蟾皮中蟾毒配基类成分的分离与鉴定

目的研究中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizansCantor)皮中的蟾毒配基类成分。方法利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱、重结晶等手段分离纯化蟾皮中的蟾毒配基类成分,根据化合物的理化性质和各种波谱学数据鉴定其化学结构。结果分离得到11个蟾毒配基类化合物,分别鉴定为脂蟾毒配基(resibufogenin,1)、华蟾毒精(cinobufagin,2)、蟾毒灵(bufalin,3)、远华蟾毒精(telocinobufagin,4)、蟾毒它灵(bufotalin,5)、去乙酰华蟾毒它灵(desace-tylcinobufotalin,6)、嚏根草苷元(hellebrigenin,7)、沙蟾毒精(arenobufagin,8)、日蟾毒它灵(gam-abufotalin,9)、11β-羟基脂蟾毒配基(11β-hydroxylresibufogenin,10)、华蟾毒它灵(cinobufotalin,11)。结论化合物10和11为首次从中华大蟾蜍皮中分离得到。     

HPLC法测定蟾皮中蟾毒配基类成分的含量

目的用HPLC法测定蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基、华蟾蜍精等成分的含量。方法样品经乙醇室温浸渍提取,采用HPLC法测定。色谱柱为DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(体积比为4∶1∶5),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为296 nm,柱温为40℃。结果蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精分别在0.0848~0.5088、0.0884~0.5304和0.2000~1.2000μg内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数r分别为0.9999、0.9992和1.0000。蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的平均回收率分别为99.3%、99.6%和99.0%,RSD分别为0.5%、0.2%和0.6%(n=9)。结论HPLC法可用于蟾皮中蟾蜍灵、脂蟾毒配基和华蟾蜍精的含量测定。     

蟾酥的镇痛活性成分

药效学实验结果表明：蟾酥镇痛的活性成分主要存在于氯仿提取物中．分离蟾酥的氯仿提取物得到了脂蟾毒配基等６种单体化合物．６种单体化合物均具有一定的镇痛作用．华蟾毒精和脂蟾毒配基有非常显著的镇痛作用；蟾毒灵镇痛作用较平稳；南美蟾毒精镇痛作用较弱     

干蟾皮及其炮制品的指纹图谱建立与化学模式识别

目的:建立干蟾皮生品及炮制品UPLC指纹图谱,并同时测定干蟾皮中指标性成分日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、沙蟾毒精-3-辛二醇辛酯的含量,通过化学模式识别控制干蟾皮质量。方法:干蟾皮的甲醇提取液的分析采用Waters Acquity UPLC BEH色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm),以乙腈-0.5%乙酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为296 nm。结果:12批生品和12批炮制品的总含量分别为3.18～4.69 mg·g^-1和0.91～2.77 mg·g^-1,指纹图谱中均有9个共有峰,相似度分别为0.963～0.991和0.692～0.988,主成分分析和聚类分析能很好地识别干蟾皮的生品和炮制品。结论:该方法稳定、可靠,可为干蟾皮的质量控制、炮制工艺,进一步开发研究提供科学依据。     

毒性中药蟾酥质量检测方法研究

目的:建立蟾蜍中多种药效及毒性成分蟾蜍毒素的定性定量检测方法。方法:采用液相色谱-质谱/质谱联用方法检测蟾酥中多种蟾蜍毒素成分。结果:建立了华蟾毒它灵、蟾蜍灵、华蟾毒配基及脂蟾毒配基的LC-MS/MS检测方法。比较了蟾酥样本的液相色谱-质谱/质谱联用分析数据。对4个不同来源中华大蟾蜍及黑眶蟾蜍的蟾酥样本进行检测,检出华蟾毒它灵、蟾蜍灵、华蟾毒配基及脂蟾毒配基的含量范围为0.05%~5.12%(w/w)。结论:液相色谱-质谱/质谱联用方法可用于蟾酥定性定量检测,并为质量评价提供参考。     

HPLC法测定安替可胶囊中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量

高效液相色谱法测定安替可胶囊中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量,色谱柱采用Kromasil C18;流动相为0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(60∶40)(用磷酸调节pH值为3.2);流速为0.8mL·min-1,检测波长为296nm;两种成份总平均回收率为96.5%,RSD=0.8%;华蟾酥毒基与酯蟾毒配基的浓度分别在0.05~0.45mg·mL-1范围内,质量浓度与峰面积具有良好的线性关系。本法稳定、准确,重现性好。     

反相高效液相色谱法测定梅花点舌丸中酯蟾毒配基、华蟾毒配基的含量

目的 :建立测定梅花点舌丸中酯蟾毒配基、华蟾毒配基的反相高效液相色谱法。方法 :采用KromasilC18 柱 ,流动相为乙腈∶0 5 %KH2PO4 溶液 (50∶50) ,检测波长为296nm。结果 :该方法线形关系良好 ,酯蟾毒配基的平均加样回收率为97 40 % ,RSD为2 2 % ;华蟾毒配基的平均加样回收率为97 78 % ,RSD为2 6 %。结论 :方法简便可靠 ,分离度较好 ,可用于梅花点舌丸的质量控制。     

RP-HPLC法测定梅花点舌丸中酯蟾毒配基和华蟾毒配基的含量

目的:建立梅花点舌丸中酯蟾毒配基、华蟾毒配基的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,使用C_(18)柱,乙腈-0.5％KH_2PO_4溶液(50:50)为流动相,检测波长:296nm。结果:线性关系良好,酯蟾毒配基的平均加样回收率为97.4％,RSD为2.3％。华蟾毒配基的平均加样回收率为97.8％,RSD为2.7％。结论:方法简便可靠,分离度较好,结果稳定,可用于梅花点舌丸的质量控制。     

干蟾皮炮制前后两种毒性成分的含量比较

目的:测定干蟾皮饮片(生品)和制干蟾皮饮片(砂炒)中2种主要毒性成分含量,分析炮制对毒性成分的影响.方法:收集10批干蟾皮饮片,8批制干蟾皮饮片,采用HPLC-DAD法测定样品中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量.结果:在干蟾皮中华蟾酥毒基的含量均值为0.51(0.14～1.74)mg·g-1;脂蟾毒配基的含量均值为0.75 (0.02～3.16)mg·g-1;在制干蟾皮中华蟾酥毒基的含量均值为0.17(0.02～0.41)mg·g-1;脂蟾毒配基的含量均值为0.22(0.004～0.87)mg·g-1.结论:炮制品中2种毒性成分的含量低于干蟾皮药材;华蟾酥毒基和脂蟾毒配基成分的含量下降是经炮制而减毒的.     

HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分(伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基)的含量。方法:采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱(150 mm×3.0 mm 2.7μm),以0.3%乙酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为296 nm。结果:11个蟾毒配基成分的线性范围分别为2.024～20.24μg·mL^-1(r=0.999 8)、18.44～184.4μg·mL^-1(r=0.999 9)、12.40～124.0μg·mL^-1(r=0.999 5)、3.720～37.20μg·mL^-1(r=0.999 5)、10.28～102.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、22.16～221.6μg·mL^-1(r=...     

HPLC法同时测定舒胆胶囊中芦荟大黄素和延胡索乙素的含量

目的建立同时测定舒胆胶囊中芦荟大黄素和延胡索乙素含量的方法,为完善现有质量标准提供科学依据。方法采用HPLC法。用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-pH6.8磷酸盐缓冲液(体积比70∶30)进行等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,柱温为40℃,检测波长为280 nm。结果芦荟大黄素质量浓度在0.130 0~2.600 mg.L-1内、延胡索乙素质量浓度在4.352~87.04 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7和0.999 9;平均回收率分别为100.0%(RSD=0.81%)和100.1%(RSD=0.33%)。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可应用于舒胆胶囊的质量控制。     

HPLC法测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸紫丁香苷和绿原酸的含量

目的 建立同时测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸含量的方法。方法 采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18 柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05 %磷酸溶液(体积比20:5:174),流速为1.0 mL·min-1,柱温为 35 ℃,检测波长为 281 nm。 结果 原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸质量浓度分别在2.40~24.0 mg·L-1、5.20 ~ 52.0 mg·L-1、26.6 ~ 266 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 6、0.999 7、0.999 5,平均回收率分别为101.0 % (RSD=0.86 % , n= 9)、100.3 % (RSD=1.9 % , n= 9) 、 101.5 % (RSD=1.4 % , n=9)。结论 HPLC法可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。     

HPLC法同时测定舒胆胶囊中4种蒽醌类成分的含量

目的建立同时测定舒胆胶囊中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量的方法,完善现有质量标准。方法采用HPLC法。用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,用甲醇-水-磷酸(体积比84∶16∶0.1)进行等度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,检测波长为254 nm。结果大黄酸质量浓度在0.220 0~4.400 mg.L-1内、大黄素质量浓度在0.162 0~3.240 mg.L-1内、大黄酚质量浓度在0.520 8~10.42 mg.L-1内、大黄素甲醚质量浓度在0.109 2~2.184 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7、0.999 9、0.999 8、0.999 9;平均回收率分别为100.5%(RSD=0.84%)、100.4%(RSD=0.51%)、100.8%(RSD=0.29%)、99.8%(RSD=0.47%)。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可作为舒胆胶囊的质量控制方法之一。     

高效液相色谱法测定金水宝胶囊中腺苷及腺嘌呤的含量

目的建立测定金水宝胶囊中腺苷及腺嘌呤含量的高压液相色谱方法。方法采用0.5%磷酸超声提取制备金水宝胶囊样品溶液,色谱柱为Venusil-XBP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相采用[0.01 mol.L-1 NaH2PO4∶0.01 mol.L-1 Na2HPO4(1∶2.2,V/V)]∶甲醇(17∶3,V/V),流速0.6 mL.min-1,进样量10μL,柱温25℃,检测波长260 nm,运行时间18 min。运行时用流动相∶甲醇(85∶15,V/V)梯度洗脱。结果腺苷及腺嘌呤分别在0.62～157.07 mg.L-1和0.23～58.29 mg.L-1内线性关系良好;两者的平均回收率分别为(97.40±4.28)%和(99.10±5.03)%;3种批号的金水宝胶囊样品中腺苷的含量分别为(0.324±0.017)%、(0.318±0.025)%和(0.331±0.019)%;腺嘌呤的含量分别为(0.089±0.009)%、(0.086±0.012)%和(0.093±0.007)%。结论高效液相色谱法测定金水宝胶囊中腺苷及腺嘌呤的含量操作简便、结果准确可靠、灵敏度高、重复性好,能作为有效控制金水宝胶囊质量的测定方法之一。     

HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的建立胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm),以甲醇-体积分数为0.1%的磷酸水溶液(体积比为82∶18)为流动相,流速:1.0 mL.min-1,柱温:35℃,检测波长:254 nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在1.42~12.79、2.02~18.14、1.28~11.52、0.76~8.36 mg.L-1内呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 1、0.999 4、0.999 0和0.999 6,平均回收率分别为102.7%(RSD=1.0%,n=9)、101.2%(RSD=2.7%,n=9)、99.4%(RSD=1.6%,n=9)和97.9%(RSD=2.8%,n=9)。结论本方法可作为胃力片质量控制方法之一。     

HPLC法测定通舒口爽胶囊中3种成分的含量

目的建立测定通舒口爽胶囊中柚皮苷,橙皮苷和新橙皮苷含量的HPLC方法。方法采用Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-乙腈-体积分数为0.05%的磷酸水溶液(体积比为20∶10∶65),流速:1.0 mL.min-1,柱温:30℃,检测波长:280 nm。结果柚皮苷在8.88~88.8 mg.L-1内呈线性关系(r=0.999 7),平均回收率为100.5%;橙皮苷在7.60~76.0 mg.L-1内呈线性关系(r=0.999 6),平均回收率为100.5%;新橙皮苷在10.56~105.6 mg.L-1内呈线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.5%。结论本实验建立的方法可作为通舒口爽胶囊质量控制方法之一。     

RP-HPLC法同时测定桂枝茯苓胶囊中3种成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定桂枝茯苓胶囊中没食子酸、白芍苷和芍药苷含量。方法色谱柱:大连中汇达C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-体积分数为0.1%的磷酸溶液,梯度洗脱,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:230 nm,柱温:40℃。结果没食子酸、白芍苷和芍药苷的线性分别为0.69~6.87 mg.L-1(r=0.999 6)、0.88~8.80 mg.L-1(r=0.999 6)和2.00~20.00 mg.L-1(r=0.999 5)。平均回收率:没食子酸为99.7%(RSD=1.0%,n=9)、白芍苷为101.5%(RSD=1.5%,n=9)、芍药苷为100.0%(RSD=0.7%,n=9)。结论此方法可为桂枝茯苓胶囊的质量控制提供方法。     

蛋白沉淀-HPLC法测定大鼠血浆中多西他赛的含量

目的建立大鼠血浆中多西他赛含量测定的方法。方法采用蛋白沉淀-HPLC法。色谱柱:Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);沉淀剂:体积分数80%的甲醇;流动相:甲醇-乙腈-水(体积比35∶40∶25);流速:1 mL.min-1;检测波长:233 nm。结果血浆中多西他赛检测方法的线性范围为0.05~50.0 mg.L-1,定量下限为50μg.L-1;血浆中多西他赛的提取回收率为87.80%,日内RSD<5.5%,日间RSD<8.5%。结论本法可用于多西他赛的药物动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定利斯的明胶囊的溶出度

目的:建立测定利斯的明溶出度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法:采用Agilent 1100型高效液相色谱仪,DiamonsilTM C18柱(150 mm×4．0 mm,5μm),以0．025 mol·L-1磷酸二氢钾／0．1％三乙胺(pH=6．7):乙腈=72:28(V／V)为流动相,流速1．0 mL·min-1,检测波长263 nm。结果:利斯的明在3．604～530 mg·L-1范围内呈良好的线性关系(r=0．999 9,n=5),平均回收率在99％～101％之间,精密度尺RSD<5％,样品稳定性好。45 min三批胶囊溶出度均在70％以上,符合规定。结论:本方法结果准确,重复性好,方法简便可行。     

RP-HPLC法同时测定地锦草片中3种黄酮苷元的含量

目的建立同时测定地锦草片中槲皮素、木犀草素和山柰酚含量的HPLC法。方法采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-体积分数为0.1%的磷酸溶液(体积比为52∶48)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为360 nm,柱温30℃。结果槲皮素、木犀草素和山柰酚的线性范围分别为1.50~30.0 mg.L-1(r=0.999 9)、2.24~44.8 mg.L-1(r=0.999 8)和0.220~4.40 mg.L-1(r=0.999 8);平均加样回收率(n=9)分别为100.1%、100.5%和98.8%。结论方法简便、结果准确、重现性好,可用于地锦草片的质量控制。