脐血巨核系造血祖细胞的初步研究

用甲基纤维素法培养１５例新生儿脐血巨核系造血祖细胞（ＣＦＵ－Ｍｅｇ），观察了ＣＦＵ－Ｍｅｇ的生长特性、集落产率与接种细胞数的相关性，并与成人骨髓及外周血ＣＦＵ－Ｍｅｇ的数量进行了比较。结果表明，脐血中富含ＣＦＵ－Ｍｅｇ，且分裂快、子代细胞多，形成集落早呈现活跃的增殖状态，其数量低于成人骨髓但个体间差异明显，２６．７％的样本ＣＦＵ－Ｍｅｇ产率高于骨髓。接种细胞数量与ＣＦＵ－Ｍｅｇ的产率在一定范围内呈良好的线性关系。     

人类脐血造血细胞研究现状

人类脐血中造血细胞的数量和质量优于外周血，可与骨髓媲美，且具有来源丰富无病原体污染、抗原性弱、淋巴细胞不成熟等优点，故在８０年代末，首例用脐血代替骨髓移植取得成功。随着仿体内扩增技术的建立，脐血造血细胞可在体外进行数十倍的扩增，从而使脐血移植具有广泛的应用前景。     

脐血混合移植的基础和临床研究

用单层琼脂法进行单一和混合脐血粒－单造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）培养，结果发现不同脐血单个核细胞（ＭＮＣ）间可能互为造血细胞集落刺激活性，混合培养ＣＦＵ一ＧＭ产率明显高于单独培养之和的均值（Ｐ＜０．０５）。长期深低温保存可累积脐血造血祖细胞数量，且可降低Ｔ４淋巴细胞的抗原表达，有利减轻移植排斥。在实验基础上，对２例晚期盆腔肿瘤患儿进行了强力化疗和混合脐血移植术，病情均于一个月内完全缓解，骨髓造血重建，为造血组织移植开拓了新的供源，可能使更多的不治之症患者获得治疗的机会。     

大鼠胚胎卵黄囊内和腹腔内人脐血造血干细胞移植的比较

目的:探讨人脐血造血干细胞宫内移植的更好途径。方法:将人脐血单个核细胞注入大鼠胚胎的卵黄囊及胎鼠腹腔内,并设阴性及空白对照组,观察手术并发症及妊娠结局,待出生后1个月及2个月,分别用流式细胞仪和免疫组化检测移植情况。结果:胎鼠腹腔途径组的手术并发症发生率、胎鼠丢失率显著高于卵黄囊途径组(P<0.001,P<0.05)。出生后实验组仔鼠外周血中检测到逐渐增加的人CD3细胞,卵黄囊组的增殖量高于腹腔途径组(P<0.05)。卵黄囊组的种植率为89.7％,腹腔组的种植率为64.0％,二者比较有显著性差异(P<0.05)。出生后2个月在仔鼠的肝、脾及胸腺组织中均检测到人CD3、CD20及CD34~+阳性细胞,卵黄囊组的表达量明显高于腹腔组(P<0.001)。结论:大鼠胚胎的卵黄囊途径是人脐血造血干细胞进行宫内移植的一条较好途径。     

脐血采集和保存的实用问题

脐血含有大量的造血干细胞,在特定的条件下,经刺激诱导,可分化为特定的细胞.目前干细胞是基因治疗法最理想的靶向细胞,一旦干细胞被导入异源基因,这种基因就会随着干细胞的自我复制和分化而终生表达.脐血干细胞移植可弥补骨髓及外周血造血干细胞移植的不足,脐血可替代骨髓及外周血进行干细胞移植.1988年,世界首例脐血干细胞移植在法国成功实施,开始了脐血干细胞移植临床应用的新纪元.     

应用不同剂量米非司酮中期引产对胎儿脐血染色体稳定性影响的临床研究

目的探讨米非司酮用于中期引产对胎儿姐妹染色单体交换率(SCE)和微核(MN)率的影响。评估不同剂量米非司酮对母亲及胎儿染色体稳定性影响。方法选择符合研究条件的中期引产患者120例,随机分为4组,1～4组分别口服米非司酮0、150、200、300mg加水囊引产,于产后取脐血进行SCE交换试验和细胞分裂阻滞法MN试验。结果各组胎儿脐血SCE率进行单因素方差分析(P>0.05)差异无显著性。各组胎儿脐血MN率经KruskalwallisH非参数检验(P>0.05),差异无显著性。结论孕妇应用150、200、300mg剂量米非司酮引产,不会引起其子代SCE和MN增加。     

脐血中树突状细胞的体外诱导和抗肿瘤效应的实验研究

探讨脐血来源的树突状细胞（ＤＣ）的体外诱导及其在抗肿瘤免疫中的作用。方法无菌条件下常规要脐血,采用淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,去除悬浮细胞后获得单核细胞。将获得的单核细胞分为两组,实验组１在含有细胞因子白介素４（ＩＬ－４）、粒单细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的综合成培养液ＤＭＥＭ中培养,对照组１培养液中未加上述细胞因子,第１０天收集部分细胞进行细胞表型分析,并     

妊娠中晚期取胎儿脐血制作染色体行核型分析的研究

对有家族遗传病史,异常孕、产史的高危孕妇及发现胎儿畸形时,对胎儿行染色体检查是产前诊断的重要内容。1989年至1999年我们在B超监测下取胎儿脐血制作染色体进行了核型分析的研究,现报告如下。1 资料与方法1.1 临床资料 72例妊娠中、晚期孕妇在B超监测下取胎儿脐血制备染色体,以获取胎儿染色体核型。孕龄22～３４周,孕妇24～３７岁。穿刺指征为有畸形胎儿分娩史5例,本次妊娠B超诊断胎儿畸形20例,有重复性流产、死产等不良孕、产史29例,有家族遗传病史13例(其中家族染色体异常7例),其他咨询5例。1.2 方法1.2.1 胎儿脐血的穿刺方…     

足月分娩孕妇母血及脐血中表皮生长因子水平的研究

足月分娩孕妇母血及脐血中表皮生长因子水平的研究高天金志魁余艳红钟梅张绍云陈翠华周凤琴表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）是一种分子量为６０４５的多功能肽类物质，可对中、外胚层起源的正常及肿瘤组织产生各种影响。ＥＧＦ可...     

人类巨细胞病毒感染对脐血红系祖细胞同源盒B6基因表达的影响

目的研究脐血红系祖细胞的HOXB6基因的表达情况以及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对红系祖细胞的HOXB6基因表达的影响，以探讨HCMV导致脐血 红系祖细胞损伤的机制。 方法在泸州医学院附属医院儿科以实时荧光定量PCR技术(FQ-RT-PCR)检测人类巨细胞病毒感染和(或)用全反式维甲酸(ATRA)处理后HOXB6基因的 表达水平。 结果人脐血红系祖细胞可表达HOXB6基因；HCMV感染后，红系祖细胞HOXB6基因的表达明显下调；ATRA能显著上调红系祖细胞HOXB6基因的表达水 平，且能够在一定时间内上调HCMV感染后的红系祖细胞HOXB6基因的表达。 结论HCMV感染能诱导脐血红系祖细胞HOXB6的表达下调，HCMV有可能通过调控HOXB6基因表达异常而引起红系祖细胞的增殖障碍。     

产妇血、羊水和新生儿脐血瘦素水平与其体重关系的研究

目的　探讨产妇血、羊水和新生儿脐血中的瘦素水平与其体重的关系。方法　采用放射免疫法 ,分别检测 34例产妇血、羊水及新生儿脐血的瘦素水平 ,并对其结果进行相关性分析。结果　 (1)产妇血、羊水、新生儿脐血中瘦素水平分别为 (2 6 .6± 12 .2 ) μg/L、(12 .3± 9.8) μg/L、(18.7±14.8) μg/L ;(2 )新生儿体重与产妇血、羊水、新生儿脐血中的瘦素水平有明显相关性 ,相关系数分别为 0 .5 3(P <0 .0 1)、0 .73(P <0 .0 1)、0 .6 7(P <0 .0 1) ;(3)产妇血瘦素水平与产妇体重有明显相关性 ,相关系数为 0 .6 1(P <0 .0 1) ;(4)羊水与新生儿脐血中的瘦素水平也有明显相关性 ,相关系数为 0 .72 (P<0 .0 0 1) ;(5 )羊水、新生儿脐血中的瘦素水平与母亲体重无明显相关性 ,相关系数分别为 0 .2 2、0 .18(P均 >0 .0 5 )。结论　检测妇女妊娠过程中血液和羊水中的瘦素水平 ,对于评估胎儿的体重和发育可能具有重要意义     

妊娠高血压综合征患者外周血与脐血血小板蛋白激酶C活性变化的研究

目的　探讨不同程度妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )患者血小板蛋白激酶 C(PKC)活性变化与妊高征病情程度及胎儿宫内生长受限 (FGR)之间的关系。　方法　底物蛋白磷酸化法检测35例妊高征患者及正常孕妇外周血和新生儿脐血血小板细胞膜和细胞浆的 PKC活性。　结果　无论外周血还是脐血 ,轻度妊高征患者血小板的细胞膜及细胞浆 PKC活性与正常妊娠组相比无明显差异。中度及重度妊高征患者血小板的细胞膜及细胞浆 PKC活性显著高于正常妊娠组 [(4 6± 6与 37±4) pmol/ (min· mg protein) ,P<0 .0 1];正常妊娠组血小板的细胞膜及细胞浆活性无明显差异。中度及重度妊高征患者血小板的细胞膜 PKC活性显著高于细胞浆且随病情加重而逐渐明显 [(16± 4与12 .8± 2 .7) pmol/ (min· mg protein) ,P<0 .0 5 ],中、重度妊高征患者合并 FGR组血小板细胞膜的PKC活性均明显高于中、重度妊高征患者非合并 FGR者 [(4 8± 8与 40± 7) pmol/ (m in· mgprotein) ,P<0 .0 1,(4 6± 10与 39± 6 ) pmol/ (min· m g protein) ,P<0 .0 1]。　结论　中度及重度妊高征患者外周血及脐血中血小板 PKC存在异常活化状态 ,其异常活化程度随妊高征病情加重而增高 ;血小板 PKC异常活化可能介导 FGR的发生和发展     

脐血来源的细胞毒性T淋巴细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤治疗的研究

目的研究脐血来源的细胞毒性T淋巴细胞用于卵巢癌过继免疫治疗的可行性。方法采用肿瘤细胞和淋巴细胞混合培养法获得脐血来源的细胞毒性T淋巴细胞对人卵巢癌裸鼠移植瘤进行治疗并与外周血来源淋巴因子激活的杀伤细胞相对照。结果脐血来源的细胞毒性T淋巴细胞有明显的抑瘤作用,移植物抗宿主病的发生不明显。结论脐血可作为过继免疫治疗中效应细胞来源试用于卵巢癌的治疗。     

母血、脐血中脂联素水平与胎儿体重之间关系的研究

目的:研究母血和脐血中脂联素水平与胎儿体重之间的关系。方法:随机选取102例无母儿合并症、并发症的足月单活胎病例。按新生儿出生体重分为3组:3000g组、3000~3999g组和≥4000g组。分析比较各组的临床指标及母血、脐血脂联素水平。结果:脐血中脂联素浓度比母血高2.90倍,脐血和母血脂联素浓度无相关性(r=0.132,P=0.199)。3组的母血脂联素浓度比较,差异无统计学意义(P=0.074);脐血脂联素浓度比较,差异有统计学意义(P=0.011);母血脂联素浓度与新生儿出生体重无相关性(r=0.015,P=0.883);脐血浓度与新生儿出生体重有关(r=0.263,P=0.008)。不同性别新生儿病例的母血脂联素水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。母血脂联素浓度与孕产妇孕周呈正相关(r=0.201,P=0.045),脐血脂联素浓度与孕妇孕前体重指数呈正相关(r=0.227,P=0.026),女性围产儿脐血脂联素浓度高于男性(P=0.020)。结论:母血和脐血脂联素浓度无明显相关性;脐血脂联素可能参与了胎儿体重的调节。     

子痫前期产妇血液、胎盘和脐血中多不饱和脂肪酸含量与正常产妇的比较研究

目的:比较子痫前期产妇和正常产妇血液、胎盘和脐血中多不饱和脂肪酸(PUFA)含量的差别。方法:收集30例正常妊娠和30例子痫前期产妇血液、胎盘和脐血标本,采用石英毛细管柱气相色谱法测定两组产妇血液、胎盘和脐血中的多种脂肪酸成分并对其中5种PUFA[亚油酸(LA)、亚麻酸(ALA)、花生四烯酸(AA)、二十二碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)]的绝对含量和百分含量进行比较。结果:子痫前期组产妇血中AA和DHA的绝对含量较正常妊娠组产妇高(P0. 05),但其百分含量比较差异无统计学意义(P0. 05)。产妇血中LA的百分含量在子痫前期组较正常妊娠组低(P0. 05)。胎盘中AA/DHA的比值在子痫前期组较正常妊娠组产妇高(P0. 05),胎盘中ALA的百分含量在子痫前期组较正常妊娠组高(P0. 05);脐血中LA的百分含量在子痫前期组较正常妊娠组高(P0. 05)。结论:子痫前期产妇血液、胎盘和脐血中PUFA的含量发生了改变,这些改变可能与子痫前期的发生有关,还有待进一步研究。     

核因子-κB在小鼠胚泡着床前后子宫表达的初步研究

探讨核因子-κB(NF-κB)在小鼠胚泡着床过程中是否存在的短暂激活。方法:采用免疫组织化学检测小鼠子宫内膜NF-κB的亚基p65蛋白的定位和表达,Western印迹法检测子宫内膜NF-κB的抑制性蛋白IκBα的降解。结果:p65在小鼠胚胎着床前后子宫内膜均有表达,其部位主要在腔上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆部分,基质细胞和子宫肌层也有微弱表达。妊娠后子宫内膜p65的表达增加,妊娠d5达最高值,d8仍然维持较高水平;而d5IκBα的降解最明显。结论:NF-κB可能通过其短暂激活来参与调节小鼠胚泡着床。     

神经干细胞移植治疗无神经节细胞性巨结肠病的实验研究

该病的治疗过程中,很多方法都已尝试,但是效果并不明显。出现了新的思路,就是在干细胞理论和干细胞移植技术上的新进展,展现出一条崭新的途径。考虑以上的观点,设计了这项研究,实验的目的是为了能够很好的探索研究神经干细胞在治疗无神经节方面的可行性,并且为治疗无神经节细胞性巨结肠病的治疗寻找一个新的方法。本文有一下几部分组成：神经干细胞的分离培养和纯化扩增、神经干细胞的肠壁移植后检测和内移植、无神经节细胞性巨结肠病模型的建立。     

口服避孕药妇女子宫颈上皮巨幼样变及应用叶酸治疗的研究

对１０１例口服避孕药妇女（服药组）和３３例放置宫内节育器正常妇女（对照组）的宫颈蜓吕颈上皮细胞形态学变化的观察，同时测定血清及红细胞内的叶酸含量，结果：服药组平均宫颈上皮细胞核直径显著大于对照组（Ｐ＜０．００１）。服药组２９例（２８．７％）出现宫颈上皮巨幼样变，对照组出现２例（６．５％），两者比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。两组的血清叶酸含量、血红蛋白和中性分叶核指数相比较，无差别。服药组红细     

子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体表达的初步研究

目的探讨子宫内膜癌细胞中细胞膜雌激素受体的表达情况。方法对子宫内膜癌高分化细胞系Ishikawa和中分化细胞系HEC-1A的细胞膜和整个细胞(包括细胞膜、细胞质和细胞核)雌激素受体(ER)α、β表达情况进行研究。用来检测细胞膜雌激素受体的细胞经固定处理,用来检测整个细胞ER的细胞经渗透处理,分别对固定与渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞进行间接免疫荧光染色,并在荧光显微镜下观察ER的分布。另对Ishikawa和HEC-1A活细胞(用来检测细胞膜雌激素受体)、渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞(用来检测整个细胞ER)进行间接免疫荧光染色,并用流式细胞仪检测ER的相对荧光强度来表示ER的表达强度。以上实验均以未用一抗的细胞为阴性对照。结果荧光显微镜下观察显示,固定处理的Ishikawa和HEC-1A细胞膜均可见ERα和ERβ标记的荧光,渗透处理的Ishikawa和HEC-1A细胞,除细胞膜外,在细胞内部也可见ERα和ERβ标记的荧光。流式细胞仪检测显示,Ishikawa活细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为1．09±0．21和1．27±0．33,高于阴性对照(均为1．00),但两者分别与阴性对照比较,差异均无统计学意义(P＞0．05);渗透处理的Ishikawa细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为4．21±0．34和4．69±1．96,均高于活细胞,两者分别与活细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。HEC-1A活细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为1．58±0．13和1．49±0．04,高于阴性对照(均为1．00),与阴性对照分别比较,差异均有统计学意义(P＜0．05);渗透处理的HEC-1A细胞ERα及ERβ相对荧光强度分别为2．34±0．33和2．52±0．15,均高于活细胞,两者分别与活细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。结论子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞中均存在细胞膜雌激素受体。