从基因分型看血液透析及肾移植患者丙型肝炎病毒感染状况

采用国产和美国Ｏｒｔｈｏ公司第２代抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）试剂对１００例维持性血透及肾移植患者进行血清丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）对比检测。阳性标本用聚合酶键反应（ＰＣＲ）法检测ＨＣＶＲＮＡ并采用型特异的ＨＣＶ亚基因探针对其非结构蛋白ＮＳＳ区扩增产物进行了杂交基因分型。结果表明，这组病人中抗－ＨＣＶ阳性率为４１％，肾移植术后再透析者达５６．５２％，且与透析时间、输血次数、受血量成正相关；国产抗－ＨＣＶ试剂同美国Ｏｒｔｈｏ公司试剂比较阳性符合率达９１．４３％；抗－ＨＣＶ阳性患者中有３１．４３％（１１／３２）血清ＨＣＶＲＮＡＮＳ５阳性；透析患者中，ＨＣＶ基因型各型均有，以混合型为主，占６３．６４％。     

输血后丙型肝炎与抗丙型肝炎病毒（HCV）阳性献血？…

采用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’－非编码区（５’－ＮＣＲ）和Ｃ区具有型特异性的引物建立的逆转录－聚合酶链反应方法检测了２５例丙型肝炎（ＨＣ）和２６例抗－ＨＣＶ阳性献血员的ＨＣＶ ＲＮＡ及基因型。结果２５例ＨＣ患者ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为１００．０％，２６例抗－ＨＣＶ阳性献血员ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为８４．５％，（２２／２６）。２５例ＨＣ中Ｉ、Ⅱ和混合型（Ｉ＋Ⅱ、Ⅱ＋Ⅲ、Ｉ＋Ⅲ、Ｉ＋Ⅱ＋Ⅲ）分别占８．０％     

聚合酶链反应鉴定丙型肝炎病毒母婴传播的状态及其意义

采用多种方法，动态检测了１１例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的孕妇所生的婴儿血抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ。发现用合成肽酶联免疫吸附试验（ｓｐＥＬＩＳＡ）检测婴儿抗－ＨＣＶ阳性率（２３．５２％）显著低于第二代重组抗原ＥＬＩＳＡ（２ｎｄＥＬＩＳＡ）（４１．１８％）（Ｐ＜０．０５）；用２ｎｄＥＬＩＳＡ检测，６例婴儿脐血和静脉血抗－ＨＣＶ阳性，５例持续１～５月阴转，１例阳性持续１３个月。经重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）鉴定，４例阳性，２例可疑阳性。用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ，５例阳性，３例于生后１～６个月自然阴转，２例持续阳性分别达９个月和１３个月。提示检测抗－ＨＣＶ判断ＨＣＶ母婴传播的状态受到婴儿抗－ＨＣＶ产生水平低下、母体抗－ＨＣＶ的被动输入和不同检测方法的影响，用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ是判断母婴传播更可靠的指标。     

巨细胞病毒感染与可溶性白细胞介素2受体的关系

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对１０４例育龄妇女的血清进行了巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体的检测，同时用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了不同感染状态下血清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的水平，并将ｓＩＬ－２Ｒ水平与未感染ＨＣＭＶ的正常育龄妇女进行了比较。结果，育龄妇女中抗－ＨＣＭＶＩｇＧ的阳性率为８９．４％，ＩｇＭ的阳性率为９．６％，感染ＨＣＭＶ的妇女血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平均大于未感染的对照组（１７８．１±５７．３Ｕ／ｍｌ），Ｐ＜０．０５，其中ＩｇＭ阳性者和ＩｇＭ、ＩｇＧ同时阳性者血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平最高，分别为９１０±４６５．６Ｕ／ｍｌ和９０５±３４７．８Ｕ／ｍｌ，两者间的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），但均大于仅抗－ＨＣＭＶＩｇＧ阳性者（４４６．８±１５８．９Ｕ／ｍｌ），Ｐ均＜０．０５。表明，ＨＣＭＶ感染可致ｓＩＬ－２Ｒ水平升高，并且活动性感染者上升明显。提示：ｓＩＬ－２Ｒ可能参与了ＨＣＭＶ的免疫致病机制。     

HCV RNA的PCR检测研究与分析

应用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ ＲＮＡ，输血后肝炎且抗－Ｃ１００－３阳性者阳性率为９５％（１９／２０）；输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阴性者阳性率为８６．７％（１３／１５）；非输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阳性者阳性率仅２０％（１／５）；非输血后肝炎而抗－Ｃ１００－３阴性者阳性率仅１８．２％（２／１１）。对克隆的５＇－ＮＣ端片段的核苷酸序列分析显示，中国株与已公布的美、日、台湾等序列的同源性都很高，可达９８     

全血与血液制品中HCV RNA检测及其基因分型的初步研究

对一组临床应用的全血（配血用标本）、血液制剂与丙种球蛋白制剂进行检测。血浆制剂抗ＨＣＶ阳性率显著高于全血（３２．６４％与１１．６８％、Ｐ＜０．０１）。三组标本中抗ＨＣＶ阳性者ＨＣＶ ＲＮＡ检出率基本相似。但丙球制剂组ＨＣＶ ＲＮＡ阳性标本在ＰＣＲ中的反应强度显著低于前两者。对部份标本作ＨＣＶ基因亚型检测，三组总体ＨＣＶ亚型表达频率为，原型：２．９４％；Ｋ１：４７．０６％；Ｋ２ａ：３２．３５％；Ｋ２     

戊型肝炎病人和实验感染戊型肝炎病毒的猕猴血清抗－HEV ORF2和ORF3的动态变化

应用人工合成的戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因组开放读码框架２（ＯＲＦ２）和３（ＯＲＦ３）两段多肽，分别建立了酶联免疫试验（ＥＩＡ），检测８５份实验感染ＨＥＶ的猕猴和１４３份戊型肝炎（简称戊肝）病人血清，结果两组抗－ＨＥＶＯＲＦ２阳性率分别为７０．８９％和６８．５３％，均显著高于抗－ＨＥＶＯＲＦ３（分别为４０．０３％和５７．３４％），且前者阳转时间较早，持续阳性时间也较长。虽然多数（９７．３％）抗－ＨＥＶＯＲＦ３阳性血清，抗－ＨＥＶＯＲＦ２也为阳性，但有少数血清（２．７％）抗－ＨＥＶＯＲＦ２为阴性。上述结果提示，ＨＥＶ基因组ＯＲＦ２和ＯＲＦ３编码的蛋白含有不同的抗原表位，可引起宿主不同的免疫反应。因此，在制备抗－ＨＥＶＥＩＡ试剂时，应联合应用ＯＲＦ２和ＯＲＦ３多肽，以提高其灵敏度和特异性。     

丙型肝炎病毒核心区抗体分型方法的研究

用丙型肝炎病毒核心区２个型特异性俣成肽作为包被抗原，建立了ＥＬＩＳＡ法，对血清中抗－ＨＣＶ进行分型。在１２１份抗－ＨＣＶ阳性血清中检出ＣＰ９阳性率为８３．４７％，在１０１份ＣＰ９阳性血清中进行核心区抗体分型，其中血清１型１７．８２％，血清２型２５．７４％、１．２混合型７．９２％。     

丙型肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒抗体IgM及HCVRNA检测结果的比较

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对住院病人抗丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性血清标本进行抗－ＨＣＶＩｇＭ的检测，并与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较。结果表明，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阳性，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阴性及ＨＣＶＲＮＡ阴性、抗－ＨＣＶ阳性三种类型中均有抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性者。结果还表明ＨＣＶＲＮＡ阳性病例的抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性率明显高于ＨＣＶＲＮＡ阴性的病例（Ｐ＜０．０５），在临床诊断上ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性病例的肝病大多数为急性肝炎（ＡＨ）和慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性比较，各类肝病的病例数无明显差别。     

戊型肝炎病人和实验感染戊型肝炎病毒的猕猴血清抗——H…

应用人工合成的戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因组开放读码框架２（ＯＲＦ２）和３（ＯＲＦ３）两段多肽，分别建立了酶联免疫试验（ＥＩＡ），检测８５份实验感染ＨＥＶ的猕猴和１４３份戊型肝炎（简称戊肝）病人血清，结果两组抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２阳性率分别为７０．８９％和６８．５３％，均显著高于抗－ＨＥＶ ＯＲＦ３，且前者阳转时间较早，持续阳性时间也较长。虽然多数（９７．３％）抗－ＨＥＶ ＯＲＦ３阳性血清，抗－ＨＥＶ     

DNA病毒与RNA病毒相互作用小鼠模型的建立

用Ｃ型病毒（ＲＮＡ病毒）和／或紫外线灭活的（疱疹病毒）ＨＳＶ－２（Ｗｕ）或ＨＳＶ－２（３３３）接种新生小鼠，结果表明接种了ＨＳＶ－２（Ｗｕ）、ＨＳＶ－２（３３３）和作为对照的小鼠均未发生白血病，在ＨＳＶ－２（Ｗｕ）组中接种了Ｃ型病毒加ＨＳＶ－２（Ｗｕ）的小鼠白血病发生率是７５００％，只接种了Ｃ型病毒的小鼠中有４４．７４％发生白血病，两者之间有高度显著性差异（Ｐ＜０．０１）。另外，在ＨＳＶ－２（３３３）组中用Ｃ型病毒加ＨＳＶ－２（３３３）接种小鼠以后有７９．１６％发生了白血病，只接种了Ｃ型病毒的小鼠中有４１．０２％发生白血病，其差异也有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。由此可见Ｃ型病毒分别与ＨＳＶ－２（Ｗｕ）或ＨＳＶ－２（３３３）在诱发小鼠白血病过程中存在相互作用。此动物模型可用于研究两类不同病毒相互作用的致癌原理。     

丙型肝炎病毒（HCV）E2／NS1相对保守区多肽抗原在检？…

目的 研究（ＨＣＶ）Ｅ２／ＮＳ１相对保守区多肽抗原在检测抗－ＨＣＶ中的意义。方法 利用ＨＣＶＥ２／ＮＳ１基因编码的膜区糖蛋白合成Ｅ２／ＮＳ１相对保守区多肽抗原,建立酶免疫试验（ＥＩＡ）,对９６例ＨＣＶ感染者及４０例正常献血员进行ＨＣＶＥ２／ＮＳ１抗体的检测,同时平行检测ＨＣＶＲＮＡ肝炎为１３．５５％,慢性丙型肝炎为２５．０４％,无症状感染者为２．０８％;正常献血员中发现３例抗ＨＣＶＥ２／ＮＳ１抗体     

IgM类抗HCV独特型抗体（抗HCV—Ab2）的ELISA法检测及意义

用抗人μ链单克隆抗体建立的ＥＬＩＳＡ法检测１５２例肝病患者ＩｇＭ类抗ＨＣＶ独特型抗体，甲肝阳性率０％（０／１５），乙肝８．５％（４／４７），丙肝３２．１％（２６／８１），丙肝合并乙肝者２２．２％（２／９）。丙肝组内频率为急肝０％（０／１７），慢性迁延性肝炎３８．１％（８／２１），慢性活动性肝炎４３．８％（１４／３２），肝炎肝硬化３６．４％（４／１１）。本法重复性好，批内变异系数４．６％，批间变异系数８．５％。用纯化人抗ＨＣＶ抗体进行阻断，阻断率＞８５％，丙肝组与乙肝组有显著性差异（Ｐ＜０．０１），与各种自身免疫性疾病无交叉，有较好的特异性和精密度，且与血清中ＩｇＭ抗ＨＣＶ关系密切，提示丙型肝炎ＩｇＭ类抗ＨＣＶ－Ａｂ２具有模拟抗原的作用，是慢性丙型肝炎的重要检测指标并与丙肝慢性化有关。     

巨细胞病毒宫内感染的诊断及对胎儿的影响

采用地高辛探针斑点杂交技术和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对５１例人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）血清学抗体ＩｇＭ阳性孕妇的羊水、脐血和产后两周内的新生儿尿液，进行ＨＣＭＶＤＮＡ检测。同时与酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测脐血、羊水中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ的结果相比较。结果，地高辛探针斑点杂交检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２１．５７％，脐血３３．３３％，新生儿尿液２７．４５％。ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ的阳性率分别为：羊水２９．４１％，脐血４３．１４％，新生儿尿液３Ｓ，２９％。羊水ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为１１．７６％，脐血ＨＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率为２３．５３％。脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性的新生儿平均出生体重明显低于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿，而脐血ＨＤＷ－ＤＮＡ阳性的新生儿肝功能异常、血小板减少以及低Ａｐｇａｒ评分的发生率明显高于脐血ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的新生儿。结果表明：采用ＥＲ技术检测羊水、脐血或产后两周内新生儿尿液ＨＣＭＶＤＮＡ有助于ＨＣＭＶ官内感染的早期诊断，便于临床早期干预，ＨＣＭＶ官内感染严重影响胎儿的生长发育，可造成胎儿肝功能异常、血小板减少和新生儿窒息的发生。     

1984-1995年12年间西安地区孕妇TORCH特异性抗体检测结果分析

本文报告自１９８４年１月至１９９５年５月间西安地区孕妇ＴＯＲＣＨ特异性抗体检测结果分析。本室用微量间接血凝法及ＥＬＩＳＡ法对孕妇血清分别检测弓形体抗体（ＴＰ－Ａｂ）３１４４例、抗风疹病毒ＩｇＭ（ＲＶ－ＩｇＭ）９２０例、抗巨细胞病毒ＩｇＭ（ＣＭＶ－ＩｇＭ）１４５４例、抗单纯疱疹病毒Ⅱ型ＩｇＭ（ＨＳＶⅡ－ＩｇＭ）９５９例，其结果阳性率分别为３．６６％０．１１％、１１．２８％、３．０２％。其中，早孕和中晚孕孕妇间的各项特异性抗体阳性率均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；有无上感病史孕妇间的ＴＰ－Ａｂ、ＣＭＶ－ＩｇＭ、ＨＳＶⅡ－ＩｇＭ阳性率均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；不同职业孕妇的ＴＰ－Ａｂ阳性率亦无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。从而得知，对所有的孕妇在孕期进行ＴＯＲＣＨ感染检测，对于作好优生工作有重要的意义。     

沈阳地区各型丙型肝炎患者丙型肝炎病毒的基因分型

目的研究沈阳地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型分布状况及其临床意义。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对沈阳地区８４例血清抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均阳性的各临床型丙型肝炎患者进行ＨＣＶ基因分型。结果８４例丙型肝炎中,ＨＣＶ－Ⅱ型４５例（５３．６％）,ＨＣＶ－Ⅲ型２６例（３０．９％）,Ⅱ／Ⅲ混合型１３例（１５．５％）;ＨＣＶ不同基因型在各型丙型肝炎中总体分布不一致,经统计学处理,Ｐ＜０．０５;在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中,ＨＣＶ－Ⅱ型感染分别占５５．６％,３６．２％,７５．０％,８５．７％及８８．９％;ＨＣＶ－Ⅲ型感染分别占２２．２％,４６．８％,８．３％,０％骸１１．１％。结论沈阳地区ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主,其次为Ⅲ型及Ⅱ／Ⅲ混合型;ＨＣＶ基因型与丙型肝炎严重程度密切相关。     

肾综合征出血热病毒结构蛋白在患者尿中融合细胞上的表达及其意义

为了探讨汉坦病毒（ＨＶ）结构蛋白与患者尿融合细胞的关系，采用抗ＨＶ包膜结构蛋白Ｇ２的单克隆抗体ＭｃＡｂ－ＬＶ４８Ａ，抗ＨＶ血凝素的ＭｃＡｂ－３Ｄ８，抗ＨＶ核衣壳蛋白的ＭｃＡｂ－Ａ３５等，分别对３０例肾综合征出血热患者尿液中的融合细胞进行免疫酶染色。结果ＭｃＡｂ－ＬＶ４８Ａ阳性率为７０％（２１／３０）；ＭｃＡｂ－３Ｄ８阳性率为７３％（２２／３０）；ＭｃＡｂ－Ａ３５阳性率为７％（２／３０）。该结果提示，患者尿液中的融合细胞的形成与ＨＶ膜结构蛋白在泌尿系统上皮细胞上的表达有密切关系。     

抗HCV阳性患者体液中正链和负链HCVRNA的检测及意义

为了解ＨＣＶ感染者血清和体液中ＨＣＶ存在状况，利用ＲＴ－巢式ＰＣＲ方法检测了４２例抗ＨＣＶ阳性患者血清，唾液、精夜或阴道分泌物中的ＨＣＶＲＮＡ。患者血清和体液中ＨＣＶＲＮＡ的检测出率分别为：血清６９．０５％（２９／４２），唾液２３．８１％（１０／４２），精液３６．６％（４／１１），阴道分泌物１５．３８％（２／１３）。     

利用双扩增聚合酶链反应检测非甲非乙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒RNA

利用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’－端序列合成两对引物，建立了灵敏、特异的ＨＣＶＲＮＡ双扩增聚合酶链反应检测方法。用此方法及第二代Ａｂｂｏｔｔ酶联抗－ＨＣＶ检测试剂盒，检测了４４例非甲非乙型肝炎患者血清及１０名抗－ＨＣＶ阴性健康人。在４４例患者中，４１例（９３％）ＨＣＶＲＮＡ阳性，３６例（８２％）抗－ＨＣＶ阳性，３３例（７５％）ＨＣＶＲＮＡ、抗－ＨＣＶ全部阳性。３例ＨＣＶＲＮＡ阴性，但抗－ＨＣＶ阳性，另外，有８例抗－ＨＣＶ阴性，ＨＣＶＲＮＡ阳性。１０名健康人ＨＣＶＲＮＡ均为阴性。结果表明，大部分（９２％）抗－ＨＣＶ阳性患者带有ＨＣＶ，但为了检测所有病毒血症患者，抗－ＨＣＶ检测是不够的，利用双扩增ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ对于抗－ＨＣＶ阴性患者的诊断是非常有用的。     

831名健康青年庚型肝炎病毒和人免疫缺陷病毒感染的调查

目的了解我国健康青年中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）和人免疫缺陷病毒的感染情况。方法采用酶联免疫法（ＥＩＡ）检测６省８３１名健康青年血清中的ＨＧＶ和ＨＩＶ抗体，对抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性的血清再用逆转录－巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果发现抗－ＨＣＶＩｇＧ阳性率为２５３％（２１／８３１），２１例阳性者中ＨＧＶＲＮＡ阳性８例，两者符合率为３８１％；抗－ＨＩＶ均阴性。结论我国健康青年人群中确实存在ＨＧＶ感染。