纤溶酶原激活物抑制剂-1与肥胖

纤 溶系统由纤溶酶原、纤溶酶原激活物 ( plasminogenac tivatorPA)和激活物特异性抑制剂 (plasminogenacti vatorinhibitorPAI)、纤溶酶及纤溶酶抑制物组成 ,其主要功能是通过纤溶酶溶解纤维蛋白而将其从循环系统中清除出去。PAI是纤溶系统活性主要的生理调节物 ,它在体内有多种形式 ,包括内皮细胞型 (PAI 1)、胎盘型 (PAI 2 )、尿型 (PAI 3)和连接蛋白酶 1(proteasenexin 1) ,其中PAI 1在纤溶活性调节中起着重要作用 ,它主要灭活组织型纤溶酶原激活物 (t PA)。PAI 1和t PA之间的平衡对维持纤溶系统正常功能十分重要。临床和流…     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其特异受体和抑制物与肺癌的浸润转移

研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其特异受体(uPA-R)和抑制物(PAI-1、PAI-2)在肺癌浸润转移中的作用.应用RIA分别对67例经组织病理确诊的各期肺癌和30例肺部相关炎症患者及30名健康献血者进行了相应的检测.结果显示,小细胞肺癌Ⅱ期和Ⅲ期患者血浆中uPA、uPA-R、PAI-1水平显著升高(P＜0.001),而PAI-2的水平逐渐降低;腺癌、鳞癌伴有浸润主支气管及肺门淋巴结者uPA、uPA-R与PAI-1水平亦显著升高(P＜0.001);周围型肺癌未见淋巴结受侵者uPA、uPA-R、PAI-1与PAI-2水平异常升高.uPA、uPA-R与PAI-1在肺癌中水平明显升高,并与肺癌的浸润转移相关密切,可作为肿瘤患者早期诊断、预后评估的有力指标.     

儿童脓毒症纤溶酶原激活物抑制剂-1基因启动子区4G/5G多态性的研究

目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）基因启动子区单核苷酸插入或缺失（4G/5G）多态性与广州地区汉族脓毒症患儿的相关性,对脓毒症的发生、发展和临床预后的影响。方法选取2007年4-12月广州市妇女儿童医疗中心诊治的汉族脓毒症患儿为病例组,同期收集健康查体儿童为对照组。应用等位基因特异性扩增多聚酶链（AS-PCR）法对病例组和对照组行PAI-1基因启动子区4G/5G多态性检测和分析。采用基因计数法计算各组基因型频率和等位基因频率,χ^2检验分析比较两组人群各基因型的分布差异,计算OR值及其95%CI评估各基因型的风险。结果研究期间病例组纳入148例,对照组181名。病例组和对照组PAI-1基因启动子区4G/5G多态性的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义（χ^2=0.79,P〉0.05）。等位基因4G（χ^2=4.35,P〈0.05）及其纯合子（χ^2=4.44,P〈0.05）与脓毒症发展相关;携带等位基因4G患儿发展至重症脓毒症的风险比5G高,OR=4.05（95%CI：1.09-15.08）,4G/4G纯合子患儿发展至重症脓毒症的风险比其他基因型高,OR=4.57（95%CI：1.11-18.78）。等位基因4G（χ^2=9.17,P〈0.05）及其纯合子（χ^2=7.35,P〈0.05）与脓毒症病死率相关,携带等位基因4G患儿脓毒症病死风险较5G高,OR=4.30（95%CI：1.50-12.29）,4G/4G纯合子患儿脓毒症病死风险较其他基因型高,OR=3.14（95%CI：1.49-6.61）。结论PAI-1基因启动子区4G/5G多态性与广州地区汉族脓毒症患儿进展及预后相关,等位基因4G及其纯合子是其高危遗传因素;PAI-1基因启动子区4G/5G点多态性与脓毒症的易感性无关。     

尿激酶型纤溶酶原激活物受体及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体与炎症相关的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活物受体（urokinase plasminogen activator receptor,uPAR）与尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase plasminogen activator,uPA）同为纤溶酶原激活系统的主要成员,是一种协调多种信号转导途径的多功能分子,可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（soluble urokinase plasminogen activator receptor,suPAR）是其可溶形式。除凝血-纤溶以外,uPAR参与了肿瘤侵袭及炎症等多种疾病过程,而suPAR可能是一种良好的炎性标志物。本文就uPAR及suPAR在炎症中的作用进行简要综述。     

人脑星形细胞瘤纤溶酶原激活抑制因子1基因表达研究

目的研究人脑星形细胞瘤纤溶酶原激活抑制因子１（ＰＡＩ１）基因表达及其临床意义。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和免疫组化ＡＢＣ方法检测３６例人脑星形细胞瘤ＰＡＩ１ｍＲＮＡ和蛋白表达，分析其与临床病理因素之间的关系。结果所有星形细胞瘤组织均可表达３．０ｋｂ和２．２ｋｂ的ＰＡＩ１ｍＲＮＡ转录物；高分级星形细胞瘤ＰＡＩ１ｍＲＮＡ表达水平显著高于低分级星形细胞瘤（Ｐ＜００１）；正常脑组织未检测出ＰＡＩ１ｍＲＮＡ表达。ＰＡＩ１ｍＲＮＡ表达水平与星形细胞瘤的坏死（ｒ＝０．５１，Ｐ＜０．０１）、微血管数（ｒ＝０．３３，Ｐ＜０．０１）及脑水肿（ｒ＝０．２７，Ｐ＜０．０１）呈显著正相关，与患者性别、年龄及瘤体大小无显著相关性。免疫组化染色显示，ＰＡＩ１蛋白主要分布在高分级星形细胞瘤的瘤细胞和内皮细胞，尤以血管增殖部位和坏死灶周围较为显著，低分级星形细胞瘤呈低水平表达。结论ＰＡＩ１基因表达与人脑星形细胞瘤的分级、坏死、血管生成及脑水肿密切相关，可作为星形细胞瘤恶性程度的分子标记。     

糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达韵影响

目的：观察糖基化终末产物（AGEs）对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）表达的影响及其与细胞外基质（ECM）成分含量的关系。方法：体外培养正常大鼠肾系膜细胞，分别用糖化牛血清白蛋白（AGEs）及未经糖化的牛血清白蛋白（BSA）处理，以常规培养的肾系膜细胞作为对照，检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用，ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量，逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测系膜细胞PAI-1 mRNA的表达。结果：与相应浓度的BSA比较，AGEs（0—200mg／L）对系膜细胞增殖无明显影响，但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT—PCR检测显示，给予AGEs（100mg／L）的系膜细胞PAI-1 mRNA的表达明显增加（P〈0．01）。结论：AGEs促进系膜细胞PAI—1的表达，提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解，可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

纤溶酶原激活剂抑制物2型的结构与功能

纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)具纤溶抑制活性,是尿激酶(uPA)特异的抑制物。u-PA在肿瘤浸润与转移过程中起了十分关键的作用,PAI-2亦因此成为当今研究的热点。本文对PAI-2的基因结构、表达调控、蛋白质结构、功能及其作用机制等进行了综述。     

LPS促进HUVECs表达纤溶酶原激活物抑制物1

目的：观察LPS对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响。 方法： 用生长良好的第2、3代HUVECs进行试验。用cell counting kit-8(CCK-8)测定LPS刺激后细胞活性变化；发色底物法测定LPS组和对照组培养液中tPA, PAI-1活性；RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平。 结果： 与对照组相比，LPS(10 mg/L)对细胞活性没有明显差异。LPS诱导PAI-1活性在24-72 h显著升高(P<0.05),且显著上调PAI-1 mRNA，24 h达到峰值，以后渐降，72 h达到正常水平。而LPS组与对照组tPA活性与tPA mRNA无明显差异(P>0.05)。 结论： LPS(10 mg/L)可显著上调PAI-1 mRNA转录和分泌而不影响tPA mRNA，结果提示LPS可活化内皮细胞，诱发PAI-1 mRNA表达和蛋白分泌而抑制纤溶系统，这有利于微血栓的形成、血栓稳定,血液凝固和DIC发生。     

人,牛内皮细胞组织型纤溶酶原激活物活性的比较

体外培养人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞,分别从其条件培养液中提取t-PA。实验主要分三步:1)胎牛内皮细胞t-PA的纯化;2)兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清的制备及纯化其1gG组分;3)免疫亲和层析、纯化人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞t-PA。结果表明,用微量法免疫动物制备的兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清具有较高的滴度与特异性。将该抗血清1gG与人、牛内皮细胞CM交联免疫亲和层析,可获得电泳纯的t-PA,其分子量为65000及67000道尔顿。两者活性比较,胎牛主动脉内皮细胞t-PA活性比人脐静脉内皮细胞t-PA明显增高。     

IgA肾病患者纤溶酶原激活物的变化及临床意义

目的：探讨IgA肾病患者纤溶酶原激活物（PA）的变化及临床意义。方法：以纤维蛋白平板法检测108例IgA肾病及34例健康自愿者尿PA活性，同时以免疫组化方法观察了27例IgA肾病及6例正常人肾组织t-PA、u-PA抗原表达，分析其与临床病理资料的关系。结果：正常人肾组织t-PA偶见少量表达于肾小球毛细血管袢，u-PA则表达于所有节段的肾小管上皮细胞。IgA肾病肾组织t-PA阳性率及单个肾小球t-PA平均积分明显高于正常人。轻度增生的肾小球其t-PA阳性率明显增高，中度增生的肾小球t-PA阳性率明显高于轻度增生者，硬化的肾小球不表达t-PA。u-PA表达明显下调，尿PA活性下降。伴血肌酐升高、肾小管间质病变严重、肾小动脉病变较重或大量蛋白管型形成的患者尿PA活性下降更为明显。结论：IgA肾病早期肾组织t-PA表达增加，晚期下降。肾组织u-PA表达减少。蛋白管型的形成可能与尿PA活性下调有关。尿PA活性的检测有助于判断IgA肾病的病情。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1在SD大鼠胰腺的表达

目的研究纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)在大鼠胰腺组织中的表达,为临床上对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者使用抗凝剂及抗血小板药物治疗提供理论依据,并为进一步研究应用PAI-1抑制剂治疗胰腺炎提供形态学依据。方法应用免疫荧光组织化学双重标记技术,在激光共聚焦显微镜观察PAI-1在大鼠胰腺组织中的分布。结果 PAI-1免疫反应阳性细胞分布在SD大鼠胰腺的外分泌腺腺泡细胞,以及内分泌腺D细胞及PP细胞,阳性物质分布于细胞质。结论 PAI-1可能在胰腺起着非常重要的作用,为进一步研究应用PAI-1抑制剂治疗胰腺炎提供了形态学依据。     

糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及其与细胞外基质(ECM)成分含量的关系。方法:体外培养正常大鼠肾系膜细胞,分别用糖化牛血清白蛋白(AGEs)及未经糖化的牛血清白蛋白(BSA)处理,以常规培养的肾系膜细胞作为对照,检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用,ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测系膜细胞PAI-1mRNA的表达。结果:与相应浓度的BSA比较,AGEs(0-200mg/L)对系膜细胞增殖无明显影响,但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT-PCR检测显示,给予AGEs(100mg/L)的系膜细胞PAI-1mRNA的表达明显增加(P<0.01)。结论:AGEs促进系膜细胞PAI-1的表达,提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解,可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

血清中尿激酶型纤溶酶原激活物在女性乳腺癌诊断中的应用

近年来,在我国京津沪地区,乳腺癌发病率已居于妇女恶性肿瘤首位川.研究表明,癌细胞在浸润转移的过程中存在着细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)和基底膜成分被相关蛋白酶溶解的活动,纤溶酶原激活在ECM水解过程中起重要作用.     

纤溶酶原激活物抑制剂1 siRNA对大鼠肺纤维化的治疗作用

 目的： 观察纤溶酶原激活物抑制剂1 （PAI-1）siRNA对博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化的治疗作用,并初步探讨其机制。方法： 72只Wister大鼠分为4组,即对照组（control组）、BLM组、BLM+非特异 siRNA 组(BLM+N组)和BLM+PAI-1 siRNA组(BLM+P组)。BLM 5 mg/kg气管内滴入制作肺纤维化模型,control组注入等体积的生理盐水。造模后,于局麻下BLM+P组每周2次气管内注入PAI-1 siRNA 7.5 nmol (0.2 mL);BLM+N组注入相同剂量的非特异siRNA;control组和BLM组注入等体积的生理盐水,28 d共给药8次。分别于第7 d、14 d和28 d每组处死6只,左肺行肺泡灌洗测定PAI-1活性,右中叶肺组织RT-PCR法检测Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）的mRNA表达。结果： 造模后,7 d、14 d和28 d肺泡灌洗液中PAI-1活性持续升高,每周2次气管内注入PAI-1 siRNA可以使肺泡灌洗液中PAI-1的活性降低,与同一时点BLM组比较有明显差异（均P<0.05）;模型组7 d、14 d和28 d  Ⅲ型胶原、α-SMA和TIMP-1的mRNA表达明显增高,BLM+P组3个时点Ⅲ型胶原、α-SMA和TIMP-1的mRNA表达明显减少,分别与同一时点BLM组比较有明显差异（均P<0.05）。结论： 每周2次气管内给予PAI-1 siRNA可以持续减少PAI-1表达。PAI-1 siRNA不但直接抑制肺纤维化进展,而且可以打破基质金属蛋白酶及组织抑制因子之间的平衡。     

纤溶酶原激活物抑制剂1反义RNA对猪主动脉内皮细胞中成纤维细胞生长因子的影响

许多研究表明纤溶酶原激活物抑制剂 1(ＰＡＩ 1)在动脉粥样硬化病变处的表达增加。ＰＡＩ 1可以通过促进细胞外基质积聚、促进血栓形成和调节平滑肌细胞迁移和增殖而促进动脉粥样硬化的发展[1] ,因此 ,降低动脉壁ＰＡＩ 1表达有可能延缓动脉粥样硬化的发展。我们观察了构建的ＰＡＩ 1反义ＲＮＡ重组质粒转导入离体培养的猪主动脉内皮细胞 (ＥＣ)后 ,表达的ＰＡＩ 1反义ＲＮＡ对细胞中ＰＡＩ 1表达的作用及对成纤维细胞生长因子 (ＦＧＦ)的影响。一、材料与方法1.细胞培养及鉴定 :体外培养猪主动脉内皮细胞 ,细胞在光镜下呈扁平、多角形或瓦…     

组织型纤溶酶原激活物基因的DNA改组

目的：探索利用DNA改组（DNAshuffling)技术，获得更高活性tPA的可能性。方法：以人，恒河猴及大白鼠tPAcDNA为一组基因，进行tPA的DNA改组（DNAfamily shuffling)。以改组后构建的tPA多样性文库转染CHO细胞并进行克隆和筛选。结果：得到了两株有意义的克隆；t9和t17，其中t9克隆表达的tPA活性略高于人tPA，初步的比活性测定结果表明，活性约提高4倍。t17克隆表达的tPA虽然有88个氨基酸的缺失，但仍表现出与人tPA相同的活性，两株克隆经测序证明，为改组后的基因，其序列以人和恒河猴的tPAcDNA序列为主，少数序列来源于大白鼠tPAcDNA。结论：这一探索性结果将为后续几轮的tPADNA改组探明道路，为最终从改组后tPA多样性基因库中筛选到比较理想的重组体打下基础。     

肝癌组织浸液尿激酶型和组织型纤溶酶原激活物的检测

一些研究表明体液中的尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinasetypeplasminogenactivator,u PA)和尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (uokinasetypeplasminogenactivatorreceptor,u PAR )浓度与癌细胞自身分泌和释放的水平及其浸润转移有关 ,而组织型纤溶酶原激活物 (tissueplasminogenactivator,t PA)则与癌组织血管内皮细胞的释放和血管新生有关 ,组织型纤溶酶原激活物抑制剂 (Tissueplasminogenactivatorinhibitor 1,PAI 1)则对t PA和u PA起调控作用 ,同时参与癌细胞的转移等过程[1 ,2 ] 。为探讨癌生长和癌扩散转移及血管新生与上述指标之间的…     

登革2型病毒调控血管内皮细胞纤溶系统相关蛋白的表达

目的观察登革2型病毒（DV2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）表达组织纤溶酶原激活物（tPA）和纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的影响。方法应用胰酶消化分离HUVEC并进行传代培养，用生长良好的第2．3代细胞进行试验。用cell counting kit-8（CCK-8）测定DV2感染后细胞活性变化；发色底物法测定感染DV2组和对照组培养液中tPA、PAI-1活性；RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平。结果DV2感染对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。感染DV2组培养液中tPA活性在12～72h显著升高（P〈0．05）；DV2诱导HUVEC表达tPA mRNA的水平显著上调，12h达到峰值，以后渐降，72h mRNA表达水平仍高于对照组（P〈0．01）。而DV2感染组培养液中PAI-1活性和PAI-1 mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论DV2感染可显著上调HUVEC的tPA mRNA转录，增强内皮细胞tPA蛋白的分泌，而不影响PAI-1 mRNA的转录或改变内皮细胞PAI-1的分泌。结果提示DV2可活化但并不损伤内皮细胞，诱发内皮细胞增强表达纤溶酶原激活物而致使纤溶系统失衡，引起纤溶亢进，这可能是诱发DHF／DSS患者急性期出血、低血容量性休克等体征的主要因素之一。     

脂肪酸对人血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响

为探讨不同种类脂肪酸对血管内皮细胞(ECs)纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的直接影响及影响水平，以不同浓度的亚麻酸、亚油酸、油酸、硬脂酸诱导培养ECs，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法。（ELISA)检测PAI-1的mRNA和蛋白表达，随后以上述脂肪酸诱导转染了由PAI-1启动子控制表达的报告基因的ECs，ELISA检测PAI-1启动子转录活性，结果ECs中亚麻酸、亚油酸和油酸均浓度依赖地诱导PAI-1 mRNA和蛋白表达，硬脂酸无影响，而它们对PAI-1启动子转录活性的影响与上述作用一致，提示不饱和脂肪酸通过提高PAI-1转录活性诱导其在ECs的表达。