三七总皂甙对脑出血大鼠脑内铁离子影响的实验研究

目的：观察三七总皂甙对脑出血后脑内铁离子的影响。方法：用胶原酶注入Wistar大鼠尾壳核造成脑出血模型，将其分为给药组和对照组，给药组每天腹腔注射三七总皂甙针剂0．5ml生理盐水，对照组给以1ml生理盐水，分别于造膜后ld、3d、7d和40d取材，其组织切生用perls’S法观察脑出血后脑内铁离子分布变化。结果：脑出血后1d，出血灶内反应比较弱。脑出血3d后，反应迅速增强，主要在出血灶及其周围、黑质、尾壳核等区域表达．脑出血后7d反应最为强烈，40d时减弱，接近于正常动物脑内铁离子水平。给药组铁离子在各个时段均比对照组表达强度低，表达范围小。三七总皂甙在脑出血后1d到40d均有明显降低铁离子表达的作用。     

脑出血大鼠的脑抑凋亡基因bcl—2的表达及三七总皂甙的影响

目的：研究大鼠脑出血前脑内抑凋亡基因bcl-2的表达，以及三七总皂甙对其表达的影响。方法：用原位杂交法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内bcl-2mRNA在对照组和给药组的表达变化；用免疫组化法观察Bcl-2蛋白在对照组和给药组的表达变化。结果：bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白主要表达于病灶及病灶周围、大脑皮质额叶、顶叶、梨状区皮质、海马CA1至CA4区，给药组阳性细胞数量显著增加，细菌着色变深；将给药组与对照组Bcl-2蛋白、bcl-2mRNA在病灶周围、皮层、海马处阳性细胞的面密度进行图像分析并统计，结果P＜0．01，具有统计学意义。结论：脑出血大鼠前脑内抑凋亡基因bcl-2的转录及蛋白表达水平均上调；三七总皂甙促进bcl-2mRNA的转录与Bcl-2蛋白的表达，减少细胞凋亡，促进脑出血后前脑内神经元的存在及损伤修复。     

脑出血大鼠前脑抑凋亡基因bcl-2的表达及三七总皂甙的影响

目的 :研究大鼠脑出血前脑内抑凋亡基因bcl- 2的表达 ,以及三七总皂甙对其表达的影响。方法 :用原位杂交法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内bcl- 2mRNA在对照组和给药组的表达变化 ;用免疫组化法观察Bcl- 2蛋白在对照组和给药组的表达变化。结果 :bcl- 2mRNA及Bcl - 2蛋白主要表达于病灶及病灶周围、大脑皮质额叶、顶叶、梨状区皮质、海马CA1至CA4区 ,给药组阳性细胞数量显著增加 ,细胞着色变深 ;将给药组与对照组Bcl- 2蛋白、bcl- 2mRNA在病灶周围、皮层、海马处阳性细胞的面密度进行图像分析并统计 ,结果P<0 .0 1,具有统计学意义。结论 :脑出血大鼠前脑内抑凋亡基因bcl- 2的转录及蛋白表达水平均上调 ;三七总皂甙促进bcl- 2mRNA的转录与Bcl- 2蛋白的表达 ,减少细胞凋亡 ,促进脑出血后前脑内神经元的存活及损伤修复。     

脑出血大鼠前脑抑凋亡基因bcl-2的表达及三七总皂甙的影响

目的 :研究大鼠脑出血前脑内抑凋亡基因bcl- 2的表达 ,以及三七总皂甙对其表达的影响。方法 :用原位杂交法观察胶原酶诱导的脑出血大鼠前脑内bcl- 2mRNA在对照组和给药组的表达变化 ;用免疫组化法观察Bcl- 2蛋白在对照组和给药组的表达变化。结果 :bcl- 2mRNA及Bcl - 2蛋白主要表达于病灶及病灶周围、大脑皮质额叶、顶叶、梨状区皮质、海马CA1至CA4区 ,给药组阳性细胞数量显著增加 ,细胞着色变深 ;将给药组与对照组Bcl- 2蛋白、bcl- 2mRNA的病灶周围、皮层、海马处阳性细胞的面密度进行图像分析并统计 ,结果P<0 .0 1,具有统计学意义。结论 :脑出血大鼠前脑内抑凋亡基因bcl- 2的转录及蛋白表达水平均上调 ;三七总皂甙促进bcl- 2mRNA的转录与Bcl- 2蛋白的表达 ,减少细胞凋亡 ,可促进脑出血后前脑内神经元的存活及损伤修复。     

急性期脑出血大鼠不同时间内给予三七治疗的作用对比研究

目的急性期脑出血大鼠不同时间给予三七治疗,观察治疗后脑血肿、脑水肿及出血半暗带脑组织Bcl-2表达情况,评价不同时间给药的差异。方法将210例应用自体血法注射建立脑出血大鼠模型随机分为7组:即刻给药、第1天后给药、第2天后给药、第3天后给药、第5天后给药、第7天后给药组及对照组,每组30例;术后第8天观察脑水肿、脑血肿情况及出血半暗带脑组织Bcl-2表达情况。结果⑴与对照组相比:即刻给药治疗组脑含水量偏高(P<0.01);其他各时点给药组大鼠脑含水量、血肿体积明显减小(均P<0.05),尤以第3天后给药组降低最明显(P<0.01)。②与对照组相比,各时间点给药组脑组织Bcl-2表达均有增高(均P<0.01),以第3天后给药组最高(P<0.01)。结论三七在一定时间窗内给药可减轻急性期脑出血大鼠脑水肿,减少血肿体积,可以上调Bcl-2蛋白表达抑制脑组织细胞凋亡。选择适当的时间窗应用三七活血化淤类中药治疗急性期脑出血是安全的,有效的。     

黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡抑制作用的研究

目的 探讨黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡的抑制作用.方法 应用脑立体定位仪于大鼠尾壳核注入肝素化Ⅶ型胶原酶建立脑出血模型.将大鼠随机分为正常组、出血对照组和治疗组.分别对各组大鼠进行神经行为学、吉姆萨(Giemsa)染色、免疫组化染色及细胞超微结构等实验观察.结果 各治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减小(P＜0.05).各治疗组脑出血灶周围细胞凋亡数量及程度较出血对照组明显降低.与相应出血对照组比较,各治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应术后24 h给药治疗组比较,各术后6h给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应3d各时间给药治疗组相比,7d给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05).各治疗组与出血对照组比较,神经元细胞线粒体、核膜、内质网等结构相对完整.结论 黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡具有较好的抑制作用.     

脑溢安颗粒对脑出血大鼠脑内细胞间粘附分子-1表达和中性白细胞浸润及神经细胞损伤的影响

目的：探讨脑溢安颗粒(简称脑溢安)对脑出血后脑内炎症损伤的影响。方法：采用胶原酶诱导的大鼠脑出血模型,分组处理,并用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫组织化学和组织学方法检测术后不同时间各组出血侧脑内细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表达、脑微血管内皮细胞上ICAM-1蛋白表达、中性白细胞浸润和神经细胞损伤情况。结果：正常组和假手术组大鼠术侧脑内检测到低水平ICAM-1 mRNA表达及少量ICAM-1阳性微血管,未见中性白细胞浸润和受损神经细胞。模型组大鼠出血侧脑内ICAM-1mRNA表达在术后4h显著升高,24h达到高峰,96h仍保持较高水平,168h恢复正常水平;ICAM-1阳性微血管数在术后4h显著增多,48h达到峰值,持续至168h;中性白细胞浸润和神经细胞损伤在术后4h也明显增多,均于48h达到高峰,之后逐渐下降。脑溢安组大鼠出血侧脑内ICAM-1mRNA表达水平和ICAM-1阳性微血管数显著降低,中性白细胞浸润,神经细胞损伤明显减轻。结论：脑溢安具有抗脑出血后脑内炎症损伤作用。其作用机制可能与抑制ICAM-1介导的中性白细胞浸润有关。     

电针对大鼠高血压性脑出血血肿周围组织NF-κB TNF-α表达的影响

目的：观察电针水沟穴对大鼠高血压性脑出血血肿周围组织NF-κB、TNF-α表达的影响，初步探讨二者在脑出血发生中的意义及电针对其的干预作用。方法：在大鼠自发性高血压基础上。以胶原酶加肝素脑内注射诱发脑出血的方法。建立大鼠高血压性脑出血模型，运用免疫组织化学技术分析各组NF-κB、TNF-α的表达水平。结果：模型组大鼠高血压性脑出血血肿周围组织NF-κB、TNF-α表达水平较正常对照组大鼠显著增强，电针治疗后其表达明显下调。结论：电针可有效抑制高血压性脑出血大鼠脑组织NF-κB、TNF-α的表达水平，进而减轻高血压性脑出血后脑免疫炎性损伤。这可能是电针治疗高血压性脑出血的重要分子机制之一。     

醒脑健神胶囊对实验性脑出血大鼠脑内β—内啡肽（β—EP）…

用免疫组织化学ＡＢＣ法分别显示灌喂醒脑健神胶囊溶液的给药组和灌喂生理盐水的对照线脑出血大鼠脑内β－内啡肽样阳性纤维的分布和含量变化。图象分析发现：在脑出血１天和３天时下丘脑处－Ｅ宋阳性纤维密度及颗粒面积是给药组高于对照组，在脑出血天和２１天给药组低于对照组，两组之间存在显著性差异，本文分析了脑内β－内啡肽的变化机理，表明中药醒脑健神胶囊治疗脑出血的机制可能与脑内β－内啡肽有关。     

醒脑健神胶囊对实验性脑出血大鼠脑内β-内啡肽(β-EP)影响的实验研究

用免疫组织化学ＡＢＣ法分别显示灌喂醒脑健神胶囊溶液的给药组和灌喂生理盐水的对照组脑出血大鼠脑内β－内啡肽样阳性纤维的分布和含量变化。图象分析发现：在脑出血１天和３天时下丘脑处β－ＥＰ样阳性纤维密度及颗粒面积是给药组高于对照组，在脑出血７天和２１天给药组低于对照组，两组之间存在显著性差异，本文分析了脑内β－内啡肽的变化机理，表明中药醒脑健神胶囊治疗脑出血的机制可能与脑内β－内啡肽有关。     

早期使用三七总皂苷对大鼠脑出血炎性反应的影响

目的：早期使用三七总皂苷对脑出血大鼠（Intracerebral Hemorrhage,ICH）脑组织病理形态和炎性反应递质细胞间黏附分子-1（Intercellular Adhesion Molecule-1,ICAM-1）和肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）的影响。方法：将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和三七总皂苷组,采用胶原酶注射尾状核法制作脑出血模型,观察脑组织病理形态变化;双抗体夹心-酶联免疫吸附实验（Avidinbiotin complex-ELISA,ABC-ELISA）观察ICH大鼠血清炎性反应递质ICAM-1和TNF-α的变化。结果：HE染色观察到炎性细胞浸润,也证实了脑出血急性期炎性反应反应较剧烈,三七总皂苷显著减轻周围脑组织水肿和神经纤维排列紊乱现象;造模7d时,模型组血清中的ICAM-1和TNF-α含量增加,三七总皂苷用药7d可下调ICAM-1（P〈0.05）和TNF-α。结论：三七总皂苷对脑出血后脑组织病理形态恢复正常具有促进作用,抑制ICAM-1和TNF-α的释放,可能是神经元保护的作用机制之一。     

三七总皂苷对大鼠扭体模型的镇痛作用

目的:观测三七总皂苷对大鼠扭体模型的镇痛作用。方法:24只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(n=12)、三七总皂苷组(n=12),各组大鼠腹腔给药,12h一次,给药7天。于第8天给药后30min腹腔注射乙酸建立扭体模型,观测给药后15min扭体反应次数。结果:三七总皂苷具有较强的镇痛作用,三七总皂苷组大鼠扭体反应次数明显少于生理盐水对照组(P<0.01)。结论:三七总皂苷对乙酸所致大鼠扭体模型有一定的镇痛作用。     

三七总皂苷分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2及神经生长相关蛋白表达的影响

目的探讨三七总皂苷（tPNS）分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2（MAP-2）及神经生长相关蛋白（GAP-43）表达的影响。方法大鼠随机分为5组：正常对照组、假手术组、脑出血模型组、脑出血后12h治疗A组、脑出血后72h治疗B组。治疗A组于脑出血后12h、治疗B组于脑出血后72h开始以三七总皂苷70mg／（kg·d）腹腔注射,连用4d。其余各组皆同时注射等量生理盐水。大鼠于造模后7d、14d、21d每个时间点分别处死,干湿重法测脑舍水量,脑组织切片行MAP-2、GAP-43免疫组化。结果治疗组大鼠肢体功能较脑出血模型组好,且治疗A组神经功能评分在7d、14d、21d优于治疗B组（P〈0．05）;治疗组可明显改善脑水肿,7d时治疗A组脑含水量低于治疗B组（P〈0．05）。治疗组血肿周边MAP-2及GAP-43表达皆高于脑出血模型组（P〈0．05）;且治疗A组在7d、14d、21d3个时间点表达高于治疗B组（P〈0．05）。结论tPNS可以减轻大鼠脑出血后的脑水肿并积极上调MAP-2和GAP-43表达;早期给予tPNS治疗脑出血大鼠较晚期运用可能对大鼠康复更有利。     

三七总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠的改善作用及对NO/iNOS/NF-κB通路的影响

目的研究三七总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠的改善作用及对NO/iNOS/NF-κB通路的影响。方法96只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,辛伐他汀组(2 mg/kg),三七总皂苷低、中、高剂量组(4.5、9、18 mg/kg),每组16只,灌胃给药(10 mL/kg),分别于第8、12周取材,检测2个时间点各组大鼠外周血丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和肝脏NO、iNOS(诱导型一氧化氮合酶);HE染色观察肝组织病理学形态;免疫组化法检测iNOS在肝脏细胞中的表达情况;Western blot法检测NF-κB(核因子-κB)、p-NF-κB(磷酸化核因子-κB)、IKKα(IκB激酶-α)、p-IKKα(磷酸化IκB激酶-α)、IκBa蛋白表达量。结果与模型组比较,给药8周后,大鼠血清各项生化指标均出现了显著下降(P<0.05);给药12周后,与第8周结果比较,模型组血清生化指标显著增加(P<0.05),而给药组增加趋势并不显著,且三七总皂苷给药剂量在抑制非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质沉积方面存在剂量-效应关系。三七总皂苷可显著下调肝组织中NO、iNOS水平及NF-κB信号通路蛋白的表达量(P<0.05)。结论三七总皂苷可有效降低非酒精性脂肪肝大鼠转氨酶水平及血脂指标,同时可以抑制NO/iNOS/NF-κB信号通路,减少肝损伤,是三七总皂苷降脂护肝、减轻炎症反应的可能机制之一。     

三七总皂苷对海水淹溺兔肺泡巨噬细胞TNF-α mRNA表达的影响

目的观察海水淹溺后家兔肺组织光镜下变化,并探讨三七总皂苷干预对海水淹溺后家兔肺泡巨噬细胞内TNF-αmRNA表达的影响。方法采用气管切开插入塑料导管、向气管内灌海水4mL/kg,双肺自主通气的方法模拟海水淹溺造成急性肺损伤模型,随机分为对照组、海水淹溺组、三七总皂苷治疗组。于淹溺后进行血气分析,采集支气管肺泡灌洗液,分离和培养肺泡巨噬细胞,并采集肺组织进行病理学分析,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺泡巨噬细胞中TNF-αmRNA的表达。结果光镜下,海水淹溺兔肺组织炎症细胞大量浸润,经三七总皂苷治疗后肺组织损伤程度减轻。RT-PCR分析示淹溺后TNF-αmRNA表达显著增高,90min后达最高峰,而三七总皂苷可使之降低。结论海水淹溺急性肺损伤可能与肺泡巨噬细胞内TNF-αmRNA高表达有关。三七总皂苷可降低TNF-αmRNA的高表达,减轻肺损伤程度。     

三七、绞股蓝对动脉粥样硬化模型家兔主动脉基质金属蛋白酶及其抑制因子表达的影响

目的观察三七、绞股蓝及其总皂苷对动脉粥样硬化模型家兔主动脉基质金属蛋白酶及其抑制因子表达的影响,并从基因水平探讨其作用机制。方法40只新西兰兔随机分为5组,即三七绞股蓝饮片组、三七绞股蓝总皂苷组、阳性药物组、模型组与正常对照组,以高脂饲料和免疫损伤联合复制动脉粥样硬化模型,各药物组在造模的同时预防给药,12周后检测各组实验兔血清脂质水平,观察兔主动脉病理学变化,RT-PCR检测主动脉壁基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）表达水平。结果模型组的血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量均明显高于正常对照组（P〈0.01）,三七绞股蓝饮片组的TC明显低于模型组（P〈0.05）,三七绞股蓝总皂苷组的TG明显低于模型组（P〈0.05）。各药物预防组的主动脉病理形态学变化与模型组比较有明显差异（P〈0.01,P〈0.05）。与正常对照组比较,模型组的主动脉组织MMP-9mRNA的表达明显增强,TIMP-1mRNA的表达明显减弱。与模型组比较,三七绞股蓝饮片组、皂苷组的MMP-9mRNA表达量水平均降低,TIMP-1mRNA的表达明显增加。结论三七绞股蓝配伍可调节MMP-9/TIMP-1mRNA的表达,降低血脂水平,具有抗动脉粥样硬化作用,下调主动脉组织MMP-9mRNA的表达,上调TIMP-1mRNA的表达可能是其作用机制之一。     

三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。     

三七总皂苷和淫羊藿苷组分配伍对成骨细胞的增殖和钙化作用研究

目的:探讨三七总皂苷和淫羊藿苷组分配伍对体外培养成骨细胞的增殖和钙化的影响.方法:取3～5代成骨细胞进行试验,成骨细胞密度为1×105个/mL,三七总皂苷和淫羊藿苷质量浓度为1,10,20,50 mg·L-1,采用MTT法观察单个药物及其配伍对成骨细胞的增殖的影响,采用茜素红钙化结节染色法观察钙化作用.结果:三七总皂苷和淫羊藿苷在质量浓度为10,20,50 mg·L-1时皆能够明显促进成骨细胞增殖.三七总皂苷和淫羊藿苷组分配伍比例为5∶2时,可明显促进成骨细胞增殖并有明显的钙化作用(P＜0.01).结论:从对成骨细胞增殖和钙化作用的角度证实了三七总皂苷和淫羊藿苷组分配伍的合理性.     

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探讨三七总皂苷对自身免疫性心肌炎模型大鼠心肌凋亡影响的研究

目的:探讨三七总皂苷通过B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)/ Bcl-2相关x蛋白(Bax)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)信号通路对自身免疫性心肌炎(EAM)模型大鼠心肌凋亡的影响。方法:55只Lewis大鼠被分成对照组(n=11)和造模组(n=44)。造模组采用猪心肌肌球蛋白乳浊液后足垫皮下注射建立EAM模型,对照组大鼠给予等体积完全弗氏佐剂后足垫皮下注射。成功建立EAM模型的大鼠被分成模型组、三七总皂苷低、高剂量组和甲氨蝶呤组各11只。模型组、对照组通过灌胃给予蒸馏水10 ml/kg,每日1次; 三七总皂苷低、高剂量组分别灌胃给予10、20 mg/ml三七总皂苷溶液10 ml/kg,每日1次; 甲氨蝶呤组灌胃给予0.1 mg/ml甲氨蝶呤混悬液10 ml/kg,每周1次。各组大鼠均给药4周。结果:与模型组比较,三七总皂苷低、高剂量组和甲氨蝶呤组大鼠左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)较高,而左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)水平较低,心肌组织病理评分较低,心肌组织细胞凋亡率较低,心肌组织Bcl-2表达水平较高,Bax、Caspase-3表达水平较低(均P<0.05),且三七总皂苷干预组呈现一定量效关系。结论:三七总皂苷能剂量依赖性的改善EAM大鼠心功能,减轻心肌炎症病理变化,抑制细胞凋亡,其作用可能与调节Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路中凋亡相关蛋白表达有关。     

“百会透曲鬓”针刺法对脑出血模型大鼠脑组织IL-6蛋白表达影响的实验研究

目的:通过观察"百会透曲鬓"针刺法对脑出血急性期大鼠模型脑组织中白介素-6(IL-6)蛋白表达的影响,研究本针刺法对脑出血后继发性脑损伤的神经保护机制,从而指导临床实践。方法:选用60只雄性Wistar大鼠,随机分为空白组、模型组、针刺组、西药组(脑复康)。分别于脑出血急性期大鼠模型造模成功后6h,2天,7天三个时间点并完成相应治疗,治疗后进行神经功能学评分,然后处死大鼠,取大鼠脑组织,用免疫组化分析法(IHC)检测脑组织中IL-6蛋白表达的平均灰度值,在光镜下观察脑组织形态学变化。结果:针刺治疗能减少神经功能缺损评分,造模后2天及7天后,针刺组与模型组比较有显著性差异(P0.01);针刺治疗能降低IL-6阳性细胞平均灰度值,造模后2天及7天后,针刺组与模型组比较有显著性差异(P0.01);光镜下脑组织病理改变结果显示,针刺组与模型组有差异。结论:"百会透曲鬓"针刺法可明显改善大鼠的神经功能学评分,有利于脑出血后肢体运动功能的恢复。在脑出血急性期,针刺"百会透曲鬓"穴可以通过下调IL-6的蛋白表达,减轻脑出血后炎性反应导致的继发性脑损伤程度,从而改善脑组织缺血缺氧状态及保护受损伤的神经元细胞。