喉鳞癌组织Cyclin G1基因表达及其临床意义的研究

目的：探讨Cyclin G1基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法：取40例喉鳞癌组织、10例癌旁正常喉黏膜组织及10例声带息肉组织，应用RT-PCR方法检测Cyclin G1基因mRNA的表达，并分析表达结果与患者临床病理特征之间的关系。结果：喉癌组织中的Cyclin G1 mRNA表达明显高于癌旁正常黏膜组织及声带息肉组织中的表达，P〈0．05。中、低分化与高分化喉癌比较，后者Cyclin G1表达较低，差异有统计学意义，P〈0．05。有淋巴结转移组比无淋巴结转移组喉癌组织Cyclin G1表达显著增高，P〈0．05。Cyclin G1的表达与癌组织分化及颈淋巴结转移有关。结论：Cyclin G1在喉癌组织中有异常高表达，并与喉癌发生发展有一定联系，其高表达可能是喉癌预后不良的因素之一。     

凋亡抑制蛋白FLIP在喉部病变组织中的表达及意义

目的:检测凋亡抑制蛋白FLIP在人喉部常见病变组织中的表达并揭示其在喉癌等病变发生发展中的意义。方法:采用免疫组织化学EliVision法检测38例喉鳞状细胞癌标本,30例声带息肉组织标本,26例喉乳头状瘤标本,15例正常喉黏膜组织标本,喉癌Hep-2细胞系10个细胞爬片样本中FLIP蛋白的表达并进行统计学分析比较。结果:凋亡抑制蛋白FLIP在38例喉癌标本中有32例阳性表达(84.2%),在喉癌Hep-2细胞系10个细胞爬片样本中全部阳性表达(100%),26例喉乳头状瘤中5例阳性表达(19.2%),30例声带息肉标本中仅2例阳性表达(6.7%),而正常喉黏膜组织中均为阴性。凋亡抑制蛋白FLIP在喉癌组织中表达水平与喉部良性肿瘤和良性病变组织中的表达水平有显著差异(P<0.01)。结论:凋亡抑制蛋白FLIP的表达水平与喉部病变组织的良恶性程度密切相关,提示其可能与喉癌的发生相关。     

凋亡抑制蛋白FLIP在喉部病变组织中的表达及意义

目的：检测凋亡抑制蛋白FLIP在人喉部常见病变组织中的表达并揭示其在喉癌等病变发生发展中的意义。方法：采用免疫组织化学EliVision法检测38例喉鳞状细胞癌标本,30例声带息肉组织标本,26例喉乳头状瘤标本,15例正常喉黏膜组织标本,喉癌Hep-2细胞系10个细胞爬片样本中FLIP蛋白的表达并进行统计学分析比较。结果：凋亡抑制蛋白FLIP在38例喉癌标本中有32例阳性表达（84.2%）,在喉癌Hep-2细胞系10个细胞爬片样本中全部阳性表达（100%）,26例喉乳头状瘤中5例阳性表达（19.2%）,30例声带息肉标本中仅2例阳性表达（6.7%）,而正常喉黏膜组织中均为阴性。凋亡抑制蛋白FLIP在喉癌组织中表达水平与喉部良性肿瘤和良性病变组织中的表达水平有显著差异（P〈0.01）。结论：凋亡抑制蛋白FLIP的表达水平与喉部病变组织的良恶性程度密切相关,提示其可能与喉癌的发生相关。     

喉癌组织中c-jun蛋白的表达及其对细胞增殖和凋亡作用的研究

背景与目的:c-jun是早期原癌基因,其蛋白产物为AP-1(activatingprotein-1)转录因子的成分之一,参与许多生长因子和细胞因子基因的转录。最近人们发现肿瘤细胞内c-jun蛋白的表达水平和活性异常升高,其起着调控细胞增生、生存和凋亡的作用。本研究通过检测c-jun蛋白在喉癌组织中的表达并计算表达指数,分析其与临床因素的关系,探讨c-jun蛋白对喉癌细胞的调控作用。方法:收集我院耳鼻喉科手术切除的52例喉鳞状细胞癌组织、15例声带息肉组织和10例喉正常组织标本进行免疫组化研究,观察c-jun蛋白在这3种标本中的定位与表达。结果:喉癌组织中c-jun蛋白的表达指数犤(56.41±24.8)%犦不但明显高于声带息肉犤(32.48±17.8)%犦和喉正常组织(无表达),而且与喉癌组织分化程度和颈淋巴结转移密切相关(P均<0.01),但是与临床分期无相关性(P>0.05)。结论:c-jun蛋白在喉癌细胞中表达水平明显增高,其表达指数与喉癌组织分化程度、颈淋巴结有无转移有关。     

喉鳞癌中p-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究

目的:检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和Skp2 蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性.方法:采用免疫组织化学法检测p-STAT3和Skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全(或近全)切除者癌旁(＞2.0 cm)正常黏膜中的表达,应用Metamorph/DP10/BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析.结果:与癌旁正常黏膜组相比较,p-STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达(P＜0.01);p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关(P＜0.05或P＜0.01);在喉鳞癌组织中p-STAT3蛋白和Skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0.8041(P＜0.01).结论:p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关.     

c-FLIP和RECK在喉鳞状细胞癌及癌旁黏膜组织中的表达及其对于喉癌手术切除的意义

目的探讨癌基因c-FLIP和抑癌基因RECK在喉癌组织中的表达与喉癌临床特征的关系,了解喉癌的生物学行为,并从细胞和基因水平探讨喉癌手术安全切缘范围。方法分别采用PV9000免疫组化两步法及RT-PCR方法检测38例喉鳞癌组织及距癌组织边缘2 mm、5 mm、10mm组织中c-FLIP和RECK蛋白的表达及mRNA转录情况,同时取距离癌组织边缘15 mm的正常黏膜作为对照。结果(1)c-FLIP和RECK在喉鳞癌组织中的表达水平与患者临床分期和肿瘤病理学分级分别成正相关和负相关。(2)c-FLIP在伴颈淋巴结转移组中的表达水平明显高于非转移组,而RECK则正好相反。(3)c-FLIP表达情况依癌组织→癌旁2 mm→癌旁5 mm→癌旁10 mm→癌旁15 mm黏膜顺序递减,而RECK则递增。c-FLIP和RECK在癌组织与癌旁5 mm、10 mm及正常黏膜组织之间的表达水平有显著性差异(P〈0.05),而与癌旁2 mm处组织之间的差异无统计学意义。结论(1)c-FLIP和RECK两因子在喉鳞癌组织中的表达水平与喉鳞癌患者的临床病理参数密切相关。(2)c-FLlP和RECK可能都参与了喉鳞癌的发生、发展,并与喉鳞癌的浸润及转移有密切关系。(3)c-FLIP和RECK在喉鳞癌组织中及癌旁不同距离组织中的表达情况进一步表明喉鳞状细胞癌手术切除的范围应该包括距离肿瘤边缘5 mm之内的癌旁黏膜组织。     

喉鳞癌组织中p53蛋白的表达及其临床意义

目的　探讨p5 3蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法　采用免疫组化技术检测p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁非典型增生组织及正常组织中的表达。结果　p5 3蛋白在喉鳞癌、癌旁和正常组织中阳性表达率分别为 5 3 .7%、3 8.1%和0 ,三者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;重度非典型增生组织与中、轻度增生、癌旁单纯增生和癌旁正常黏膜 p5 3阳性表达分别有显著性差异 ,表达率分别为 68.8%、2 1.4%、16.7%、8.3 %和 0 ;在肿瘤浸润的前沿部 p5 3阳性表达显著强于浅表部 (P <0 .0 5 ) ;且癌巢边缘 p5 3表达显著强于中央部 (P <0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达与喉鳞癌的分化、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3的过度表达可能为喉鳞癌的早期发生事件 ,癌旁组织中已发生p5 3基因突变的细胞可能是肿瘤复发的根源 ;p5 3表达与喉鳞癌的浸润生长、分化及转移有关 ,为判断预后的 1个有意义指标。     

hOT7T175蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测hOT7T175蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达并探讨其临床意义。方法:收集我院病理科喉鳞状细胞癌60例及癌旁喉组织（术后病理证实）20例。应用免疫组织化学方法（IHC）检测hOT7T175蛋白在喉鳞状细胞癌和癌旁喉组织中的表达情况。结果:喉鳞状细胞癌组织和癌旁喉组织中hOT7T175蛋白阳性率分别为58.33％和95.00％,二者差异有统计学意义（P<0.05）。hOT7T175蛋白与临床分期、病理分级、淋巴结转移分级密切相关。结论:hOT7T175蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达率显著低于癌旁喉组织;hOT7T175基因可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展过程有关。     

喉鳞癌中p73、p63的表达及其临床意义

目的:探讨p73、p63在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达及与喉鳞癌发生、发展的关系和生物学意义。方法:应用原位分子杂交方法,检测p73mRNA、p63mRNA在47例喉鳞癌组织、癌旁组织及14例正常喉组织中的表达。结果:p73在正常喉组织中不表达;在喉癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为57.4%(27/47)、29.8%(14/47),分别与正常喉组织比较,差异有统计学意义(P<0.05);组织分化程度越低、TNM分期越晚、淋巴结转移率越高,则p73 mRNA表达越强(均P<0.05)。p63在喉鳞癌、癌旁组织中的阳性表达率为91.5%(43/47)、93.6%(44/47)、分别与正常喉组织(57.1%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);p63与喉癌临床病理特征无关。结论:p73表达有助于判断喉鳞癌的生物学行为和预后。p63对LSCC生物学行为的影响较小。     

Sema4C在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨脑信号蛋白4C(Sema4C)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化EnVision 二步法检测82例喉鳞状细胞癌及癌旁正常喉黏膜组织中Sema4C和微小染色体维持蛋白2(MCM2)蛋白的表达水平,用D2-40标记淋巴管,计数微淋巴管密度(LMVD),分析三者的表达水平变化与临床病理指标的关系。结果:Sema4C、MCM2蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率分别为60%(49/82)及98%(80/82),均显著高于癌旁正常喉黏膜组织(P<0.01),LMVD在癌及癌旁喉黏膜中的差别无统计学意义(P=0.077); Sema4C、MCM2的表达水平与颈部淋巴结转移有关,与年龄及肿瘤T分级无显著相关。Sema4C、MCM2 蛋白表达水平和LMVD,两两间均呈正相关关系(P<均0.05)。结论:Sema4C的异常高表达与喉鳞状细胞癌的发生发展、转移及预后有关,提示Sema4C有可能成为判断喉鳞状细胞癌生物学行为及预后指标。     

Omi/HtrA2对前列腺癌细胞株PED/PEA-15表达及PC-3细胞凋亡的影响

背景与目的：促、抑凋亡因子间的相互作用与肿瘤的发生、发展密切相关。Omi／HtrA2是新近发现的一种凋亡调节因子,PED／PEA—15是一种广泛表达的抗凋亡蛋白。本研究旨在探讨Omi／HtrA2对PED／PEA—15表达和前列腺癌细胞PC-3凋亡的影响。方法：构建Omi／HtrA2的表达载体和siRNA载体。并用脂质体法分别将两载体转染至PC-3细胞中,Westernblot和ELISA法检测Omi／HtrA2对PED／PEA—15表达和细胞凋亡的影响;Caspase-8检测试剂盒检测PED／PEA-15对Caspase-8活性的影响;Westernblot、RT—PCR法检测Omi／HtrA2特异siRNA序列对其转录、翻译的影响,流式细胞仪检测siRNA导致Omi／HtrA2基因沉默后PC一3细胞凋亡的变化。结果：酶切和DNA测序证实Omi／HtrA2的表达载体和siRNA载体构建成功。通过转染Omi／HtrA2表达载体高表达Omi／HtrA2可抑制PED／PEA-15表达,并增加肿瘤细胞的凋亡率;抑制PED／PEA—15的表达可提高Caspase-8活性。siRNA沉默Omi／HtrA2基凶后PC-3细胞对顺铂的敏感性降低。结论：Omi／HtrA2可通过抑制抗凋亡蛋白PED／PEA—15表达而在PC-3细胞凋亡中发挥重要作用。     

Omi/HtrA2在腺样囊性癌的表达及其临床意义

目的 探讨Omi/HtrA2在不同分型腺样囊性癌中的表达差异,并评价其对腺样囊性癌的临床意义.方法 纳入确诊为腺样囊性癌的患者100例,应用免疫组织化学染色方法,检测Omi/HtrA2在不同分型腺样囊性癌中的表达;并检测腺样囊性癌转移组和非转移组患者中Omi/HtrA2表达情况.结果 Omi/HtrA2表达主要位于细胞胞质中,在腺样囊性癌组织中其阳性率为83％;腺样囊性癌低级组与高级组间表达情况具有统计学差异(P＜0.05),但不同分型的腺样囊性癌组织中其表达差异无统计学意义(P＞ 0.05);Omi/HtrA2在转移组腺样囊性癌中阳性率为93.1％,在非转移组中其阳性率为46.2％,两组比较具有统计学差异(P＜0.05).结论 Omi/HtrA2与腺样囊性癌的发病密切相关,可作为临床判断腺样囊性癌的辅助性指标,对临床的诊治及预后的判断具有一定的指导价值.     

喉癌组织HMGA2表达及其临床意义的探讨

目的:探讨喉癌组织中HMGA2的作用及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR (RQ-PCR)检测HM-GA2基因在20例喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织中mRNA的水平,同时制作组织芯片应用免疫组化检测其在50例喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织中蛋白水平的表达.结果:喉癌组织和癌旁正常黏膜上皮组织HMGA2 mRNA的相对表达量分别为0.358±0.261和0.203±0.151,HMGA2蛋白的阳性率分别为86.0％ (43/50)和27.3％(12/44),两组比较差异有统计学意义,P值均＜0.05;HMGA2的表达与与患者性别、年龄无显著相关性,P＞0.05;与TNM分期和淋巴结转移有显著相关性,P＜0.05.结论:HMGA2在喉癌组织中的表达与肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,可能成为喉癌新的肿瘤标志或预后因子.     

喉鳞癌中KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达及意义

目的探讨喉鳞癌中KAI1/CD82和MRP1/CD9的表达及意义。方法 采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)及免疫组织化学技术检测100例喉鳞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)组织及随机抽取30例相应癌旁非癌组组织中KAI1/CD82和MRP1/CD9的表达情况, 并分析二者与肿瘤临床病理参数的关系及对生存函数的影响。结果 在mRNA及蛋白水平上KAI1/CD82和MRP1/CD9表达结果基本是一致的, KAI1/CD82和MRP1/CD9在30例配对的LSCC中, 癌组织表达显著低于相应癌旁非癌组织, 其表达差异有统计学意义(P＜0.05);两者在TNM分期Ⅲ~Ⅳ、分化程度差、临床分期Ⅲ~Ⅳ、有淋巴结转移LSCC中的表达水平均低于在TNM分期Ⅰ~Ⅱ、分化程度良、临床分期Ⅰ~Ⅱ、无淋巴结转移LSCC患者(P＜0.05)。而在不同性别、不同年龄组、不同生长部位等LSCC患者的组织中其表达差异无统计学意义(P＞0.05);LSCC中KAI1/CD82蛋白阳性表达者中位生存期为78个月, 高于阴性表达者的48个月(χ²=6.98, P=0.008), LSCC中MRP1/CD9蛋白阳性表达者中位生存期为78个月, 高于阴性表达者的49个月(χ²=5.45, P=0.02);在LSCC中KAI1/CD82和MRP1/CD9蛋白的表达呈正相关(χ²=31.41, P＜0.01)。结论 KAI1/CD82和MRP1/CD9可能共同参与了LSCC的发生发展过程, 对LSCC的浸润和转移及预后评估具有一定的临床参考价值。KAI1/CD82、MRP1/CD9可以作为判断喉鳞癌浸润转移及预后的标记物。     

Survivin、Bcl-2和Bax在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达及其与Bcl-2、Bax基因表达的相关性。方法应用免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(strept avidin-biotin complex,SABC)方法检测45例喉鳞癌及10例正常喉黏膜组织中survivin,Bcl-2及Bax基因的表达。结果喉鳞癌组织中,Survivin的表达率为80%,显著高于正常喉黏膜组织的表达率20%(P均<0.05)。Survivin蛋白表达与喉鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。Survivin表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.05),而与Bax蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论Survivin在喉鳞癌的发生发展中起重要作用,可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点;survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-2、Bax在喉鳞癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

Decorin mRNA和p57KIP2 mRNA在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的检测Decorin mRNA和p57~(KIP2) mRNA在非小细胞肺癌中的表达情况,并分析它们与非小细胞肺癌的病理、临床特征及预后的关系。方法选取石蜡包埋的59例非小细胞肺癌及12例癌旁正常肺组织的标本制作组织芯片。利用原位杂交法检测Decorin mRNA和p57~(KIP2) mRNA的表达情况。结果Decorin mRNA在癌旁正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达率分别为66.7%(8/12)和20.3%(12/59),正常组织中Decorin mRNA的表达高于肺癌组织(P<0.05)。大细胞肺癌中Decorin mRNA的表达高于鳞癌(P<0.05)。鳞癌中p57~(KIP2) mRNA的阳性表达率为63.2%(12/19),高于腺癌、大细胞癌和小细胞癌(P<0.05)。在无淋巴结转移的非小细胞肺癌标本中Decorin mRNA和p57~(KIP2) mRNA的表达呈增高趋势,与有淋巴结转移的标本比较其差异具有统计学意义。Decorin mRNA和p57~(KIP2) mRNA的表达无相关性(P>0.05)。结论Decorin和p57~(KIP2)的表达可能与非小细胞肺癌的组织学类型和转移有关,有望成为监测非小细胞肺癌患者病情发展及评价预后的有用指标。     

癌蛋白iASPP在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的:从蛋白及mRNA水平检测iASPP在喉鳞癌组织中的表达,并研究其表达与喉鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用免疫组化方法检测99例喉鳞癌和15例癌旁黏膜组织中癌蛋白iASPP的表达,统计分析iASPP的表达与喉鳞癌患者临床病理特征和预后的关系;采用荧光定量RT-PCR检测13例配对喉鳞癌及癌旁组织中iASPP mRNA的表达情况。结果:癌蛋白iASPP在喉鳞癌细胞的胞浆及胞核中均有表达,且iASPP蛋白及mRNA在喉鳞癌组织和癌旁黏膜组织中的表达有显著性差异(P＜0.01)。胞浆iASPP蛋白和胞核iASPP蛋白的表达与喉鳞癌患者的T分期(P=0.001,P=0.021)、临床分期(P=0.001,P=0.010)、淋巴结转移(P=0.001,P=0.003)和复发(P＜0.001,P=0.001)具有显著的相关性。Kaplan-Meier生存分析结果表明,胞浆iASPP蛋白高表达组和低表达组、胞核iASPP蛋白高表达组和低表达组的5年无病生存率和5年总生存率间具有显著性差异(P均<0.01)。进一步用多因素Cox比例风险回归模型分析显示,胞浆iASPP表达水平是喉鳞癌患者预后的独立影响因素(P＜0.01)。结论:癌蛋白iASPP在喉鳞癌组织中的表达显著上调,且与喉鳞癌患者的T分期、临床分期、淋巴结转移和复发密切相关。iASPP可能在喉鳞癌的发生发展中起着重要作用,并有望成为预测和评估喉鳞癌患者预后的重要分子标志物和潜在的治疗靶点。     

MTA-2蛋白在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的：研究转移相关蛋白2（metastasis—associated protein2,MTA-2）在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化检测了90例喉癌标本（其中40例为具有配对的淋巴结转移标本）中MTA-2的表达及其与患者临床病理因素之间的关系。另选30例新鲜喉鳞癌及癌旁正常喉组织用于MTA-2的mRNA和蛋白检测。结果：正常喉组织相比,MTA-2的mRNA和蛋白在喉鳞癌组织中表达显著增高,且MTA-2的阳性表达与喉鳞癌的低分化、高TNM分期及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。结论：MTA-2的阳性表达与喉鳞癌患者的不良预后显著相关,并可能是喉鳞癌新的标志物及基因治疗靶点。     

The tumor suppressor WARTS activates the Omi / HtrA2-dependent pathway of cell death

Drosophila tumor suppressor WARTS (Wts) is an evolutionally conserved serine / threonine kinase and participates in a signaling complex that regulates both proliferation and apoptosis to ensure the proper size and shape of the fly. Human counterparts of this complex have been found to be frequently downregulated or mutated in cancers. WARTS, a human homolog of Wts, is also known as tumor suppressor and mitotic regulator, but its molecular implications in tumorigenesis are still obscure. Here, we show that WARTS binds via its C-terminus to the PDZ domain of a proapoptotic serine protease Omi / HtrA2. Depletion of WARTS inhibited Omi / HtrA2-mediated cell death, whereas overexpression of WARTS promoted this process. Furthermore, WARTS can enhance the protease activity of Omi / HtrA2 both in vivo and in vitro. Activation of Omi / HtrA2-mediated cell death is thus a potential mechanism for the tumor suppressive activity of WARTS.