使RPF和VDD减慢(P＜0.01)外,APA显著减小(P＜0.01)、MDP的绝对值显著减小(P＜0.05)、APA显著减小(P＜0.01).200μmol/L与50μmol/LNaHS比较,RPF、VDD显著减慢(P＜0.01)、APA显著减小(P＜0.01)、MDP的绝对值显著减小(P＜0.05).④400μmol/L NaHS与对照组比较,除使RPF和VDD减慢(P＜0.01)外,APA显著减小(P＜0.01)、MDP的绝对值显著减小(P＜0.01)、APA显著减小(P＜0.01).400μmol/L与50μmol/LNaHS比较,RPF、VDD显著减慢(P＜0.01)、APA和MDP的绝对值显著减小(P＜0.01).400μmol/L NaHS与100μmol/LNaHS比较,APA和MDP的绝对值显著减小(P＜0.01).结论:H2S可降低左心室流出道组织的自律性.     

心室-动脉耦联机制及相关影响因素研究进展

心室-动脉耦联是指心脏功能与外周血管功能的相互匹配关系。通过调整相匹配的动脉性能,即使在病理状态下,心脏仍能为外周器官提供充足的血液。目前,对心室-动脉耦联的研究主要集中于心、肺疾病及循环休克等领域,本文就心室-动脉耦联的机制、在这些领域的研究进展及影响因素进行归纳总结。     

多形性室性心动过速的临床表现及治疗（附12例报告）

报道12例多形性室性心动过速（PVT）患者，其中冠心病8例，感染性休克2例，家族性QT延长综合症1例，乙胺碘呋酮作用1例，临床心电图检查有9例伴QT延长；3例QT正常，治疗原则为除去病因，治疗原发病,中止PVT发作，并就MgSOR，异丙肾上腺素和电复律对PVT的作用进行了讨论。     

当归对~(60)Co-γ射线照射后家兔染色体作用的研究

本文采用当归对辐射损伤的家兔进行腹腔注射,引起家兔染色体畸变率明显下降,连续注射9天,家兔染色体畸变率完全恢复正常。体外用药实验结果与体内注射结果相同。     

敌枯双慢性毒性实验的病理形态学研究——实验大鼠脏器组织病理变化

将150只SD大鼠随机地分成Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ四个实验组和一个对照组(Ⅴ)。实验组敌枯双剂量分别为1.0,0.2,0.05及0.01mg/kg,均用去离子水配成相应浓度的染毒水,由动物自由摄取,对照组摄入去离子水。于实验第29.5,55周分两批处死。经组织病理学检查,结果发现:敌枯双可引起甲状腺滤泡上皮细胞萎缩甚至脱屑,其发生率(Ⅲ组为63.64%)与对照组(0%)比较差异有高度显著性(P<0.01);睾丸曲细精管各级生精细胞减少、萎缩甚至完全消失,其发生率(Ⅳ组为58.33%)与对照组(8.33%)比较差异有显著性(P<0.01);对心肌、肝组织也有不同程度的损伤.     

心腔内粘液瘤的诊治（附18例报告）

心腔粘液瘤１８例，其中左心房粘液瘤１６例，右心房及左心室粘液瘤各１例。所有病例均经超声心动图（ＵＣＧ）诊断，全麻体外循环下胸骨正中切口入路，经房间沟、右房、左房或房间隔切开完成手术。为防止肿瘤组织脱落造成周围血管栓塞，术中除了轻柔的操作，并采用负压抽吸法将瘤体较完整地吸入到心脏切口外针筒内，然后从基底部切除粘液瘤。１８例患者无１例发生手术后栓塞。     

组织胺对小鼠Lewis肺癌生长和转移抑制作用的病理学研究

通过组织胺（Ｈｔ）对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）生长和转移的抑制作用实验研究，现在了Ｈｔ对小鼠ＬＬＣ癌细胞酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性的影响以及ＬＬＣ的病理形态的改变，结果发现Ｈｔ能明显抑制ＬＬＣ细胞ＡＣＰ活性。组织学观察可见Ｈｔ处理后ＬＬＣ中心坏死率高，且中心坏死区大，并出现显著的周边坏死。而这种坏死在对照组ＬＬＣ组织中未曾发生。电镜观察发现Ｈｔ处理后小鼠ＬＬＣ细胞出现不同程度的变性，以致坏死。表明Ｈｔ对小鼠ＬＬＣ具有直接的破坏作用。     

Fura－2荧光测定中药有效成分对神经细胞内Ca~（2＋）浓度的变化

将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育，应用新型钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定神经细胞内游离Ｃａ２＋浓度变化。结果表明，上述中药有效成分均能影响胞内Ｃａ２＋释放和胞外Ｃａ２＋内流。从而有效地保护神经元免受兴奋性毒性作用     

敌枯双慢性毒性实验的病理学研究——大鼠甲状腺和肝超微结构的改变

本实验用敌枯双按不同剂量(1.0、0.2、0.05、0.01 mg/kg/d)配成不同浓度的溶液分别供4个剂量组的 SD 大鼠(每组30只)饮用,并设对照组(30只,仅饮用去离子水)。在第55周处死动物,每组随机选3～5只取甲状腺、肝脏作电镜观察。结果:4个剂量组大鼠甲状腺滤泡腔扩大,滤泡细胞变扁平,粗面内织网扩张呈囊状,线粒体肿胀,嵴变短而少,核膜内陷,异染色质凝集呈板或染色质边集;部分滤泡上皮细胞脱屑到滤泡腔内,可见畸形核、裸核及核碎裂。肝细胞线粒体呈“O”形,“C”形,粗面内织网呈囊状扩张,大滴脂肪变,核染色质边集,核均质化。实验表明敌枯双对甲状腺、肝组织均有毒性作用,超微结构改变程度与农药剂量呈正相关。     

儿童腺样体肥大A／N比值测量与手术对照分析（附134例报告）

目的回顾性总结儿童腺样体肥大的x线鼻咽侧位平片表现,评价测量腺样体/鼻咽腔（A／N）比值的临床应用价值。方法收集经临床及手术刮除,病理证实的腺样体肥大134例,男92例,女42例。均常规摄吸气期鼻咽侧位平片和测量A／N比值。结果134冽均为鼻咽顶后壁软组织增厚,鼻咽腔变窄;A／N比值0．6—0．7有32例,占24％;A／N比值0．7以上有102例,占76％。本组手术的134例中没有A／N比值〈0．6。结论（1）摄吸气时的鼻咽侧位片是观察腺样体肥大的简单而准确的方法。（2）测量A／N比值用以观察腺样体肥大的程度,A／N比值≤0．60为正常范围,0．6—0．7为腺样体中度肥大,0．70以上者为腺样体重度肥大。（3）测量A／N对选择腺样体刮除术具有一定的临床价值。     

Inhibition of N-methyl-D-aspartate-activated current by bis(7)-tacrine in HEK-293 cells expressing NR1/NR2A or NR1/NR2B receptors

In normal rat forebrain, the NR1/NR2A and NR1/NR2B dimmers are the main constitutional forms of NMDA receptors. The present study was carried out to determine the functional properties of the heteromeric NMDA receptor subunits and their inhibition by bis(7)-tacrine (B7T). Rat NR1, NR2A and NR2B cDNAs were transfected into human embryonic kidney 293 cells (HEK-293).The inhibition of NMDA-activated currents by B7T was detected in HEK-293 cell expressing NR1/NR2A or NR1/NR2B receptors by using whole-cell patch-clamp techniques. The results showed that in HEK-293 cells expressing NR1/NR2A receptor, 1μmol/L B7T inhibited 30μmol/L NMDA- and 1000μmol/L NMDA-activated steady-state currents by 46% and 40%, respectively (P>0.05; n=5), suggesting that the inhibition of B7T on NR1/NR2A receptor doesn’t depend on NMDA concentration, which is consistent with a non-competitive mechanism of inhibition. But for the NR1/NR2B receptor, 1μmol/L B7T inhibited 30μmol/L NMDA- and 1000 μmol/L NMDA-activated steady-state currents by 61% and 13%, re-spectively (P<0.05; n=6), showing that B7T appears to be competitive with NMDA. In addition, simultaneous application of 1μmol/L B7T and 1000μmol/L NMDA produced a moderate inhibition of peak NMDA-activated current, followed by a gradual decline of the current to a steady state. However, the gradual onset of inhibition produced by B7T applied simultaneously with NMDA was eliminated when B7T was given 5s before NMDA. These results suggested that B7T inhibition of NMDA current mediated by NR1/NR2B receptor was slow onset, and it did not depend on the presence of the agonist. With holding potentials ranging from -50 to +50 mV, the B7T inhibition rate of NMDA currents didn’t change significantly, and neither did the reversal potential. We are led to conclude that the NR1/NR2B recombinant receptor can serve as a very useful model for studying the molecular mechanism of NMDA receptor inhibition by B7T.     

PRAK不同突变体的构建、表达及细胞内定位的研究

目的:构建p38调节/激活蛋白激酶(PRAK)不同突变体的绿色荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞中表达后,观察这些突变体在细胞内的定位情况.方法:将克隆在绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上的野生型PRAK通过定点突变技术构建其无活性突变体PRAK(T182A)、活性突变体PRAK(T182D)、无激酶活性突变体PRAK(KM)、核定位信号缺失突变体PRAK(NLSm)及核输出信号缺失突变体PRAK(NESm),随后转染NIH3T3细胞,并在荧光显微镜下观察其表达和细胞内定位情况.结果:经测序鉴定各种PRAK不同突变体正确无误后,在NIH3T3细胞中得到高量表达;融合蛋白发出的绿色荧光表明,在静息状态下,野生型PRAK(WT)、PRAK(182A)、PRAK(182D)、PRAK(KM)和PRAK(NESm)主要分布于细胞核内,而PRAK(NLSm)在细胞中均匀分布;在受到NaAsO2刺激后,PRAK(WT)和PRAK(KM)移位出核,而PRAK(182A)、PRAK(182D)和PRAK(NESm)失去了移位出核的能力,PRAK(NLSm)则与刺激前无明显差异.结论:成功构建了PRAK不同突变体的绿色荧光蛋白融合表达载体并在真核细胞中进行了表达,且不同的突变体能够影响PRAK的细胞内定位.