羟基红花黄色素Ａ抗谷氨酸氧化性神经损伤的保护作用

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对谷氨酸(Glu)诱导的氧化性神经损伤的保护作用。方法以体外原代培养Wistar胎鼠大脑皮层神经元为实验材料，进行形态学观察，采用噻唑蓝（MTT）比色法、Hoechst33342/PI双荧光探针染色、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）含量检测、流式细胞仪分析细胞凋亡率以及免疫细胞化学法检测细胞色素C（CytC）荧光强度，综合评价HSYA对Glu氧化性神经损伤的保护作用。结果与Glu损伤组相比，HSYA能显著提高细胞相对存活率，维持细胞内较高SOD和GSH水平，降低Glu引起的细胞凋亡率及线粒体内CytC向胞质的释放，以160μg/mL浓度的 HSYA保护效果最为显著。结论HSYA对Glu氧化性神经损伤有显著的保护作用，其机制与抗氧化、抑制细胞凋亡有关。     

绞股蓝总苷对谷氨酸诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤保护机制的研究

目的：探讨绞股蓝总苷（gypenosides,GP）对谷氨酸（glutamic acid,Glu）诱导的胎鼠大脑皮层神经元损伤的保护作用，并从信号通路角度探讨其作用机制。方法：以体外培养的13～14?d胎鼠大脑皮层神经元为研究对象，建立谷氨酸损伤和GP保护模型。采用MTT法测定细胞的存活率；荧光染料Ho33342和碘化丙碇（PI）荧光双染法鉴定细胞死亡方式；硝酸还原法测定细胞培养上清液中NO含量；生化法检测H2O2含量；流式细胞仪检测线粒体膜电位变化，分析GP对谷氨酸氧化性神经损伤的保护机制。结果：谷氨酸可导致神经细胞发生凋亡和坏死两种死亡方式；GP（200?μg/ml）可明显抑制谷氨酸引起的NO、H2O2含量的升高，有效地防止线粒体膜电位的下降，从而提高细胞存活率。结论：GP可明显拮抗谷氨酸介导的氧化性神经损伤，提高细胞的存活率，其机制可能与提高神经细胞内抗氧化酶活性，清除氧自由基对线粒体膜的损伤有关。     

运脾开胃方含药血清对HGSMCs中MLC磷酸化水平的调节机制研究

观察运脾开胃方含药血清对人胃窦平滑肌细胞（HGSMCs）内Ca²⁺、MLC、p-MLC的干预作用以及与Ghrelin受体（GHSR）的关系,研究运脾开胃方治疗厌食症的机制。方法 培养HGSMCs,制备低、中、高浓度的运脾开胃方含药血清;采用激光共聚焦、Western blot法检测运脾开胃方含药血清对HGSMCs内Ca²⁺、MLC、p-MLC的影响;阻断HGSMCs表面GHSR并干扰细胞内外Ca²⁺的正常调控,研究运脾开胃方含药血清对HGSMCs内p-MLC的干预机制。结果 低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在一定时间范围内上调HGSMCs内Ca²⁺的相对荧光强度（P<0.05~0.01）;低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在10min时显著上调HGSMCs内p-MLC水平（P<0.05~0.01）;(D-Lys3)-GHRP-6、Thapsigargin、D-HBSS液能显著抑制高剂量运脾开胃方含药血清在10min时对p-MLC的上调作用（P<0.01）。结论 运脾开胃方含药血清可能通过激活GHSR提高细胞内Ca²⁺水平来促进MLC磷酸化。     

绞股蓝皂甙抗谷氨酸诱导的氧化性神经毒性

目的：探讨绞股蓝皂甙(gypenoside，GP)对谷氨酸(glutamate，Glu)介导的氧化性神经毒性的拮抗作用。方法：体外培养胎鼠大脑皮层神经细胞，建立Glu氧化性损伤模型，用MTT法测定细胞活力，透射电镜观察Glu所致的神经细胞死亡方式，流式细胞术分析细胞凋亡率。结果：GP以时间依赖性方式明显拮抗谷氨酸介导的氧化性神经毒性，于Glu损伤前达到最佳保护效果，Glu氧化性毒性导致神经细胞发生凋亡兼具坏死特征的死亡，Glu损伤组细胞凋亡率(21．63％)明显高于正常对照组(0．09％)及GP保护组(8．94％)。结论：GP可明显拮抗Glu介导的氧化性神经毒性。     

运脾开胃方含药血清对HGSMCs中MLC磷酸化水平的调节机制研究

〖H观察运脾开胃方含药血清对人胃窦平滑肌细胞（HGSMCs）内Ca²⁺、MLC、pMLC的干预作用以及与Ghrelin受体（GHSR）的关系,研究运脾开胃方治疗厌食症的机制。方法 培养HGSMCs,制备低、中、高浓度的运脾开胃方含药血清;采用激光共聚焦、Western blot法检测运脾开胃方含药血清对HGSMCs内Ca²⁺、MLC、pMLC的影响;阻断HGSMCs表面GHSR并干扰细胞内外Ca²⁺的正常调控,研究运脾开胃方含药血清对HGSMCs内pMLC的干预机制。结果 低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在一定时间范围内上调HGSMCs内Ca²⁺的相对荧光强度（P<0.05~0.01）;低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在10min时显著上调HGSMCs内pMLC水平（P<0.05~0.01）;(DLys3)GHRP6、Thapsigargin、DHBSS液能显著抑制高剂量运脾开胃方含药血清在10min时对pMLC的上调作用（P<0.01）。结论 运脾开胃方含药血清可能通过激活GHSR提高细胞内Ca²⁺水平来促进MLC磷酸化。     

绞股蓝总皂苷对谷氨酸所致大鼠海马组织损伤的保护作用

目的探讨绞股蓝总皂苷(gypenosides, GP)对大鼠侧脑室注射谷氨酸(glutamate, Glu)引起的海马组织氧化损伤的保护作用。方法将大鼠随机分为假手术组、Glu损伤组、GP低（200mg/kg）、中（400mg/kg）、高（800mg/kg）剂量组。GP组预先灌胃给药10d。大鼠经侧脑室注射Glu后2h取脑，测定各组大鼠海马组织匀浆中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 活性及产生羟自由基的能力;制备海马组织切片，观察各组形态学变化。结果Glu损伤组大鼠海马组织中MDA含量和羟自由基生成能力均高于假手术组(P＜0.05)，而SOD和GSH-Px活性降低(P＜0.05)；与Glu损伤组比较，GP组MDA含量和产生羟自由基的能力降低(P＜0.01)，SOD和GSH-PX活性明显增强(P＜0.01)；HE染色显示, GP组海马神经元变性及坏死较Glu损伤组明显减少。GP 400mg/kg对Glu所致海马组织氧化损伤的保护作用最为明显。结论GP通过增强抗氧化酶活性，抑制羟自由基和脂质过氧化物生成而减轻Glu介导的氧化性神经损伤，发挥神经保护作用。     

龙葵碱对雄性小鼠睾丸支持细胞毒性的初步研究

目的 初步探讨龙葵碱对睾丸支持细胞的毒性。方法 原代培养睾丸支持细胞,MTT 法检测不同浓度龙葵碱对于支持细胞的毒性作用;激光共聚焦显微镜观察细胞内线粒体膜电位的变化以及［Ca²⁺］_i 的改变。结果 龙葵碱作用于睾丸支持细胞 72 h 的 IC₅₀ 为 22.29 μmol/L。随着剂量的增大,细胞内线粒体膜电位降低,［Ca²⁺］_i 升高。结论 龙葵碱通过损伤小鼠睾丸支持细胞线粒体,升高细胞 ［Ca²⁺］_i,从而对睾丸支持细胞产生毒性作用。     

针刺对局灶性脑缺血大鼠海马神经元细胞[Ca2+]i的影响

[目的]研究脑缺血不同时点大鼠海马神经元内游离Ca²⁺浓度[Ca²⁺]_i及醒脑开窍针刺对其影响,探讨醒脑开窍针刺法早期干预对脑缺血的治疗作用。[方法]建立大脑中动脉所致局灶性脑缺血(MCAO)模型,采用醒脑开窍针刺法治疗,采用激光扫描共聚焦显微技术动态观察脑组织海马CA1区锥体细胞[Ca²⁺]_i在不同时间点的变化。[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞内游离[Ca²⁺]_i(以细胞内Ca²⁺相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血1 h时升高,持续升高至缺血24 h时(P<0.05)。假手术组与正常组相比[,Ca²⁺]_i变化差异无统计学意义(P>0.05)。相应时间点非穴位针刺组与模型组[Ca²⁺]_i比较,无统计学意义(P>0.05)。在相应时间点,醒脑开窍针刺组[Ca²⁺]_i低于模型组(P<0.01)。[结论]急性局灶性脑缺血后大鼠海马神经细胞[Ca²⁺]_i随缺血时间的延长而持续升高,提示细胞内钙超载;醒脑开窍针刺组能有效调节缺血区的[Ca²⁺]_i,提示在缺血后针刺治疗效果越早越好,为临床及早应用针刺治疗缺血性脑血管病提供了理论依据。     

羊栖菜多糖SFPS-B1诱导SGC-7901细胞凋亡及对细胞［Ca2+］i和pH值的影响

目的 研究羊栖菜多糖 SFPS-B1 诱导人胃癌细胞 SGC-7901 凋亡作用及对细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响。方法 采用 MTT 法检测 SFPS-B1 对细胞增殖的影响;采用荧光显微镜观察细胞凋亡形态;采用激光共聚焦显微镜观察 SFPS-B1 对 SGC-7901 细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响。结果 SFPS-B1 对 SGC-7901 细胞增殖有抑制作用,可使细胞体积缩小、出现凋亡小体。药物作用后细胞［Ca²⁺］_i 明显上升,pH 值明显降低。结论 SFPS-B1 具有抑制人胃癌 SGC-7901 细胞增殖并诱导凋亡作用,对细胞［Ca²⁺］_i 和 pH 值的影响在其诱导 SGC-7901 细胞凋亡中发挥了作用。     

PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷拮抗谷氨酸诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用

目的应用磷脂酰肌醇3位羟基激酶(PI3K)的特异性阻断剂LY294002,研究PI3K/Akt信号转导通路在绞股蓝皂苷(GPs)拮抗谷氨酸(Glu)诱导胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤中的作用。方法以体外原代培养的14～15d胎鼠大脑皮层神经元为研究对象,用相差显微镜进行形态学观察,MTT法检测神经元存活率,流式细胞仪检测神经元凋亡率,Western blot法检测磷酸化Akt和总Akt的表达,分析PI3K/Akt信号转导通路在GPs拮抗Glu诱导神经元氧化性损伤中的作用。结果 GPs可抑制Glu诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤,使神经元存活率上升,凋亡率降低,磷酸化Akt表达增加,PI3K的特异性抑制剂LY294002明显抑制了GPs对神经元的保护作用。结论绞股蓝皂苷激活了PI3K/Akt信号转导通路,拮抗谷氨酸诱导的胎鼠大脑皮层神经元氧化性损伤。     

抗精神病药奎硫平的神经保护作用

目的：探讨抗精神病药奎硫平的神经保护作用,阐明其神经保护作用的机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制谷氨酸(Glu)损伤模型以模拟抑郁症时的病理改变。实验分为正常对照组、Glu损伤组和奎硫平给药组。体外MTT法检测各组神经元存活率,酶学检测试剂盒测定不同浓度（50、100、200和500μmol·L-1）奎...     

依达拉奉对谷氨酸诱导神经元释放一氧化氮的影响

目的探讨依达拉奉（Edaravone,Eda）对谷氨酸（Glutamate,Glu）诱导皮层神经元释放一氧化氮的影响。方法 SD乳鼠皮层神经元原代培养7d后,分对照组、Glu组（50μM）以及Glu（50μM）＋Eda（100μM）组,分别在加药前、加药6h和24h后取三组培养基以硝酸还原酶法检测NO浓度。结果加药前三组培养基的NO浓度没有显著差异（P〉0.05）,加药6h、24h后,Glu组和Glu＋Eda组NO浓度均显著高于对照组（P〈0.01）,而且Glu组NO浓度显著高于Glu＋Eda组（P〈0.01）。结论依达拉奉能降低谷氨酸诱导皮层神经元释放一氧化氮。     

还原型谷胱甘肽对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞的干预性研究

目的：探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法：将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为正常对照与GSH不同浓度处理组,缺氧、复氧前均给予0、40、80、160mg/L浓度的GSH,缺氧2 h,复氧1 h。应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性,用硫代巴比妥酚显色法测定丙二醛（MDA）含量。结果：与对照组相比,单纯缺氧/复氧（0 mg/L）组SOD活性显著下降、MDA水平显著升高（P＜0.01）。GSH预处理以剂量依赖性减轻细胞活力下降及MDA的上升,而对SOD的作用则在160 mg/L组达到峰值。结论：GSH对缺氧/复氧损伤的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与GSH的抗氧化作用有关。     

新型番荔枝酰胺衍生物FLZ对去血清培养损伤星形胶质细胞的保护作用

目的 评价番荔枝酰胺衍生物FLZ对去血清培养损伤星形胶质细胞的作用,并探讨其可能的作用机制.方法 在去血清培养的星形胶质细胞模型上,以3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞存活率,Hochest 33342染色观察细胞核形态变化,荧光比色法检测细胞内活性氧簇(ROS)生成.酶联免疫...     

抗抑郁药万拉法新的神经保护作用

目的：探讨万拉法新的神经保护作用及其机制。 方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制谷氨酸损伤模型以模拟抑郁症时的病理改变,在体外通过MTT法检测万拉法新对神经元存活率的影响,并且测定万拉法新应用前后LDH的释放、GSH水平、MDA含量和SOD活性的改变情况。 结果：万拉法新抵抗了谷氨酸诱导的神经元损伤,提高了神经元存活率,减少了LDH的释放,维持细胞膜的完整性,提高了神经细胞内SOD活性和GSH水平,降低了MDA含量。 结论：万拉法新具有神经保护作用。     

脑溢安含药血清对谷氨酸致培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 :研究中药复方脑溢安对培养大鼠皮层神经元谷氨酸兴奋毒损伤的保护作用 ,为脑溢安用于治疗中风提供实验依据。方法 :建立谷氨酸致离体培养的大鼠皮层神经元兴奋毒损伤模型 ,用中药脑溢安浸膏粉含药血清进行干预 ,检测各组细胞培养液中的乳酸脱氢酶 (LDH)活性。结果 :脑溢安浸膏粉含药血清能显著地对抗培养皮层神经元的谷氨酸兴奋毒损伤 ,培养液中LDH活性明显降低 (P <0 .0 1)。实验过程中 ,含药血清加入量 5 %至 2 0 %均可。致神经元损伤的谷氨酸浓度以 1mmol·L- 1 以下为宜。结论 :脑溢安含药血清对谷氨酸致培养皮层神经元损伤具有明显保护作用     

阿米替林对缺氧缺糖培养神经细胞的保护作用

目的 研究阿米替林(Ami)对缺氧缺糖培养大鼠脑皮层神经细胞的保护作用.方法 分离培养15～18 d胎龄的大鼠神经细胞,用连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基缺糖模拟细胞缺血性损伤,测定乳酸脱氢酶、一氧化氮、丙二醛和超氧化物歧化酶的含量变化,观察缺氧缺糖对神经细胞的损伤及Ami的保护作用.结果 缺氧缺糖引起神经细胞明显损伤性变化,死亡率升高,培养上清液中乳酸脱氢酶、一氧化氮含量升高,细胞匀浆中丙二醛生成增加,超氧化物歧化酶含量明显减少.Ami 10-7～10-5mol/L能不同程度地减轻上述损伤性变化.结论 Ami对神经细胞"缺血"性损伤有保护作用,机制可能与抗脂质过氧化及钙拮抗作用有关.     

TMB-8体外对神经细胞保护作用及其机理的研究

目的 研究ＴＭＢ－８［８－（Ｎ,Ｎ－二乙胺）－ｎ－辛基－３,４,５－三甲氧基苯甲酸酯］的神经保护作用及其可能机制。方法 用氧－葡萄糖剥夺模型观察ＴＭＢ－８对培养的大鼠神经细胞形态、细胞膜通透性和细胞内丙二醛（ＭＤＡ）、总过氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的影响。结果 经氧－葡萄糖剥夺１ｈ后,无血清培养２４ｈ的神经细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出明显增加