大鼠局灶性脑缺血预处理对IL-17及IL-6表达的影响

IL-17是近年来新发现的细胞因子，并发现其在大鼠脑缺血后脑组织内有表达，同时伴有T细胞浸润，且与脑损伤面积呈正相关，表明IL-17和T细胞参与脑损伤过程。但国内外关于IL-17与脑缺血耐受的关系尚未见报道。[第一段]     

PRL腺瘤患者外周血Th17含量及IL-17表达与PRL水平的关系

目的探讨Th17(helper T lymphocyte,Th17)细胞含量及白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)在垂体泌乳素腺瘤外周血中的表达水平与泌乳素分泌水平的关系。方法采用流式细胞术检测24例不同泌乳素水平的PRL(prolacin,PRL)腺瘤患者术前、术后和16例健康体检者外周血中Th17细胞含量,RT-PCR技术检测2组外周血中IL-17mRNA的表达情况并行统计学分析。结果流式细胞术结果显示,泌乳素腺瘤患者术前外周血Th17细胞比例(3.49±0.51)%,高于正常对照组(0.86±0.13)%,差异有统计学意义(P0.05),且随泌乳素增高程度而增加;RT-PCR结果显示,泌乳素腺瘤患者术前IL-17mRNA表达水平(19.43±3.14)%,高于术后的(8.91±1.92)%及正常对照组的(2.69±0.69)%,差异均有统计学意义(P0.05),且随泌乳素增高程度而增加。结论 Th17细胞及IL-17在垂体泌乳素腺瘤外周血中的表达与泌乳素的分泌水平呈正相关,可作为评价PRL腺瘤治疗效果及预后的指标。     

IL-17及IL-17R在人脑胶质瘤中的表达

目的探讨IL-17及IL-17R在人正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤中的表达,及其与胶质瘤级别的关系。方法正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本分别20、23、22例,采用PCR法检测IL-17mRNA,PCR法及原位杂交法检测IL-17RmRNA,免疫组化法检测IL-17蛋白在各组中的表达。结果 IL-17mRNA在各组中仅见微量表达;IL-17RmRNA在各组中的表达无明显差异(P0.05);蛋白IL-17的表达在正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤中依次增高,各组间差异均具有统计学意义(P0.05)。结论蛋白IL-17可能在胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

人脑缺血组织中IL-17表达及来源

目的证实IL-17是否参与人脑缺血损伤过程以及缺血脑组织中表达IL-17细胞的来源。方法选择疾病不同时间,尸检取因脑梗死死亡人的脑组织,以对侧正常脑组织为对照,通过免疫组织化学方法检测IL-17在人类脑组织中的表达。用线栓法封闭SD大鼠右侧大脑中动脉制作pMCAO动物模型。寡核苷酸原位杂交检测脑缺血不同时间点IL-17的表达;利用GFAP抗体和IL-17抗体双染方法检测大鼠脑组织中GFAP、IL-17共同表达细胞-神经胶质细胞。结果人脑缺血病灶中IL-17呈高表达,与对照侧脑组织相比存在极显著差异。IL-17表达高峰在发病后3~5d。SD大鼠缺血侧脑组织IL-17表达6h开始增高(P<0.01),第6天达到高峰。pMCAO手术侧可见大量IL-17和GFAP双染细胞。结论IL-17参与了人类及大鼠脑组织缺血性损伤的局部炎症反应过程;在大鼠实验中证实IL-17表达细胞来源于除以往确认的T淋巴细胞外,还包括神经胶质细胞。     

急性脑梗死患者血清IL-8、IL-17、IL-18水平变化

目的探讨急性脑梗死患者血清白介素(IL)-8、IL-17、IL-18的水平变化及意义。方法采用ELISA法检测89例急性脑梗死患者和45例健康对照者血清中IL-8、IL-17、IL-18的水平,比较2组差异。结果急性脑梗死患者血清中IL-8、IL-17、IL-18的水平均高于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论炎症反应参与了急性脑梗死的病理生理过程,IL-8、IL-17、IL-18水平的变化可用于监测急性脑梗死的病情严重程度。     

IL-6在小鼠单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏与再激活感染中的表达及意义

目的探讨细胞因子IL-6在小鼠三叉神经节单纯疱疹病毒I型(HSV-1)潜伏与再激活感染时的表达及其意义。方法用角膜划痕法建立Balb/c小鼠HSV-1潜伏感染模型,紫外线角膜照射诱发疱疹病毒的再激活。免疫组织化学法检测小鼠三叉神经节病毒抗原和IL-6的表达,Mias2000图像分析系统测定其平均光密度值。结果HSV-1潜伏感染组小鼠三叉神经节细胞周围卫星细胞出现IL-6的弱表达,其OD值高于对照组(0.198±0.025 vs 0.145±0.017,P<0.05);再激活感染组小鼠三叉神经节IL-6的表达在2d达高峰,其OD值高于同一时间点单纯紫外线照射组(0.282±0.047 vs 0.230±0.040,P<0.05),同时三叉神经节单纯疱疹病毒抗原的表达在2~4d也达最高值。结论IL-6是一多功能的细胞因子,对于HSV-1潜伏感染的维持以及病毒再激活的发生和病毒的清除都起重要作用。     

血清PCT、IL-6、CRP在颅脑损伤术后颅内感染的早期诊治 中的价值

目的 探讨血清降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）对颅脑损伤术后早期颅内感染的诊断价值。方法 选取2016年1月至2018年1月收治的颅脑损伤术后颅内感染23例作为 感染组，同期颅脑损伤术后未出现颅内感染46例作为对照组。感染组给予万古霉素及美罗培南治疗。术后12 h内采取空腹肘静脉血5 ml，采用双抗体夹心免疫化学发光法半定量快速实验测定血清PCT含量 ，采用全自动免疫透视比浊法测定血清CRP含量，采用全自动免疫化学发光法测定血清IL-6含量。感染组给药第1、3、6、9、12天（五次）清晨空腹采取肘静脉血5 ml检测血清PCT、IL-6、CRP。采用受试 者工作特征（ROC）曲线判断各指标对颅内感染的诊断效能。结果 感染组23例中，12例治愈，6例好转，5例无效或加重；感染控制18例，未控制5例。术后12 h内，感染组血清PCT、CRP、IL-6浓度均明显 高于对照组（P<0.05）。感染控制组血清PCT和CRP浓度显著低于未控制组（P<0.05）。血清PCT、CRP、IL-6判断颅内感染最佳截断值分别为0.51 ng/ml、16.25 mg/ml、32.67 pg/ml，敏感性分别为52.2% 、91.3%、91.3%，特异性分别为82.6%、79.4%、87.0%；三者联合判断颅内感染的敏感性为100.0%，特异性为79.3%。结论 血清PCT、IL-6和CRP均有助于早期诊断颅脑损伤术后颅内感染，三者联合检测对 于诊断颅内感染效果更好。     

血清TNF-αIL-1IL-6IL-8在急性颅脑损伤后含量变化及意义

目的探讨急性颅脑损伤患者血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量变化及其与颅脑损伤程度的关系。方法选取急性颅脑损伤患者53例(颅脑损伤组),并选取30例健康人作为对照组,采用放射免疫法测定急性颅脑损伤患者伤后l、3、7d的血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量,对不同程度的颅脑损伤与血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8的关系进行分析。结果急性颅脑损伤患者血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8早期即有升高,伤后第3天达到高峰,第7天开始下降,但仍高于对照组(P<0.05)。血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8含量在各个时间点重度组高于中度组,中度组高于轻度组及对照组(P<0.01)。重型颅脑损伤组在病程第1、3、7天3个时间点血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8水平较轻、中型组显著升高(P<0.05)。结论血清TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8水平与急性颅脑损伤的严重程度呈正相关。     

急性颅脑损伤后血清IL-6IL-8IL-10含量变化及意义

目的 探讨急性颅脑损伤后免疫功能紊乱的相关炎性介质与时间动态变化的关系,即血清中促炎细胞因子IL-6、IL-8和抗炎细胞因子IL-10 的含量变化及临床意义.方法 采用放射免疫分析法检测急性颅脑损伤患者150 例,分为轻、中、重型3组血清IL-6、IL-8、IL-10含量的变化,分析血清中IL-6、IL-8、IL-10含量之间的动态关系与急性颅脑损伤分级以及变化趋势.结果 重型组1 d、2 d、3 d、7 d、14 d5个时间点的IL-6、IL-8、IL-10水平较轻、中型明显升高;IL-6 水平于第2天达到最高峰,IL-8水平于第3天达到最高峰,IL-10水平于第7天达到最高峰;IL-6、IL-8、IL-10达到最高峰后均出现迅速下降趋势.结论 血清中IL-6、IL-8、IL-10 水平的变化与急性脑损伤程度呈正相关,即脑损伤程度越重,IL-6、IL-8、IL-10的水平越高.     

急性颅脑损伤后血清IL-6 IL-8 IL-10含量变化及意义

目的探讨急性颅脑损伤后免疫功能紊乱的相关炎性介质与时间动态变化的关系,即血清中促炎细胞因子IL-6、IL-8和抗炎细胞因子IL-10的含量变化及临床意义。方法采用放射免疫分析法检测急性颅脑损伤患者150例,分为轻、中、重型3组血清IL-6、IL-8、IL-10含量的变化,分析血清中IL-6、IL-8、IL-10含量之间的动态关系与急性颅脑损伤分级以及变化趋势。结果重型组1d、2d、3d、7d、14d5个时间点的IL-6、IL-8、IL-10水平较轻、中型明显升高;IL-6水平于第2天达到最高峰,IL-8水平于第3天达到最高峰,IL-10水平于第7天达到最高峰;IL-6、IL-8、IL-10达到最高峰后均出现迅速下降趋势。结论血清中IL-6、IL-8、IL-10水平的变化与急性脑损伤程度呈正相关,即脑损伤程度越重,IL-6、IL-8、IL-10的水平越高。     

马索罗酚对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠IL-6、IL-17、TGF-b表达的影响

目的观察马索罗酚(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠IL-6、IL-17、TGF-β表达的影响。方法采用MOG35-55多肽为抗原免疫C57BL/6小鼠制备EAE模型。小鼠随机分成对照组、模型组和治疗组,各组18只。治疗组给予马索罗酚10mg/(kg·d)干预,对照组及模型组给予等量溶剂干预。分别在发病后10 d、20 d进行神经功能评分后取材,采用实时定量PCR方法检测小鼠腰髓和脾组织IL-6、IL-17、TGF-bm RNA表达水平,采用ELISA方法检测脑组织IL-6、IL-17、TGF-b蛋白表达水平。结果模型组与治疗组发病10 d、20 d时神经功能评分为(7.22±1.10)、(4.22±0.97),(2.89±1.05)、(1.33±0.71),差异有统计学意义(P0.05)。治疗组与模型组比较结果如下。脊髓组织:1IL-6水平发病10 d时(8.54±2.49)、(14.07±3.19),差异有统计学意义(P0.05);发病20 d时(4.26±1.44)、(4.90±1.24),差异无统计学意义(P0.05)。2IL-17水平发病10 d时(25.50±11.77)、(47.59±8.01);发病20 d时(10.02±2.99)、(20.14±4.57),差异均有统计学意义(P0.05)。3TGF-b水平发病10 d时(0.74±0.11)、(0.04±0.01);发病20 d时(1.49±0.30)、(0.59±0.23),差异均有统计学意义(P0.05)。脑组织(pg/m L):1 IL-6水平发病10 d时(44.58±6.94)、(57.46±7.32);发病20 d时(35.85±9.58)、(51.29±2.09),差异均有统计学意义(P0.05)。2IL-17水平发病10 d时(515.90±63.10)、(899.89±242.39);发病20 d时(437.71±137.35)、(730.32±139.94),差异均有统计学意义(P0.05)。3TGF-b水平发病10 d时(170.88±24.69)、(132.85±20.27);发病20 d时(229.59±32.10)、(172.58±16.94),差异均有统计学意义(P0.05)。脾组织:1 IL-6水平发病10 d时(6.51±1.29)、(19.76±5.85),差异有统计学意义(P0.05);发病20 d时(3.13±0.78)、(4.14±0.58),差异无统计学意义(P0.05)。2IL-17水平发病10 d时(2.08±1.19)、(7.50±1.31);发病20 d时(0.67±0.41)、(2.75±0.44),差异均有统计学意义(P0.05)。3TGF-b水平发病10 d时(0.61±0.16)、(0.08±0.02);发病20 d时(1.77±0.39)、(0.50±0.33),差异均有统计学意义(P0.05)。结论马索罗酚可以改善EAE小鼠病情,其作用机制可能与下调IL-6、IL-17表达,上调TGF-b表达有关。     

IL-17在中枢神经系统感染发病机制及鉴别诊断中的作用

目的 探讨IL-17有无参与结核性脑膜炎(TBM)、隐球菌性脑膜炎(CM)、病毒性脑膜脑炎(VM)这3类中枢神经系统感染的免疫反应和对这3类中枢神经系统感染的鉴别诊断有无提示意义.方法 选择自2008年2月至2009年12月在中山大学附属第三医院住院治疗的中枢神经系统感染患者112例,根据感染源不同分为TBM组、CM组和VM组.同时选择同期在该院住院的非中枢神经系统感染性疾病及非自身免疫疾病患者36例,归入对照组.用ELISA法测定IL-17、IL-12、IFN-γ在4组患者脑脊液中的浓度.结果 4组对象脑脊液中IL-17水平差异有统计学意义(P＜0.05),由高到低依次是CM组、TBM组、VM组和对照组.4组患者间IL-12、IFN-γ水平差异也有统计学意义(P＜0.05),其中TBM组和CM组患者脑脊液中的IL-12、IFN-γ的水平较VM组和对照组患者明显增高.TBM组患者脑脊液中IL-17与IL-12呈负相关(r=-0.311,P=0.033).IL-17、IL-12、IFN-γ与脑脊液白细胞数均呈正相关(r=0.219,0.434,0.341;P=0.031,0.027,0.001).利用脑脊液中IL-17的水平建立这3种疾病的ROC曲线,曲线下面积均大于0.7.结论 Th17免疫途径广泛的参与了这3种中枢神经系统感染的免疫应答,且可能与Th1免疫途径相互影响.IL-17检测有助于这3类中枢神经系统感染的鉴别诊断.

Abstract：

Objective To study the role of IL-17 in the pathogenesy and differential diagnosis of the 3 types of CNS infections (tubercular meningitis [TBM], cryptococcal meningitis [CM], viral meningoencephalitis [VM]). Methods One hundred and twelve patients with CNS infections,admitted to out hospital from February 2008 to December 2009, were chosen and divided into TBM group, CM group and VM group;another 36 patients without CNS infections either autoimmune disease at the same period were chosen as control group. ELISA was employed to determine the levels of IL-17,IL-12, IFN-γ in the cerebrospinal fluid in these 4 groups. Results IL-17 level in the cerebrospinal fluid of the 3 groups with CNS infections were obviously different, but all of them were significantly higher than that in control group (P＜0.05), with CM group enjoying the highest level, following by TBM group,VM group and control group. The levels of IL-12 and IFN-γ in patients with TBM and CM were higher than those in patients with VM and controls. Through the correlation analysis of IL-17, IL-12 and IFN-γ in patients with TBM, we found that IL-17 level was negatively correlated with IL-12 level (r=-0.3 11,P=0.033);the levels of these 3 cytokines were positively correlated with the quantity of leucocytes (r=0.219, 0.434 and 0.341, P=0.031, 0.027 and 0.001). ROC curves were established for differential diagnosis among these 3 groups according to CSF IL-17 levels, and all of the areas under the curve were bigger than 0.7. Conclusion Thl7 pathway is widely involved in the immune responses of CNS infection, and interacts with Thl pathway. The different levels of IL-17 in the cerebrospinal fluids in patients with various CNS infections may contribute to differential diagnosis.     

IL-17、RORγt在实验性自身免疫性神经炎中的表达

目的 观察Th17型细胞因子IL-17和Th17细胞特异性转录因子维甲酸受体相关孤儿受体γ的胸腺异构体(RORγt) mRNA在实验性自身免疫性神经炎(EAN)模型中的表达,以探讨Th17细胞在EAN中的作用.方法 用P253-78aa肽段免疫Lewis大鼠,建立EAN模型,观察大鼠发病情况和组织病理改变,并检测淋巴细胞增殖反应,用RT-PCR技术检测IL-17和RORγt在大鼠发病高峰期脾脏、淋巴结和坐骨神经中的表达.结果 EAN组大鼠在第14-16天发病高峰期时平均临床评分为(7.5±1.2),病理学检查可见明显炎性细胞浸润,对P253-78aa的刺激产生强烈淋巴细胞增殖反应,与对照组相比,IL-17和RORγt mRNA在脾脏、淋巴结和坐骨神经中的表达均显著升高(P<0.001).结论 IL-17和RORγt表达上调与EAN的发病相关.     

HCV感染小鼠小胶质细胞后TLR7 mRNA和IL-6表达

目的通过观察丙型肝炎病毒(HCV)感染小鼠小胶质细胞BV2后Toll样受体(TLR)7 mRNA及白细胞介素(IL)-6水平的动态变化,探讨HCV对中枢神经系统(CNS)的免疫发病机制。方法用20%(体积分数)的HCV阳性血清感染BV2细胞,在感染后6、12、244、8 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA法检测TLR7 mRNA和IL-6表达,同时设空白对照组和正常血清组。结果 3组BV2细胞中均有TLR7 mRNA表达;HCV阳性血清感染BV2细胞后TLR7 mRNA表达随时间延长而逐渐增高,其中在12、24、48 h时表达水平均较其他两组增高(P<0.05)。IL-6表达在HCV阳性血清组也逐渐增高,48 h时与空白对照组、正常血清组48 h时比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BV2细胞可以表达TLR7 mRNA,HCV感染能上调BV2细胞TLR7 mRNA和IL-6表达。TLR7可能参与了HCV对CNS的病理生理过程。     

急性颅脑损伤后血清TNF-α，IL-1，IL-6，IL-8含量变化及其临床意义

目的探讨急性颅脑损伤后血清TNF-α,IL-1,IL-6,IL-8的含量变化及其临床意义。方法用放射免疫法检测50例急性颅脑损伤患者血清IL-1,IL-6,IL-8,TNF-α含量的变化,分析急性颅脑损伤分级与血清中IL-1,IL-6,IL-8,TNF-α含量之间的关系以及其变化趋势。结果重型颅脑损伤组在病程第1、3、7天三个时间点的血清TNF-α,IL-1,IL-6,IL-8的水平较轻、中型组明显升高(P<0.01),IL-6,IL-8早期即有升高,伤后3,7d升高明显,且有继续上升趋势;TNF-α,IL-1分别于伤后第3天达高峰,第7天有所下降,但仍明显高于正常人(P<0.01)。结论血清中TNF-α,IL-1,IL-6,IL-8水平在重型颅脑损伤中明显增高,与颅脑损伤程度呈正相关,并可能在继发性脑损害中起重要作用。     

不同程度颅脑损伤后血清TNF-α、IL-6、IL-8变化及其临床意义

目的 探讨不同程度颅脑损伤病人血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-8水平变化及其临床意义。方法 收集我院2005年4-11月神经外科住院急性颅脑损伤患者41例及对照组25例，对照组清晨空腹抽取静脉血，急性颅脑损伤病人分别在伤后第1、3、7天取外周静脉血3mL。采用放射免疫法检测TNF-α、IL-6、IL-8，分析急性颅脑损伤分级与血清中TNF-α、IL-6、IL-8含量之间的关系及其变化趋势。结果 IL-6、IL-8早期即有升高，伤后3、7d升高显著，且有继续上升趋势；TNF-α于伤后第3天达高峰，第7天有所下降，但仍显著高于对照组。重型颅脑损伤组在病程第1、3、7天三个时间点的血清TNF-α、IL-6、IL-8的水平较轻、中型组显著升高（P〈0．05）。结论 血清中TNF-α、IL-6、IL-8参与了急性颅脑损伤的病理生理过程，其水平在重型颅脑损伤中显著增高，与颅脑损伤程度呈正相关，并可能在继发性脑损害中起重要作用。其测定对于早期评估颅脑损伤的严重程度和预后有重要的临床意义。     

Plasma Levels of IL-23 and IL-17 before and after Antidepressant Treatment in Patients with Major Depressive Disorder

Objective

Cytokines are believed to have a role in the pathophysiology of major depression. The alteration in levels of pro-inflammatory cytokines [interleukin 1β (IL-1β), IL-2, IL-6, IL-12, interferon γ, and tumor necrosis factor α] in major depression supports the cytokine hypothesis of this illness. IL-23 and IL-17 are also pro-inflammatory cytokines, but few studies have focused on their role in major depression. This study investigated the potential role of the IL-23 and IL-17 axis in major depression.

Methods

Plasma IL-23 and IL-17 levels were measured in 26 major depressive disorder (MDD) patients before and after 6-week treatment with antidepressants; these levels were measured in 28 age- and sex-matched normal controls. Depression severity was assessed using the Hamilton Depression Rating Scale (HDRS). IL-23 and IL-17 plasma levels were estimated using quantitative enzyme-linked immunosorbent assay.

Results

Pre-treatment plasma levels of IL-23 and IL-17 in MDD patients were not significantly different from those of normal controls. In MDD patients, IL-23 and IL-17 levels after 6 weeks of antidepressant treatment were not different from the baseline levels. There was no significant correlation between changes in the cytokine levels and changes in the HDRS scores representing the severity of depression.

Conclusion

The present study does not support a potential involvement of IL-23 and IL-17 axis in major depression. Replication and extension using a larger sample are required.     

脑血管病急性期MMP-9、IL-6和IL-10水平变化的研究

目的：探讨基质金属蛋白酶‐9（MMP‐9）、白细胞介素‐6（IL‐6）和白细胞介素‐10（IL‐10）与脑动脉粥样硬化斑块不稳定性以及脑梗死的关系。方法选择急性脑血管病患者56例,其中反复短暂性脑缺血发作（TIA）16例,急性脑梗死40例。对照组为21例健康体检者。所有缺血性脑血管病患者均经头CT血管造影（CTA）检查或颈部血管超声证实存在不稳定斑块,且发病机制考虑与不稳定斑块破裂有关。采用ELISA方法检测各组血清MMP‐9、IL‐6和IL‐10水平并进行比较。结果急性脑梗死组患者血清中MMP‐9、IL‐10水平分别为（137.10±69.38）ng/mL和（39.16±32.82）pg/mL,TIA组患者血清中MMP‐9、IL‐10水平分别为（119.79±65.54）ng/mL和（33.00±21.36）pg/mL,均明显高于对照组〔分别为（65.42±36.81）ng/mL和（19.83±12.16）pg/mL〕;脑梗死组患者血清MMP‐9及IL‐10水平均高于TIA组（均P＜0.05）。各组间IL‐6水平差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论MMP‐9和IL‐10水平升高可能与动脉粥样硬化不稳定斑块破裂以及脑梗死灶形成有关。