大鼠脑缺血再灌注后线粒体ATP酶活性、形态学变化及丹参多酚酸的保护作用

目的观察注射用丹参多酚酸对大鼠脑缺血再灌注损伤后线粒体ATP酶活性、及形态学的影响。方法将54只雄性SD大鼠随机分成3组(n=18):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、丹参多酚酸组(Salvianolate组)。HE染色法观察大脑神经元的组织病理学变化;TTC染色检测脑梗死体积;分光光度计发法线粒体丙二醛含量和线粒体Na~+/K~+ATP酶、Ca~(2+)ATP酶、Mg~(2+)ATP酶活性。结果假手术组大鼠脑组织红染,未见梗死灶;丹参多酚酸组神经细胞变性坏死程度、脑梗死面积较缺血再灌注组明显减轻;与缺血再灌注组相比,丹参多酚酸组线粒体丙二醛含量下降(P0.05)和线粒体Na~+/K~+ATP酶、Ca~(2+)ATP酶、Mg~(2+)ATP酶活性升高(P0.05)。结论注射用丹参多酚酸对缺血再灌注损伤有保护作用,其机制与提高线粒体ATP酶活性有关。     

开放线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的　研究开放线粒体 ATP敏感性钾通道对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。方法　采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,将 38只大鼠随机分成 4组 :假手术组 (S)、缺血组 (I)、缺血 二氮嗪组 (D)、缺血 二氮嗪 5 - HD组 (DH)。观察各组脑梗死体积和线粒体标志酶活性变化。结果　与 I组比较 ,D组脑梗死体积明显减少 (自 2 3.5 7± 7.83%减至 8.16± 3.81% ) ,线粒体标志酶活性明显增高 ,差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,DH组与 I组比较无明显差异 (P>0 .0 5 )。结论　二氮嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ,其机制与开放线粒体 ATP敏感性钾通道 ,维护线粒体功能有关     

灯盏花素对大鼠颅脑损伤脑组织线粒体ATP酶活性的影响

目的 探讨灯盏花素对创伤性颅脑损伤后脑组织线粒体ATP酶活性水平的影响。方法 建立自由落体脑挫裂伤模型,伤后立即腹腔注射灯盏花素注射液,采用生化检测的方法分别测定伤后4h、24h和48h及各自的对照组大鼠脑组织线粒体ATP酶活性水平。结果 颅脑损伤后大鼠脑组织线粒体Na~ -K~ ATP酶,Ca~(2 )-ATP酶及Mg~(2 )-ATP酶活性均明显下降(P<0.05),灯盏花素治疗后24h和48h脑组织线粒体ATP酶活性均高于各自时间点对照组(P<0.05)。结论 灯盏花素可以通过影响线粒体功能而减轻创伤性颅脑损伤后的继发性脑损害,从而改善预后。     

缺血后处理对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤线粒体的影响

目的观察缺血后处理(I-Post)对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤线粒体超微结构和功能的影响,探讨I-Post诱导的脑保护的可能机制。方法采用链脲佐菌(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,在此基础上通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注模型。SD糖尿病大鼠随机分为4组(n=10),空白对照组、假手术组、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(I-Post组)。于缺血90min再灌注6h后电镜下观察线粒体超微结构、测定缺血侧脑组织线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、Na+/K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性。结果缺血后处理能明显减轻I/R引起的线粒体超微结构的损伤,提高线粒体SOD、GSH-Px、Na+/K+-ATPase和Ca2+-ATPase的活性(P<0.05或0.0),降低MDA的含量(P<0.05)。结论线粒体可能在I-Post诱导的脑保护中起关键性作用,I-Post诱导的脑保护机制可能与SOD、Na+/K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和GSH-Px活性增加有关。     

3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。方法采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将52只大鼠随机分成4组:假手术组、缺血组、3-硝基丙酸预处理组、3-硝基丙酸预处理+5-羟癸酸盐组,并观察各组脑梗死体积和线粒体标志酶活性变化。结果与缺血组比较,3-硝基丙酸预处理组脑梗死体积明显减少[自(22.89±6.97)%减至(9.68±2.05)%],线粒体标志酶活性明显增高,差异具有显著性(P<0.01),而3-硝基丙酸预处理+5-羟癸酸盐组与缺血组比较无明显差异(P>0.01)。结论3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机理与开放线粒体ATP敏感性钾通道、维护线粒体功能和提高其耐受性有关。     

巴曲酶对脑缺血再灌注后海马ATP酶活性的影响

脑缺血后Na~+,K~+-ATPase,Ca~(2+)-AT-Pase活性的改变是神经元缺血后继发损伤的重要环节。如果能预防或减轻因缺血及复灌引起Na~+、K~+-ATPase、Ca~(2+)-ATPase活性的改变,则有可能防止神经原细胞膜的进一步损伤。研究表明,巴曲酶(Batroxobin)能明显抑制沙土鼠脑缺血引起的细胞外兴奋性氨基酸水平的增高,减轻缺血后继发性兴奋性损伤。减少缺血再灌后自由基的生成,提高     

脑缺血时钙稳态与钙泵(Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶)活性变化

在兔MCAO局灶脑缺血动物模型上,测定缺血后不同时限脑组织水、Ca~(2+)含量和钙泵(Ca~(2+),Mg~(2+)—ATP酶)活性变化。结果发现缺血早期2h组钙泵活性较假手术对照组下降近30％(P<0.05),并随时相递减。同期缺血脑组织水、Ca~(2+)含量随时相递增。本文系国内外首次报道脑缺血时钙泵活性改变,认为脑缺血后早期出现钙稳态失调,细胞内钙超载可能与钙泵功能抑制有关。     

3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用。方法:采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将38只大鼠随机分成4组,假手术组、缺血组、3-硝基丙酸预处理组、3-硝基丙酸预处理+5-羟癸酸盐组。观察各组脑梗死体积和线粒体标志酶活性变化。结果:与缺血组比较,3-硝基丙酸预处理组脑梗死体积明显减少(自23.57±7.83％减至10。50±2.37％),线粒体标志酶活性明显增高,差异具有显著性(P0.01)结论:3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机理与开放线粒体ATP敏感性钾通道,维护线粒体功能和提高其耐受性有关。     

强直性肌营养不良症的红细胞膜ATP酶的研究

对13例MyD病人和13例健康人的红细胞膜的Na~+-K~+ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶进行测定,发现两组的Na~+-K~+ATP酶活力无显著区别,且均可被乌本苷抑制,而MyD组的Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶活力则高于对照组。证明在MyD中存在膜的缺陷,推测Ca~(2+)-Mg~(2+)ATP酶活力改变与细胞内高钙水平有关。     

急性脑梗塞病人的红细胞膜ATP酶活性变化和自由基损伤

测定33例急性脑梗塞病人的红细胞膜Na~ K~-ATP酶和Ca~(2 )Mg~(2 )-ATP酶活性及血浆MDA含量,红细胞SOD活性,与29例正常老年人作比较,发现急性脑梗塞病人的红细胞膜Na~ K~ -ATP酶和Ca~(2 )Mg~(2 )-ATP酶活性均降低,而血浆MDA含量升高,红细胞SOD活性下降。说明急性脑梗塞病人存在红细胞功能受损和自由基损害。这些变化的研究,对于进一步探讨脑梗塞的病理生理及其防治可能具有重要意义。     

硫酸镁对大鼠急性脑缺血再灌注损伤时ATP酶的影响

目的　探讨镁剂在动物实验性急性脑缺血再灌注 (cerebral ischemia-reperfusion,CIR)过程中对 ATP酶的影响。方法　选用 Wistar大鼠 ,按改良的 Pulsinelli法建立了大鼠颈总动脉 CIR损伤模型 ;CIR损伤 1 5 min后 ,断髓处死鼠 ,取额叶脑组织测定 ATP酶含量。结果　急性 CIR早期 ,脑中 Na -K -ATP酶活性降低极显著(P <0 .0 1 ) ,Mg2 -ATP酶和 Ca2 -ATP酶活性降低显著 (P <0 .0 5 ) ;预先应用 Mg SO4 能稳定 ATP酶的活性(Mg2 -ATP酶 ,P <0 .0 1 ;Ca2 -ATP酶、Na -K -ATP酶 ,P <0 .0 5 )。结论　 Mg SO4 对大鼠 CIR损伤的脑保护作用与防止脑内多种 ATP酶活性降低有关。     

异丙酚对大鼠脑缺血再灌注损伤线粒体能量代谢的影响

目的 探讨静脉麻醉药异丙酚对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经保护作用.方法 SD大鼠48只按随机数字表法分为假手术组、模型组、50 mg/kg异丙酚和100 mg/kg异丙酚组,每组12只.后3组大鼠均制备脑缺血(2 h)再灌注(24 h)模型,恢复灌注后分别经腹腔内注射等体积生理盐水和50、100 mg/kg异丙酚.再灌注24 h后对大鼠进行神经功能缺损评分,应用TTC染色观察脑梗死的范围,化学比色法检测脑组织线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的改变.结果 与模型组比较,50、100mg/kg异丙酚组大鼠神经功能缺损评分较低,脑组织线粒体SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶活性增高,差异有统计学意义(P＜0.05);与50mg/kg异丙酚组[(45.9±25.1)U/mg pro,(5.24±0.85)分]比较,100mg/kg异丙酚组SDH活性[(96.1±20.8)U/mgpro]较高,神经功能缺损评分(4.40±0.79)较低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论异丙酚对脑缺血再灌注损伤大鼠具有神经保护作用,促进线粒体SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶活性的恢复、保护线粒体功能是其机制之一.     

The effects of the pre-treatment of intravenous nimodipine on Na(+)-K+/Mg+2 ATPase, Ca+2/Mg+2 ATPase, lipid peroxidation and early ultrastructural findings following middle cerebral artery occlusion in the rat

Excessive calcium influx has been implicated in the pathophysiology of ischemic cerebral damage. The effects of nimodipine, a calcium antagonist, on the Na(+)-K+/MG+2 ATPase activity, Ca+2/Mg+2 ATPase, lipid peroxidation, and early ultrastructural findings were examined at the acute stage of ischemia in the rat brain. Ischemia was produced by permanent unilateral occlusion of the middle cerebral artery. In Group I, the rats which had no ischemia and not received medication were used for determining Na(+)-K+/Mg+2 ATPase, Ca+2/Mg+2 ATPase, the extent of lipid peroxidation by measuring the malondialdehyde content and normal ultrastructural findings. In Group II, the rats which had only subtemporal craniectomy without occlusion and received saline solution were used for determining the effect of the surgical procedure on the biochemical indices and ultrastructural findings. In Group III, the rats received saline solution following the occlusion in the same amount of nimodipine and in the same duration as used in Group IV. In Group IV, nimodipine pre-treatment 15 min before occlusion (microgram kg-1 min-1 over a 10 min period) was applied i.v. Na(+)-K+/Mg+2 ATPase and Ca+2/Mg+2 ATPase activities decreased significantly and promptly as early as 10 min and remained at a lower level than the contralateral hemisphere in the same group and at the normal level in Group I. Nimodipine pre-treatment immediately attenuated the inactivation of Na(+)-K+/Mg+2 ATPase (p < 0.05) but there was no change on Ca+2/Mg+2 ATPase activity (p < 0.05). Malondialdehyde content increased significantly in Group III following ischemia as early as 30 min. Nimodipine pre-treatment decreased the malondialdehyde level in Group IV (p < 0.05). This study supports the possibility that nimodipine pre-treatment effects the membrane stabilizing properties via inhibiting the lipid peroxidation and subsequently restoring some membrane bound and lipid dependent enzymes' activity such as Na(+)-K+/Mg+2 ATPase and the ultrastructural findings.     

Na+-K+-Cl- cotransporter in rat focal cerebral ischemia.

In cultured neurons, the authors previously demonstrated that the Na+-K+-Cl- cotransporter is significantly stimulated by elevated extracellular potassium and glutamate, which are important factors in cerebral ischemic damage. These findings led the authors to hypothesize that stimulation of the cotransporter after ischemia might result in Na+, K+, and Cl- influx, and might contribute to neuron damage. In the current study, the authors investigated such a role of the Na+-K+-Cl- cotransporter in focal cerebral ischemia. Cerebral ischemia was induced by 2-hour occlusion of the left middle cerebral artery (MCA) and 24-hour reperfusion in male spontaneously hypertensive rats (SHRs). Immunocytochemical staining and immunoblotting revealed an up-regulation of expression of the cotransporter protein in neurons in cortex at 24 hours of reperfusion. Artificial cerebral spinal fluid (aCSF) or 100 micromol/L bumetanide (a cotransporter inhibitor) in aCSF were continuously microdialyzed through a microdialysis probe into left cortices throughout 2-hour MCA occlusion and 24-hour reperfusion. Compared with the aCSF-treated group, infarction volume was significantly reduced in the bumetanide-treated group (25%, P < 0.05). In addition, brain water content in the bumetanide-treated brains was decreased by 70% (P < 0.05). These results strongly suggest that the Na+-K+-Cl- cotransporter may play an important role in cerebral ischemic neuronal damage.     

丹参多酚酸盐对缺血再灌注损伤大鼠脑组织BDNF和GDNF的影响

目的观察丹参多酚酸盐对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织内脑源性神经营养因子（BDNF）及胶质源性神经营养因子（GDNF）表达的影响,探讨其神经保护作用的机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,SD大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注组、丹参多酚酸盐低剂量治疗组（10mg／kg）和丹参多酚酸盐高剂量治疗组（30mg／kg）,观察各组大鼠的行为学改变,测定脑梗死体积,ELISA法检测脑组织中BDNF和GDNF的含量。结果与缺血再灌组比较,丹参多酚酸盐可以显著降低大鼠神经损伤行为学评分,减少脑梗死体积,增加脑组织内BDNF和GDNF的含量,且呈剂量依赖性。结论丹参多酚酸盐对脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其机制与促进脑组织合成BDNF及GDNF有关。     

短时间诱导高血压对急性脑缺血再灌注大鼠梗死体积的影响

目的探讨在不同缺血时间诱导高血压对急性局部脑缺血再灌注大鼠梗死体积的影响。方法61只年龄30～40周的SD大鼠,随机分为假手术组、缺血组、缺血再灌注组和升压组。通过静脉滴注新福林对升压组动物进行诱导高血压治疗。结果(1)缺血再灌注组的梗死体积大于相应的缺血组。(2)升压组的梗死体积小于缺血再灌注组和缺血4h组。(3)在缺血4h再灌注2h升压组中,再灌注前15min升压组的梗死体积小于再灌注后30min升压组。结论(1)诱导高血压治疗能有效地减少急性脑缺血再灌注大鼠梗死体积。(2)再灌注前升压疗效优于再灌注后升压。     

葛根素预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注线粒体功能的影响

目的观察葛根素对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后线粒体功能的影响。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分成5组(n=8):假手术组、脑缺血-再灌注组、葛根素预处理24h 100mg组、葛根素预处理24h 200mg组和葛根素预处理24h 400mg组,其中葛根素预处理24h组于脑缺血前24h给予相应剂量葛根素腹腔注射行单次预处理,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注模型,缺血90min,再灌注24h后,测定缺血侧海马线粒体内游离MDA、SOD、Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性。结果与脑缺血-再灌注组相比,葛根素预处理-24 h100mg组、葛根素预处理-24h 200mg组及葛根素预处理-24h 400mg组大鼠脑线粒体内MDA含量明显下降,SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性明显升高(P<0.05),而在葛根素预处理3个剂量组间比较差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论葛根素预处理对脑缺血-再灌注后线粒体损伤具有非剂量依赖性保护作用。     

不同发作频度的全身强直—阵挛性发作癫痫患者红细胞膜ATPase活性的研究

目的 探讨不同发作频度的全身强直－阵挛性发作与红细胞膜ATPase活性的关系。方法 对68例全身强直－阵挛性发作患者,按其发作频度分为3组,癫痫持续状态（SE）组26例、癫痫频发（FE)组22例、癫痫发和（EP）组20例及正常对照组35例,进行红细胞膜Na^ /K^ -ATPase、Mg^2 -ATPase、CA^2 -ATPase测定。结果 SE、FE组患者红细胞膜Na^ /K^ -ATPase降低,与EP组、正常对照组比较有极显著差异（P＜0．01）,SE组红细胞膜Mg^2 -ATPase与正常对照组比较有极显著差异（P＜0．01）,SE、FE组红细胞膜Ca^2 -ATPase与正常对照组比较有极显著差异（P＜0．01）,SE组红细胞膜Ca^2 -ATPase与EP组比较有极显著差异（P＜0．01）,SE组红细胞膜Na^ /K^ -ATPase与FE组比较有显著差异（P＜0．05）,SE组红细胞膜Mg^2 -ATPase与EP组比较有显著差异（P＜0．05）,FE组红细胞膜Mg^2 -ATPase与正常对照组比较有显著差异（P＜0．05）,EP组红细胞膜Ca^2 -ATPase与正常对照组比较有显著差异（P＜0．05）。结论 （1）癫痫病人ATPase活性下降与癫痫的发作有一定联系;（2）ATPase活性下降的趋势可以间接反映癫痫发作程度及脑部损害程度;（3）ATPase中Na^ /K^ -ATPase活性下降对癫痫发作的影响最大,Mg^2 -ATPase、Ca^2 -ATPase活性只在SE病人中下降较明显。     

iASPP在大鼠脑缺血再灌注中的表达及其意义

目的 观察p53凋亡刺激蛋白（apoptosis stimulating protein of p53,ASPP）家族的抑制因子（inhibitorymember of the ASPP family,iASPP）在大鼠脑缺血再灌注后的表达及其意义。方法 48只清洁级、成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（8只）和脑缺血再灌注组（40只）。脑缺血再灌注组又分为缺血2h再灌注4h、12h、24h、48h和72h 5个时间点,其中每个时间点8只大鼠。苏木素-伊红染色测定脑梗死体积;原位末端转移酶标记技术检测半暗带细胞凋亡情况;免疫印迹法测定半暗带iASPP的表达变化。结果 脑缺血再灌注4h组和24h组的凋亡细胞阳性率与假手术组存在统计学差异（P <0.01）。脑缺血再灌注组的脑梗死体积百分比与假手术组相比具有统计学意义（P <0.05）。与假手术组相比,在脑缺血再灌注12h时iASPP表达开始下降（P <0.01）,再灌注24h降至最低（P <0.01）,再灌注48h开始回升（P <0.01）。结论 在脑缺血再灌注后,缺血半暗带凋亡细胞显著增多,iASPP表达下降,提示在脑缺血再灌注中iASPP的表达下降可能在细胞凋亡的发生中发挥重要作用,其表达上调可能具有神经保护作用。